2-([(3-бензилксантин-8-іл)-метил]тіо)-n’-[(1z)-(5-хлоро-3-етил-1-метил-1н-піразол-4-іл)метиліліден]-ацетогідразиду, який виявляє антимікробну дію

Реферат: 2-([(3-бензилксантин-8-іл)-метил]тіо)-N'-[(1Z)-(5-хлоро-3-етил-1-метил-1Н-піразол-4іл)метиліліден]-ацетогідразид: O O O NH H N HN N S Cl N N N N , який виявляє протимікробну дію. UA 84227 U (12) UA 84227 U UA 84227 U 5 10 15 20 Корисна модель належить до біологічно активних сполук і може бути використана у фармації та медицині. Антимікробна терапія є вагомою ланкою сучасної медичної практики. Багато різноманітних схем лікування використовують широкий арсенал антибактеріальних лікарських засобів (Слепцов В.П., Бондаренко И.В. Антимикробные препараты в клинической медицине. Симферополь, 2002. 224 с.). У зв'язку з виникненням нових резистентних форм збудників інфекційного процесу суттєвою проблемою сучасної медицини є подальше вдосконалення терапії інфекційних захворювань (Jacobs MR. The Alexander Project 1998-2000: susceptibility of pathogens isolated from community acquired respiratory tract infection to commonly used antimicrobial agents. J. of Antimicrobial Chemother. 2003; 52: 229-246). За останні роки у медичну практику було впроваджено певна кількість нових антимікробних засобів, однак більшість з них є не достатньо ефективними та викликають не бажану побічну дію (Козлов Р.С. Современные аспекты рациональной антибиотикотерапии. Здоров'я України 2007; 11-12:46-48). У зв'язку з вищезазначеним актуальною проблемою сучасної медицини є створення нових високоефективних та менш токсичних засобів антибактеріальної терапії. Найближчим аналогом за структурою сполуки, що заявляється, може служити 2-[1,3диметилксантин-8-іл)тіо]-N-метил-N-фенілацетамід (Synthesis, anti-bronchoconstrictive and antibacterial activities of some new 8-substituted-1, 3-dimethylxahthine derivatives / Walid A. Elgaher, Alaa M. Hayallah, Ola LA. Salem [et al.]// Bull. Pharm. Sci., Assiut University-2009, №1 (32) pp. 153187). O CH3 O H N N S N O N N CH3 25 30 35 Сполука, що заявляється, відрізняється від найближчого аналога відсутністю замісника в 1 положенні ксантинового біоциклу, замісниками у 3 та 8 положеннях. У найближчому аналозі вивчалась антибактеріальна активність. На відміну від ампіциліну (еталон порівняння за антимікробною активністю згідно з Наказом МОЗ України №167 від 05.04.2007 "Про затвердження методичних вказівок "Визначення чутливості мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів»») сполука, що заявляється, виявляє значно сильнішу антимікробну дію на штам патогенної мікрофлори Escherichia coli АТСС 25922. В основу корисної моделі поставлена задача створення нових менш токсичних препаратів антимікробної дії, які після поглиблених фармакологічних досліджень можуть бути використані в медичній практиці. Поставлена задача вирішується синтезом 2-([(3-бензилксантин-8-іл)-метил]тіо)-N'-[(1Z)-(5хлоро-3-етил-1-метил-1Н-піразол-4-іл)метиліліден]-ацетогідразиду: O O O NH H N HN N S Cl N N N N Одержують сполуку, що заявляється, стадійним синтезом, який складається з наступних етапів (схема 1). Схема 1 1 UA 84227 U O HN O C3H7OH OH N O O H N N H N HN O NH2-NH2 O H2SO4 S O N N 1 C3H7OH S 2 O O Cl O H N HN O O NH2 NH N N S O N N CH3COOH O 10 15 20 25 30 35 40 S Cl N N N N 4 3 5 H N HN N NH Приклад 1. Етап 1. Синтез 3-бензилксантиніл-8-метилтіоацетатної кислоти (1) був проведений за методикою (Синтез та фізико-хімічні властивості 3-феніл(бензил)ксантиніл-8метилтіоацетатних кислот та їх водорозчинних солей / К. В. Александрова, СВ. Левіч, О. С Шкода [та ін.]// Актуальні питання фармацевтичної і медичної науки та практики.-2011. - № 24 (2).-С 45-48.) Етап 2. Синтез н-пропіловиого естеру 3-бензилксантиніл-8-метилтіоацетатної кислоти (2) До 0,01 моль сполуки 1 додають 100 мл пропілового спирту та 5 мл концентрованої сульфатної кислоти. Розчин кип'ятять протягом 18 год., охолоджують та виливають в 300 мл води. Осад, що утворився відфільтровують, промивають водою та сушать при 80-85 °C. Для аналізу отриману речовину перекристалізовують із пропілового спирту: Вихід 82 %. Т.пл. 211212 °C. C18H20N4O4S. Знайдено, %: С, 55,63; Н, 5,17; N, 14,41; S, 8,28. Розраховано, С, 55,66; Н, 7 5,19; N, 14,42; S, 8,26. ПМР спектр (δ-шкала, м.ч., розчинник ДМСО-d6): 13,48 (1Н, с, N H), 11,17 1 3 8 (1Н, с, N Н), 7,35-7,26 (5Н, м, С6Н5), 5,09 (2Н, с, N -CH2), 3,99 (2Н, т, О-СН2), 3,85 (2Н, с, С -СН2), 3,48 (2Н, с, S-CH2), 1,58 (2Н, м, О-С-СН2), 0,88 (3Н, т, СН3). Етап 3. Синтез гідразиду 3-бензилксантиніл-8-метилтіооцтової кислоти (3) Суспензію 0,01 моль сполуки в 30 мл н-пропанолу нагрівають 10 хв, додають 5 мл гідразиногідрату. Утворюється істинний розчин, який кип'ятять протягом 30 хв. Після охолодження в осад випадають кристали гідразиду (3). Осад, що утворився відфільтровують, промивають водою, сушать при 80-85 °C та перекристалізовують із н-пропанолу. Вихід 90 %. Т.пл. 264-265 °C. С15H16N6O3S. Знайдено, %: С, 49,96; Н, 4,42; N, 23,34; S, 8,95. Розраховано, %: С, 49,99; Н, 4,47; N, 23,32; S, 8,90. ПМР спектр (δ-шкала, м.ч., розчинник 7 1 ДМСО-d6): 13,48 (1Н, с, N H), 11,15 (1Н, с, N H), 9.16(1Н, с, NH), 7,35-7.25 (5Н, м, С6Н5), 5,11 (2Н, 3 8 с, N -CH2), 3,89 (2Н, с, С -СН2), 3,79 (2Н, с, NH2-N), 3,20 (2Н, с, S-CH2). Етап 3. Синтез 2-([(3-бензилксантин-8-іл)-метил]тіо)-N'-[(1Z)-(5-хлоро-3-етил-1-метил-1Нпіразол-4-іл)метиліліден]-ацетогідразиду (4). 0.01 моль сполуки 3 розчиняють при нагріванні в 70 мл водного діоксану (1:1). До істинного розчину додають 3 мл оцтової кислоти та 0,011 моль альдегіду та нагрівають при 70 °C до початку утворення осаду. Після охолодження осад, що утворився, відфільтровують, промивають водою та сушать при 80-85 °C. Для аналізу отриману речовину перекристалізовують із етанолу. Вихід 60 %. Т.пл. 204-205 °C. C22H23ClN8O3S. Знайдено, %: С, 51,29; Н, 4,52; N, 21,75; S, 6,21. Розраховано, %: С, 51,31; Н, 4,50; N, 21,76, S, 6,23. ПМР спектр (δ-шкала, м.ч., розчинник 7 ДМСО-d6): 13,48 (1Н, с, N H), 11,35 (1Н, с, NH), 11,16 (1Н, с, N'H), 7,84 (1Н, с, N=CH), 7,54-7,16 3 8 1 (9Н, м, С6Н5), 5,09 (2Н, с, N -CH2), 3,88 (2Н, с, С -СН2), 3,59 (2Н, с, S-CH2), 3,32 (3Н, с, N' -СН3) 3 2,84 (2Н, м, С' -СН2), 1,14 (3Н, к, С-СН3). Приклад 2. Етап 1. Чутливість патогенного штаму до сполуки, що заявляється, виконували відповідно до методичних рекомендацій "Вивчення специфічної активності протимікробних лікарських засобів" (Метод, реком. [Текст] / Ю.Л. Волянський, I.C. Гриценко, В.П. Широбоков та ін.; ДФЦ МОЗ України.-К, 2004.-38 с.). 2 UA 84227 U 5 10 Під час досліджень готували ряд двократних серійних розведень препарату у бульйоні Мюлер-Хінтона в об'ємі 1 мл, після чого додавали у кожну пробірку по 0,1 мл. мікробної зависі 6 (10 м.к./мл). МІК визначали за відсутністю видимого росту в пробірці з мінімальною концентрацією препарату, мінімальну бактерицидну концентрацію (МБ ЦК) - за відсутністю росту на агарі після висіву з прозорих пробірок. Як розчинник сполук в дослідженнях використовували диметилсульфоксид, вихідні розчини доводили до концентрації 1 мг/мл. Як стандартний тестштам було взято Escherichia coli АТСС 25922. Тест-штам отримано з баклабораторії ДУ "Запорізький ОЛЦДСЕСУ" (Запорізький обласний лабораторний Центр держсанепідслужби України"). Як еталон порівняння було використано препарат "Ампіцилін" (еталон порівняння за антимікробною активністю згідно №167 МОЗ України від 05.04.2007 "Про затвердження методичних вказівок "Визначення чутливості мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів") (табл. 1). Таблиця 1 Протимікробна активність досліджуваної сполуки in vitro Назва штаму патогенної мікрофлори Сполука Ампіцилін Сполука, що заявляється 15 20 Е. coli АТСС 25922 Е. coli АТСС 25922 Мінімальна інгібуюча концентрація in vitro мг/л 2 1,56 Мінімальна бактерицидна концентрація in vitro мг/л 2 1,56 Дослідження протимікробної активності шляхом двократних серійних розведень препарату у бульйоні Мюллер-Хінтона показало, що синтезована сполука (4) виявляє бактеріостатичну у дію у мінімальній інгібуючій концентрації, до штаму патогенної мікрофлори Escherichia coli 1,56 мг/л. В той час як "Ампіцилін" 2 мг/л. Таким чином, наведені вище дані свідчать про те, що після поглиблених фармакологічних досліджень сполука, що заявляється, має більш високу активність у порівнянні з еталоном та може бути використана як антимікробний засіб в медичній практиці. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 25 2-([(3-бензилксантин-8-іл)-метил]тіо)-N'-[(1Z)-(5-хлоро-3-етил-1-метил-1Н-піразол-4іл)метиліліден]-ацетогідразид: O O O NH H N HN N S Cl N N N N , який виявляє протимікробну дію. Комп’ютерна верстка С. Чулій Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3