Етиловий естер 9-метил-3-оксо-2,3-дигідротієно[3,2-e][1,2,4]триазоло[4,3-c]піримідин-8-карбонової кислоти, який проявляє анальгетичну та протизапальну активність

Етиловий естер 9-метил-3-оксо-2,3дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло[4,3-с]піримідин8-карбонової кислоти загальної формули: Винахід відноситься до хіміко-фармацевтичної галузі, а саме до нових біологічно активних хімічних сполук, похідних з ряду [2,3-d]-піримідин-6карбонової кислоти, які можуть бути використані для створення лікарських засобів з властивостями, притаманними групі нестероїдних протизапальних засобів (НПЗЗ), з метою лікування патологічних станів, що супроводжуються запаленням та/або больовим синдромом. Актуальність пошуку нових НПЗЗ обумовлена тим, що ряд побічних ефектів, пов'язаних з їх механізмом дії, таких як гастротоксичність, гепатотоксичність, нефротоксичність, гематотоксичність та тощо, обмежують їх застосування в клініці. Це та позитивні фармакологічні ефекти препаратів цієї групи: протизапальний, аналгетичний, жарознижувальний та антиагрегантний спонукають до пошуку та синтезу нових молекул з властивостями НПЗЗ, але більш нешкідливих та ефективних. У сучасній медичній практиці невідомі похідні [2,3-d]-піримідин-6-карбонової кислоти, які застосовуються як НПЗЗ. Аналогів за хімічною структурою заявленої сполуки не знайдено. Аналогом за фармакологічною дією заявленої сполуки може бути препарат „Ортофен", діючою речовиною якого є диклофенак натрію [Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух томах. T.1. - Изд. 13-е, новое. - Харьков: Торсинг, 1997. С. 172], який виявляє виражені анальгетичні та протизапальні властивості і вважається одним з найефективніших та найбезпечніших з групи НПЗЗ. Ортофен (диклофенак натрію) є похідним фенілоцтової кислоти (натрієва сіль 2-[(2,6дихлорфенил)-аміно]-фенілоцтової кислоти) як і всі НПЗЗ призначений для лікування запальних захворювань, які супроводжуються больовим синдромом: гострого ревматизму, ревматоїдного артриту, анкілозуючого спондилоартриту (хвороби Бехтерева), артрозів, спонділоартрозів. До недоліків ортофену (диклофенаку натрію) можна віднести гастротоксичну, гепатотоксичну та нефротоксичну побічну дію. Завданням винаходу є створення нової хімічної сполуки з вираженими анальгетичними та протизапальними властивостями без характерних для НПЗЗ побічних ефектів, що може бути використа O N N H3C N EtO S O N (19) UA (11) 86561 (13) C2 , який проявляє анальгетичну та протизапальну активність. 3 на як діюча речовина у складі фармацевтичних препаратів різних лікарських форм. Поставлене завдання вирішується шляхом синтезу етилового естеру 9-метил-3-оксо-2,3дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло[4,3-с]піримідин8-карбонової кислоти - індивідуальної хімічної сполуки загальної формули: яка проявляє виражену анальгетичну та протизапальну активність і може бути віднесена до групи нестероїдних протизапальних засобів (НПЗЗ). Заявлена сполука невідома з джерел інформації. Заявлену речовину одержують шляхом взаємодії етилового естеру 4-гідразино-5 Заявлену сполуку одержували у 3 етапи. I. Етиловий естер 5-метил-4-хлортієно[2,3d]піримідин-6-карбонової кислоти (2) одержували за відомими методиками з [1, 2] етилового естеру 5-метил-4-оксо-3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин-6карбонової кислоти (1) при обробці останнього хлорокисом фосфору (РОСl3). II. Одержання етилового естеру 4-гідразино-5метилієно[2,3-d]піримідин-6-карбонової кислоти (3). До суспензії етилового естер 5-метил-4хлортієно[2,3-d]піримідин-6-карбонової кислоти (2) 7г (0,027моль) у 50мл ізопрпанолу додавали 2,7г (0,054моль) гидразингідрату та суміш кип'ятили протягом 40 хвилин. Осад, який утворився після охолодження відфільтровували та промивали 50% ізопроапнолом. Вихід 65%. Т пл. 193-95°С. ІЧ (KВr, см-1): 3402, 3318, 3246, 2997, 1701, 1635, 1558, 1503, 1479, 1395. 1 Н ЯМР (200 MHz, ДMCO-D6): 1,27 (3Н, т., СООСН2СН3); 2,81 (3Н, с, СН3); 3,3 (2Н, уш. с, NH2); 4,28 (2Н, кв., СООСН2СН3); 7,6 (1H, уш.м., NH); 8,34 (1H, с, СН). Знайдено, %: N 22,52. C10H12N4O2S. Розраховано, %: N 22,21. М. 252,30. III. Одержання етилового естеру 9-метил-3оксо-2,3-дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло[4,3с]піримідин-8-карбонової кислоти (4). До розчину 1,1'-карбонілдіімідазолу (КДІ) 3,4г (0,021моль) у безводному ДМФА додавали етиловий естер 4 86561 4 метилієно[2,3-d]піримідин-6-карбонової кислоти з 1,1'-карбонілдіімідазолілом у безводному ДМФА. Вихід речовини складає 71%. Етиловий естер 9-метил-3-оксо-2,3дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло [4,3-с]піримідин8-карбонової кислоти - це порошок білого або жовтуватого кольору без запаху, розчинний в ДМФА при нагріванні, мало розчинний у спирті, діоксані, не розчиняється в ацетонітрилі, хлороформі, оцтовій кислоті. Структура та індивідуальність заявленої хімічної речовини підтверджена за допомогою елементного аналізу, ІЧ-спектрофотометрії та 1Н ЯМРспектроскопії. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1 Схема одержання етилового естеру 9-метил3-оксо-2,3-дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло[4,3с]піримідин-8-карбонової кислоти гідразино-5-метилієно[2,3-d]піримідин-6-карбонової кислоти (3) 5,1г (0,02моль) та суміш кип'ятили протягом 1 години. Після охолодження осад, який утворився відфільтровували та перекристаизовували з ДМФА. Одержали заявлену сполуку. Вихід 71%. Т пл. 289-91°С. ІЧ (KВr, см-1): 3300, 2987, 1777, 1707, 1623, 1549, 1527, 1508, 1477, 1435. 13 С ЯМР (75 MHz, ДМСО-D6): 14,0; 14,6; 61,3; 119,1; 125,5; 138,4; 138,7; 139,6; 148,6; 154,5; 161,6. 1 Н ЯМР (200 MHz, ДМСО-D6): 1,28 (3Н, т., СООСН2СН3); 2,73 (3Н, с, СН3); 4,32 (2Н, кв., СООСH2СН3), 8,69 (1Н, с, СН); 12,57 (1H, уш.м., NH). + Знайдено, %: N 20,31. C11H10N4O3S. [М+Н] 279. Розраховано, %: N 20,13. М. 278,29. Приклад 2 Вивчення анальгетичної активності заявленої сполуки у порівнянні з ортофеном проводили на моделі оцтовокислих корчів у білих лабораторних мишей масою 18-20г. [Доклінічні дослідження лікарських засобів (методичні рекомендації) // За редакцією: член-кор. АМН України О.В. Стефанова. - К.: Авіцена, 2001. - С.307-320]. Анальгетичну активність (%) оцінювали за здатністю наведених засобів зменшувати кількість корчів у дослідній групі мишей у порівнянні з контрольною. Результати експерименту наведені у Таблиці 1. 5 86561 6 Таблиця 1 Вивчення анальгетичної активності заявленої сполуки та препарату порівняння № п/п Варіанти досліду 1. Заявлена сполука 2. Ортофен Доза, мг/кг 5,0 10,0 20,0 1,0 5,0 10,0 Результати проведеного дослідження свідчать про те, що заявлена сполука етиловий естер 9метил-3-оксо-2,3-дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло [4,3-с]піримідин-8-карбонової кислоти проявляє виражену анальгетичну активність, яка перевищує анальгетичну активність препарату порівняння: за ЕД50 (3,50мг/кг) заявлена сполука перевершує у 1,4 рази ортофен (5,0мг/кг). Приклад 3 Протизапальну активність заявленої сполуки у порівнянні з референс-препаратом ортофеном Анальгетична дія, % 7,15±16,53 74,14±3,52 61,78±2,79 14,1±2,46 42,2±3,21 70,4±8,06 ЕД50, мг/кг 3,50 5,00 вивчали на моделі ексудативного карагенінового набряку лапи у білих щурів масою 180-200г. [Доклінічні дослідження лікарських засобів (методичні рекомендації) // За редакцією: член-кор. АМН України О.В. Стефанова. - К.: Авіцена, 2001. - С. 292-306]. Протизапальну активність нової сполуки та препарату порівняння виражали у % і визначали за здатністю зменшувати набряки у дослідних тварин у порівнянні з контрольними. Результати дослідження наведені у Таблиці 2. Таблиця 2 Вивчення протизапальної активності заявленої сполуки та препарату порівняння № п/п Назва речовини 1. Заявлена сполука 2. Ортофен Доза, мг/кг 1,0 5,0 10,0 8,00 Протизапальна активність, % (середня за 5 годин) 17,23±6,69 23,57±4,25 44,42±2,63 66,62±4,34 ЕД, мг/кг ЕД40=2,30 ЕД50=8,00* * - ЕД50 ортофену, яка розрахована нами в інших дослідженнях та підтверджується даними літератури [Доклінічні дослідження лікарських засобів (методичні рекомендації) // За редакцією: член-кор. АМН України О.В. Стефанова. - К.: Авіцена, 2001. - С 292-306]. Результати проведеного дослідження свідчать про те, що етиловий естер 9-метил-3-оксо-2,3дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло[4,3-с]піримідин8-карбонової кислоти (ЕД40=2,30мг/кг) проявляє протизапальну активність на рівні ЕД40 і за вираженістю ефекту дещо поступається препаратові порівняння ортофену (ЕД50=8мг/кг), протизапальна активність якого реалізується на рівні ЕД50. Приклад 4 Гостру токсичність заявленої сполуки вивчали з використанням стандартних загальноприйнятих методів на білих мишах масою 18-20г при одноразовому внутрішньошлунковому введенні сполуки у декількох дозах у діапазоні від 500мг/кг до 5000мг/кг з метою знаходження середньосмертельної дози (ЛД50). Для заявленої сполуки ЛД50 знаходиться за межами 5000мг/кг. Для порівняння ЛД50 вольтарену дорівнює 370мг/кг. Згідно з загальноприйнятою класифікацією токсичності речовин етиловий естер 9-метил-3-оксо2,3-дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло[4,3 с]піримідин-8-карбонової кислоти належить до V класу практично нетоксичних речовин (ЛД50>5000мг/кг). Таким чином, заявлено нову хімічну сполуку етиловий естер 9-метил-3-оксо-2,3дигідротієно[3,2-е][1,2,4]триазоло[4,3-с]піримідин8-карбонової кислоти, що проявляє виражену анальгетичну та протизапальну активність, є практично нетоксичним. Заявлена сполука може знайти застосування у терапевтичній практиці для лікування патологічних станів, що супроводжуються больовим синдромом та запаленням. При синтезі заявленої сполуки використовують доступні реактиви, дозволені у фармацевтичній практиці. Речовина одержується за простою технологією, яка може бути відтворена у промислових умовах, є стійкою, що підвищує термін її зберігання. Таким чином, перелічені фактори дозволяють рекомендувати заявлену речовину як субстанцію для створення високоефективних лікарських засобів у різних лікарських формах. 7 Комп’ютерна верстка М. Ломалова 86561 8 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601