1-трет-бутокси-3-(2,2,6,6-тетраметил-4-гідроксипіперидино)-2-пропанол

Реферат: 1-Трет-бутокси-3-(2,2,6,6-тетраметил-4-гідроксипіперидино)-2-пропанол формули OH O N OH . UA 91886 U (12) UA 91886 U UA 91886 U Корисна модель належить до органічної хімії, конкретно до нової речовини 1-третбутокси-3(2,2,6,6-тетраметил-4-гідроксипіперидино)-2-пропанолу формули: OH O 5 10 15 N OH . (III) Запропонована нова речовина, її властивість, структура та спосіб одержання в літературі не описані. На теперішній час увага медицини привернута до проблеми гепатиту С (ВГС-інфекція). Це пов'язано із значним розповсюдженням інфекції та вкрай несприятливими наслідками, до яких може призвести це захворювання. Препарати альфа-інтерферону (ІФН) (Реаферон, Роферон А та ін.) залишаються основними для лікування ВГС-інфекцій, але достовірний противірусний ефект (відсутність РНК ВГС в сироватці крові протягом не менш 6 місяців після лікування) спостерігається лише у 8-12 % хворих, що лікувалися альфа-ІФН [1, 2, 3]. Тривале застосування високих доз ІФН викликає резистентність до деяких форм рекомбінованого ІФН, а також негативні побічні ефекти на організм. Крім того, кількість високоефективних препаратів для лікування ВГС-інфекції досить обмежена. Найближчим аналогом за фармакологічною дією вибрано препарат рибавирин [4]. Задачею корисної моделі є пошук нових речовин, які мають високу активність проти ВГСінфекції з метою створення нового засобу зазначеної дії. Рішення поставленої задачі досягається синтезом 1-трет-бутокси-3-(2,2,6.6-тетраметил-4гідроксипіперидино)-2-пропанолу. Зазначену сполуку одержують за наступною схемою: OH O + HN O OH N OH O 20 25 30 35 40 45 (I) (III) (II) . 1-Трет-бутокси-2,3-епоксипропан (І) кип'ятять в ізопропанолі з еквівалентною кількістю 2,2,6,6-тетраметил-4-гідроксипіперидину (II) з одержанням кінцевої сполуки (III). Винахід ілюструється наступними прикладами: Приклад 1. Синтез 1-трет-бутокси-3-(2,2,6,6-тетраметил-4-гідроксипіперидино)-2-пропанолу (III). Суміш 1,30 г (0,01 моль) 1-трет-бутокси-2,3-епоксипропану та 1,57 г (0,01 моль) 2,2,6,6тетраметил-4-гідрокси піперидину в ізопропанолі кип’ятять 10 годин. Реакційну суміш випаровують, залишок обробляють діетиловим етером і залишають на 10 годин при температурі 5-8 °C. Осад фільтрують, промивають сухим діетиловим етером, висушують. Вихід: 1,92 г (67 %). Т. топл. 98-101 °C. Обчислено, %: С - 66,86, Н - 11,56, N - 4,87. Знайдено, %: С - 66,83, Н - 11,54, N - 4,83. ПМР спектр (ДМСО-d6, м.ч., ТМС): 1,0-1,1 (12Н, с, 4хСН3), 1,12 (9Н, с, 3хСН3), 1,21, 1,67 (4Н, м, (СН2)2), 2,55, 2,76 (2Н, дд, CH2N), 3,78 (2Н, м. 2хСН), 3,95 (2Н, м, ОСН2), 4,41 (1Н, д, ОН), 4,55 (1H, с, ОН). Приклад 2. Антивірусна активність 1-трет-бутокси-3-(2,2,6,6-тетраметил-4-гідрокси піперидино)-2-пропанолу (III) на експериментальній моделі вірусу гепатиту С Дослідження антивірусної активності сполуки (III) проведені на експериментальній продукуючій моделі вірусу гепатиту С, отриманого методом трансфекції компліментарної ДНК вірусу гепатиту С [5]. Як носій ВГС інфекції використовували нерозведену плазму крові хворих на гепатит С. Вихідне вірусне навантаження в матеріалах визначали методом зворотної транскрипції та полімеразної ланцюгової реакції (ЗТ-ПЛР). Ці ж матеріали використовували як джерела отримання кДНК ВГС (комплементарна ДНК вірусу гепатиту С) методом зворотної транскрипції (ЗТ). Для виділення РНК з проб сироватки хворих на гепатит С використовували набір РИБО-сорб (ФГУН ЦНІІЕ, Москва, Росія). Виділення проводили з проб об'ємом в 100 мкл, додаючи лізуючий 1 UA 91886 U 5 10 розчин і сорбент згідно з інструкцією фірми-виробника. Реакцію ЗТ проводили за допомогою комплекту реагентів "Реверта-L" (ФГУН ЦНІІЕ, Москва, Росія) з РНК, виділеної на попередньому етапі. Трансфекцію культур суспензійних клітин МТ-4 або Jurkat проводили кальцій-фосфатним методом. Для цього до розчину, що містить кДНК (інкубаційна суміш ЗТ реакції без додаткового очищення), додавали концентрат розчину HEPES з фосфатом до досягнення кінцевих концентрацій: 25 ммоль/л HEPES, рН 7,5, 140 ммоль/л NaCl, 0,75 ммоль/л Na2HPO4. До отриманої суміші (230 мкл) повільно додавали 15 мкл розчину хлориду кальцію з концентрацією 2 ммоль/л і інкубували суміш 30 хв. при кімнатній температурі до утворення преципітату. Утворену суспензію по краплях додавали до культури клітин. Трансфековані культури інкубували при температурі 37 °C. Сполуку III додавали до трансфекованої культури на 1 та 3 добу від початку експерименту. Як стандартний препарат було використано рибавирин (табл. 1). Таблиця 1 Антивірусна активність 1-трет-бутокси-3-(2,2,6,6-тетраметил-4-гідроксипіперидино)-2-пропанола та препарата порівняння рибавирину. Термін введення (доба) Концентрація в мкг/мл Рибавирин 1 3 1 3 1 3 1 ВГС 1 25 25 20 20 1000 100 10 Препарати, вірус III ВГС Вірусне навантаження, г/екв 1092 1346 287 1971 1430 0 1309 1856 3575 Процент інгібіції, % 44,6 100 32 80 100 64 49 15 20 25 30 В результаті проведених досліджень було показано, що сполука III зменшує вірусне навантаження вірусу гепатиту С при одноразовому введені на 44,6 % та 32 %, а при дворазовому введені речовини III в концентрації 25 мкг/мл та 20 мкг/мл вірусне навантаження повністю не визначається при концентрації 25 мкг/мл та зменшується на 80 % при концентрації 20 мкг/мл. Запропонований механізм дії сполуки III полягає в блокуванні протонного каналу та порушенні функціонування мембранного білка [6]. Таким чином, сполука III має значно вищу антивірусну активність в порівнянні з тест препаратом рибавирином (таблиця 1). Джерела інформації: 1. Lindsay K.L. Therapy of Hepatitis С (overview) // Hepatology - 1999. - Vol. 26 - p. 71-72. 2. Ершов Ф.И. Антивирусные препараты. – M., 1998. - 240 с. 3. Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии. - М., 1996. - 430 с. 4. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 2000. - Т. 2. - С. 333. 5. Порва Ю.И., Рибалко С.Л., Дядюн С.Т. и др. Культивирование вируса гепатита С с использованием метода трансфекции. Лабораторная диагностика. - 2010. - 1 (51). - С. 20-23. 6. Pinto L., Lamb R. J. Biol.Chem. - 2006. - V.281. - p. 8997-9000. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 35 1-Трет-бутокси-3-(2,2,6,6-тетраметил-4-гідроксипіперидино)-2-пропанол формули OH O N OH . 2 UA 91886 U Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3