2-аміно-4-арил(гетарил)-7-метил-3-ціано-4н,5н-пірано[4,3-b]піран-5-они та спосіб їх одержання

1. 2-Аміно-4-арил(гетарил)-7-метил-3-ціано4Н,5Н-пірано[4,3-b]піран-5-они формули: 2 3 75541 4 зу та ІЧ-та ПМР спектрами. натрієву сіль 2-[(2,6Далі приведена загальна методіка одерження дихлорфеніл)аміно]фенілуксусної кислоти. Вказасполук (А), що заявляються. на сполука має виражену анальгезуючу та протиПРИКЛАД 1. 2-Аміно-4-(3-піридил)-7-метил-3набрякову активність, за ступенем токсичності ціано-4Н,5Н-пірано-[4,3-Ь]піран-5-он(4а) відносяться до класу малотоксичних речовин і під До суміші 1.89 г (0.015 моль) 4-гідрокси-6назвою диклофенаку натрію широко застосовуєтьметил-2Н-шрону (1) послідовно додають 0.99 г ся в медичній практиці як нестероїдний протиза(0.015 моль) малононітрилу (2), та 1.60 г (0.015 пальний засіб. моль) піридин 3-альдегіду та 1.55 г (0.015 моль) Фізіологічна активність 2-аміно-4триєтиламіну в 20 мл етанолу. Суміш кип'ятять в арил(гетарил)-7-метил-3-ціано-4Н,5Н-пірано[4,3конічній колбі обь'емом 100 мл при перемішуванні b]піран-5-онів 4 (а-д), оцінивалась ступенем анальзі зворотним холодильником протягом 3-х годин. гезуючої та протизапальної активності, а також Після охолодження розчину до кімнатної темпераодним із найбільш інтегральних критеріїв загальтури 20-25 °С, осад що випав відфільтровують, нобіологічної дії ксенобіотиків - класом гострої токпромивають послідовно етанолом., гексаном, висичності. сушують на повітрі. Хроматографічний контроль за Результати вивчення фізіологічної активності протіканням реакції здійснюють у системі ацетон сполук проілюстровані прикладами 2-4 (таблиці 1гексан 3:5 на пластинках SILUFOL 254 UV з прояв3). ленням в парах йоду. Вихід сполуки 4а составляє ПРИКЛАД 2. 4.05 г (96 %). Гостра токсичність найбільш активних сполук Тпл 234-235 °С. вивчалась на білих мишах обох статей масою 1814 спектр, см-1 : 1718 (С=0), 1635, 3330, 3445 22 г. Критерієм ступеню токсичності була доза ре(NH2), 2210 (CN). Знайдено, % ; С - 64,20 Н- 3, 88 човини, однократне введення якої приводило до N- 15,16. С15Н11N3О3. Вирахувано, % : С -64,05; Нзагибелі 50% піддослідних тварин. Піддослідних 3, 94; N-14.96. тварин, згідно умовам методу розра-хунку середСпектр ПМР 1H (DMSO –d6) 300 МГц : СН3 ньолетальної дози (ЛД50) [5], розподіляли на групи 2.22 с. (3Н), С4 -Н 4.38 с. (1Н), С8 6.27 с . (1Н), NH2 по 2 різностатеві особини в кожній. Препарати 7.24 уш.с (2Н) 7.36-7.40 м. (4Н). вводили внутрішньо натще в 5-6 дозах у вигляді Поскільки лікарські засоби серед вказаного завису в 1%-ном крохмальному клейстері. Об'єм класу хімічних сполук не описані, при вивченні завису, що вводився, не перевищував 10 мл/кг. фізіологічної активності в якості найближчого анаЗагибіль тварин реєстрували на протязі 14 діб. лога за фармакологічною дією використано моноТаблиця 1 Фізіологічна активність похідних 2-аміно-4-арил-(гетарил)-7метил-3-ціано-4Н,5Н-пірано[4,3-b]піран-5-ону 4 (а-д) та препарату порівняння Речовина, що досліджується Сполука 4д*** Сполука 4г*** Сполука 4б*** Сполука 4в ЛД50, мг/кг Доза, мг/кг* 815 32,7 34,3 31,5 37,0* 18,5* 9,3* 28,2* 14,1* Сполука 4а 708 Диклофенак натрію 360 7,05* 31,8* 15,9* 8.0* Примітка: * вказані дози дорівнюють 0,1, 0,05, 0,025 М/кг відповідно; ** - Величина дози препарату, що підвищує поріг больової чутливості при термічному подразненні на 50% через 1 год після введення; *** - сполуки вводили в дозах 0,1 М/кг Встановлено, що ступінь токсичності похідних 2-аміно-4-арил(гетарил)-7-метил-3-ціано-4Н,5Нпірано[4,3-b]піран-5-онів 4 (а-д) в 1,96-2,26 рази нижчий, ніж у препарату порівняння, і належать до 1У класу токсичності (малотоксичні речовини) з Зміна порогу больової чутливості при термічному подразненні, в % 1 год 2 год 3 год 5 год 24год ОД50** 59,8 40,5 28.7 21,2 20,8 79,5 55,6 21,0 27,4 9,5 85,5 76,4 51,4 38,8 15,9 103,3 82,9 91,2 54,9 20,5 74,0 63,5 66,7 72,7 19,5 8,8 69,8 57,5 63,8 69,1 7,1 100 88,2 100 76,5 51,7 106,4 90,9 80,9 59,1 58,3 6,2 64,2 67,2 37,5 14,6 44,8 64,2 53,8 30,8 57,4 49,8 27,4 42,4 28,3 13,5 26,2 15,7 8,90 8,8 10,6 6,0 16,2 параметрами середньолетальних доз 708-815 мг/кг, в той час як препарат порівняння за ступенем токсичності (ЛД50 360 мг/кг) відноситься до помірно токсичних речовин. ПРИКЛАД 3. Анальгезуюча активність похідних 2-аміно-4-арил(гетарил)-7-метил-3-ціано-4Н,5Нпірано[4,3-b]піран-5-ону 4 (а-д) препарату порівняння вивчалась на моделі термічного подразнення за класичним методом Komlos Е., Porzasz [4]. Згідно з умовами методу, термічне подразнення кінцівок тварин забезпечувалося за допомогою 5 75541 6 ультратермостату на рівні 55°С. Ступінь знебонтезованих похідних 2-аміно-4-арил(гетарил)-7лення оцінювалася збільшенням порогу чутливості метил-3-ціано-4Н,5Н-пірано[4,3-b]піран-5-ону 4 (апід впливом дії вказаних речовин . д) над препаратом порівняння вивчення їх фізіолоДосліди виконані на дорослих білих мишах гічних властивостей було розширене дослідженобох статей масою 18-20 г. Після триразового виням протизапальної дії та встановленням деяких значення порогу чутливості формували три групи особливостей знеболюючої активності. тварин з приблизно рівною больовою чутливістю ПРИКЛАД 4. до дії термічного подразника, а латентний період Протизапальна активність похідних 2-аміно-4кожної з груп слугував контролем. Потім перораарил-7-метил(гетарил)-3-ціано-4Н,5Н-пірано[4,3льно вводили одноразово сполуки, що вивчалися, b]піран-5-ону 4 в та 4 а, оцінювалась здатністю у вигляді завису в 1%-ному крохмальному клейспригнічувати розвиток однієї із його фаз - набряків. тері. Для порівняльного визначення анальгезуючої Антиексудативний ефект сполук 4 (а-д) вивчали на активності препарати вводили в трьох еквімолярбілих щурах методом плетизмометрії. В дослідах них дозах, які складали 0,025, 0,05 і 0,1 М/кг. Бовикористовували дорослих здорових щурів обох льова чутливість оцінювалася в динаміці - через 1, статей масою 180-210 г. Після 3-кратного вимірю2, 3, 4, 24 години після введення сполук. вання об'єму стопи задньої кінцівки та встановОтримані результати (табл.1) свідчать, що всі лення її фізіологічних норм тваринам під апоневсинтезовані похідні 2-аміно-4-арил(гетарил)-7роз стопи з допомогою мікрошприца вводили по метил-3-ціано-4Н,5Н-пірано[4,3-b]піран-5-ону 4(а0,1 мл 1,0-%-ного розчину карагеніну. Про розвид) мають досить виражену анальгезуючу активток запалення свідчило збільшення об"єму стопи ність. Зокрема, ступінь знеболення сполук 4б, 4г, кінцівки, обумовлене специфічною дією флогоген4д використаних в дозах 0,1 М/кг, знаходиться ного агенту на проникність капілярної стінки. Об'єм практично на рівні препарату порівняння - диклокінцівки вимірювали в динаміці - через 1, 2, 3, 5, 24 фенаком натрію, а сполуки 4 в та 4 а, мають сутгодин після введення флогогену. Досліджувані тєву перевагу над ним. Це підтверджується велиречовини вводили внутрішньо у вигляді завису в чинами доз, введення яких сприяє зниженню 1%-ному крохмальному клейстері в еквімолярних больової чутливості на 50%: для диклофенаку дозах - 0,1 М/кг - за 30 хвилин до введення флогонатрію, 4 б, 4 г ОД50 через 1 год після введення ці гену. дози становлять відповідно 16,2, 8,8 та 6,2 мг/кг. Протизапальні властивості досліджуваних Перевага вказаних сполук становиться ще важлисполук проявлялися здатністю гальмувати розвивішою, коли врахувати тривалість дії знеболення. ток карагенінового набряку. При цьому слід зауваТак, якщо при введенні диклофенаку натрію в дозі жити, що вказана активність заявлюваних речови0,1 М/кг чутливість при термічному подразненні ни перевершує аналогічну препарату порівняння через 4 год знижується лише на 26,2 %, то при не лише за ступенем вираженості, а за тривалістю введенні сполук 4 б, та 4 а - на 54,9 і 76,5%, а чедії (табл.2). рез 24 години -на 8,8, 20,5 та 51,7% відповідно. Для підтвердження переваг найактивніших сиТаблиця 2 Протизапальна активність похідних 2-аміно-4-арил(гетарил)-7-метил-3-ціано-4Н,5Н-пірано[4,3-b]піран5-ону при карагеніновому набряку Об'єкт дослідження Диклофенак натрія 4в 4а 1 14,7 38,2 37,8 Зменшення об'єму кінцівки (%) через ... год 2 3 5 24,4 35,8 29,1 57,7 63,5 68,9 60,2 69,2 76,4 В зв'язку з тим, що чутливість тканин при запаленні суттєво підвищується, проведено порівняльне вивчення знеболюючої активності сполук 4а , 4в та диклофенаку натрію при дозованому механічному стисканні інтактних та запалених (карагеніновий набряк) ступнів кінцівок за методом Randall L.O. a. Sellitto J.J.[5]. Цінність методу полягає в більш високій об`єктивності оцінки ступеня знеболення, зумовленій виключенням елементів індивідуальної чутливості, поскільки досліди проводяться на одній і тій же тварині, а контролем в даних дослідженнях є багаторазово визначе-на чутливість обох кінцівок. Досліди виконані на білих щурах з карагеніновим набряком, викликаних за вищенаведеною схемою. Больову чутливість на механічне стискання стопи визначали за допомогою приладу UNO 24 23,3 54,8 80,6 BASIC (Італія). Анальгезуючу активність оцінювали різницею зміни порогу больової чутливості (в %) на набряклих та інтактних кінцівках. Встановлено (таблиця 3), що всі препарати, які вивчалися, суттєво знижують чутливість тканин до їх механічного стискання. При аналізі отриманих даних очевидна суттєва різниця в характері анальгезуючої дії сполук: в той час, як диклофанак натрію в більшій мірі знеболює в місцях з патологічне зміненими тканинами, то похідні 2-аміно-4арил(гетарил)-7-метил-3-ціано-4Н,5Н-пірано[4,3b]піран-5-ону 4 (а-д), проявляють рівно-ефективну дію на інтактні та запалені ступні. Вказані відмінності анальгезуючої дії сполук, що вивчалися, свідчать про відмінності їх механізмів дії, зокрема, про можливу здатність проникати через гематоенцефалічний бар'єр і спричинювати анальгезуючу 7 75541 8 дію через центральну нервову систему. препарату порівняння і зберігається на досить Як і при термічному подразненні, в даному вивисокому рівні протягом всього терміну спостерепадку знеболююча активність сполуки 4 в, і особження. ливо сполуки 4 а є більш пролонгованою, ніж у Таблиця 3 Специфічна дія похідних 2-аміно-4-арил(гетарил)-7-метил-3-ціано-4Н, 5Н-пірано[4,3-Ь]піран-5-ону на інтактні (І) та запалені(З) тканини Об'єкт дослідження Диклофенак натрію 4в 4а 1 год. З* Анальгезуюча дія (в % до значень тварин контрольної групи) 2 год. 3 год. 4 год. 24 год. І" З I З I З I З I 79,6 44,3 73,9 53.3 65,0 38,2 48,9 42,6 64,5 57,8 81,5 87,0 75,3 80,4 81,5 74,7 82,5 61,3 80,8 74,7 68.8 90,3 92,4 95,6 72,0 91,6 90,3 100 85,6 95,5 Таким чином, при дослідженні фізіологічних властивостей похідних 2-аміно-4-арил(гетарил)-7метил-3-ціано-4Н,5Н-пірано[4,3-b]піран-5-ону 4(ад) встановлені наступні переваги їх ефективності над препаратом порівняння: а/ більш висока протинабрякову активність; Комп’ютерна верстка М. Клюкін б/ суттєва різниця ступеню знеболення; в/ пролонгованість протизапальної та анальгезуючої дії; г/ в 1,96-2,26 разів нижчі показники середньосмертельних доз. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601