Спосіб діагностики злоякісних пухлин людини

Спосіб діагностики злоякісних пухлин людини, що полягає в дослідженні взаємодії біологічного 3 64427 4 нок застосування стандартного, близького за мони при додаванні вказаних реактивів знаходиться лекулярною вагою до ядерних білків людини, в діапазоні довжини хвиль від 410нм до 430нм, а фосфопротеїду - донатора кальцій-білкових мінімальна оптична щільність знаходиться в комплексів та об'єктивної оцінки результатів, діапазоні - 460нм - 480нм. спрощення дослідження за рахунок усунення Експериментально доведено, що максимальне травматизації пацієнта, залежності від показників підвищення оптичної щільності зразка слини хвовологості, температури та атмосферного тиску, що рих на злоякісні пухлини при дії вказаних реактивів дозволяє використовувати спосіб при на зразок слини знаходиться в діапазоні довжини скринінговому обстеженні населення. хвиль від 450нм до 480нм, а мінімальна оптична Поставлене завдання вирішується тим, що у щільність знаходиться в діапазоні довжини хвиль способі діагностики злоякісних пухлин людини, що від 430нм і нижче. полягає у дослідженні взаємодії біологічного Спосіб здійснюють таким чином. У пацієнта матеріалу з розчином комплексону, донатору та беруть 1-2мл слини для дослідження, після чого з проявника кальцій-білкових комплексів, експозиції інтервалом у 10хв послідовно додають: розчин при денному світлі з наступною оцінкою отриманих комплексону, наприклад 0,1мл 8% -15% розчину результатів, згідно з винаходом, досліджують слидінатрієвої солі етилендіамінтетраоцтової кислоти ну пацієнта, до якої додають 0,01-0,5% розчин (ЕДТА), або дінатрієвої солі кальцій-фосфопротеїду у співвідношенні 10:1 та етиленглікальтетраоцтової кислоти (ЕГТА), або проводять спектрофотометричне дослідження у натрієвої солі етилендіамінтетраянтарної кислоти діапазоні довжини хвиль 340нм - 500нм і при (ЕДТЯ), донатор кальцій-білкових комплексів підвищенні значення оптичної щільності у 0,1мл 0,01-0,5% розчину кальцій-фосфопротеїду діапазоні довжини хвиль 450нм - 480нм відносно (тобто, при співвідношенні 10:1) та проявник контролю - діагностують злоякісну пухлину. кальцій-білкових комплексів - 0,1мл 0,15%-0,2% Передумовою створення способу стала зарозчину азотнокислого срібла. Після чого провопропонована нами концепція про роль ядерних дять експозицію при денному світлі протягом 1 кальцій - зв'язуючих білків кальцій-білкових сполук години, далі проводять спектрофотометричне у регуляції стабільності геному, згідно чого при дослідження на приладі СФ-46 у діапазоні довжизлоякісних пухлинах із ядерного хроматину ни хвиль 340нм-500нм і при підвищенні значення малігнізованих клітин у кров надходять ядерні оптичної щільності у діапазоні довжини хвиль кальцій - зв'язуючі білки [Роль ДНК - протеин450нм-480нм відносно контролю - діагностують Са2+- комплексов в канцерогенезе. Методы их опзлоякісну пухлину. 0,5-1мл слини, що залишився, ределения для ранней диагностики злокачественвикористовують для контролю без додавання ных опухолей легких. [Суслов Е.И., Подгаевская реактивів. Т.П., Пленов С.Н., П.И. Чепиль, С.Д. Кузовкова, Винахід проілюстрований наступними приклаЛ.Л. Григорович. // Журн. АМН Украины. - 1997. дами. № 3. - С. 282-290]. Враховуючи ідентичність склаПриклад 1. У пацієнтки К-ої з підозрою на сарду крові, слини та тканинної рідини в організмі, кому язика було взято 2мл слини для дослідження. логічно міркувати, що аналогічні кальцій-білкові До 1мл слини з інтервалом у 10хв послідовно докомплекси ядерного генезу знаходяться і в слині, дали 0,1мл 8% розчина ЕДТА, 0,1мл 0,01% розчияка значно доступніша для аналізу. на кальцій-фосфопротеїду і 0,1мл 0,15% розчина Кальцій-фосфопротеїд, який використовується азотнокислого срібла. 1мл слини, що залишився, у винаході, є білком, який містить кальцій, та забув використаний для контролю без реактивів. лишок фосфорної кислоти. Фосфорна кислота Після цього було проведено спектрофотометричне естерифікує серин, а також і треонін до фосфоседослідження на приладі СФ-46 показників оптичної рину. Молекулярна вага фосфопротеїду знахощільності розчинів (дослідного зразка та контродиться у діапазоні від 40 000 до 60 000 дальтон. лю) у діапазоні довжини хвиль 340нм-500нм. Було Це стандартний, близький за молекулярною вагою встановлено підвищення значення оптичної до ядерних білків людини, фосфопротеїд - донащільності у діапазоні довжини хвиль 450нм-480нм тор кальцій-білкових комплексів. відносно контролю. У дослідах встановлено, що концентрація доПри рентгенологічному дослідженні легень натору кальцій-білкових комплексів -кальційхворої було виявлено рентгенщільну тінь. Після фосфопротеїду повинна знаходитися у межах проведенні біопсії гістологічно був встановлений 0,01% - 0,5%. Його концентрації менше, ніж 0,01% діагноз саркоми язика. Таким чином, був призводить до псевдонегативного результату, а підтверджений результат онкологічного тесту слипідвищення концентрації більш, ніж 0,5% - призвони - злоякісна пухлина. дить до псевдопозитивного результату. Приклад 2. У пацієнта Б-о зі скаргами на болі в Експериментальним шляхом встановлено, що області прямої кишки. За даними для отримання достовірних результатів ректороманоскопії у пацієнта було виявлено дослідження співвідношення кальційпроктосигмоїдіт з поліпозними розростаннями фосфопротеїду до зразка слини повинно складати слизової оболонки прямої кишки на фоні 10:1. При порушенні вказаного співвідношення дисбактеріозу. 2мл слини пацієнта було взято для підвищується кількість псевдопозитивних дослідження. У 1мл слини з інтервалом у 10хв результатів. послідовно додали 0,1мл 8% розчину ЕГТА, 0,1мл Експериментальним шляхом також встанов0,01% кальцій-фосфопротеїду і 0,1мл 0,15% розлено, що у здорових осіб в умовах фізіологічної чину азотнокислого срібла. Далі, 1мл слини, що норми максимальна оптична щільність зразка слизалишився, був використаний для контролю без 5 64427 6 реактивів. Після чого розчини (дослідний та конфотометричне дослідження на приладі СФ-46 трольний) були піддані спектрофотометрії на показників оптичної щільності розчинів (дослідного приладі СФ-46 для визначення показників оптичної зразка та контролю) при довжині хвиль у діапазоні щільності розчинів (дослідного зразка та контродовжини хвиль 340нм-500нм. Було встановлено лю) у діапазоні довжини хвиль 340нм-500нм. підвищення значення оптичної щільності у Встановлено підвищення значення оптичної діапазоні довжини хвиль 450нм-480нм відносно щільності у діапазоні довжини хвиль 450нм-480нм контролю. відносно контролю. При обстеженні в діагностичному центрі Гістологічне дослідження біопсії шматочка онкологічного захворювання в нього не знайдено. слизової оболонки прямої кишки виявило залозоЧерез місяць у хворого з'явилася кров у сечі, при вий поліп прямої кишки із малігнізацією. Таким цистоскопії була встановлена злоякісна пухлина чином, був підтверджений результат онкологічного сечового міхура, проведена резекція міхура з петесту слини - злоякісна пухлина. ресадкою сечоводу. При гістологічному Приклад 3. Пацієнтка М-ко звернулася у дослідженні встановлений перехідноклітинний рак поліклініку для профілактичного огляду. Скарг не сечового міхура. Таким чином, був підтверджений було. В ході огляду було встановлено невелике результат онкологічного тесту слини - злоякісна ущільнення в тканинах правої молочної залози. пухлина. Взято 2мл слини для дослідження. До 1мл слини з Приклад 6. У дівчини 13 р., пацієнтки Г-к була інтервалом у 10хв послідовно додали 0,1мл 8% запідозрена злоякісна пухлина легень, і призначерозчину ЕДТЯ, 0,1мл 0,5% розчину кальційна операція. Було взято 2мл слини для фосфопротеїду і 0,1мл 0,2% розчину азотнокислодослідження запропонованим методом. До 1мл го срібла. Після цього було проведено спектрофослини з інтервалом у 10хв було додано 0,1мл 10% тометричне дослідження на приладі СФ-46 розчину ЕГТА, 0,1мл 0,1% кальцій-фосфопротеїду показників оптичної щільності розчинів (дослідного і 0,1мл 0,2% розчину азотнокислого срібла. При зразка та контролю) у діапазоні довжини хвиль спектрофотометрії зразка слини з реагентами в 340нм-500нм. Було встановлено підвищення знадіапазоні довжини хвиль 410нм-430нм оптична чення оптичної щільності у діапазоні довжини щільність зразку була максимальною, а діапазоні хвиль 450нм-480нм відносно контролю. довжини хвиль 450нм-480нм була мінімальною. При проведенні пункційної біопсії тканини Результат дослідження оцінений як негативний. молочної залози гістологічно був встановлений При проведенні трансбронхіальної біопсії ткадіагноз аденокарциноми правої молочної залози. нини легень гістологічно був встановлений пошиТаким чином, підтверджений результат рений туберкульозний процес із лобарною казеозонкологічного тесту слини - злоякісна пухлина. ною пневмонією. Приклад 4. Пацієнт С-о звернувся зі скаргами Запропонований спосіб був застосований у 50 на збільшення лімфатичних вузлів. При пацієнтів, хворих на злоякісні пухлини та у 50 здодослідженні результатів пункційної біопсії рових осіб. Результати оцінки діагностичної лімфатичного вузла цитологічно були знайдені чутливості і діагностичної специфічності способу, елементи злоякісної лімфоми. Хворому був запрощо заявляється, проводились згідно рекомендації понований курс опромінення та хіміотерапії. ХвоАмериканського Протиракового Товариства (див. рий вирішив перевірити встановлений діагноз онтабл. 1 і табл. 2). котестуванням зразка слини. В результаті Таким чином, у порівнянні із прототипом розпроведеного дослідження зразку слини запропороблений спосіб діагностики дозволяє: нованим способом, встановлено, що максимальна - підвищити точність дослідження за рахунок оптична щільність зразку слини з реагентами зназастосування стандартного, близького за молекуходиться в діапазоні довжини хвиль від 410нм до лярною вагою до ядерних білків людини, донатора 430нм, а мінімальна - в діапазоні довжини хвиль кальцій-білкових комплексів кальцій460нм-480нм. Результат дослідження було фосфопротеїду та об'єктивної оцінки результатів оцінено як негативний. за параметрами вимірювання оптичної щільності, При біопсії лімфатичного вузла гістологічно при цьому технологічні умови проведення встановлений реактивний лімфаденіт. Таким чидослідження не залежать від показників вологості, ном, був підтверджений негативний результат атмосферного тиску та температури; онкологічного тесту слини. - є атравматичним оскільки уникає етапу Приклад 5. Пацієнт І-в звернувся у поліклініку травматизації тіла пацієнта для взяття для профілактичного огляду. Скарг не було. Взято біологічного матеріалу; 2мл слини для дослідження. До 1мл слини з - має високу діагностичну чутливість від 87,6% інтервалом у 10хв послідовно додали 0,1мл 8% до 100% і специфічність 96%. розчину ЕДТЯ, 0,1мл 0,3% розчину кальційСпосіб діагностики злоякісних пухлин людини фосфопротеїду і 0,1мл 0,15% розчину азотнокисуніверсальний, придатний для скринінгової лого срібла. Після чого було проведено спектродіагностики різноманітних злоякісних пухлин. 7 64427 8 Таблиця 1 Результати обстеження хворих на злоякісні пухлини запропонованим способом Локалізація пухлини Молочна залоза Рак легень Рак прямої кишки Рак нирок Рак матки Рак яєчників Всього Кількість обстежених 16 10 10 6 6 1 50 Кількість істинопозитивних результатів (абс.) 14 9 10 Кількість псевдопозитивних результатів (абс.) 2 1 Діагностична чутливість (%) 87,6 90,0 100,0 100,0 100,0 100,0 Таблиця 2 Результати обстеження здорових осіб запропонованим способом Кількість обстежених 50 Кількість істинонегативних результатів (абс.) 48 Комп’ютерна верстка М. Клюкін Кількість псевдопозитивних результатів (абс.) 2 Підписне Діагностична специфічність (%) 96 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601