N-стеароїлетаноламін як лікарський засіб в супроводжуючій протипухлинній терапії

Застосування N-стеароїлетаноламіну як лікарського засобу, що має протипухлинні властивості, не змінює цитостатичну дію цисплатину, проявляє антитоксичну дію на організм, в супроводжуючій протипухлинній терапії перорально у вигляді твердих, рідких або м'яких лікарських форм для внутрішнього застосування у дозах 50мг/кг та 250мг/кг маси тіла. Винахід відноситься до біології та медицини. N-стеароїлетаноламін (NSE) може бути застосований як лікарський засіб в супроводжуючій протипухлинній терапії для гальмування росту неоплазми і для корекції токсичних проявів протипухлинної терапії цитостатичними препаратами, а також для використання в схемах променевої терапії для людей і тварин. Хіміотерапія злоякісних пухлин є важливим та необхідним засобом у схемі лікування онкологічних хвори х. Цей метод застосовується як самостійно, так і в комбінації з хірургічним втручанням та променевою терапією. Добре відомо, що лікування онкологічних захворювань за допомогою радіаційного випромінювання призводить до порушень процесів розвитку не тільки злоякісних клітин, а й негативно впливає на тканини і органи організму в цілому. До способу реабілітації організму після променевої терапії належать схеми застосування різних терапевтичних препаратів, що сприяють нормалізації процесів функціонування організму хворого. В онкологічній практиці одним із найбільш ефективних цитостатичних препаратів є Цисплатин (Cisplatin) [1], комплексна сполука, що має в своєму складі платину. Цисплатин викликає зростання продукції реактивних форм кисню, що активують ядерний фактор Капа-β (NF-kappa β), що призводить до зростання експресії прозапальних медіаторів та інтенсифікації цитотоксичних ефектів Цисплатину. Цисплатин використовується для лікування багатьох злоякісних пухлин, здатний зв'язуватись з ДНК та інгібувати її реплікацію. Порушення функціонування нирок є основним фактором токсичності цього препарату. Тому в період лікування потрібно постійно спостерігати за функціонуванням нирок. Цисплатин застосовують в монотерапії або в комбінованій терапії з такими цитотоксичними препаратами: вінбластин, блеоміцин, доксорубіцин, гексаметилмеламін, фторурацил, метотрексат, етопозид тощо, які належать до групи протипухлинних антибіотиків. Недоліком такої схеми лікування є те, що вищезазначені препарати можуть спричиняти порушення функцій (19) UA (11) 85522 (13) C2 (21) a200708176 (22) 18.07.2007 (24) 26.01.2009 (46) 26.01.2009, Бюл.№ 2, 2009 р. (72) ГУЛА НАДІЯ МАКСИ МІВН А, UA, ХМЕЛЬ ТЕТЯНА ОЛЕКСІЇВН А, U A, КЛІМАШЕВСЬКИЙ ВІТАЛІЙ МАР'ЯНОВИЧ, UA, БЄРДИШЕВ АНДРІЙ ГЕННАДІЙОВИЧ, U A, ГУДЗЬ ЄГОР АН АТОЛІЙОВИЧ, UA (73) ІНСТИТУТ БІОХІМІЇ ІМ. О.В. ПАЛЛАДІН А НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ Н АУК УКРАЇНИ, U A (56) Gulaia N.M, Smirnov I.M, Shmal'ko I.P, Mel'nik A.A, Mel'nik S.N.: ”Effect of N-palmitoyl- and Nstearoylethanolamines on lipid peroxidation in mouse 3 85522 печінки, нирок, серцево-судинної системи та підвищува ти токсичний вплив препаратів платини. Гідратація і використання Маннітола (2-6 годин внутрішньосудинне крапельне введення) підвищує діурез, що сприяє виводу води і гальмує реабсорбцію іонів натрію, хлоридів та прискорює виведення токсичних речовин. В процесі лікування Маннітолом необхідно контролювати ступінь гідратації та рівень натрію і калію в плазмі крові. До побічних ефектів дії цього препарату відносять гіпогідратацію, головний біль, набряк легенів, нудоту, блювання, діарею, тремор [1]. Враховуючи вищезазначене, необхідно підкреслити важливість застосування в лікуванні онкозахворювань супровідної терапії, що передбачає використання засобів, які гальмують пухлинний ріст та сприяють поліпшенню стану організму під дією токсичних речовин. Широкий спектр біологічних ефектів Nацилетаноламінів - природних біологічно активних ліпідних сполук, став основою до розробки нових лікувальних засобів, в яких ендоканабіноїди можуть бути використані як терапевтичні агенти за багатьох патологічних станів. Відомо спосіб застосування сполук класу канабіноїдів, як антиоксидантів та нейропротекторів [2]. Відомий канабіноїд, Δ-9-тетрагідроканабінол основна діюча речовина маріхуани, та основний ендоканабіноїд - N-арахідоноїлетаноламін (2-(Nейкоза-5,8,11,14-тетраєноїл)-аміноетанол), здатні викликати апоптоз клітин низки злоякісних пухлин (гліоми, раку шийки матки, раку простати, а також раків іншого походження) і є добрими об'єктами для дослідження їх протипухлинної дії з метою використання в клініці [3, 4, 5, 6, 7, 8]. Однак Nарахідоноїлетаноламін надзвичайно нестабільний, бо є похідною ненасиченої арахідонової кислоти з чотирма подвійними зв'язками і швидко окислюється як in vivo, так і in vitro. Крім того, обидві сполуки належать до психоактивних речовин, до яких легко виникає звикання. Намагаючись обійти ці складнощі, різні автори синтезують стійкі похідні ендоканабіноїдів, що не проявляють психоактивної дії [9]. Відомо, що ендоканабіноїдподібні речовини, що не мають психотропної дії, гальмують клітинний ріст in vitro [10]. До таких сполук належить NSE, гідроксиамід стеаринової кислоти (з довжиною насиченого вуглеводневого ланцюга С18). NSE не зв'язується з канабіноїдними рецепторами, але проявляє канабіміметичні властивості. NSE запропонований до застосування як лікарський засіб для фармакотерапії атеросклерозу, ішемічної хвороби серця, стенокардії спокою та напруги, гострого коронарного синдрому, при функціональних та органічних ураженнях печінки та консервації донорських органів, опійній наркоманії, інтоксикаціях ЦНС, для лікування станів, що супроводжуються ішемією та гіпоксією органів та тканин, реперфузійним синдромом, оксидативним стресом, інтоксикаціями, наркотичною залежністю, запобігання розвитку незворотних стр уктурних змін мембран, а також для істотного підвищення резистентності органів та тканин до дії ушкоджуючи чинників у людини та тварин [11]. 4 Відомо, що NSE гальмує ріст та метастазування карциноми Льюїс у мишей за умов його введення на різних стадіях розвитку п ухлини [12], порушує антиоксидантний захист клітин карциноми Льюїс. В той же час в умовно нормальній легеневій тканині пухлиноносіїв NSE гальмує процеси перекисного окиснення ліпідів, сприяючи нормалізації в ній окисних процесів. Встановлено здатність NSE. коригувати ліпідний склад умовно нормальної тканини легенів та змінювати ліпідну організацію злоякісних клітин за умов розвитку карциноми Льюїс у мишей [13]. Відомо, що для поліпшення стану організму за умов його інтоксикації широко використовується препарат Ербісол - комплекс природних органічних сполук негормонального походження, отриманих із тваринних ембріональних тканин, що застосовується внутрішньовенно. Як препарат супроводу при хіміотерапії Ербісол підвищує е фективність лікування за двома напрямками: як гепатопротектор активує функції печінки, сприяючи прискоренню видалення із організму токсичних агентів [14], та як імунопротектор відновлює протипухлинний імунний статус [15]. Проте в деяких випадках в перші 2-5 діб лікування Ербісол може викликати загострення хронічних запальних процесів. Крім того, до недоліків препарату Ербісол слід віднести труднощі стандартизації препаратів із тваринних тканин, коштовність виробництва і висока споживча ціна препарату. Задачею винаходу є пошук засобу, фізично та хімічно стійкого у зовнішньому та внутрішньому середовищі, здатного гальмувати розвиток неоплазми та коригувати порушення гомеостазу клітин і тканин пухлиноносія, зокрема стани, що супроводжуються накопиченням токсичних речовин в тканинах за умов введення цитотоксичних протипухлинних препаратів. Поставлена задача вирішується шляхом застосування NSE в супроводжуючій протипухлинній терапії з використанням Цисплатину. NSE може бути використаний перорально у вигляді твердих, рідких та м'яких лікарських форм для внутрішнього вживання. Вплив NSE на трансформовані клітини вивчали в дослідах in vitro на лейкемічних клітинах мишей L1210 за умов інкубації клітин з NSE в дозах 10-7, 10-6 і 10-5моль. Антипухлинна дія NSE спостерігається також за умов його введення перорально мишам з карциномою Льюїс. Введення препарату починали з 4 дня після перещеплення пухлини до кінця експерименту двічі на день по 50мг/кг та по 250мг/кг маси тварини, що складає, відповідно, 1мг та 5мг на мишу вагою 20г. Приклад 1 Реалізація протипухлинного ефекту NSE. Антипроліферативний ефект NSE спостерігається на лейкемічних клітинах мишей лінії L1210. На Фіг.1 показано, що за умов введення NSE у дозах 10-7, 10-6 і 10-5моль спостерігається дозозалежне гальмування проліферації клітин. Причому максимальний ефект виявляється через 24год після введення препарату до клітинного середовища. 5 85522 Дані, представлені на Фіг.2, демонструють, що антипроліферативна дія NSE пов'язана з підвищенням кількості мертвих клітин лінії L1210. Виживання клітин під дією NSE у дозах 10-7, 10-6 і 105 моль вже через 24 години дозозалежно знижується порівняно з контрольними клітинами. Таким чином, за умов введення NSE спостерігається зменшення проліферації досліджуваних 6 клітин лінії L1210 (Фіг.1), що може реалізуватися за рахунок цитотоксичного ефекту NSE на малігнізовані клітини (Фіг.2). В таблиці 1 наведені дані щодо гальмування розвитку пухлини у тварин-пухлиноносіїв під дією NSE. Таблиця 1 Діаметр пухлини та об'єм метастатичного ураження легенів у мишей з карциномою Льюїс за умов перорального введення NSE пухлиноносіям протягом 30 днів, порівняно з тваринами групи "Контроль", що не отримували препарат (М±m; n=5-6) Параметр Діаметр пухлини, мм Об’єм метастатичного ураження легенів, мм 3 "Контроль" 30,6±0,5 "NSE 1мг" 22,4±0,6* "NSE 5мг" 21,3±1,1* 38,3±3,9 31,9±6,1 25,6±3,1* Примітки: * - дані вірогідні (р