Біостимулюючий збір

Изобретение относится к медицине и, в частности, к фармакологическим лекарственным препаратам из растительного сырья, используемых в нативном виде или в виде галеновых препаратов, с биостимулирующим типом действия. В настоящее время в медицинской практике широко применяются лекарственные растения или галеновые препараты из них в качестве биостимуляторов. К ним относятся плоды лимонника, корень женьшеня, корневища с корнями левзеи, аралии маньчжурской, стрекулин, экстракт элеутерококка, родиолы розовой и др. [1, 2]. Перечисленные растения и галеновые препараты из них стимулируют (тонизируют) центральную нервную систему и функцию организма в целом. Они не оказывают резкого выраженного влияния на организм, но при длительном и систематическом применении вызывают биостимулирующий эффект. Показаниями к их применению являются: вегетососудистая дистония, гипотония, общее ослабление организма после тяжело перенесенных заболеваний, операций, умственного и физического перенапряжения, неблагоприятных воздействиях факторов окружающей среды, в том числе, ионизирующего излучения. Многие лекарственные растения, указанного типа действия на организм, входят в состав многокомпонентных сборов или галогеновых препаратов из них. Наиболее близким к предлагаемому нами биостимулирующему сбор у относится биостимулирующее средство, содержащее экстракт левзеи, элеутерококка, корня солодки голой, прополиса, цветочную пыльцу и мед [3], который нами принят за прототип. Общим недостатком перечисленных аналогов и взятого нами за прототип биостимулирующего средства, является то, что основные компоненты приведенного сбора и отдельные лекарственные растения (женьшень, левзея, элеутерококк и др.) является их малодоступность для Украины, так как в дикорастущем виде они у нас не произрастают, а выращивание в культуре связано с большими материальными и финансовыми затратами. В тоже время, медицинские учреждения Украины крайне нуждаются в биостимулирующи х средствах, а именно растительного происхождения, которые физиологически близки к человеческому организму. В этом большую потребность испытывают в первую очередь те районы и населения, которые пострадали от аварии на Чернобыльской АЭС. Задачей настоящего изобретения является расширение применения препаратов растительного происхождения, доступных в Украине как в дикорастущем, так и культивируемом виде с биостимулирующим типом действия. Поставленная задача достигается тем, что биостимулирующий сбор содержит: корни шлемника байкальского, цветки бессмертника песчаного, корневища с корнями девясила высокого, корни стальника пашенного, траву череды трехраздельной, траву эхинацеи пурпурной в следующи х соотношениях компонентов, мас.ч.: корни шлемника байкальского - 15 - 20; цветки бессмертника песчаного - 8 - 10; корни стальника пашенного - 20 - 25; корневища с корнями девясила высокого - 8 10; траву череды трехраздельной - 10 - 15; траву эхинацеи пурпурной - 15 - 20. Лекарственное сырье, из которого готовят отвар, содержит комплекс биологически активных веществ, которые способны проявлять биостимулирующее действие на организм. В табл.1 приводится химический состав каждого компонента, входящего в биостимулирующий сбор. Из табл.1 видно, что части растений, входящие в сбор, содержат большой набор биологически активных веществ, которые обладают широким диапазоном фармакологического действия на организм. При этом большинство из них присущи метаболитам животного организма. При этом следует отметить, что сырьевая база трав, входящи х в сбор, достаточна для обеспечения лечебных учреждений и широкого круга населения Украины. Не менее важен и тот факт, что все они являются фармакопейными, кроме эхинацеи пурпурной. Последняя входит в фармакопею многих стран мира [4]. Соотношение отдельных биологически активных веществ в сборе в исходном растительном сырье может изменяться в зависимости от видовой принадлежности, места произрастания, срока сбора и условий хранения. Предлагаемый сбор готовится для применения в виде отвара следующим образом: хорошо высушенное и измельченное до фракции 2 - 3мм лекарственное сырье, в указанных выше весовы х количествах, помещают в эмалированную емкость (инфундирку), заливают 200мл питьевой воды и в течение 15мин кипятят в водяной бане. Затем отвар охлаждают до комнатной температуры, процеживают, жмых отжимают, доводят отвар кипяченой водой до 200мл, а затем вводят животным. Полученный отвар представляет собой легкоподвижную жидкость темно-коричневого цвета, с легким горько-вяжущим вкусом, горьковато-ароматного запаха. Отвар из предлагаемого биостимулирующего сбора малотоксичен. Изучение острой и хронической токсичности проводили на беспородных белых мышах массой тела 18 - 22г и белых крысах массой 180 - 230г. Отвар вводили в желудок с помощью зонда до кормления животных в сроки от 1 - го дня до 10 - ти и до 3 - х месяцев ежедневно. Выбор дозы отвара исходил от дозы для человека - 50мл 3 раза в день, что в перерасчете на экспериментальных животных составляло: для белых крыс - 2,14мл/кг, белых мышей - 0,21мл/кг. При изучении острой токсичности отвар вводили в максимально возможном объеме крысам 2 - 3мл, мышам - 1 - 1,5мл. При определении острой токсичности наблюдение за животными проводили в течение 3 - х суток. За это время не отмечено каких-либо изменений в поведенческих реакциях, внешнего вида, аппетита по сравнению с контрольной группой животных. По истечению срока наблюдения подопытных животных умерщвляли эфирным наркозом и брали внутренние органы (желудок, 12-перстная и тонкая кишки, печень, почки) для патоморфологических исследований. При последних установлено, что отвар из биостимулирующего сбора трав вызывает в 12-перстной и тощей кишках обратимые морфологические сдвиги, которые можно расценивать как функционально реактивные в ответ на действие отвара. Хроническая токсичность отвара изучалась на белых крысах, которым ежедневно однократно в течение 90сут вводили в желудок отвар в дозе 2,14мл/кг массы животных. Через каждые 30сут проводили исследование состава периферической крови. За период наблюдения за животными отвар не вызывал гибели животных, не отмечалось видимых изменений в их поведении и общем состоянии. Динамика изменений показателей состава периферической крови крыс представлена в табл.2, 3. Из табл.2, 3 видно, что к окончанию срока наблюдения отвара у животных увеличивалось количество эритроцитов, лимфоцитов, моноцитов, содержание гемоглобина. Причем это отмечалось как у взрослых, так и молодых неполовозрелых крыс. При морфологическом исследовании тимуса, лимфоузлов, щитовидной железы, пищевода, желудка, тонкого кишечника, печени, поджелудочной железы, почек и половых органов крыс установлено, что после 90-суточного введения отвара не выявлено отклонений от физиологических норм. Изучалось влияние отвара на физическую и психическую работоспособность животных на белых мышах и крысах. Оценка действия отвара на умственную работоспособность проводилась в тестах условной реакции пассивного и активного электроболевого избегания [5, 6]. Результаты опытов приведены в табл.4. В опытах на белых мышах изучалась иммунологическая реактивность организма на воздействие отвара. Показатели иммунного ответа проводили по утвержденным методам [7, 8]. Полученные результаты приведены в табл.5. Из таблицы видно, что трехнедельное введение отвара не меняет характер и интенсивность иммунного ответа интактных животных. В то же время, в течение первых 3сут после введения отвара, отмечается снижение титров гемолизинов. Применение отвара способствует нормализации процесса антителообразования на 7 - е сут после введения препарата, что говорит о возможном иммуностимулирующем влиянии отвара из предлагаемого сбора лекарственных трав. Естественно, при изучении лечебных свойств лекарственных растений, необходима оценка аллергенных и антиаллергических свойств. Оценка этих показателей проводилась на морских свинках. Аллергенные свойства отвара оценивались по реакции гиперчувстви тельности "замедленного типа" [9, 10]. Полученные результаты приведены в табл.6. Из табл.7 видно, что отвар не обладает выраженной сенсибилизирующей активностью. При оценке гипосенсибилизирующей активности отвара использовали модель с эталонным аллергеном 2,4динитрохлорбензолом. Опыты проводили на морских свинках. Полученные результаты приведены в табл.7. Из таблицы видно, что отвар обладает антиаллергенной активностью. Известно, что многие лекарственные растений обладают антиоксидантной активностью. Поэтому нами проводилась экспериментальная оценка антиоксидантной активности предлагаемого сбора из лекарственных трав. Воздействие на организм световой энергии, альфа частиц, гамма лучей вызывает образование свободных радикалов, что влечет за собой повышение интенсивности перекисного окисления липидов. В экспериментах были задействованы 4 группы белых крыс: 1 - я группа, получавшая отвар в течение 3 - х недель; 2 - я получала гаммаоблучение; 3 - я - животные подвергались гаммаоблучению, а затем получали отвар в течение 7 ми дней; 4 - я группа - контрольная. Доза облучения 1 Грэй. Достоверные различия наблюдали по трем параметрам хемолюминисценции во 2 - й группе животных (гамма-облучение) по сравнению с контрольными: возрастание общей светосуммы (S), что говорит об увеличений вновь образовавшихся перекисных радикалах (ROO); подъем высоты общей вспышки расценивается как увеличение содержания промежуточных продуктов перекисного окисления липидов; наблюдавшееся, по сравнению с контролем, увеличение значения H свидетельствует о повышенной способности липидов к перекисному окислению (табл.8). Имеются также достоверные различия между 1 - й и 2 - й группами животных по тем же показателям в сравнении с контролем уменьшение H в 3 - й группе по сравнению со 2 - й расценивалось как снижение способности липидов к перекисному окислению. Описанные выше данные, как и результаты исследований уровня малонового альдегида (табл.9), свидетельствуют о повышении интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ). Таким образом, результаты исследований показали о благоприятном влиянии отвара на состояние свободнорадикальных процессов в сыворотках крови облученных животных. Излучалось влияние отвара на сердечнососудистую деятельность белых крыс. С этой целью снималась электрокардиограмма (ЭКГ) в 3м стандартном отведении. За 10мин до снятия ЭКГ крыс обездвиживали эфирным наркозом. Исследования проводились на половозрелых и неполовозрелых животных линии Вистар. При длительном (90сут) введении отвара в течение месяца ЭКГ регистрировали в исходном состоянии, а затем через 30, 60 и 90сут после первого введения - на 1 - е сут, через 1 и 2 месяца после завершения курсового введения отвара. Полученные результаты приведены в табл.10. Из таблицы видно, что при длительном введении отвара в организм животных статистически достоверные изменения параметров ЭКГ отсутствовали. При изучении биостимулирующей деятельности биологически активных веществ нельзя обойти функциональные изменения в печени. С этой целью изучалась желчеотделительная и антитоксическая функция печени. Опыты проводили на белых беспородных крысах массой 180 - 200г обоего пола. Животные были разделены на 2 группы - опытную и контрольную. Первая получала отвар перорально в течение 30сут ежедневно 1 раз в день до кормления, вторая аналогичным образом водопроводную воду. Желчь брали из желчного протока в остром опыте под барбамиловым наркозом с помощью катетера в течение 4 - х ч. Собирали часовые порции желчи. Измеряли общее количество желчи и определяли содержание в ней желчных кислот и холестерина (11), а также рассчитывали скорость желчеотделения. Результаты представлены в табл.11. Полученные результаты свидетельствуют о тенденции отвара увеличивать количество отделяемой желчи с одновременным снижением содержания желчных кислот и холестерина в ней. Антитоксическую функцию печени оценивали по продолжительности гексеналового сна белых крыс линии Вистар массой 180 - 220г. 5% водный раствор гексенала вводили внутрибрюшинно в дозе 80мг/кг. Выраженность сна учитывали по времени нахождения животных в боковом положении. Животные были разделены на 2 группы: 1 - я контроль, которым вводили только гексенал, 2 - й группе вводили вн утрижелудочно отвар в течение 3-х недель 1 раз в сутки по 0,5мл. Результаты представлены в табл.12. Из таблицы видно, что многократное введение отвара приводило к достоверному уменьшению продолжительности гексеналового сна, а это свидетельствует об увеличении антитоксической функции печени. Полученные экспериментальные данные при изучении отвара из предлагаемого сбора лекарственных растений свидетельствуют о том, что он не обладает токсическим влиянием на жизненно важные органы и не оказывает аллергизирующего действия на организм животных при длительном его введении; способствует усилению желчеотделения; повышает антитоксическую функцию печени; проявляет антиаллергические свойства; приводит к увеличению количества эритроцитов, содержания гемоглобина в периферической крови, уменьшает уровень эозинофиллов; повышает физическую работоспособность. После рентгеновского облучения действие отвара характеризовалось нормализацией перекисного окисления липидов, гуморального иммунного ответа. Ряд показателей на половозрелых и неполовозрелых животных (состав периферической крови и сердечная деятельность) свидетельствуют о возможности использования отвара в клинической практике, с учетом возрастного аспекта, с целью повышения защитных функций организма принеблагоприятных факторах воздействия на него условий внешней и вн утренней среды, в том числе и при воздействии ионизирующего излучения. Материалы об экспериментальном изучении отвара из сбора трав будут представлены, после установления приоритета заявки на изобретение, в Фармакологический комитет МЗ Украины с целью разрешения клинического изучения.