Застосування 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2н-пірано[2,3-c]піридин-3-n-(3-фторфеніл)карбоксаміду як засобу з антикандидозною активністю

Реферат: Застосування 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2H-пірано[2,3-с]піридин-3-N-(3фторфеніл)карбоксаміду як засобу з антикандидозною активністю. UA 98337 C2 (12) UA 98337 C2 UA 98337 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Винахід стосується нового застосування відомої речовини, яка належить до пірано[2,3с]піридинів, зокрема є похідним 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2H-пірано[2,3-с]піридин-3-N-(3фторфеніл)карбоксаміду, синтез та властивості якого розкриті в публікації 2005 р. [Construction of the combinatorial libraries of 5-hydroxymethyl-2-imino-8-methyl-2H-pyrano[2,3-c]pyridin-3-Narylcarboxamides [Текст] / I. O. Zhuravel", S. M. Kovalenko, A. V. Ivashchenko, V. P. Chernykh // Журн. органіч. та фармац. хімії.-2005. - Т. 3, № 3. - С. 3-8] (схема 1, сполука 3 {1-33}). Результати проведеного авторами прогнозування біологічної активності свідчать про наявність фармакотерапевтичного потенціалу групи речовин, до яких належить сполука, що заявляється (схема 1, сполуки {1-35}), в сфері лікування гіперплазії простати та алергічних захворювань. Оцінка потенційної протимікробної активності цієї групи, що проводилась у відношенні герпесвірусів та М. tuberculosis, позитивних результатів не дала. Нами показано, що 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2H-пірано[2,3-с]піридин-3-N-(3фторфеніл)карбоксамід проявляє фунгіцидну та фунгістатичну активність по відношенню до широкого спектра дріжджоподібних грибів роду Candida, що робить його придатним для застосування як діючої речовини в фармацевтичних композиціях з антикандидозною дією. Для лікування кандидозної інфекції зазвичай використовують препарати, що належать до двох груп: полієни (для місцевого застосування - ністатин, леворин, натаміцин; для системного амфотерицин В) та азоли (для системного застосування - кетаконазол, флуконазол, інтраконазол; для місцевого - клотримазол, міконазол, біфоназол, еконазол, ізоконазол, оксиконазол). Ністатин має досить високий рівень активності в умовах in vitro та при місцевому застосуванні, однак, у зв'язку з низьким рівнем біодоступності, препарат використовується, головним чином, для місцевого застосування. Інший полієн - амфотерицин В (особливо його ліпосомальна форма АмбизомТ) - має покращені параметри біодоступності, при парентеральному введенні він розподіляється в багатьох органах та тканинах, накопичується в плевральній, перитонеальній, синовіальній рідинах. Препарат високо ефективний при важких системних мікозах, однак має високий рівень нефро- та гепатотоксичності, що зумовлює відповідні обмеження в його застосуванні. Азоли - найбільш чисельна та широко застосовувана на сьогодні група синтетичних антимікотиків. Вони проявляють переважно фунгістатичний ефект, обумовлений цитохром Р450-залежним пригніченням ланостерол-14α-деметилази - ключового ферменту біосинтезу основного структурного компонента клітинної стінки ергостеролу [Kelly S. L., Arnoldi A., Kelly D. E. Molecular genetic analysis of azole antifungal mode of action. // Biochem Soc Trans.-1993. - V. 21.- P. 1034-1038]. Найближчим аналогом рішення, що заявляється, слід вважати флуконазол (fluconazole) [Затверджено Наказом МОЗ України 24.12.03 № 604. Реєстраційне посвідчення: № UA/0276/01/01; № UA/0276/01/02; № UA/0276/01/03], активний по відношенню до більшості представників роду Candida (C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. lusitaniae та ін.). Однак, у зв'язку з широким застосуванням цього препарату, підвищується і розповсюдженість резистентних до нього форм [Sanglard D. Resistance of Candida species to antifungal agents: molecular mechanisms and clinical consequences. [Text] / Sanglard D., Odds F.C. // Lancet Infect Dis.-2002. - V.2(2). - P. 73-85. PMID: 11901654]. В основу винаходу поставлено задачу розширити спектр антикандидозних засобів шляхом проведення скринінгу похідних кумаринів та їх гетероаналогів на наявність у них цього виду біологічної активності для подальшого використання при розробці фармакотерапевтичних засобів. Поставлена задача вирішується застосуванням 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2Hпірано[2,3-с]піридин-3-N-(3-фторфеніл)карбоксаміду загальної формули OH O N H N O F NH CH3 50 . Молекулярна формула C17H14FN3O3; молекулярна маса 327,32; температура плавлення 213214 °C. Речовина є ліпофільною, не розчиняється у воді та гліцерині, має низьку розчинність у диметилсульфоксиді. При нагріванні розчиняється у диметилформаміді (ДМФА), поліпропіленгліколі, діоксані, ацетонітрилі. Можливість здійснення винаходу підтверджують дані про наявність антикандидозної активності в умовах in vitro по відношенню до 7 з 10 1 UA 98337 C2 5 досліджуваних культур Candida spp., у тому числі резистентних до флуконазолу клінічних штамів C. albicans, C. famata, C. kefyr. Дослідження антикандидозної активності проводили методом двократних серійних розведень в рідкому поживному середовищі (м'ясопептонний бульйон, рН 7,0) в межах діапазону концентрацій 6,25-100,0мкг/мл. Порогом чутливості штаму вважалась концентрація 25,0 мкг/мл. Мінімальні фунгістатичні (МФстК) та мінімальні фунгіцидні (МФцК) концентрації досліджуваної сполуки, використаного розчинника (ДМФА) та препарату порівняння (флуконазолу) наведено в таблиці. Таблиця 1 Ступінь чутливості представників роду Candida spp. До 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2H-пірано[2,3-с]піридин-3-N-(3-фторофеніл)карбоксаміду Штам м\о 1 C. albicans ATCC 885-653 C. pseudotropicalis ВКПГу 601/33 C. parapsilosis ВКПГу 488/10 C. albicans Скляр-31 C. albicans Скляр-20 C. kefyr 85/2 C. famata 40 б/з C. famata 18/2 C. catenulata Скляр-27 С. rugosa Скляр-2/1 C17H14FN3O3 МФстК МФцК 2 3 6,25 12,5 Флуконазол МФстК МФцК 4 5 12,5 50,0 ДМФА МФстК МФцК 6 7 >100 >100 12,5 25,0 25,0 100,0 >100 >100 25,0 25,0 6,25 12,5 12,5 25,0 50,0 50,0 50,0 50,0 12,5 50,0 12,5 50,0 100,0 100,0 25,0 50,0 50,0 50,0 100,0 50,0 50,0 50,0 100,0 >100,0 >100,0 >100 >100 100,0 100,0 100,0 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 10 15 Дослідження антибактерійної активності 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2H-пірано[2,3с]піридин-3-N-(3-фторофеніл)карбоксаміду у відношенні окремих представників грампозитивної та грамнегативної мікрофлори (табл. 2) свідчить про досить низький її рівень (50-250 мг/мл) та вузький спектр. Для фармацевтичного препарату, який застосовується на тлі дисбіотичних порушень, це позитивна якість, що обумовлює вибірковість впливу на мікробіоценоз. Таблиця 2 Чутливість представників грампозитивної та грамнегативної бактерійної мікрофлори до 5гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2H-пірано[2,3-с]піридин-3-N-(3-фторофеніл)карбоксаміду Штам мікроорганізмів 1 S. aureus ATCC 25923 Е. соlі АТСС 25922 P. aeruginosa ATCC 27853 P. vulgaris ATCC 4636 В. cereus ATCC 10702 Е. aerogenes 418 S. pneumoniae ATCC 49619 R. aquatilis ATCC 33989 R. aquatilis 3-88 20 МБстК, мкг/мл 2 50,0 50,0 100,0 100,0 100,0 50,0 50,0 25,0 50,0 МБцК, мкг/мл 3 100,0 100,0 >200,0 >200,0 200,0 100,0 100,0 50,0 100,0 Наведені експериментальні дані свідчать про наявність привабливого спектра біологічної активності та, відповідно, фармакотерапевтичного потенціалу 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил2H-пірано[2,3-с]піридин-3-N-(3-фторофеніл)карбоксаміду, що заявляться. 2 UA 98337 C2 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 5 Застосування фторфеніл)карбоксаміду OH O N H N O 5-гідроксиметил-2-іміно-8-метил-2H-пірано[2,3-с]піридин-3-N-(3 F NH CH3 як засобу з антикандидозною активністю. Комп’ютерна верстка Л. Купенко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3