Спосіб одержання фітосубстанції з протизапальною дією

Спосіб одержання фітосубстанції з протизапальною дією, що включає використання сухої рослинної сировини з плодів перцю стручкового (Capsicum annum), її подрібнення, який відрізняється тим, що подрібнену суху рослинну сировину кілька разів екстрагують при температурі 90-95°С очищеною водою у співвідношенні 1:15-1:20 впродовж 30-60 хвилин з наступним просвітленням, фільтруванням та ліофільним висушуванням кінцевого продукту. (19) (21) u200607435 (22) 04.07.2006 (24) 15.12.2006 (46) 15.12.2006, Бюл. № 12, 2006 р. (72) Дубровна Людмила Володимирівна, Бензель Леонід Васильович, Вовк Юрій Володимирович, Нєктєгаєв Ігор Олексійович, Бензель Ігор Леонідович, Маслюк Марія Володимирівна (73) ЛЬВІВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМЕНІ ДАНИЛА ГАЛИЦЬКОГО 3 19547 4 рослинної сировини з плодів перцю стручкового відтворювали шляхом введення очищеного скипи(Capsicum annum) екстрагували в круглодонній дару мікрошприцом з фіксованою канюлею та наколбі ємністю 2,0л доведеною до кипіння очищенесеним на відстані 3мм від кінця голки обмежуваною водою у співвідношенні сировина - екстрагент чем в перехідну згортку з вестибулярної сторони 1:15 на водяній лазні при температурі 90°С впронижньої щелепи в зоні, яка відповідає розташудовж 30 хвилин. Аналогічний спосіб отримання ванню першого правого моляра. Об’єм введеного біологічно активних речовин повторювали ще трискипидару - 0,04мл на 1кг маси тіла. Через тричі, після чого об’єднані екстракти просвітлювали чотири години після введення скипидару при температурі 8-10°С впродовж 10 годин і фільз’являлась асиметрія голови тварин за рахунок трували. Фільтрати розливали у флакони по 250мл набряку правої щоки. Праве око щурів частково і висушували за допомогою сублімаційного апаразакривалось. На наступну добу приєдналась сльоту КС-30. Вихід кінцевого продукту становив зотеча з ока, тризм жувальних м’язів, гіперемія 33,6%. слизової оболонки щоки та збільшення набряку. Приклад 2. 50г подрібненої сухої лікарської Методика нанесення «ПС» була наступною: рослинної сировини з плодів перцю стручкового 4% водний розчин фітосубстанції з плодів перцю (Capsicum annum) екстрагували в круглодонній стручкового наносили на ватну турунду в кількості колбі ємністю 2,0л доведеною до кипіння очище0,1-0,25мл та вводили щурам дослідної групи №2 ною водою у співвідношенні сировина - екстрагент в присінок ротової порожнини з боку запалення на 1:20 на водяній лазні при температурі 93°С впро3-4 хвилини. довж 45 хвилин. Вказане екстрагування повторюРеєстрацію клінічних даних проводили щоденвали ще двічі, після чого об’єднані екстракти проно, починаючи з першого дня досліду і до зникненсвітлювали при температурі 8-10°С впродовж 12 ня клінічних симптомів запалення у тварин. З вегодин, фільтрували і проводили ліофільне висуликого спектру клінічних симптомів, що шування. Вихід кінцевого продукту становив характеризують перебіг гострого запального про35,9%. цесу, для оцінки його інтенсивності були обрані і Приклад 3. 50г подрібненої сухої лікарської проаналізовані такі ознаки: стан слизової оболонки рослинної сировини з плодів перцю стручкового щоки, наявність набряку, ступінь відкривання рота, (Capsicum annum) екстрагували в круглодонній стан слизової оболонки ока. колбі ємністю 2,0л доведеною до кипіння очищеЗ метою вивчення механізму протизапальної ною водою у співвідношенні сировина - екстрагент дії фітосубстанції і оцінки ефективності його засто1:17 на водяній лазні при температурі 95°С впросування при асептичному запаленні м’яких тканин довж 60 хвилин. Аналогічний спосіб отримання ротової порожнини, на 4-й і 8-й день були дослібіологічно активних речовин повторювали ще триджені клінічні та біохімічні показники крові (лейкочі, після чого об’єднані екстракти просвітлювали цитарна формула, активність лужної фосфатази при температурі 8-10°С впродовж 15 годин, потім нейтрофілів крові та вміст білка в сироватці крофільтрували і ліофільне висушували. Вихід кінцеві) [5, 6]. вого продукту становив 38,1%. Гостра токсичність «ПС» вивчалась на білих Вивчення впливу фітосубстанції з плодів пермишах-самках, масою 190-200г, які знаходились цю стручкового (Capsicum annum) на перебіг асепна звичайному раціоні харчування та при вільному тичного запалення м’яких тканин ротової порождоступі до води. Фітосубстанцію вводили в очеренини проводили в дослідах на 42 статевозрілих вину (д/о) та в шлунок (д/ш) відповідно у дозах від білих щурах-самцях лінії Вістар віком 5-6 місяців і 500 до 4000мг/кг та від 1000 до 6000мг/кг. За твамасою 240-350г. Експеримент тривав 8 днів. Для ринами спостерігали протягом 14 днів. Відмічали відтворення запалення м’яких тканин ротової почас загибелі, зміни у поведінці та в зовнішньому рожнини використано «скипидарну» модель асепвигляді тварин. При д/ш введенні загибель тварин тичного запалення [2]. Дослідження проводились не відмічено, тому за середньосмертельну дозу згідно з методичними рекомендаціями та відпові(LD50) умовно взяли максимально введену дозу дали основним вимогам Державного фармакологі6000мг/кг (IV клас безпеки згідно з ГОСТ 12.1007чного центру МОЗ України [3, 4]. 76). Як контрольну використовували групу тварин, Для порівняльної характеристики і оцінки акякі отримували еквівалентний об’єм 0,9% розчину тивності «ПС» використовували засіб «Ротокан», натрію хлориду. LD50 для білих мишей-самок при який застосовували за оптимальною для нього д/о визначали за методом Лічфілда і Уїлкоксона. схемою введення: на рясно змочених ватних туруLD50=2800мг/кг (V клас безпеки за класифікацією ндах. Сідорова К.К.) [7, 8, 9]. Тварини були поділені на 4 групи: перша група Статистична обробка результатів проводилась (6 тварин) - інтактні тварини; друга - контрольна за допомогою Microsoft Excel. Для оцінки розбіж(12 тварин) - модель асептичного запалення ностей між середніми величинами при нормальм’яких тканин ротової порожнини без лікування; ному розподілі вибіркових сукупностей використотретя група - дослідна №1 (12 тварин) - після мовували t-критерій Стьюдента. При перевірці гіпотез делювання асептичного запалення як лікувальний використовувався рівень значимості р=0,05. засіб використано «Ротокан»; четверта група Результати проведених досліджень з вивчендослідна №2 (12 тварин) - після моделювання ня динаміки клінічних показників у щурів в умовах асептичного запалення як лікувальний засіб викомоделювання асептичного запалення м’яких ткаристано 4% водний розчин «ПС». нин ротової порожнини та застосування водного Запалення м’яких тканин ротової порожнини розчину «ПС» наведено в таблиці 1. 5 19547 6 Таблиця 1 Динаміка клінічних показників у щурів із асептичним запаленням м’яких тканин ротової порожнини Клінічні прояви Ступінь відкривання рота (%) Набряк щоки (мм) Стан слизової оболонки щоки (бал) Стан слизової оболонки ока (бал) Ступінь відкривання рота (%) Набряк щоки (мм) Стан слизової оболонки щоки (бал) Стан слизової оболонки ока (бал) Ступінь відкривання рота (%) Набряк щоки (мм) Стан слизової оболонки щоки (бал) Стан слизової оболонки ока (бал) Ступінь відкривання рота (%) Набряк щоки (мм) Стан слизової оболонки щоки (бал) Стан слизової оболонки ока (бал) Ступінь відкривання рота (%) Набряк щоки (мм) Стан слизової оболонки щоки (бал) Стан слизової оболонки ока (бал) Ступінь відкривання рота (%) Набряк щоки (мм) Стан слизової оболонки щоки (бал) Стан слизової оболонки ока (бал) Ступінь відкривання рота (%) Набряк щоки (мм) Стан слизової оболонки щоки (бал) Стан слизової оболонки ока (бал) Ступінь відкривання рота (%) Набряк щоки (мм) Стан слизової оболонки щоки (бал) Стан слизової оболонки ока (бал) Група інтактних Контрольна група тварин 1-й день досліду 100,0±0,0 65,61±1,49 1,00±0,00 1,12±0,02 0,00±0,00 1,33±0,16 0,00±0,00 7,75±0,20 2-й день досліду 100,0±0,0 67,04±2,17 1,00±0,00 1,19±0,02 0,00±0,00 1,92±0,19 0,00±0,00 7,25±0,14 3-й день досліду 100,0±0,0 70,02±2,02 1,00±0,00 1,18±0,01 0,00±0,00 1,92±0,19 0,00±0,00 7,42±0,16 4-й день досліду 100,0±0,0 73,92±2,23 1,00±0,00 1,15±0,01 0,00±0,00 1,83±0,12 0,00±0,00 6,00±0,30 5-й день досліду 100,0±0,0 76,16±2,34 1,00±0,00 1,12±0,01 0,00±0,00 1,58±0,16 0,00±0,00 5,17±0,30 6-й день досліду 100,0±0,0 79,62±2,02 1,00±0,00 1,09±0,01 0,00±0,00 1,16±0,12 0,00±0,00 3,92±0,28 7-й день досліду 100,0±0,0 81,81±2,05 1,00±0,00 1,08±0,01 0,00±0,00 1,08±0,16 0,00±0,00 2,50±0,34 8-й день досліду 100,0±0,0 83,32±2,35 1,00±0,00 1,06±0,02 0,00±0,00 0,75±0,20 0,00±0,00 1,66±0,46 Дослідна група №1 Дослідна група №2 70,52±1,0 1,14±0,01 1,30±0,12 7,0±0,5 69,46±1,46 1,15±0,02 1,42±0,34 7,33±0,25 71,24±2,1 1,12±0,02 1,58±0,1 5,2±0,25 73,92±2,67* 1,13±0,01 1,50±0,16 5,83±0,12* 75,45±1,9 1,10±1,01 1,17±0,12 1,08±1,09 77,43±2,91* 1,10±0,02* 1,25±0,14* 5,00±0,30* 77,33±1,12 1,1±0,01 1,08±0,09 4,91±0,28 82,73±2,15*** 1,08±0,01* 0,92±0,16* 3,83±0,35*** 80,5±1,24 1,08±0,01 1,0±0,19 4,5±0,21 88,23±2,36*** 1,06±0,015* 0,75±0,14* 3,17±0,26*** 85,16±1,80 1,05±0,01 0,075±0,11 3,08±0,21 93,14±2,42*** 1,03±0,01* 0,50±0,16* 2,00±0,30*** 87,25±2,10 1,05±0,02 0,20±0,02 1,58±0,21 97,33±1,01*** 1,01±0,01*** 0,16±0,02* 0,75±0,14*** 88,50±2,9 1,03±0,01 0,00±0,00 1,0±0,28 98,75±1,53*** 1,00±0,00* 0,00±0,00* 0,00±0,00*** Примітка: * - достовірні відмінності (р