Спосіб прогнозування стану хворих з діабетичною нефропатією за умов гемодіалізу

Реферат: UA 110109 U UA 110109 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, зокрема до лікування хворих з хронічною нирковою недостатністю (ХНН) на фоні цукрового діабету, які отримують замісну ниркову терапію методом гемодіалізу, і може бути використана для прогнозування розвитку ускладнень з визначенням прогресування ендотеліальної дисфункції та зниження антиоксидативного захисту на фоні вторинного імунодефіциту. У пацієнтів з діабетичною нефропатією, ускладненою хронічною хворобою нирок (ХХН) V ступеня, основним методом лікування є замісна ниркова терапія (ЗНT), завдяки якій забезпечується продовження тривалості життя. Відомий як найближчий аналог спосіб оцінки ризику розвитку ускладнень перебігу хронічної ниркової недостатності у хворих, які лікуються програмним гемодіалізом. Спосіб включає лабораторні дослідження в крові церулоплазміну та трансферину [Патент України на корисну модель № 58034, МПК G01N33/49; опубл. 25.03.2011 р., бюл. № 6]. Недоліком способу є те, що отримані результати не вказують на ризик розвитку ускладнень у хворих з діабетичною нефропатією, у яких спостерігається порушення метаболізму оксиду азоту. В основу корисної моделі поставлено задачу створити спосіб прогнозування стану хворих з діабетичною нефропатією за умов гемодіалізу, у якому шляхом встановлення змін активності показників активності NO-синтаз, вмісту нітрогену оксиду (NО) та його похідних, а також оксидативних процесів можна буде прогнозувати стан хворих після сеансів гемодіалізу і відповідно коригувати лікування, що надасть можливість поліпшити якість життя таких хворих. Поставлена задача вирішується тим, що у способі прогнозування стану хворих з діабетичною нефропатією за умов гемодіалізу, що включає лабораторні дослідження та визначення біохімічних показників крові, згідно з корисною моделлю, пацієнтам до та після проведення гемодіалізу визначають у лізаті лімфоцитів вміст продуктів тіобарбітурової кислоти (ТБК-активних продуктів), L-аргініну та нітрит-аніону і при різкому зниженні рівня активності індуцибельної та ендотеліальної NO-синтази, зменшенні концентрації L-аргініну, нітрит-аніону, ТБК-активних продуктів і зростанні активності аргінази прогнозують прогресування розвитку хронічної ниркової недостатності. Прогресування розвитку ХНН на фоні цукрового діабету супроводжується ендотеліальною дисфункцією та зростанням рівня нітрозо-оксидатативного стресу, що проявляється відповідними змінами вмісту ТБК-активних продуктів, нітратів, нітритів, L-аргініну, активністю ензимів антиоксидантного захисту як у плазмі крові, так і у формених елементах крові, зокрема лімфоцитах. Проведення сеансу гемодіалізу, при якому відбувається механічний контакт компонентів плазми крові та формених елементів з діалізною мембраною, викликають різносторонні ефекти - як зростання процесів перекисного окиснення ліпідів [Вплив сеансу гемодіалізу на структурнофункціональний стан ендотелію у хворих із термінальною нирковою недостатністю / А.І. Гоженко, О.Б. Сусла, А.А. Клим, О.З. Яремчук // Український журнал нефрології та діалізу. 2013. - Т. 3. – С. 102-107], так і виведення продуктів їх метаболізму під час діалізу. Наскільки вплив гемодіалізу змінює стан нітрозо-оксидативних процесів у крові та формених елементах свідчить зміна відповідних показників. Після гемодіалізу у плазмі крові знижується вміст ТБК-активних продуктів, L-аргініну, нітританіону [Baylis С. Nitric oxide deficiency in chronic kidney disease / С. Baylis // Amer. J. Physiol-Renal Physiol. - 2008. - Vol. 294. - № F1-F9]. Подібні зміни вмісту ТБК-активних продуктів, L-аргініну та нітрит-аніону спостерігаються і у лізаті лімфоцитів. Спосіб прогнозування стану хворих з діабетичною нефропатією за умов гемодіалізу здійснюють таким чином. Пацієнту з діабетичною нефропатією, який отримує лікування ЗНТ методом гемодіалізу, до та після проведення гемодіалізу визначають у лізаті лімфоцитів вміст ТБК-активних продуктів, L-аргініну та нітрит-аніону. При різкому зниженні рівня активності iNOS та активності eNOS, зменшенні концентрації L-аргініну, нітрит-аніону, ТБК-активних продуктів прогнозують розвиток поліорганної недостатності на фоні ендотеліальної дисфункції та зниженого антиоксидативного захисту. Для створення способу та підтвердження його достовірності були проведені обстеження на базі відділення хронічного гемодіалізу Львівської обласної клінічної лікарні. У дослідження було включено 21 хворих (чоловіків - 8, жінок - 13) з діабетичною нефропатією, які отримували лікування ЗНТ методом гемодіалізу 3 рази на тиждень (12 год.) у бікарбонатному режимі. Середній вік пацієнтів становив 52 роки. Артеріальний тиск у хворих з ХНН становив: систолічний 160 мм рт. ст., діастолічний 85 мм рт. ст. Групу порівняння склала кров 20 донорів, середнім віком 48 років. Кров для дослідження у кожного хворого забирали із сформованого судинного доступу артеріовенозної фістули перед та після гемодіалізу. Дослідження проведено з дотриманням біоетичних норм. 1 UA 110109 U 5 10 15 20 25 30 Для оцінки стану ситеми NO-синтаза/аргіназа визначали активність NO-синтази (ендотеліальної - eNOS та індуцибельної - iNOS) [Тимурбулатов М.А. Метод повышения свободнорадикального окисления липидсодержащих компонентов крови и его диагностическое значение / М.А. Тимурбулатов, Е.И. Селезнев // Лабораторное дело. - 1981. - № 4. - С. 209-211], вміст L-аргініну [Алейникова Т.Л. Руководство к практическим занятиям по биохимии / Т.Л. Алейникова, Г.В. Рубцова. - М.: Высшая школа. - 1988. - 239 с.], нітрит-аніону [Green L.С. Analysis of nitrate, nitrite and (1515) nitrate in biological fluids / L.C. Green, A.W. David // Anal. Biochem. - 1982. - Vol. 126. - P. 131-138] та активність аргінази [Geyer J.W. Rapid method for determination of arginase activity in tissue homogеnates / J.W. Geyer, D. Dabich // Anal. Biochem. 1971. - Vol. 39, № 2. - P. 412-417]. Рівень процесів ліпопероксидації оцінювали за вмістом ТБКактивних продуктів [Сумбаев В.В. Влияние ДДТ на активность синтазы оксида азота в печени, легких и головном мозге крыс / В.В. Сумбаев, И.М. Ясинская // Совр. пробл. токсикологии. 2000. - № 3. - С. 3-7], антиоксидантний захист - визначаючи активність супероксиддисмутази (СОД) [Чевари С. Определение антиоксидантых параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте / С. Чевари, Т. Андял Я. Штренгер // Лабораторное дело. - 1991. № 10. - С. 9-13]. Лізат лімфоцитів готували згідно з [Boyum A.A. A one-stage procedure for isolation of granulocytes and lymphocytes from human blood / A.A. Boyum // Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1968. - Vol. 21, suppl. 97. - P. 51-76]. Статистичну обробку експериментальних результатів проводили з використанням прикладної програми ANOVA "Statistica". Статистично достовірними вважали розбіжності при р