7-n-метилбензил-8-бензиліденгідразінотеофілін, який виявляє антигіпоксичну та антиоксидантну дії

Реферат: 7-n-метилбензил-8-бензиліденгідразинотеофіліну формули: O N O N N N NH N , який виявляє антигіпоксичну та антиоксидантну дію. UA 115720 U (12) UA 115720 U UA 115720 U 5 10 15 20 25 30 Корисна модель належить до біологічно активних сполук і може бути використана у медицині та фармації. Гіпоксія є одним з найпоширеніших патологічних процесів. Вона може мати самостійну етіологію, але може виступати як супутній фактор захворювань багатьох органів та тканин, в залежності від їх резистентності до гіпоксії. Найменшу стійкість до гіпоксії мають тканини нервової системи, особливо нейрони кори великих півкуль та серцево-судинна система, зокрема характерним проявом цього, є зниження скоротливої функції міокарда і зменшення, у зв'язку з цим, ударного і серцевого викидів та розладу кровотоку в судинах серця з розвитком коронарної недостатності. Також слід зазначити, що гіпоксія призводить до порушення енергетичного забезпечення функцій і пластичних процесів в організмі. Гостра гіпоксія, яка характеризується швидким порушенням в тканинах окислювально-відновних процесів, наростанням гліколізу, закислення цитоплазми клітин і позаклітинного матриксу, призводить до підвищення проникності мембран лізосом, виходу гідролаз, що руйнують внутрішньоклітинні структури. Крім того, гіпоксія активує перекисне окислення ліпідів, з'являються вільнорадикальні перекисні сполуки, які руйнують мембрани клітин. Дефіцит О 2 супроводжується зниженням ресинтезу різних макроергів (АТФ, ГТФ, АДФ, ГДФ) перш за все в мітохондріях, що призводить до виникнення дефіциту цих сполук в клітинах і міжклітинних структурах, а значить, характеризується недоліком енергозабезпечення різних метаболічних, структурних і фізіологічних процесів в організмі. В зв'язку з цим практична медицина постійно стикається з необхідністю захисту мозку, серцево-судинної системи тощо, від нестачі кисню та метаболічних проявів гіпоксії, таких як вільно-радикальні перекисні сполуки за допомогою антигіпоксантів та антиоксидантів. Препарати, що представлені на фармацевтичному ринку України, не задовольняють потреб сучасної системи охорони здоров'я. Тому розробка нових, оригінальних вітчизняних препаратів з антигіпоксантною та антиоксидантною дією, є актуальною проблемою сьогодення. Найближчим аналогом до корисної моделі є 1,3-диметил-7-n-хлоробензил-8-nметоксибензиліденгідразиноксантин (Пат. 41586 Україна, МПК C07D 473/00. 1,3-Диметил-7-nхлоробензил-8-n-метоксибензиліденгідразиноксантин, який виявляє діуретичну та антиоксидантну дії /М.І. Романенко, Л.В. Євсєєва, К.В. Александрова, Б.О. Самура, І.Б. Самура; заявники та патентовласники Запорізький державний медичний університет та автори. № u200900336; заявл. 19.01.09; опубл. 25.05.09, Бюл. № 10.). O N O N N N Cl NH N O 35 . В основу корисної моделі поставлена задача створення нових малотоксичних сполук антигіпоксичної та антиоксидантної дії, які після поглиблених фармакологічних досліджень можуть бути використані в медичній практиці. Поставлена задача вирішується синтезом 7-n-метилбензил-8-бензиліденгідразинотеофілін формули: 1 UA 115720 U O N O N N N NH N 5 10 15 20 25 30 . Корисна модель відрізняється від найближчого аналога наявністю у 7 положенні nметилбензильного залишку та в 8 положенні залишку бензиліденгідразину. Сполука, виявляє додаткову антигіпоксичну та значно вищу антиоксидантну дію, ніж найближчий аналог. На відміну від еталонів порівняння (аскорбінової кислоти, тіотриазоліну, α-токоферолу ацетату, дибунолу) сполука, що заявляється, виявляє значно вищу антиоксидантну дію та проявляє також антигіпоксичну дію порівнянну з мексидолом (еталон порівняння). Отримують сполуку, що заявляється, реакцією 8-бромо-7-n-метилбензилтеофіліну з надлишком гідразину гідрату з подальшим сполученням вихідного 8-гідразино-7-nметилбензилтеофіліну з бензальдегідом в середовищі водного діоксану. Приклад 1. Етап 1. Синтез 8-гідразино-7-n-метилбензилтеофіліну. Суміш 3,63 г (0,01 моль) 8-бром-1,3-диметил-7-n-метилбензилксантину, 4 мл (0,08 моль) гідразингідрату, 20 мл води та 30 мл діоксану кип'ятять 3 години. В гарячому вигляді фільтрують, фільтрат охолоджують, розводять водою до 500 мл. Осад, що утворився, відфільтровують, промивають водою та метанолом, сушать. Вихід 3,2 г, 98 %, Ттопл. 238-240 °C. C15H18N6O2. Знайдено, %: С - 57,20; Н - 5,80; N - 26,80. Розраховано, %: С - 57,31; Н - 5,77; N 26,74. ПМР спектр (δ-шкала, м.д., розчинник - ДМСО): 7,11 (кв. 4Н) - СН аром; 5,26 (с, 2Н) - N7CH2; 4,40 (с, 2Н) - NH2; 3,38; 3,18 (с, 3Н) - N1CН3, N3CH3 8,33 (с, 1H); 2,24 (с, 3Н) - СН3-Аr. Етап 2. Синтез 7-n-метилбензил-8-бензиліденгідразинотеофіліну, сполуки, що заявляється. До гарячого розчину 1,57 г (0,005 ммоль) 8-гідразино-7-n-метилбензилтеофіліну в суміші 15 мл води, 20 мл діоксану та 5 крапель конц. НСl додають 0,75 мл (0,005 ммоль) бензальдегіду, кіп'ятять 15 хв. Осад, що утворився, відфільтровують, промивають водою, ацетоном та ефіром, сушать. Вихід 1,7 г (80,95 %), Тпл. 199-201 °C. C22H22N6O2. Знайдено, %: С - 65,50; Н - 5,40; N 20,65. Розраховано, %: С - 65,66; Н - 5,51; N - 20,88. ПМР спектр (δ-шкала, м.д., розчинник - ДМСО): 11,39 м.ч. (с, 1Н) - NH; 8,03 м.ч. (с, 1Н) N=CH; 7,51 м.ч. (м, 2Н); 7,32 м.ч. (м. 3Н) - Ph; 7,08 м.ч. (кв, 4Н) - С6Н4СН3; 5,78 м.ч. (с, 2Н) N7CH2; 3,45 м.ч. (с, 3Н) - NCH3; 3,22 (с, 3Н) - NCH3; 2,27 м.ч. (с, 3Н) - СН3-Аr. Приклад 2. Вивчення антигіпоксичної активності проводили в умовах гострої нормобаричної гіпоксії (Сернов Л.Н. Элементы експериментальной фармакологии /Л.Н. Сернов, В.В. Гацура. М., 2000. - 352 с.). Як еталон порівняння використовували мексидол в дозі 10 мг/кг. Таблиця 1 Антигіпоксична дія сполуки, що заявляється, та еталона порівняння № з/п 1. 2. 3. 35 Сполука Доза, мг/кг Тривалість життя, хв. 7-n-метилбензил-8бензиліденгідразинотеофілін, сполука, що заявляється Мексидол Контроль Тривалість життя, % до контролю 30 34,4±0,25 133,07 10 35,0±0,25 26,0±0,20 134,62 100,00 Як видно із наведених в таблиці 1 даних, сполука, що заявляється, виявляє високу антигіпоксичну дію, порівнянну з мексидолом. 2 UA 115720 U 5 10 15 20 Приклад 3. Антиоксидантну активність (АОА) 7-n-метилбензил-8бензиліденгідразинотеофіліну вивчали in vitro методом неферментного ініціювання вільнорадикального окиснення (Pat. 5726063 USA, G01N 33/52. Method of colorimetric analysis of malonic dialdehydes and 4-hydroxy-2-enaldehydes as indexes of lipid peroxidation, kits for use in said mathod and their preparation /D. Gerard-Monnier, I. Erdelmeir, J. Chaudiere, J. Yadan. - appl. № 702197, date of patent Mar. 10, 1998.). Як субстрат використано суспензію яєчних ліпопротеїдів (СЯЛ). СЯЛ готується шляхом гомогенізації яєчного жовтка з фосфатним буфером (рН 7,4). До -3 -5 -7 суспензії додають досліджувані сполуки в концентрації 10 , 10 , 10 моль/л. Реакцію вільнорадикального окиснення ініціюють додаванням 25 мМ розчину FeSO4·7H2O. Суміш інкубують 60 хвилин при 37 °C. Реакцію зупиняють 50 % розчином трихлороцтової кислоти з трилоном Б. Після центрифугування протягом 30 хвилин до розчину тіобарбітурової кислоти (ТБК) додають надосадочну рідину і кип'ятять на водяній бані протягом 60 хвилин. Забарвлений комплекс малонового діальдегіду з ТБК вилучають додаванням н-бутанолу. Методом спектрофотометрії визначають концентрацію малонового діальдегіду, яка свідчить про інтенсивність процесів вільнорадикального окиснення. Антиоксидантну активність (у відсотках) визначають за формулою: АОА=(СК1-С0/СК1-СК2)100 %, де СК1, СК2 - вміст ТБК-реактантів у контрольних пробах, моль/л; С0 - вміст ТБК-реактантів у дослідній пробі, моль/л. Дані АОА сполуки, що заявляється, еталонів порівняння та аналога наведені в таблиці 2. Таблиця 2 АОА сполуки, що заявляється, еталонів порівняння та прототипу № п/п Сполука 1 7-n-метилбензил-8-бензиліденгідразинотеофіліну (сполука, що заявляється) М.м. С, моль/л АОА, % -3 Прототип (1,3-диметил-7-n-хлоробензил-8-nметоксибензиліденгідразиноксантин) Аскорбінова кислота Тіотриазолін α-Токоферолу ацетат Дибунол 2 3 4 5 6 25 83,33 61,11 36,11 453 10 -3 79,50 -3 65,00 33,90 10,16 25,20 176 246 472 220 10 -3 10 -3 10 -3 10 Таким чином, наведені вище дані свідчать про те, що після подальших фармакологічних досліджень сполука, що заявляється, може бути використана як антигіпоксичний та антиоксидантний засіб в медичній практиці. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 7-n-метилбензил-8-бензиліденгідразинотеофіліну формули: O N O N N N NH N 30 402 10 -5 10 -7 10 , який виявляє антигіпоксичну та антиоксидантну дію. 3 UA 115720 U Комп’ютерна верстка Л. Литвиненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4