9-(4′-метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридин, що проявляє протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність

Реферат: 9-(4'-Метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридин, що проявляє протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Винахід належить до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема до синтезу нових хімічних сполук. Синтезований 9-(4'-метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридин структурної формули UA 105652 C2 (12) UA 105652 C2 NHN=CH OCH3 CH3 N NO2 CH3 , що проявляє протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. UA 105652 C2 5 10 Винахід належить до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема до синтезу 9-(4'метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридину, який проявляє протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Пошук нових засобів з комплексною фармакологічною дією є актуальною проблемою сучасної медицини. Відомий цілий ряд лікарських засобів синтетичного походження, кожен з яких має свою домінуючу дію: етакридину лактат (бактеріостатична дія), фурацилін (протигрибкова дія), оксафенамід (жовчогінна дія), вольтарен (протизапальна дія) (Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: ООО "Издательство Новая Волна", 2005. - 1200 с: ил. - С. 951, 852, 913, 170). До недоліків зазначених засобів можна віднести, зокрема, наявність у тій чи іншій мірі негативної побічної дії. У комплексному лікуванні виникає необхідність призначення хворому одночасно декількох лікарських засобів з моноспрямованою фармацевтичною дією, внаслідок чого загальна побічна дія підсилюється. За прототип вибраний 4-метил-5-нітро-9-(м-толіл)аміноакридин загальної формули: CH3 NH N 15 20 NO2 CH3 , що виявляє протимікробну та жовчогінну активність (деклараційний патент на винахід № 46181, Україна, МПК: С07D 219/06, 219/10, А61K 31/435. Заявлено 02.08.1988. Опубліковано 15.05.2002. Бюл. № 5). Сполука за прототипом проявляє протимікробну та жовчогінну дію, проте діапазон та ступінь фармакологічної активності може бути реально підвищений. В основу винаходу поставлена задача по створенню нової хімічної сполуки, що проявляє високу протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Поставлена задача вирішується шляхом синтезу нової індивідуальної хімічної сполуки 9-(4'метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридину формули: NHN=CH OCH3 CH3 CH3 N 25 30 35 NO2 CH3 , який проявляє протимікробну, фунгіцидну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Речовина, яка заявляється, утворена взаємодією 9-гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридину та 4-метоксибензальдегіду у диметилформаміді (ДМФА). Кінцевий продукт 9-(4'-метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридин - порошок жовтого кольору, розчинний у воді (1:100), етанолі, диметилсульфоксиді (ДМСО), ДМФА. Будова сполуки підтверджена за допомогою елементного аналізу та ІЧ-спектроскопії, а індивідуальність - методом тонкошарової хроматографії. Винахід ілюструється наступним прикладом: Приклад 1 2,82 г (0,01 моль) 9-гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридину та 1,36 г (0,01 моль) 4метоксибензальдегіду в 15 мл ДМФА нагрівають протягом 1 години. Осад, що випав, відфільтровують, промивають водою та сушать. Кристалізують із водного ДМФА. Вихід 3,40 г (85 %), Тпл. 249-251 °C, М.м. 400,433. 1 UA 105652 C2 5 10 15 20 Бруто-формула: C23H20N4O3. Розраховано, %: С - 68,99; N-13,99; Н - 5,03. Знайдено, %: С - 68,84; N-14,05; Н - 4,95. -1 as s ІЧ-спектр у KВr, см : 3338 (√NH), 2972 (√ CH3), 2884 (√ Ch3), 1600 (√С-Ph), 1576 (δNH), 1534 as S (√ No2), 1350 (√ NO2). Rf: 0,33 в системі етанол-гексан (1:3). Приклад 2 Визначення протимікробної активності заявленої сполуки проводилося за методом двократних серійних розведень у рідких харчових середовищах (Навашин С.И., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. М: Медицина, 1982. - С. 40-42). Для культивування бактерій використовувався амінопептид, попередньо розведений у два 5 6 рази дистильованою водою, рН 7,2. Мікробне навантаження склало 10 -10 мікробних тіл в 1 мл середовища. Для випробування використовувалися 8 штамів мікроорганізмів: 1-Sta-phylococcus aureus, штам АТСС 25923; 2-Echerichia coli, штам АТСС 7241; 3-Bacillus subtilis, штам АТСС 25922; 4Pseudomonas aeruginosa, штам АТСС 27853, 5-Salmonella choleraesuis; 6-Salmonella thyphimurium; 7-Salmonella thyphisuis, 8-Salmonella dublin. Як критерій фармакологічної активності вибрано рівень мінімальної пригнічуючої концентрації (МПК) та рівень гострої токсичності (DL50). Результати вивчення антимікробної активності та токсичності 9-(4'метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридину (сполука № 1) у порівнянні з 4метил-5-нітро-9-(м-толіл)аміноакридином (прототип) та етакридину лактатом наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Протимікробна активність і токсичність заявленої сполуки (№1) у порівнянні з прототипом та етакридину лактатом МПК (мкг/мл) Сполука №1 Прототип Етакридину лактат DL50 (внутрішньошлунково), мг/кг Штами мікроорганізмів 1 3,9 31,2 2 1,6 1,8 3 1,6 1,8 4 3,9 31,2 5 31,2 6 31,2 7 15,6 8 31,2 >5500 5000 31,2 31,2 15,6 62,5 125 250 125 250 21* Примітка. * DL50 - при внутрішньочеревному введенні. 25 30 35 40 За даними табл. 1, сполука № 1 активніша за етакридину лактат у відношенні до Staphylococcus aureus та Bacillus subtilis у 8,0-9,75 разу, у відношенні до Echerichia coli у 19,5 разу, у відношенні до Pseudomonas aeruginosa у 16,03 разу. Сполука № 1 також перевищує в аналогічних умовах основні характеристики прототипу у відношенні до Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, Echerichia coli. Крім того сполука № 1 активніша за етакридину лактат у відношенні до мікроорганізмів роду Salmonella у 4-8 рази, а у прототипу ці дані відсутні. Заявлена сполука є менш токсичною, ніж прототип і значно менш токсичною, ніж рефренс-препарат (етакридину лактат). Приклад № 3 Визначення протигрибкової активності проводилось за відомою методикою (Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / Под ред. М.О. Бригера - 3-е изд. перераб. и доп. - М.: Медицина, 1982. - 462 с.). Для вирощування грибів використовувалось середовище Сабуро (рН = 6,5-6,7). Навантаження склало 500-600 репродуктивних тілець штамів Candida albicans або Trichophyton rubrum в 1 мл середовища. Протигрибкову дію оцінювали за мінімальною мікостатичною концентрацією (ММК), вираженою в мкг/мл. Результати вивчення протигрибкової активності та токсичності 9-(4'метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридину (сполука №1) у порівнянні з 4-метил 2 UA 105652 C2 5-нітро-9-(м-толіл)аміноакридином (прототип), фурациліном та гризеофульвіном наведені у таблиці 2. Таблиця 2 Протигрибкова активність та токсичність сполуки (№ 1) у порівнянні з прототипом, фурациліном та гризеофульвіном Штами грибків, ММК (мкг/мл) Candida albicans Trichophyton rubrum 15,6 15,6 64,0 50 Сполука Сполука № 1 Прототип Фурацилін Гризеофульвін 5 10 15 20 DL50 (внутрішньочеревне) мг/кг >2500 4 82,5 За результатами дослідження, наведеними у таблиці 2, сполука № 1 інгібує ріст Candida albicans у концентрації в 4,1 разу меншій, ніж фурацилін. Також сполука № 1 проявляє протигрибковий ефект у відношенні Trichophyton rubrum у концентрації 15,6 мкг/мл та перевищує за дією гризеофульфін в 3,2 разу. Прототип не проявляє протигрибкову дію. Крім того, сполука № 1 у 30,3 разу менш токсична, ніж фурацилін при внутрішньочеревному введенні. Таким чином, заявлена сполука перевищує прототип та препарати порівняння за широтою протигрибкової дії. Приклад 4 Вивчення жовчогінної дії заявленої сполуки, прототипу та оксафенаміду здійснювали на білих щурах масою 140-180 г за методом Скакун Н.М., Олійник А.Н. (Фармакологія та токсикологія. - 1967, № 3. - С. 334-337). Як критерії фармакологічної активності вибрано: ізоефективна доза (DE50), при якій фармакологічний ефект набуває 50 % випадків у експериментальній групі тварин, рівень гострої токсичності (DL50), терапевтичний індекс ТІ (показник відношення DL50/DE50) та відносний терапевтичний індекс. Результати вивчення жовчогінної активності 9-(4'-метоксибензиліден) гідразино-2,3диметил-5-нітроакридину (сполука № 1), 4-метил-5-нітро-9-(м-толіл)аміноакридину (прототип) та оксафенаміду наведені в таблиці 3. Таблиця 3 Жовчогінна активність та токсичність сполуки № 1, прототипу та оксафенаміду Сполука Сполука № 1 Прототип Оксафенамід Доза, мг/кг 10 15 150 51 52 51 00 150 15 50 150 Кількість Жовчогінна досліджень активність, % 5 5 5 9 5 5 5 5 12 5 5 28,8±2,2* 65,8±19,7 71,5±15,7 24,5±2,70 45,7±4,20 55,6±1,20 26,9±3,70 18,6±3,30 24,7±6,4 32,3±5,3 49,4±6,3 DE50, мг/кг DL50, мг/кг Т.І. = DL 50 DE 50 Відносний Т.І. за оксафенамідом 12,4 >5500 443,55 17,13 19,0 5000 263,16 10,16 154,3 4000 25,9 1 Примітка. * Р 5500 5000 597,83 Відносний Т.І. по натрію диклофенаку 13,29 8,0 360 45,0 1 Сполука № 1 Прототип Натрію диклофенак 15 20 25 За даними таблиці 4 сполука № 1 має виражену протизапальну активність, за широтою терапевтичного ефекту перевищує натрію диклофенак у 13,29 разу. Прототип протизапальну активність не проявляє. Таким чином, заявлена сполука 9-(4'-метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5нітроакридину проявляє широкий спектр фармакологічної дії: протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну при низькій токсичності. За окремими видами активності вона перевищує дію препаратів порівняння етакридину лактату, фурациліну, гризеофульвіну, оксафенаміду та натрію диклофенаку. При синтезі заявленої сполуки використовуються доступні реактиви, дозволені у фармацевтичній практиці. Речовину одержують за простою технологією, яка може бути відтворена у промислових умовах, є стійкою, що сприяє тривалому терміну зберігання. Заявлена сполука може знайти застосування у медичній практиці при створенні лікарських засобів у різних лікарських формах для лікування інфекційних та запальних процесів різної етіології, які супроводжуються вторинною грибковою інфекцією та застійними явищами жовчного міхура. 30 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 9-(4'-Метоксибензиліден)гідразино-2,3-диметил-5-нітроакридин структурної формули: NHN=CH OCH3 CH3 N CH3 NO2 35 , що проявляє протимікробну, протигрибкову, жовчогінну та протизапальну активність. Комп’ютерна верстка Л. Литвиненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4