Спосіб визначення стану імунної системи людини

Реферат: Спосіб визначення стану імунної системи людини включає забір крові з вени, додавання антикоагулянта, виділення з неї лімфоцитів методом центрифугування на градієнті щільності, + + + розрахунок абсолютної кількості CD4 , CD8 , CD16 субпопуляцій лімфоцитів та + імунорегуляторного індекса (ІРІ). .Додатково визначають субпопуляцію лімфоцитів CD16 , та по співвідношенню всіх субпопуляцій визначають ІРІ. UA 68274 U (12) UA 68274 U UA 68274 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Спосіб належить до медицини, а саме - до імунології, та може бути використаний в діагностиці імунодефіцитних станів людини. Відомий спосіб визначення стану імунної системи за даними загального аналізу крові, який включає: забір крові з пальця або вени, визначення в ній лейкоцитів та лейкоцитарної формули. По співвідношенню окремих класів лейкоцитів роблять висновок про активність лімфогенезу, мієлогенезу та загального стану імунної системи [Шиффман Ф. Дж. Патофізіологія крові. - М. СПб.: "Невский діалект", 2000. - С. 379-381]. Спільними ознаками із запропонованим способом є: - забір крові з вени; - визначення співвідношення окремих класів лейкоцитів. Недоліками способу є низька точність та достовірність висновків про стан імунної системи, тому що його оцінка за кількістю лейкоцитів та співвідношення їх класів в лейкоцитарній формулі недостатньо інформативна. Найбільш близьким до заявленого є спосіб визначення стану імунної системи людини за співвідношенням субпопуляцій лімфоцитів [Чорний В.І., Нестеренко А.Н. Порушення імунітету при критичних станах // "Внутренняя медицина" - 2007. - № 4 (4). - С. 14-19], що включає: забір крові з вени, додавання антикоагулянта, виділення з неї лімфоцитів методом центрифугування + на градієнті щільності, визначення кількості субпопуляцій лімфоцитів Т-хелперів (CD4 ) та Т+ кілерів/супресорів (CD8 ) із застосуванням стандартної панелі моноклональних антитіл до CD+ + структур, розрахунок за співвідношенням кількості CD4 субпопуляції лімфоцитів до CD8 субпопуляції лімфоцитів імунологічного Т-регуляторного індекса (ТРІ) та оцінка по його рівню стану ефекторної та супресорної ланок імунної системи. Спільними ознаками із запропонованою корисною моделлю є: - забір крові з вени з додаванням антикоагулянта; - виділення з крові лімфоцитів методом центрифугування на градієнті щільності; - типування лімфоцитів із застосуванням моноклональних антитіл до CD-структур. Недоліками цього способу є недостатня інформативність ТРІ про стан ефекторної та супресорної ланок імунної системи в організмі людини. В основу корисної моделі поставлена задача розробити більш інформативний спосіб визначення стану імунної системи людини шляхом урахування інших субпопуляцій лімфоцитів зі спільним типом реагування. Задача досягається тим, що у способі визначення стану імунної системи людини новим є те, + що додатково визначається кількість субпопуляції натуральних кілерів (CD16 ). Спосіб здійснюється наступним чином. Виконують забір крові з вени (не менше 2 мл) з додаванням антикоагулянта (наприклад гепарин у кількості 0,2 мг/мл), виділяють з неї лімфоцити методом центрифугування на градієнті щільності (наприклад фіколверографін), + + + визначають серед них кількість субпопуляцій лімфоцитів CD4 , CD8 , CD16 (наприклад, із застосуванням еритроцитарного діагностикуму кон'югованого моноклональними антитілами, + + + відповідно анти-CD4 , анти-CD8 , анти-CD16 ), що мають спільну структуру CD2. Розраховують + + + абсолютну кількість субпопуляцій лімфоцитів CD4 , CD8 , CD16 та по їх співвідношенню визначають імунорегуляторний індекс (ІРІ): + + ІРІ=CD4 /(CD8 +CD16), + де CD4 - абсолютна кількість в Г/л Т-хелперів; + CD8 - абсолютна кількість в Г/л Т-кілерів/супресорів; + CD16 - абсолютна кількість в Г/л натуральних кілерів. За результатами розрахунків оцінюють стан імунної системи. У здорових дорослих ІРІ дорівнює 1±0,07 (референтні значення 0,9-1,2). При значеннях ІРІ менше 0,9 роблять висновок про розвиток імунодефіцитного стану за рахунок підвищення супресорної ланки, така ситуація + може формуватися при суттєвому зниженні кількості субпопуляції CD4 або підвищенні + + субпопуляцій лімфоцитів CD8 та CD16 . Значення ІРІ менше 0,5 свідчить про виражений імунодефіцитний стан. При значенні ІРІ більше 1,2 роблять висновок про гіперреакторний стан імунної системи за рахунок підвищення ефекторної ланки, така ситуація може формуватися при + + суттєвому підвищенні кількості субпопуляції CD4 або зниженні субпопуляцій лімфоцитів CD8 + та CD16 . Використання запропонованого ІРІ при оцінці стану імунної системи дозволить з більшою точністю давати висновки про активність ефекторної або супресорної ланки, тому що + + субпопуляції лімфоцитів CD8 та CD16 являють собою єдину систему кілерно-супресорної дії і + показник їх співвідношення до субпопуляції CD4 більш інформативний. Результати аналізу + + співвідношення вмісту CD4 та CD8 субпопуляцій лімфоцитів, що використовується в 1 UA 68274 U 5 10 15 20 25 теперішній час в клінічній практиці, не враховує вище наведеного факту, тому можливість помилкових висновків значно підвищується. Приклад Пацієнтка X., 1952 р.н. Диагноз: Гіпертонічна хвороба. Клімактеричний синдром. Обстеження: OAK: Лейкоцити 3,52, Лф - 17 %, Е - 7 %, П - 4 %, С – 66 %, М - 6 %. CD4-38 %, 0,88 Г/л; CD8-19 %, 0,44 Г/л; CD16-28 %, 0,65 Г/л. Розрахунок: 1. ТРІ: 2,0 - результат є в межах норми. 2. ІРІ: 0,81 - має місце розвиток імунодефіцитного стану за рахунок підвищення супресорної ланки імунної системи. Заключний діагноз: Вторинний імунодефіцит, субклінічна стадія. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб визначення стану імунної системи людини, що включає забір крові з вени, додавання антикоагулянта, виділення з неї лімфоцитів методом центрифугування на градієнті щільності, + + + розрахунок абсолютної кількості CD4 , CD8 , CD16 субпопуляцій лімфоцитів та імунорегуляторного індекса (ІРІ), який відрізняється тим, що додатково визначають + субпопуляцію лімфоцитів CD16 , та по співвідношенню всіх субпопуляцій визначають ІРІ: + + + ІРІ=CD4 /(CD8 +CD16 ), + де CD4 - абсолютна кількість в Г/л Т-хелперів, + CD8 - абсолютна кількість в Г/л Т-кілерів/супресорів, + CD16 - абсолютна кількість в Г/л натуральних кілерів, причому при значеннях ІРІ 0,9-1,2 стан імунної системи вважають нормальним, при значеннях ІРІ менше 0,9 роблять висновок про імуносупресивний стан імунної системи, при значеннях ІРІ менше 0,5 діагностують імунодефіцитний стан імунної системи, при значеннях ІРІ більше 1,2 має місце гіперреакторний стан імунної системи людини. 30 Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2