Спосіб відбору експлантів та отримання асептичної культури сумаха оленерогого (rhus typhina l.)

Реферат: Спосіб відбору експлантатів та отримання асептичної культури сумаха оленерогого (Rhus typhina L.) включає відбір пазушних бруньок від рослини-донора, отримання їх асептичної культури, підбір складових живильних середовищ для морфогенезу та ризогенезу в культурі in vitro на базовому середовищі Мурасіге та Скуга. Використовують пагони завдовжки 3-5 см з кількома бруньками, а стерилізацію здійснюють у травні місяці 70 %-м етиловим спиртом, 0,2 % розчином хлориду ртуті; причому мікроклональне розмноження проводять на середовищі половинного складу мінеральних солей, модифікованому регуляторами росту. UA 92253 U (12) UA 92253 U UA 92253 U 5 10 15 20 25 Корисна модель належить до галузі сільського господарства, зокрема до садово-паркового господарства. Відомий спосіб (Safarnejad A. Tissue culture in medicinal plant of Sumac (Rhus coriaria) / Abbas Safarnejad, Sayedeh Bi Bi. Layla Alamdari // International jornal of science and nature. Vol. 2 (4). Society for science and nature, 2011. P. 760-763). Спосіб який включає відбір пазушних бруньок від рослини-донора, отримання їх асептичної культури, підбір складових живильних середовищ для морфогенезу та ризогенезу в культурі in vitro на базовому середовищі Мурасіге та Скуга у повному складі. Відомий спосіб не враховує видоспецифічні особливості розмножуваних видів: термін відбору від рослини-донора експлантатів, тип експлантата, отримання асептичної культури, співвідношення та концентрацію фітогормонів для одержання рослин-регенерантів. Суть способу полягає у розмноженні in vitro сумаха пухнастого (Rhus typhina L.), що включає відбір пазушних бруньок від рослини-донора, отримання їх асептичної культури, підбір складових живильних середовищ для морфогенезу та ризогенезу в культурі in vitro на базовому середовищі Мурасіге та Скуга, і, згідно з корисною моделлю, використовують пагони завдовжки 3-5 см з кількома бруньками, а стерилізацію здійснюють у травні місяці 70 %-м етиловим спиртом з експозицією 30 сек., потім 0,2 %-им розчином хлориду ртуті - 7 хв; причому мікроклональне розмноження проводять на середовищі половинного складу мінеральних солей, -1 -1 модифікованому регуляторами росту: 0,5 мг·л 6-бензиламінопурину, 2,0 мг·л β-1 індолілмасляної кислоти (ІМК) та 2,0 г·л активованим вугіллям. Запропонований спосіб шляхом використання як вихідних експлантатів пагонів завдовжки 35 см з кількома бруньками, які розміщені в пазухах листків (здебільшого по дві бруньки) забезпечить високоякісним генетично однорідним садивним матеріалом. Для стерилізації експлантатів ізольованих у травні використовуємо: 70 %-й етиловий спирт з експозицією 30 сек., потім 0,2 %-й розчин сулеми (HgCl2) - 7 хв. Таблиця Етапи морфогенезу сумаха пухнастого (Rh. typhina L.) в культурі in vitro Варіант 1 2 3 4 30 35 40 Склад живильного середовища ½ МС + БАП 0,5 мг/л + 2,0 г/л акт. вуг. ½ МС + БАП 0,5 мг/л + ІМК 2,0 мг/л + 2,0 г/л акт. вуг. МС + БАП 0,5 мг/л + ІМК 0,1 мг/л + 2,0 г/л акт. вуг. Контроль (МС безгормональне) Початок морфогенезу, лоба Етапи морфогенезу Початок Початок Початок регенерації множинного регенерації основного пагоноутворення, коренів, доба пагона, доба доба 7-8 11-13 27-32 100-104 7-8 11-13 25-30 99-104 10-11 15-16 35-40 12-14 24-25 Мікроклональне розмноження (утворення мікропагонів та їх укорінення) сумаха пухнастого (Rhus typhina L.) проводимо на універсальному базовому середовищі Мурасіге і Скуга (МС) -1 половинного складу мінеральних солей, модифікованому регуляторами росту: 0,5 мг·л 6-1 -1 бензиламінопурину (БАП), 2,0 мг·л β-індолілмасляної кислоти (ІМК) та 2,0 г·л активованим вугіллям. Використання опрацьованого способу дасть можливість забезпечити потреби озеленення високоякісним генетично однорідним садивним матеріалом рослин-регенерантів декоративних культиварів виду (Rhus typhina L.). Аналіз таблиці показує, що для індукування множинного пагоноутворення та регенерації кореневої системи необхідні екзогенні регулятори росту БАП та ІМК у певному співвідношенні. За результатами дослідження найбільш оптимальною виявилася комбінація БАП та ІМК (2,5:1). Експериментальним шляхом визначено, що знижена вдвічі концентрація компонентів живильного середовища позитивно впливає на пагоноутворення і ризогенез. Інтенсивність 1 UA 92253 U регенерації мікропагонів на варіантах живильних середовищ № 1 і № 2 відбувалася у 3 рази інтенсивніше, порівняно з контролем. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 10 Спосіб відбору експлантатів та отримання асептичної культури сумаха оленерогого (Rhus typhina L.), що включає відбір пазушних бруньок від рослини-донора, отримання їх асептичної культури, підбір складових живильних середовищ для морфогенезу та ризогенезу в культурі in vitro на базовому середовищі Мурасіге та Скуга, який відрізняється тим, що використовують пагони завдовжки 3-5 см з кількома бруньками, а стерилізацію здійснюють у травні місяці 70 %м етиловим спиртом з експозицією 30 сек., 0,2 % розчином хлориду ртуті - 7 хв.; причому мікроклональне розмноження проводять на середовищі половинного складу мінеральних солей, -1 -1 модифікованому регуляторами росту: 0,5 мг·л 6-бензиламінопурину, 2,0 мг·л β-1 індолілмасляної кислоти (ІМК) та 2,0 г·л активованим вугіллям. 15 Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2