Комплекс бактеріофагу та ліпосом для інгібування активності стафілококових інфекцій

Реферат: Комплекс для інгібування активності стафілококової інфекції, який включає як основу бактеріофаг. До бактеріофага додають ліпосоми у співвідношенні 1:1-2:1. UA 85178 U (12) UA 85178 U UA 85178 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до області медицини і біології, зокрема стосується засобів для лікування бактеріальних інфекцій і може бути використаною для інгібування активності стафілококових інфекцій. Відомий спосіб інгібування дії стафілококової, стрептококової й інших бактеріальних інфекцій шляхом використання засобів на основі бактеріофагів. Бактеріофаг являє собою вірус, який знищує бактерії. Він здатний знайти бактеріальну клітину, прикріпитися до неї, розмножитися та згубити. Кожен фаг знищує призначену тільки для нього бактерію [Крылов В.Н. Фаготерапия / В.Н. Крылов // Химия и жизнь.-2002. - № 3. - С. 11-15]. Так, наприклад, відомий антибактеріальний засіб виборчої дії, ефективний відносно стафілококової, стрептококової й інших бактеріальних інфекцій, який включає як основу бактеріофаги і екстракти рослин [Патент РФ № 2366436 А61К35/74, А61Р31/04. от 25.03.2008 Средство антибактериальное избирательного действия на основе бактериофагов/ Чубатова С.А., Кузнецова Г.В., Жиленков Е.Л., Попова В.М., Зурабов А.Ю.,Чумбуридзе Г.Г.] Даний комплекс для інгібування активності бактеріальних інфекцій з використанням бактеріофага є найбільш близьким до того, що заявляється, за технічною суттю і результатом, який може бути досягнутим, тому його вибрано за прототип. В основу корисної моделі поставлено задачу розширення арсеналу засобів для інгібування активності стафілококової інфекції (Staphylococcus aureus). Задачу, яку поставлено в основу корисної моделі, вирішують тим, що у відомому комплексі для інгібування активності стафілококової інфекції, який включає як основу бактеріофаг, згідно з корисною моделлю, до бактеріофага додають ліпосоми у співвідношенні 1:1-2:1. Технічний ефект корисної моделі, що заявляється, а саме розширення арсеналу засобів для інгібування культури стафілококу комплексом бактеріофага (стафілофага або секстафага, або піофага) та ліпосом, обумовлений синергізмом дії бактеріофагу та ліпосом. Теоретичною передумовою корисної моделі є той факт, що наночастки і ліпосомальні форми лікарських засобів дозволяють значно підвищити ефективність препаратів, знизити їх токсичність, терапевтичні дози і якісно змінити характер їхньої дії. Так у роботі [Бактериофаги и липосомы в пародонтологии. / под ред. С.А. Чубатова, И.В. Желудева, Е.Г. Михайлова// Москва. Нижний Новгород; Изд-во Нижегородского госуниверситета им., Н.И. Лобачевского, 2001.-73 С.] запропонований біотехнологічний підхід до конструювання і використання в готових препаратах ліпосом і бактеріофагів для лікування і профілактики гнійно-запальних захворювань. Засіб одержують наступним чином: лецитин або негативно заряджені ліпіди випарюють й одержують ліпосоми з наступним суспендуванням у забуференому фізіологічному розчині з рН 7,4 для одержання ліпосомальної дисперсії з концентрацією ліпідів 1 %, продавлюють на екструдері при охолодженні до 2-4 °C до досягнення розміру ліпосом 160-200 нм. Бактеріофаг додають до ліпосом у співвідношенні 1:1-2:1 та інкубують протягом 30 хвилин при кімнатній температурі. Одержаний комплекс використовують для інгібування активності стафілококової інфекції. Ефективність комплексу доказана експериментально. Комплекс бактеріофага та ліпосом розводили методом серійних розведень м'ясопептонним бульйоном (МПБ) у плоскодонних планшетах, додавали до культури стафілококу Staphylococcus aureus, інкубували при 34 °C протягом 24 годин. Контролем служила культура Staphylococcus aureus без бактеріофага. Комплекс бактеріофага та ліпосом висівали на щільне середовище Мюллера-Хінтона для визначення мінімальної інгібуючої концентрації (МІК). За МІК вважають найменшу концентрацію, що затримує ріст Staphylococcus aureus (S. aureus) протягом періоду інкубації. Кількість мікроорганізмів в посівах визначали в колонієутворюючих одиницях (КУО). Аналіз отриманих даних показав, що на середовищі Мюллера-Хінтона після дії комплексу лецитинових ліпосом та секстафага з 1-ї по 6 лунку ріст колоній не визначався. З 7-ї по 11 лунку, як і в контрольній лунці без бактеріофага спостерігався ріст S. aureus. Таким чином, активність комплексу лецитинових ліпосом та секстафага, який діє на планктонну форму 3 8 культури, знаходилася в межах 10 -10 КУО. Після дії комплексу негативно заряджених ліпосом та секстафага з 1-ї по 7 лунку ріст колоній не визначався. З 8-ї по 11 лунку, як і в контрольній лунці без бактеріофага спостерігався ріст S. aureus. Таким чином, активність комплексу негативно заряджених ліпосом та секстафага, 2 8 який діє на планктонну форму культури, знаходилася в межах 10 -10 КУО. Ефективність дії комплексів ліпосом та секстафага була вище ефективності дії комерційного секстафага. Мінімальна інгібуюча концентрація комплексу лецитинових ліпосом та секстафага, при якій знищувались планктонні клітини S. aureus, була у 10 разів менше МІК комерційного секстафага. Використання негативно заряджених ліпосом знижало МІК у 100 разів. 1 UA 85178 U 5 10 15 20 25 30 Аналіз отриманих даних на середовищі Мюллера-Хинтона після дії комплексу лецитинових ліпосом та піофага показав, що з 1-ї по 6 лунку ріст колоній не визначався. З 7-ї по 11 лунку, як і в контрольній лунці без бактеріофага спостерігався ріст S. aureus. Таким чином, активність комплексу лецитинових ліпосом та піофага, який діє на планктонну форму культури, 3 8 знаходилася в межах 10 -10 КУО. Після дії комплексу негативно заряджених ліпосом та секстафага з 1-ї по 7 лунку ріст колоній не визначався… З 8-ї по 11 лунку, як і в контрольній лунці без бактеріофага спостерігався ріст S. aureus. Таким чином, активність комплексу негативно заряджених ліпосом 2 8 та піофага, який діє на планктонну форму культури, знаходилася в межах 10 -10 КУО. Ефективність дії комплексів ліпосом та піофага була вище ефективності дії комерційного піофага. Мінімальна інгібуюча концентрація комплексу лецитинових ліпосом та піофага, при якій знищувались планктонні клітини S. aureus, була у 100 разів менше МІК комерційного секстафага. Використання негативно заряджених ліпосом знижало МІК у 200 разів. Аналіз отриманих даних на середовищі Мюллера-Хінтона після дії комплексу лецитинових ліпосом та стафілофага показав, що з 1-ї по 6 лунку ріст колоній не визначався. З 7-ї по 11 лунку, як і в контрольній лунці без бактеріофагу спостерігався ріст S. aureus. Таким чином, активність комплексу лецитинових ліпосом та стафілофага, який діє на планктонну форму 3 8 культури, знаходилася в межах 10 -10 КУО. Після дії комплексу негативно заряджених ліпосом та стафілофага з 1-ї по 7 лунку ріст колоній не визначався. З 8-ї по 11 лунку, як і в контрольній лунці без бактеріофага спостерігався ріст S. aureus. Таким чином, активність комплексу негативно заряджених ліпосом та 2 8 стафілофага, який діє на планктонну форму культури, знаходилася в межах 10 -10 КУО. Ефективність дії комплексів ліпосом та стафілофага була вище ефективності дії комерційного стафілофага. Мінімальна інгібуюча концентрація комплексу лецитинових ліпосом та стафілофага, при якій знищувались планктонні клітини S. aureus, була у 10 разів менше МІК комерційного стафілофага. Використання негативно заряджених ліпосом знижало МІК у 100 разів Таким чином, комплекс для інгібування дії стафілококової інфекції на основі ліпосом та бактеріофагів, які використовують у співвідношенні бактеріофаг: ліпосоми 1:1-2:1, зменшує мінімальну інгібуючу концентрацію комерційних бактеріофагів в 10-200, що підвищує їх ефективність. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 35 Комплекс для інгібування активності стафілококової інфекції, який включає як основу бактеріофаг, який відрізняється тим, що до бактеріофага додають ліпосоми у співвідношенні 1:1-2:1. Комп’ютерна верстка І. Мироненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2