Спосіб лікування або профілактики імунозапальних хвороб шкіри або кишечнику у ссавців та фармацевтична композиція, що використовується в ньому

1. Способ лечения или профилактики иммуновоспалительных заболеваний кожи или кишечника у млекопитающих, нуждающихся в лечении, предусматривающий введение эффективного количества активного агента оральным, парентеральным, интраназальным, интрабронхиапьным, местным или ректальным путём, отличающийся тем, что в качестве активного агента используют рапамицин. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что иммуновоспалительными заболеваниями кожи являются псориаз, диффузный нейродерматит, контактный дерматит, экземный дерматит, себорейная экзема, плоский лишай, пузырчатка, пемфигоид ные пузыри, врождённый буллезный эпидермолиз, крапивница, ангионевротический отёк, васкулитид, эритема или кожная эозинофилия. 3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что иммуновоспалительными заболеваниями кишечника являются язвенный колит, болезнь Крона, язвенный проктит. 4. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что рапамицин применяют в сочетании с циклоспорином А 5. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики иммуновоспалительных заболеваний кожи или кишечника у млекопитающих, включающая активный агент и фармацевтически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что активным агентом является противоиммуновоспалительно эффективное количество раламицина 6. Композиция по п. 5, отличающаяся тем, что иммуновоспалительными заболеваниями кожи являются псориаз, диффузный нейродерматит, контактный дерматит, экземный дерматит, себорейная экзема, плоский лишай, пузырчатка, пемфигоидные пузыри, врождённый буллезный эпидермолиз, крапивница, ангионевротический отек, васкулитид, эритема или кожная эозинофилия. 7 Композиция по п 5, отличающаяся тем, что иммуновоспалительными заболеваниями кишечника являются язвенный колит, болезнь Крона, язвенный проктит. 8. Композиция по любому из пп. 5-7, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит противоиммуновоспалительно эффективное количество циклоспорина А. Изобретение относится к области медицины, в частности, к способам лечения или профилактики воспалительных кожных или кишечных заболеваний у млекопитающих. Заболевания кожи такие, как контактная гиперчувствительность, диффузный нейродермит и псориаз, характеризуются гиперпролиферативными и воспалительными кожными расстройствами. Значительная часть населения страдает такими расстройствами; псориазом, например, страдает приблизительно 2% населения западных стран (Zibok, VA. Psoriasis: Hyperprotiferative // Inflammatory skindisorder, Drug Develop Res., т. 13, стр. 137146, 1988). Заболевания кожи человека типа псориаза характеризуются ги стоп атол огически различными структурами инфильтрации Т-клеток, Вклеток, моноцитов и гранулоцитов. Такие инфильтрации клеток лейкоцитов являются следствием экспрессии молекул межклеточной адгезии и высвобождения цитокина и хемотаксических факторов клетками, вырабатываемыми некроветворными органами (например, кератиноцитами) кожи, СМ О см 1 СМ С П 27742 которые в свою очередь увеличивают гиперплазию. Современное лечение иммунологически стимулированных кожных расстройств включает использование противовоспалительных агентов таких, как глкжокортикоиды и антипро-лиферативные агенты такие, как метотрексат, 5флюроурацил и ретиноиды. Недавно было предложено использовать иммуносупрессивный агент, циклоспорин А, чтобы улучшить состояние при псориазе (Ellis, J. American Med. Assoc, т. 256, стр. 3110-3116, 1986). Однако его эффективность при псориазе ограничивается высокой частотой нефротоксичности (Ellis, New England J. Med. т. 324, стр. 277-284, 1991) и обнаружением рецидивов после прекращения лечения циклоспорином А (Griffiths, J. Amer. Acad. Dermat, т. 23, с. 12421247, 1990). Как было показано, рапамицин, мэкроциклический триеновый антибиотик, продуцируемый Streptomyus hygroscopicus (Патент США № 3929992), принятый в качестве прототипа, предотвращает образование гуморальных (Ig Е-подобных) антител в ответ на аллергическое введение альбумина (Marlet, R., Can. Y. Physiol. Pharm, т. 55, с. 48, I977), подавляет активацию Т-клеток мыши (Staruch М., FASEB, т. 3, с. 3411, 1989) и увеличивает время функционирования трансплантатов при тканевой несовместимости (Moms R. Med. Scikes.T. 17,c.877,1989). В основу изобретения поставлена задача в способе лечения иммуновоспалительных заболеваний путем введения в организм больного противоиммуновоспалительного количества рапамицина обеспечить повышение эффективности лечения. В основу изобретения поставлена также задача создания фармацевтической композиции путем применения в качестве активного агента оптимального количества рапамицина для того, чтобы обеспечить повышение эффективности печения. Поставленная задача решается в способе лечения или профилактики иммуновоспалительных кожных или кишечных заболеваний у млекопитающих, нуждающихся в лечении или подверженных заболеваниям, тем, что млекопитающим назначают противоиммуновоспалительное количество рапамицина для приема оральным, парентеральным, внутриносовым, внутрибронхиальным, местным, трансдермальным или прямокишечным способом. При этом рапамицин применяют в сочетании с циклоспорином А. Поставленная задача решается также в композиции для лечения или профилактики иммуновоспалительных кожных или кишечных заболеваний у млекопитающих, включающая активный агент и фармацевтически приемлемый носитель, тем, что в качестве активного агента она содержит противоиммуновоспалительно эффективное количество рапамицина и фармацевтически приемлемый носитель. Композиция дополнительно может содержать противоиммуновоспалительно эффективное количество циклоспорина А. Причинно-следственная связь очевидна из нижеследующего описания. Рапамицин полезен для обеспечения ослабления симптомов, предотвращения развития или для подавления воспалений кожи и заболеваний кишечника. Как таковой, рапамицин эффективен при лечении таких заболеваний кожи, как псориаз, диффузный нейродермит, контактный дерматит, зкземный нейродермит, себорейная экзема, плоский лишай, пузырчатка, пемфигоидные пузыри, врожденный буллезный эпидермолиз, крапивница, ангионевротический отек, васкулитид, эритема, кожная эозинофилия и т. п. и заболеваний кишечника таких, как воспаление кишечника. Эффект рапамицина на кожу и кишечные заболевания определяется при помощи двух in vivo стандартных фармакологических процедур испытаний на животных, моделирующих иммуновоспалительные заболевания кожи и кишечника, наблюдаемые у млекопитающих. Используемые процедуры и полученные результаты описаны ниже Первая in vivo стандартная фармакологическая процедура испытаний предназначена для измерения эффекта рапамицина на воспаление кожи, измеряемого при помощи предотвращения вызванного тетраде ка ной л форбол ацетатом (ТРА) отека уха у мышей Вебстера. С целью сравнения оценивали также эффект циклофосфамида, циклоспорина (CSA), индометацина и BW755 С. Ниже кратко описана используемая процедура. Самок мыши Суисс Вебстер (Букшир, в возрасте 8 месяцев) разбивали на группы по шесть животных Тетрадеканоилфорбил ацетат (ТРА) растворяли в ацетоне в концентрациях 200 мкг/мл. Каждая мышь получала 4 мкг/ухо ТРА в правое ухо. Эти субоптимальные дозы воспалительного агента вводили при помощи автоматической пипетки в 10 мкл объемах как в наружную, так и внутреннюю поверхности уха. В левое (контрольное) вводили ацетон или носитель. Препараты применяли местным способом в ацетоне, а в некоторых случаях использовали 95 % этанол, чтобы растворить препарат перед разбавлением ацетоном. Режим для препарата местного применения состоял в следующем; препараты применяли через 30 минут после обработки ТРА. Измерения отека осуществляли с использованием циркулей типа Одитест. Толщину правого и левого ушей в общем случае измеряли в единицах 0,01 мм через 4 часа после применения ТРА. Отек уха вычисляли при помощи вычитания толщины левого уха (контрольное с носителем) из толщины правого уха (обработанное ухо) Полученные результаты при осуществлении стандартной фармакологической процедуры испытания с отеком уха, вызванным ТРА, приведены в помещенной ниже таблице. 27742 Группа обработки Доза (ляг/ухо) Ср отек (ым2±ССО) Изменение % 28,3±1,1 Контрольный Рапамицин 0,25 17,8±4,1 -37,1 * Рапамицин 1,0 12,0±2,5 -57,6 * Циклофосфамид 0,25 16,5±3,1 -41,7* Циклофосфамид 1,0 15,0±2,4 -47,0* Циклоспорин А 0.25 23,8+2,0 -15,9 Циклоспорин А 1,0 26,0±1,3 -7,1 Индометацин 0,5 12,0±2,3 -57,6* BW 755C 0,5 12,0±2,4 -57,6* BW 755C 1,0 12,7+1,4 -55,1* •статистически значимое /рс0,05/ отличие от контрольной мыши Результаты этого стандартного фармакологического испытания показали, что рапамицин существенно (рсО,О5) предотвращает острую воспалительную реакцию после местного применения ТРА. Циклоспорин А, ишлуносупрессивный агент, в общем случае сравнимый с рапамицином, предотвращал воспалительную реакцию в намного меньшей степени. Во втором in vivo стандартном фармакологическом испытании измеряли воздействие рапамицина на предотвращение вызванной оксазалоном контактной гиперчувствительности ушей у мышей. В этой процедуре испытаний изучали воспалительную реакцию, наблюдаемую при иммуновоспалительных заболеваниях кожи и кишечника у млекопитающих. Ниже кратко описана процедура, используемая при этом, и полученные результаты. С целью сравнения использовали также дексаметазон и циклоспосрин А. Самок мышей Суисс Вебстер (в возрасте 8 недель) разбивали на группы по 6 животных и обрабатываемую область брили. Мышей делали чувствительными к оксазолону (4-этоксимети лен-2-фенил-оксазол-5-ону) при помощи введения 100 мкл 2% раствора в 95% спирте непосредственно на бритую область брюшка, используя автоматическую пипетку, и растирали оставшийся оксазолон по коже при помощи круглой деревянной палочки. Спустя шесть дней после этого каждой мыши вводили 20 мкл 2% раствора оксазопона в 95% спирте в правое ухо (10 мкл в каждую сторону) и 20 мкл только спирта в левое ухо. Соединения для местного применения приготавливали в ацетоне и применяли в правое ухо через 30 минут после введения; ацетон (носитель) вводили в левое ухо. Соединения для стоматического присенения суспендировали в 0,5 мл 0,5% мет ил целлюлозы и давали за десять минут до введения. Измеряли толщину каждого уха в (мм х 10 2 ) через 24 и 48 часов после введения, используя циркуль типа Одитест. Размер отека вычисляли при помощи вычитания толщины левого уха из толщины правого уха. Воздействие препарата определяли при помощи вычисления изменения в процентах от контрольного испытания в каждый момент времени. Были получены следующие результаты. 27742 Соединение Доза Применение Отек (ммх 10"2+ст.ош.) Контрольный 34,7±2,9 Не чувствительные Изменение, % 4,2±1,3 Рапамицин 20 мг/кг через рот 26,8±5,6 -22,6 Рапамицин 0,5 мг/ухо местное 9,7±3,4 -72,1* Циклоспорин А 50 мг/кг через рот 27,5±3,9 -20,7 Циклоспорин А 1,0 м г/ухо местное 4,7±1,5 -86,5* Дексаметазон 1 мг/кг через рот 25,8±4,2 -25,5 Дексаметазон 0,1 м г/ухо местное 1,2±0,4 -96,6* Результаты этой in vivo стандартной фармакологической процедуры относительно иммуновоспалительных заболеваний кожи и кишечника показали, что рапамицин предотвращал воспалительные изменения в ответ на вызванное оксазалоном воспаление. Аналогичные результаты были отмечены для дексаметазона и циклоспорина А. В заключение отметим, что результаты этих стандартных фармакологических процедур испытания подтверждают, что рапамицин эффективен при лечении иммуновоспалительных расстройств кожи и кишечника у млекопитающих. Как таковой, рапамицин полезен при лечении таких заболеваний кожи, как псориаз, диффузный нейродермит, контактный дерматит, экземный дерматит, себорейная экзема, плоский лишай, пемфигоидные пузырьки, врожденный буллезный эпидермолиз, крапивница, ангионевротический отек, васкулитид, эритема, кожная эозинофилия и т. п. и заболеваний кишечника таких, как воспаление кишечника. Как было установлено, рапамицин действует синергетически с циклоспорином, как in vitro, так и in vivo. Например, Кахан показал, что рапамицин значительно увеличивает ингибиторные эффекты циклоспорина А при активации человеческих периферийных лимфоцитов фитогемагглютинином, анти-СЭз моноклинальным антителом, и смешанной лимфоцитной реакцией. Циклоспорин А усиливал эффект рапамицина на пролиферацию зависящих от IL-2 и IL-6 лимфокина линий клеток. Кроме того, комбинация рапамицин/циклоспорин усиливает иммуносупрессию реакций отторжения у крыс относительно гетеротопных сердечных аллотрансплантатов, используя концентрацию, в которой каждый из них отдельно неэффективен (Transplantation, т. 51, с. 232, 1991) Как таковой, рапамицин может быть также использован в комбинации с циклоспорином А для лечения кожных расстройств таких, как псориаз, диффузный нейродермит, контактный дерматит, экземный дерматит, себорейная экзема, плоский лишай, пузырчатка, пемфигоидные пузырьки, врожденный буллезный эпидермолиз, крапивница, ангионевротический отек, васкули тид, эритема, кожный эпидермолиз и т. п. и кишечных заболеваний таких, как воспаление кишечника. Когда используют только рапамицин и рапамицин в комбинации с циклоспорином А при лечении иммуновоспалений кожи и кишечных заболеваний, то их можно применять чистыми или с фармацевтическим носителем к млекопитающему. Фармацевтический носитель может быть твердым или жидким. Твердый носитель может включать один или несколько материалов, которые могут также действовать как вкусовые агенты, смазочные агенты, сольюбилизаторы, суспендирующие агенты, наполнители, вспомогательные агенты для прессовки, связывающие агенты или агенты для разрыхления таблеток; он может быть также материалом, образующим оболочку. Для порошков носителем является тонко измельченный твердый материал, который находится в смеси с тонко измельченным активным ингредиентом. В таблетках активный ингредиент смешивают с носителем, обладающим необходимыми свойствами для прессовки, в соответствующих пропорциях и прессуют в заданных форме и размерах. Порошки и таблетки в предпочтительном варианте содержат до 99% активного ингредиента. Соответствующие твердые носители включают, например, фосфат кальция, стеарат магния, тальк, сахар, лактозу, декстрин, крахмал, желатин, целлюлозу, метил целлюлозу, натрий карбоксиметил целлюлозу, поливинилпирролидин, парафины с низкой температурой точки плавления и ионообменные смолы. Жидкие носители используют для получения растворов, суспензий, эмульсий, сиропов, эликсиров и композиций под давлением. Активный ингредиент может быть растворен или суспендирован в приемлемом с фармацевтической точки зрения жидком носителе таком, как вода, органический растворитель, смесь того и другого, или приемлемых с фармацевтической точки зрения маслах или жирах. Жидкий носитель может содержать другие необходимые фармацевтические добавки такие, как сольюбилизаторы, эмульгаторы, буферы, консервирующие агенты, вкусовые 27742 агенты, ароматизирующие агенты, суспендирующие агенты, загущающие агенты, красящие агенты, регуляторы вязкости, стабилизаторы или осморегуляторы. Соответствующие примеры жидких носителей для стоматического и парентерального применения включают воду (в частности, содержащую добавки, перечисленные выше, например, производные целлюлозы, в предпочтительном варианте раствор натрий карбоксиметил целлюлозы), спирты (включающие одноатомные спирты и многоатомные спирты, например, гликоли) и их производные, и масла (например, фракционированное кокосовое масло и арахисовое масло). Для парентерального применения носителем может быть также маслянистый сложный зфир такой, как этил олеат и изопропил миристат. Стерильные жидкие носители используют в стерильных жидких композициях для парентерального применения Жидкий носитель для композиций под давлением может быть галогенизированным углеводородом или другим, приемлемым с фармацевтической точки зрения, распыляющим агентом. Жидкие фармацевтические композиций, которые являются стериальными растворами или суспензиями, могут быть использованы, например, для внутримышечной, внутрибрюшинной или подкожной инъекций. Стерильные растворы могут быть применены также внутривенным способом. Такое соединение может быть также применено стоматически либо в жидкой, либо в твердой форме. Рапамицин, отдельно или в комбинации с циклоспорином А, может быть применен прямокишечным способом в форме известных суппозиториев. Для применения внутриносовым или внутрибронхиальным способом в форме ингаляции или инсуфляции соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, могут быть включены в водные или частичное водные растворы, которые могут быть затем использованы в форме аэрозоли. Соединения настоящего изобретения могут быть также применены через кожу через использование повязки (наклейки), содержащей активное соединение и носитель, который является инертным относительно активного соединения, нетоксичным относительно кожи и которая позволяет обеспечить систематическое поглощение агента в поток крови через кожу. Носитель может иметь любую форму такую, как кремы и мази, пасты, гели и "закрытые" устройства. Кремы и мази могут быть вязкими жидкостями или полутвердыми эмульсиями одного из типов: масло в воде или вода в масле. Можно также использовать пасты, состоящие из поглощаемых порошков, диспергированных в нефтепродуктах или гидрофильных нефтепродуктах, содержащих активный ингредиент. Можно использовать самые разнообразные закрытые средства, чтобы обеспечить высвобождение активного ингредиента в кровяной поток, такие как полупроницаемые мембраны, покрывающие резервуар, содержащий активный ингредиент с носителем или без него, или матрицы, содержащие активный ингредиент. Из литературы известны также другие закрытые средства. Рапамицин, как таковой или в комбинации с циклоспорином А может быть применен местным способом в форме раствора, кремации лосьона при помощи смешения с приемлемыми с фармацевтической точки зрения носителями, содержащими 0,1-5 процентов, в предпочтительном варианте 2%, активного соединения Дозировка зависит от конкретной используемой композиции, способа применения, серьезности симптомов и состояния пациента, подвергающегося лечению. На основе результатов, полученных в стандартных фармакологических процедурах испытаний, предполагаемые ежедневные дозы активного соединения (которым является только рапамицин или рапамицин в комбинации с циклоспорином А) должна составлять 0,001-100 мг/кг, в предпочтительном варианте от 0,1 до 50 мг/кг, а в более предпочтительном варианте от 0,3 до 25 мг/кг. Лечение в общем случае начинается с малых доз, меньших оптимальной дозы соединения. Затем дозу увеличивают до тех пор, пока не будет получен оптимальный эффект при сложившихся обстоятельствах; точные дозы для стоматического, парентерального, носового или внутрибронхиального применения определяются лечащим врачом на основе опыта, приобретенного при лечении отдельных пациентов. В общем случае, рапамицин в наиболее предпочтительном варианте применяют в концентрации, которая в общем случае будет обеспечивать эффективные результаты без нанесения какого-либо вредного или неблагоприятного побочного эффекта, и он может быть применен либо в форме одной дозы, либо, если это необходимо, доза может быть разделена на отдельные поддозы, которые применяют в соответствующее время в течение дня. ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Бульв. Лесі Українки, 26, Київ, 01133, Україна (044) 254-42-30, 295-61-97 Підписано до друку S ОУ 2001 р. Формат 60x84 J/8. Обсяг USt обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам,_ УкрІНТЕІ Бул. Горького, 180, Київ, 03680 МСП, Україна (044) 268-25-22