Спосіб моделювання цирозу печінки

Реферат: Спосіб моделювання цирозу печінки, полягає в створенні у тварин токсичного гепатиту. Попередньо тварин одноразово перегрівають протягом 20 хв. у повітряному термостаті зі штучною вентиляцією при температурі повітря 45 °C. А потім протягом 30 діб 2 рази на тиждень підшкірно вводять хлороформ на оливковій олії з розрахунку 0,3 мл на 100 г маси тварини. UA 72180 U (12) UA 72180 U UA 72180 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медичної технології, зокрема - до експериментальної медицини і може бути використана при науково-дослідній роботі при вивченні морфофункціональних механізмів адаптації органів і систем організму до печінкової недостатності, а також при наукових дослідженнях дії фармакологічних препаратів для профілактики та лікування токсичних уражень печінки, цирозу печінки (ЦП) і портальної гіпертензії. Відомі способи моделювання ЦП включають формування токсичного гепатиту шляхом введення гепатотоксичних речовин (хлороформ, чотирихлористий вуглець, алкоголь, солі важких металів та ін.) (Верин В.К. Изменения неспецифических эстераз печени крыс при отравлении оганизма четыреххлористым углеродом / В.К. Верин // ААГЭ. - 1971. - № 12. - С. 5760; Состояние клеточной поверхности гепатоцитов при действии четыреххлористого углерода / [В.Ф. Ушаков, Л.А. Палиенок, К.И. Лившиц и др.] // ААГЭ. - 1990. - № 12. - С. 44-48; Садовникова В.В. Морфологические изменения в печени крыс при токсическом медикаментозном гепатите и стимуляции репаративных процессов / В.В. Садовникова, И.В. Садовникова, Н.Л. Иванова // Морфология. - 2001. - Т. 120, № 6. - С. 63-65; Морфологические особенности реакции печени крыс на хроническое воздействие ксенобиотиками / [X. Я. Каримов, Ф.Ш. Иноятов, Ш.Н. Дадажанов, Р.И. Исраилов] // Морфология. - 2002. - Т. 122, № 5. - С. 25-27; Андреева И.В. Морфофункциональные изменения в печени при интоксикации хлороформом / И.В. Андреева, Т.Н. Абросимова, А.А. Виноградов // Вісник Луганського національного педагогічного університету імені Тараса Шевченка (біологічні науки). - 2008. - № 14 (153). - С. 12-17). Недоліками відомих способів є: 1) тривала експозиція моделювання ЦП (до 60 і більше діб); 2) не завжди відтворення токсичного гепатиту приводить до розвитку ЦП; 3) частина тварин (до 20-30 %) гине у процесі моделювання токсичного гепатиту. Прототипом запропонованого способу моделювання ЦП є спосіб, запропонований С.А. Шалімовим з співавт. (Шалимов С.А. Руководство по экспериментальной хирургии / С.А. Шалимов, А.П. Радзиховский, Л.В. Кейсевич. – М.: Медицина, 1989. - 272 с), який заснований на введенні тваринам у шлунок хлороформу. Спосіб-прототип має недоліки, що є характерним для відомих способів, які засновані на введені тваринам хлороформу. Хлороформ може викликати пошкодження печінки шляхом прямої взаємодії зі структурами кліток. У основі цієї дії лежить утворення хімічних зв'язків між отрутою (речовиною) або продуктами її метаболізму з макромолекулами, що супроводжується порушенням їх фізіологічних властивостей. Великі пошкодження виявляються в печінці. Вони діляться на цитотоксичні пошкодження (стеатоз, некроз) і холестатичні (жовтяниця) (Степанов Ю.М. Лекарственные поражения печени: патогенез, классификация, диагностика, лечение / Ю.М. Степанов, А.Ю. Филиппова, И.Н. Кононов. – М.: Медицина, 1999. - 22 с; Бюрроуз Э. Портальная гипертензия / Э. Бюрроуз // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2001. - Т. 11, № 4. - С. 74-75; Садовникова В.В. Морфологические изменения в печени крыс при токсическом медикаментозном гепатите и стимуляции репаративных процессов / В.В. Садовникова, И.В. Садовникова, Н.Л. Иванова // Морфология. - 2001. - Т. 120, № 6. - С. 63-65). Метаболізм хлороформу в організмі супроводжується утворенням високореактивних проміжних продуктів, які ініціюють пошкодження печінки (Кулинский В.И. Обезвреживание ксенобиотиков / В.И. Кулинский. - Москва, 1999.-56 с; Морфологические особенности реакции печени крыс на хроническое воздействие ксенобиотиками / [X.Я. Каримов, Ф.Ш. Иноятов, Ш.Н. Дадажанов, Р.И. Исраилов] / Морфология.-2002. - Т. 122, № 5. - С. 25-27.). Тому в основу способу, що пропонується, поставлено задачу усунення недоліків прототипу шляхом моделювання токсичного гепатиту. Поставлена задача вирішується тим, що попередньо тварин одноразово протягом 20 хв. 3 перегрівали у повітряному термостаті об'ємом до 0,06 м (0,5 м, 0,4 і 0,3 м) зі штучною вентиляцією при температурі повітря 45 °C. Після закінчення перегрівання тваринам протягом 30 діб 2 рази на тиждень підшкірно вводили 80 % розчин хлороформу на оливковій олії з розрахунку 0,3 мл на 100 г маси тварини. Запропонований спосіб моделювання ЦП заснований на тому, що при одноразовому перегріванні в печінці відбуваються видоспецифічні зміни морфометричних показників судинного русла печінкового ацінуса зі збільшенням кількості стромальних кліток і зміною їх топографії в межах ацинуса. Відбуваються зміни показників клітинного циклу і стану фракцій хроматину гепатоцитів. Ультраструктурні зміни ядра і цитоплазми гепатоцитів носять мозаїчний характер. Активуються біохімічні маркери загибелі гепатоцитів - оксидоредуктази мітохондрій і цитозолю. Зміст іонів [Са2+]і, [K+]і і [Na+]і підвищується (Соседко Ю.И. Судебно-медицинская экспертиза при перегревании организма / Ю.И. Соседко. – М.: ООО Издательство 1 UA 72180 U 5 10 15 20 25 30 35 "Юрлитинформ", 2002.-152 с; Антонова Е.И. Апоптоз-некрозное соотношение в клеточных культурах гепатоцитов позвоночных животных после тепловой нагрузки / Е.И. Антонова, О.3. Мкртчан, В.Е. Высокогорский // Сборник научных трудов VII Всероссийская конференция по патологии клетки. - 2004. - С. 11-12; Антонова Е.И. Стромально-паренхимные и ультрамикроскопические проявления первичной компенсаторно-приспособительной реакции печени млекопитающих после гипертермии // Фундаментальные исследования. - 2008. - № 1 С. 138-140.). Перегрівання супроводжується втратою печінкою води (Фаращук Н.Ф. Вода - структурная основа адаптации / Н.Ф. Фаращук, Ю.А. Рахманин. - Москва-Смоленск, 2004.-172 с). Приклад використання способу моделювання цирозу печінки Нами проведені дослідження на 30 щурах-самцях лінії Wistar. 10 щурів склали контрольну групу. 20 щурів дослідної групи одноразово перегрівали протягом 20 хв. у повітряному термостаті об'ємом до 0,06 м зі штучною вентиляцією при температурі повітря 45 °C. Потім тваринам протягом 30 діб 2 рази на тиждень підшкірно вводили хлороформ на оливковій олії з розрахунку 0,3 мл на 100 г маси. У тварин після 20 хв. перегрівання кількість загальної води в печінці знижувалася в 1,05±0,03 разу (на 5,47 %) відносно до контрольних даних. Зниження рівня загальної води у поєднанні з морфофункціональними змінами в печінці (підвищення активності амінотрансфераз - АЛТ і ACT, а також гаммаглютамілтрансферази) при введенні хлороформу створювали умови для швидкого розвитку токсичного гепатиту з переходом у ЦП (фіг. 1). Показник венозного тиску (ВТ) у ворітній вені печінки контрольних тварин коливався від 0,447 до 0,598 кПа (0,520±0,048 кПа). ВТ у ворітній вені печінки тварин після моделювання ЦП шляхом одноразового перегрівання в поєднанні з 30-добовою інтоксикацією хлороформом підвищувалося до 2,012±0,064 кПа. Аналіз отриманих даних говорить на користь розвитку портальної гіпертензії. Запропонований спосіб простий, об'єктивний і перспективний, наприклад у плані наукових досліджень дії фармакологічних препаратів для профілактики та лікування токсичних уражень печінки, ЦП і портальної гіпертензії. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб моделювання цирозу печінки, що полягає в створенні у тварин токсичного гепатиту, який відрізняється тим, що попередньо тварин одноразово перегрівають протягом 20 хв. у повітряному термостаті зі штучною вентиляцією при температурі повітря 45 °C, а потім протягом 30 діб 2 рази на тиждень підшкірно вводять хлороформ на оливковій олії з розрахунку 0,3 мл на 100 г маси тварини. 2 UA 72180 U Комп’ютерна верстка В. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3