Гідрохлорид 2-діетиламіноетиламіду 1-ізобутил-2-оксо-1,2-дигідрохінолін-3-карбонової кислоти, який виявляє місцевоанестезуючу активність

Гідрохлорид 2-діетиламіноетиламіду 1ізобутил-2-оксо-1,2-дигідрохінолін-3-карбонової кислоти формули: C2H5 O x HCl , N N C2H5 H N O C4H9- iso , 93454 (11) UA волна: издатель Умеренков, 2009. - С. 307-315]. З цієї причини роботи над розробкою нових більш досконалих місцево-знеболюючих засобів не втрачають своєї актуальності. Найбільш близьким до об'єкта, що заявляється за будовою і дією є гідрохлорид діетиламіноетиламіду 4-гідрокси-2-оксо-1-пропіл-1,2-дигідрохінолін-3-карбонової кислоти [UA, №19287, C07D215/227, А61К31/47, опубл. 25.12.1997, бюл. № 6/1997]. Разом з високою місцево анестезуючою активністю цей препарат, на жаль, виявляє помітну подразнюючу дію, що суттєво обмежує можливості його практичного застосування у медицині. В основу винаходу поставлено задачу одержати нову індивідуальну хімічну сполуку з високою анестезуючою дією, та відсутністю подразнюючої дії. Задача винаходу вирішується шляхом синтезу гідрохлориду 2-діетиламіноетил аміду 1-ізо-бутил2-оксо-1,2-дигідрохінолін-3-карбонової кислоти: (19) Винахід відноситься до хіміко-фармацевтичної промисловості і стосується біологічно активних речовин, зокрема, похідних хінолін-3-карбонових кислот, а саме гідрохлориду 2діетиламіноетиламіду 1-ізо-бутил-2-оксо-1,2дигідрохінолін-3-карбонової кислоти, який виявляє високу місцево анестезуючу активність, має покращені фармацевтичні властивості (відсутність подразнюючої дії) і, крім того, демонструє додаткові позитивні біологічні ефекти (моторний блок, седативна дія). На сьогодні в умовах амбулаторного прийому застосовуються різні методи контролю над болем загальний наркоз, акупунктура, гіпноз, електроанестезія, гомеопатія та ін., але жоден з них не є таким же надійним та безпечним, як місцева анестезія. Ефективність останньої визначається, перш за все, обраним анестезуючим засобом. На жаль, ідеального місцевого анестетика поки що не існує і всім сучасним препаратам даної групи в тій, чи іншій мірі притаманні певні недоліки [Машковский М. Д. Лекарственные средства. - М.: РИА Новая (13) C2 який виявляє місцевоанестезуючу активність. 3 93454 C2H5 O x HCl , N H N N C2H5 O C4H9- iso який виявляє місцево анестезуючу активність. Відповідно з винаходом заявлено одну індивідуальну хімічну сполуку, яку синтезують взаємодією 1-ізо-бутил-2-оксо-1,2-дигідрохінолін-3-карбонвої кислоти з 2-діетиламіноетиламіном в присутності N,N’-карбонілдіімідазолу в середовищі безводного диметилформаміду (ДМФА) з подальшим переведенням утвореного аміду-основи у гідрохлорид та перекристалізацією одержаного продукту. Винахід ілюструються наведеними нижче прикладами. Приклад 1. Одержання гідрохлориду 2діетиламіноетиламіду 1-ізо-бутил-2-оксо-1,2дигідрохінолін-3-карбонової кислоти. До розчину 2.45г (0.01моль) 1-ізо-бутил-2-оксо-1,2дигідрохінолін-3-карбонової кислоти в 15мл безводного ДМФА додають 1.78г (0.011 моль) N,N’карбонілдіімідазолу і захищаючи від вологи повітря СаСl2-трубкою витримують при температурі 80С до припинення виділення СО2 (біля 1 години). Потім у реакційну суміш додають 1.42мл (0.01моль) 2-діетиламіноетиламіну і витримують при тій же температурі протягом 2 годин. Розчинник видаляють під пониженим тиском. До залишку додають 15мл води, підкисляють НСl до рН ~ 4, після чого послідовно обробляють 0.1г натрію гідросульфіту та вугіллям. Фільтрують, до фільтрату додають розчин NaOH до рН ~ 8. Утворений маслянистий осад аміду-основи екстрагують СН2Сl2 (3х20мл). Органічні витяжки об'єднують, розчинник відганяють, одночасно видаляючи залишки води у вигляді азеотропу. До охолодженого розчину одержаного аміду-основи в 20мл пропанолу-2 додають насичений газоподібним НСl пропанол-2 до рН ~ 4, потім 20мл сухого діетилового етеру і залишають на 4-5-годин при температурі -10С. Безбарвні кристали цільового гідрохлориду 2діетиламіноетиламіду 1-ізо-бутил-2-оксо-1,2дигідрохінолін-3-карбонової кислоти відфільтровують, промивають сухим діетиловим етером, сушать. Вихід 3.14г (83%). Т. пл. 129-131С (ацетон). Спектр ЯМР 1Н,  , м.д., (J, Гц): 10.29 (1Н, уш. с, NH+); 9.91 (1Н, т, J= 5.7, CONH); 8.84 (1Н, с, Н-4); 7.95 (1Н, д, J= 8.0, Н-5); 7.71 (1Н, т, J = 7.7, Н-7); 7.43 (1Н, д, J= 8.2, Н-8); 7.28 (1Н, т, J= 7.2, Н-6); 4.23 (2Н, д, J = 7.0, 1-NCH2); 3.71 (2Н, к, J = 6.3, CONHCH2); 3.19 (6Н, м, N(CH2)3); 2.16 (1Н, м, СН(СН3)2); 1.21 6Н, т, J= 7.1, N(CH2CH3)2); 0.90 (6Н, д, J = 6.8, СН(СН3)2). Знайдено, %: С 63.32, Н 8.04, N 10.95. C20H29N3O2НСl. Вирахувано, %: С 63.23, Н 7.96, N 11.06. Спектр ЯМР 1Н заявленої сполуки зареєстровано на приладі Varian Mercury- VX-200 (200МГц) в розчині ДМСО-d6, внутрішній стандарт ТМС. 4 Приклад 2. Місцевоанестезуючу активність заявленої сполуки на моделі поверхневої анестезії вивчали у порівнянні зі сполукою за найближчим аналогом за методом Реньє, а особливості їх місцевоподразнюючої дії -за методом Сетнікара [Мамчур В. И., Коваленко Е. Ю., Степанюк Г. Іі., Столярчук А. А. Экспериментальное (доклиническое) изучение новых местно-анестезирующих средств: методические рекомендации. - К.: ГФЦ МЗ Украины, 2003. - 48 с]. Випробовування проводили на не наркотизованих кроликах-самцях масою 2,0-2,5кг. Тварин поміщали в спеціальний ящик з отвором для фіксації голови. Визначали поріг чутливості рогівки ока кролика до тактильного впливу. З цією метою застосовували нейлонову нитку (волосінь), кінець якої попередньо оплавляли в полум'ї газового пальника. Вихідну чутливість рогівки ока кролика (контроль) визначали двічі з інтервалом у 5 хвилин (вії перед дослідом обстригали). Водний 2%-ний розчин заявленої сполуки та сполуки за найближчим аналогом в об'ємі 0,4мл вводили в кон'юнктивальний мішок ока кролика за 2 рази з інтервалом 30 секунд. Перше визначення поверхневої анестезії проводили на 2-ій хвилині і потім повторювали на 5, 10 і далі через кожні 5 хвилин. Кожного разу фіксували мінімальне число доторкань однакової сили та ритму, яке викликало змикання повік. Одночасно з виявленням місцево анестезуючих властивостей визначали подразнюючу дію досліджуваних сполук на тканини ока кролика. Для оцінки цієї дії використовували наступну шкалу: (-) немає видимих змін; (+) гіперемія кон'юнктиви і краю повік, моргальної перетинки в межах 30 хвилин, змикання повік не більше ніж на 5-10 хвилин після введення досліджуваного розчину; (++) гіперемія кон'юнктиви повік, моргальної перетинки, краю повік, склери, інфільтрація тканин повік протягом 30-300 хвилин; Дані досліду наведені у таблиці 1. З наведених у таблиці 1 даних випливає, що на моделі поверхневої анестезії заявлена сполука помітно перевищує за активністю сполуку за найближчим аналогом. Крім того, експериментальні дані свідчать про те, що заявлена сполука взагалі не викликає подразнюючої дії, тоді як сполука за найближчим аналогом у тій же концентрації внаслідок досить сильного подразнення призводить до тривалого змикання повік. Приклад 3. Місцевоанестезуючу активність заявленої сполуки та сполуки за найближчим аналогом на моделі інфільтраційної анестезії вивчали за методом Бюльбрінг-Уейда [Мамчур В. И., Коваленко Е. Ю., Степанюк Г. И., Столярчук А. А. Экспериментальное (доклиническое) изучение новых местно-анестезирующих средств: методические рекомендации. - К.: ГФЦ МЗ Украины, 2003. - 48 с]. При тестуванні місцевою нестезуючих властивостей враховувались усі показники, які характеризують основні специфічні прояви даного виду біологічної активності: індекс інфільтраційної анестезії, швидкість настання анестезії, тривалість повної 5 93454 анестезії, загальна тривалість анестезії, моторний блок та седативний ефект. Експерименти проводили на самцях морських свинок масою 200-250г. Розчини досліджуваних сполук 2%-ної концентрації вводили внутрішньошкірно в об'ємі 0.25мл в попередньо депільовану ділянку шкіри на спині (квадрат - 4x4см). Біологічний ефект оцінювали у вигляді індексу інфільтраційної анестезії. Це умовний показник, що визначається як сумарне число доторкувань ін'єкційною голкою, які не викликають адекватну реакцію тварини (посмикування шкіри). Означені доторкування проводяться серіями по 6 з інтервалами 3-4 секунди через кожні 5 хвилин протягом 0.5 години. Максимальне значення індексу може досягати 36. Оцінку моторного блоку, який може виникати у піддослідних тварин при введенні досліджуваних сполук, проводили за 5-ти бальною шкалою: 0 балів - тонус кореня хвоста зберігається, його рухи спостерігаються у повному обсязі; 1 бал - послаблення тонусу кореня хвоста; 2 бали - послаблення тонусу кореня хвоста, рухи мляві, тварина більше сидить; 3 бали - пониження тонусу кореня хвоста і можливість незначних рухів тварини при подразненні сегментів шкіри, що не входять до зони анестезії, незначна заторможеність тварини; 4 бали загальна атонія кореня хвоста, поява деяких рухів у відповідь на подразнення, загальна заторможеність тварини; 5 балів - стан повної атонії кореня хвоста без виникнення рухів при больовому, тепловому чи електричному подразненні ділянок шкіри, які не входять до зони анестезії, тварина лежить на боці. Інтенсивність моторного блоку оцінюють на "піці" місцевої анестезії. Оцінка седативного ефекту у морських свинок: 0 балів - ефект відсутній, тварина рухлива, самостійно активно рухається кліткою; 1 бал - тварина спокійна, більше сидить, переміщується кліткою тільки за умови занепокоєння її експериментатором; 2 бали - тварина заторможена, сидить в кутку клітки, при її занепокоєнні експериментатором незначно відсувається у бік ізнозу сидить, часто змикає повіки, починає засинати; 3 бали - тварина спить лежачи на боці, на подразнення експериментатором та уколи голкою не реагує. Дачі проведених експериментів наведені у таблиці 2. 6 Наведені у таблиці 2 дані свідчать про те, що на моделі інфільтраційної анестезії заявлена сполука дещо перевищує за активністю сполуку за найближчим аналогом. Крім того, відмітною ознакою заявленої сполуки є те, що вже па 7-10 хвилині після її введення у тварин виникав стан глибокого сну: тварини спали лежачи на боці, не реагуючи на активне подразнення голкою (тактильна, больова і температурна чутливість при цьому були повністю відсутні). Через 30-35 хвилин тварини просинались, але ще біля 30 хвилин не рухались були у стані сонливості і тільки потім починали рухати лапками. В результаті одержано експериментальне підтвердження глибокого і тривалого моторного блоку та седативної дії з боку заявленої сполуки, тоді як у сполуки за найближчим аналогом означені ефекти не виявляються зовсім. Разом з тим, вони можуть стати дуже корисними якостями анестетика - зокрема при проведенні ряду короткочасних оперативних втручань, особливе при наданні допомоги пацієнтам з підвищеною збудливістю та можливим страхом перед здійсненням яких-либонь хірургічних маніпуляцій. Таким чином, заявлено гідрохлорид 2діетиламіноетиламіду 1-ізо-бутил-2-оксо-1,2дигідрохінолін-3-карбонової кислоти, який на моделях поверхневої та інфільтраційної анестезії виявляє більш високу специфічну активність, ніж сполука за найближчим аналогом, але на відміну від останньої не виявляє подразнюючої дії і демонструє виражений моторний блок та седативний ефект, завдяки яким може знайти широке практичне застосування у медичній практиці та ветеринарії. Заявлена сполука одержується з доступних реагентів та за простою технологією, яка може бути здійснена в умовах хіміко-фармацевтичних підприємств або лабораторій з використанням стандартного обладнання. Гідрохлорид 2-діетиламіноетиламіду 1-ізобутил-2-оксо-1,2-дитідро-хінолін-3-карбонової кислоти може бути використаний як місцево анестезуючий засіб безпосередньо у вигляді водного розчину, а також і як лікарська субстанція для виготовлення інших лікарських форм. Таблиця 1 Сполука Заявлена сполука Сполука за найближчим аналогом Час настання анестезії, хв. 9 2 Тривалість пов- Загальна тривалість анестезії, Місцевоної анестезії, хв.. хв.. подразнююча дія 62 96 (-) Після 40 хв. підрахунок немо45 жливий внаслідок змикання (++) повік. 7 93454 8 Таблиця 2 Інфільтраційна анестезія Сполука Початок анестезії, хв. Індекс Заявлена сполука Сполука за найближчим аналогом 1.70.12 36.0 1.60.13 36.0 Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Загальна трива- Моторний Повна анестелість анестезії, блок, бали зія, хв. хв. 5 83.64.93 253.29.85 74.74.71 236.89.34 Підписне Седативний ефект, бали 0 Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3 0