Спосіб екстреної хіміопрофілактики “пташиного” грипу (h5n1) у період загрози грипозної епідемії

1. Спосіб екстреної хіміопрофілактики "пташиного" грипу (H5N1) у період загрози грипозної епі 3 35876 Однак при застосуванні амізону достатнє підвищення рівня ендогенного інтерферону (поперед усього a-ІФН) у сироватці крові та біологічних рідинах -в 3-4 рази та більш стосовно вихідної, нерідко зниженої концентрації цього противірусного фактору, що забезпечує захисний ефект проти вірусу грипу, який виникає лише протягом тижня, у той час як нерідко потрібно сформувати противірусний ефект протягом 2-3 діб, що забезпечить захист від вірусу „пташиного" грипу людей, які безпосередньо контактували з птахами, серед яких виникла епідемія „пташиного" грипу, або епізоотія іншої вірусної хвороби, з ще невточненим діагнозом. Існує також спосіб хіміопрофілактики "пташиного" грипу H5N1 у період загрози грипозної епідемії, який включає введення додатково до амізону сиропу ехінацеї пурпурової [Патент України на корисну модель №17890. - МПК А61К35/14, А61К36/28. - Спосіб екстреної хіміопрофілактики „пташиного" грипу (H5N1) в період загрози грипозної епідемії. - Оп убл. 16.10.2006. - Бюл. №10]. Цей спосіб є найбільш ефективним з існуючих і тому обраний нами в якості прототипу. До недоліків прототипу відноситься те, що в частини обстежених з можливою наявністю в них „пташиного" грипу (H5N1) у період загрози грипозної епідемії, все ж таки зберігаються зсуви деяких імунологічних показників, які не виключають можливості виникнення захворювання на „пташиний" грип в осіб, які безпосередньо контактували з хворими птахами. Крім того, введення сиропу ехінацеї пурпурової не завжди викликає достатній імуномодулюючий ефект, особливо в плані стимуляції продукції a-ІФН. Тому відомий спосіб-прототип потребує удосконалення. Задачею корисної моделі було підвищення ефективності відомого способу екстреної хіміопрофілактики „пташиного" грипу в період загрози грипозної епідемії, а саме прискорення суттєвого підвищення рівня a-ІФН у сироватці крові та sIgA в ротоглоточному та бронхіальному секреті, що буде гарантувати цих людей проти захворювання на „пташиний" грип, якщо вони безпосередньо контактували з хворими птахами. Вказана задача здійснюється шляхом введення замість сиропу ехінацеї пурпурової особам, які потребують проведення екстреної хіміопрофілактики „пташиного" грипу (H5N1), індуктора синтезу ендогенного інтерферону циклоферону. Циклоферон - це сучасний препарат, що є низькомолекулярним індуктором ендогенного інтерферону та водночас проявляє імуномодулюючу дію та чітко виражений протизапальний ефект. Циклоферон не викликає негативних побічних ефектів, добре сполучається з іншими препаратами, в тому числі імуномодулюючими та нестероїдними протизапальними, володіє пролонгованою дією, та у зв'язку з практичною відсутністю токсичності у терапевтичному дозуванні, може призначатися не лише дорослим, а також і дітям. Пропозиція авторів корисної моделі щодо додаткового введення циклоферону крім амізону базується на вперше встановленій в експериментальних умовах закономірності й підтвердженої в 4 умовах епідеміологічного нагляду з імунологічним обстеженням осіб, які брали участь у цьому обстеженні, що циклоферон при сумісному введенні з амізоном з'являють чітко виражену адаптогенну, імуномодулюючу та інтерфероногенну активність, у зв'язку з чим амізон та циклоферон при сумісному введенні надають взаємнопотен-ціюючий ефект стосовно продукції ендогенного інтерферона (а саме a-ІФН, що володіє противірусним ефектом) та посилення регіонального імунітету верхніх дихальних шляхів, що забезпечує суттєве посилення резистентності слизових оболонок щодо вірусних агентів. Авторами корисної моделі було вперше встановлено, що при сумісному введенні амізону та циклоферону виникає так званий феномен тахіфілаксії, який проявляється у вигляді швидкого, протягом 24-48 годин посилення імунологічних механізмів, зокрема продукції ендогенного a-ІФН та sIgA, що обумовлює за даними експериментальних досліджень підвищення резистентності слизових оболонок (зокрема кон'юктиви та верхніх ди хальних шля хів) щодо вірусних агентів у 10-20 разів. Саме на біологічному феномені тахіфілаксії, який формується при сполученому введенні амізону (противірусного й імуноактивного препарату, перорального індуктора синтезу ендогенного інтерферону) і циклоферону (який проявляє імуномоделюючі властивості), базується наша пропозиція щодо швидкого, протягом 1-3 діб підвищення резистентності організму людини до вірусної інфекції, зокрема викликаної вірусом „пташиного" грипу (H5N1). Заявлений спосіб екстреної хіміопрофілактики „пташиного" грипу (H5N1) у період загрози грипозної епідемії здійснюється таким чином. Особам, що безпосередньо контактували з птахами, серед яких вже виник спалах „пташиного" грипу, іншої вірусної хвороби, за клінічними ознаками сходний з „пташиним" грипом або за даними епізоотологічного моніторингу має високий ступінь розвитку епізоотії „пташиного" грипу, вводять амізон за схемою: в першу добу 1,0г (по 0,5г 2 рази з інтервалом 10-12 годин між введенням), другу добу 1,0г (по 0,25г 4 рази), третю добу - 0,75г (по 0,25г 3 рази), потім по 0,25г 2 рази на добу протягом 1015 діб (в залежності від тривалості збереження загрози виникнення епідемії „пташиного" грипу) і додатково циклоферон - по 150мг (1 табл.) 1 раз на добу щоденно протягом 5-7 діб поспіль, та потім через день по 150мг на добу ще протягом 1-2 тижнів, у залежності від тривалості збереження загрози виникнення епідемії „пташиного" грипу. Авторами корисної моделі досвідним шляхом було встановлено, що саме при такій схемі введення комбінації амізону й циклоферону забезпечується максимальна ефективність обох препаратів, що проявляється в найбільш швидкому й максимальному підвищенні концентрації a-ІФН (головного природного противірусного фактору) у сироватці крові та одночасно sIgA у ротоглоточному секреті (РГС) та бронхіальному секреті (БС), що віддзеркалює швидке посилення локального імунного статусу верхні х ди хальних шля хів та обумовлює суттєве підвищення противірусної резистентності організму. Тому ця схема введення амізону й 5 35876 циклоферону також є результатом творчої роботи авторів і тому входить до задачі корисної моделі. При розробці заявленого способу екстреної хіміопрофілактики „пташиного" грипу у період загрози грипозної епідемії було обстежено 2 групи осіб у віці 20-56 років, переважно робітників птахо ферм і зоомагазинів, з яких перша група (70 осіб) отримувала екстрену хіміопрофілактику грипу відповідно до заявленого способу, тобто за допомогою амізону й циклоферону, та друга гр упа (72 особи) за допомогою відомого способу-прототипу. Обидві групи обстежених були рандомізовані за віком і статтю. Проведення екстреної хіміпрофілактики „пташиного" грипу в обох групах було здійснено водночас, після появи перших випадків епізоотії „пташиного" грипу серед птахів чи іншої вірусної хвороби, з ще невточненим діагнозом. У всіх обстежених вивчали рівень a-ІФН та sIgA. Вміст a-ІФН у сироватці крові визначали методом твердофазного імуноферментного аналізу за допомогою сертифікованих в Україні тестсистем виробництва НПО "Диагностические системы" (РФ - Нижний Новгород) на імуноферментному аналізаторі PR 2100 фірми „Sanofi Diagnostics Pasteur" (Франція) з використанням методик, які рекомендовані виробником. Вміст sIgA вивчали у змішаному РГС за методом Mancini е.а. в модифікації R. Simmons. РГС збирали зранку натщесерце протягом фіксованого часу (6 хвилин) до чищення зубів, після чого центрифугували протягом 10 хвилин при 1500об/хв, відбирали надосадову рідину (супернатант). Надосадову рідину використовували для аналізу вмісту sIgA виходячи з методичних рекомендацій по вивченню концентрацій імуноглобулінів в зонах низьких концентрацій цих білків. При імунологічному дослідженні було встановлено, що до початку проведення екстреної про 6 філактики „пташиного" грипу в обох гр упах - першій та другій, мали місце зниження концентрації aІФН у сироватці крові. Дійсно, до початку профілактичних заходів вміст a-ІФН складав 5,3±0,2пг/мл, у другій групі - 5,4±0,3пг/мл, що було в середньому менше за нормальні значення у 3,3 рази (таблиця 1). При аналізі рівня a-ІФН у крові в динаміці, звертає на себе увагу той факт, що в першій групі обстежених концентрація даного цитокіну досягала максимальних значень уже на третю добу з початку проведення екстреної хіміопрофілактики відповідно до заявленого способу (тобто за допомогою амізону й циклоферону), у той час як у др угій гр упі, що отримувала хіміопрофілактику відповідно до відомого способу-прототипу, максимальне значення рівня a-ІФН спостерігалося лише на початку сьомої доби з моменту проведення екстрених хіміопрофілак-тичних заходів. Вивчення в ході імунологічного моніторингу динаміки концентрацій a-ІФН показало, що в обстежених, які отримували амізон і циклоферон, на першу добу з початку проведення екстреної хіміопрофілактики „пташиного" грипу концентрація aІФН дорівнювала 9,9±0,3пг/мл, на другу добу вона складала 14,7±0,1пг/мл, а вже на третю добу з початку профілактичних заходів з включенням амізону й циклоферону досягала 18,8±0,2пг/мл, що було ви ще за ви хідні показники даного цитокіну в 3,5 рази (таблиця 1). У той же час у другій гр упі, яка отримувала амізон і сироп ехінацеї пурпурової, відповідно до відомого способу-протипу, на першу добу з початку проведення хіміопрофілактики концентрація sIgA досягала 6,1±0,3пг/мл, на другу добу - 9,2±0,2пг/мл, на третю добу - 11,8±0,1пг/мл, на четверту - 13,6±0,2пг/мл, на п'яту 15,1±0,3пг/мл, на шосту - 17,2±0,4пг/мл і на сьому 18,7±0,2пг/мл. Таблиця 1 Динаміка a-ІФН у сироватці крові при проведенні екстреної хіміопрофілактики „пташиного" грипу, пг/мл (М±m) Період обстеження - до початку екстреної хіміопрофілактики „пташиного" грипу - на 1 добу з початку хіміопрофілактики - на 2 добу з початку хіміопрофілактики - на 3 добу з початку хіміопрофілактики - на 4 добу з початку хіміопрофілактики - на 5 добу з початку хіміопрофілактики - на 6 добу з початку хіміопрофілактики - на 7 добу з початку хіміопрофілактики Норма Групи обстежених перша (n=70) Друга (n=72) 5,3±0,2 9,9±0,3 14,7±0,1 18,8±0,2 18,9±0,1 19,1±0,3 19,2±0,3 19,3±0,1 Примітка: стовпчик Р - вірогідність різниці відносно норми. 5,4±0,3 6,1±0,3 9,2±0,2 11,8±0,1 13,6±0,2 15,1±0,3 17,2±0,3 18,7±0,2 (17,9±0,4)пг/мл Р