Засіб для диференційної діагностики лістеріозу бактеріологічним методом та оцінка якості поживних середовищ для культивування listeria spp

Реферат: Засіб для диференційної діагностики лістеріозу бактеріологічним методом та для оцінки якості поживних середовищ для культивування Listeria spp., що має у своєму складі сукупність ампул з ліофільно висушеними тест-штамами мікроорганізмів з роду Listeria (Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s), а також Rhodococcus equi 1, Staphylococcus aureus KV25 та Escherichia coli Esi 5, причому для диференціації патогенних видів Listeria використовують штами Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s, Rhodococcus equi 1, Staphylococcus aureus KV25, а для перевірки якості поживних середовищ додатково Escherichia coli Esi 5. UA 83158 U (54) ЗАСІБ ДЛЯ ДИФЕРЕНЦІЙНОЇ ДІАГНОСТИКИ ЛІСТЕРІОЗУ БАКТЕРІОЛОГІЧНИМ МЕТОДОМ ТА ОЦІНКА ЯКОСТІ ПОЖИВНИХ СЕРЕДОВИЩ ДЛЯ КУЛЬТИВУВАННЯ LISTERIA SPP. UA 83158 U UA 83158 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до ветеринарії, а саме до ветеринарної мікробіології і біотехнології, зокрема до способів диференційної діагностики лістеріозу бактеріологічним методом з оцінкою якості поживних середовищ для культивування Listeria spp. за продуктивністю та селективністю. Даний засіб може бути використаний при виявленні збудника лістеріозу в продуктах харчування, патологічному матеріалі та в/на об'єктах зовнішнього середовища, при розробці діагностичних систем, а також при проведенні оцінки якості поживних середовищ. Існує "Спосіб детекції лістерій Listeria monocytogenes, L. innocua, L. grayi, L. ivanovii, L. seeligeri, L. welshimeri" (Деклараційний патент України на винахід 40310А, C12Q1/04, C12Q1/68, опубл. 16.07.2001, бюл. №6), що являє собою набір праймерів для полімеразної ланцюгової реакції із забезпеченням 100 % специфічності для детекції шести видів лістерій. Даний спосіб може бути використано в молекулярно-генетичному аналізі, але не може бути застосовано в бактеріологічній діагностиці. Також існує "Мікробіологічне середовище для накопичення бактерій роду Listeria" (Деклараційний патент України 29973U, C12N 1/00, C12N 1/20, опубл. 11.02.2008, бюл. №3), що, окрім середовища, має в своєму складі тест-штами: Listeria monocytogenes №924002, Listeria ivanovii №924004 та Listeria innocua №924005. Ця корисна модель може використовуватися як позитивні контролі для перевірки ефективності середовища, проте відповідно до міжнародних вимог (ДСТУ ISO/TS 11133-2:2006) для оцінки селективності середовища необхідним є використання негативних контролів, що в даній корисній моделі відсутні. Найбільш близьким до заявленого засобу є "Способ дифференциации культуры Listeria monocytogenes" (Патент на изобретение RU 2196827 С1, C12Q1/04, C12N1/20), що передбачає використання поживного середовища з додаванням та без додавання активованого вугілля. Спосіб є специфічним, дешевим та швидким, однак не забезпечує внутрішньородової диференціації виділених ізолятів. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити засіб для диференційної діагностики лістеріозу бактеріологічним методом з проведенням оцінки якості поживних середовищ. Поставлена задача вирішується тим, що засіб для диференційної діагностики лістеріозу бактеріологічним методом та для оцінки якості поживних середовищ для культивування Listeria spp., що має у своєму складі сукупність ампул з ліофільно висушеними тест-штамами мікроорганізмів з роду Listeria (Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s), а також Rhodococcus equi 1, Staphylococcus aureus KV25 та Escherichia coli Esi 5. Для диференціації патогенних видів Listeria використовують штами Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s, Rhodococcus equi 1, Staphylococcus aureus KV25, а для перевірки якості поживних середовищ додатково Escherichia coli Esi 5. Приклад 1. Засіб являє собою сукупність ампул з ліофільно висушеними тест-штамами мікроорганізмів з роду Listeria (Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s) та штами Rhodococcus equi 1 і Staphylococcus aureus KV25, що дають можливість проводити CAMP-test та контроль якості поживних середовищ для лістерій, а також Escherichia coli Esi 5, що використовується як негативний контроль при визначенні селективності середовищ для виділення лістерій. Кожен штам знаходиться в окремій ампулі. Приклад 2. Штами Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s, Staphylococcus aureus KV25 та Rhodococcus equi 1 використовуються для проведення CAMP-test за загальноприйнятими методиками (ДСТУ ISO 11290-1:2003 "Мікробіологія харчових продуктів та кормів для тварин. Горизонтальний метод виявляння та підраховування Listeria monocytogenes"). Приклад 3. Штам Listeria monocytogenes 92U002 використовують для визначення продуктивності поживних середовищ для лістерій відповідно до ДСТУ ISO/TS 11133-2:2006 "Мікробіологія харчових продуктів і кормів для тварин. Настанови щодо готування та вироблення поживних середовищ. Частина 2. Практичні настанови щодо випробування культуральних середовищ". Приклад 4. Штами Listeria monocytogenes 92U002 (позитивний контроль) та Escherichia coli Esi 5, (негативний контроль) використовують для визначення селективності поживних середовищ для лістерій відповідно до ДСТУ ISO/TS 11133-2:2006 "Мікробіологія харчових продуктів і кормів для тварин. Настанови щодо готування та вироблення поживних середовищ. Частина 2. Практичні настанови щодо випробування культуральних середовищ". 1 UA 83158 U 5 Приклад 5. Штами Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s використовують під час проведення порівняльного аналізу морфологічних, культуральних, біохімічних, гемолітичних та біологічних властивостей виділених культур та еталонних штамів з набору. Даний засіб знайде широке використання в лабораторній практиці при виділенні, ідентифікації та вивченні мікроорганізмів з роду Listeria. А також при розробці та впровадженні інших методів дослідження мікроорганізмів з роду Listeria, де є необхідність позитивних та негативних контролів, якими можуть бути еталонні штами з набору. 10 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 20 Засіб для диференційної діагностики лістеріозу бактеріологічним методом та для оцінки якості поживних середовищ для культивування Listeria spp., що має у своєму складі сукупність ампул з ліофільно висушеними тест-штамами мікроорганізмів з роду Listeria (Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s), а також Rhodococcus equi 1, Staphylococcus aureus KV25 та Escherichia coli Esi 5, який відрізняється тим, що для диференціації патогенних видів Listeria використовують штами Listeria monocytogenes 92U002, Listeria ivanovii 0811і, Listeria innocua 92U005, Listeria seeligeri 0811s, Rhodococcus equi 1, Staphylococcus aureus KV25, а для перевірки якості поживних середовищ додатково Escherichia coli Esi 5. Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2