Штучне живильне середовище для вирощування шовкопрядів

Штучне живильне середовище для вирощування шовкопрядів, що містить порошок з листя дуба черешкового, порошок з шроту сої, глюкозу, вітамін С, порошок з целюлози, сорбінову кислоту, ретанол-ацетат, рибофлавін, тіамінбромід, агар-агар, нікотинамід і воду, яке відрізняється тим, що додатково містить комплекс фітоекдистероідів і складається з 5оксіекдистерону, екдистерону, 1 - оксіекдистерону, 26 - оксіекдистерону в вагових співвідношеннях 1 75 1 0,20, біологічно активну суміш, що містить лізин - 10,14-12,10%, гістидин - 1,87-2,28%, арганін - 6,75-7,36%, аспарагінову кислоту - 7,01-7,77% треонін - 4,36-5,70%, серин - 2,99-3,88%, глютамінову кислоту - 5,00-5,49%, пролін - 7,88 8,66%, гліцин - 8,82-9,47%, аланін - 12,48-13,38%, цистеїн - 1,76-1,86%, валін - 8,34-6,29%, метіонін 3,06-2,30, ізолейцин - 4,78-4,00%, лейцин - 4,784,00%, тирозин -1,65-1,00%, фенілаланін -5,844,50%, цинкову сіль 3 - метил піридину при наступному ВМІСТІ компонентів, маса % Листя дуба 20,57-28,44 черешкового 2,04-2,88 Порошок з шроту сої 2,03-2,54 Глюкоза 2,35-2,89 Вітамін С 4,18-5,80 Порошок з целюлози Цинкова сіль 30,03-0,05 метилпіридину 0,04-0,09 Сорбінова кислота 2,52-3,28 Агар-агар 0,03-0,05 Ретанол-ацетат 0,03-0,06 Рибофлавін 0,02-0,04 Тіамш-бромід 0,02-0,04 Нікотинамід БІОЛОГІЧНО активна суміш Комплекс фітоекдистероідів Вода 0,29-0,39 О 0,0003-0,0005 65,8497-53,4495 00 ю Винахід відноситься до лісового і сільського господарств, конкретно до шовківництва, і може використовуватись при штучному вирощуванні шовкопрядів в лабораторіях і вигод івельних пунктах при цілорічному і сезонному їх вирощуванні, при випробуванні біологічної і ентомопатогенної активності різноманітних мікробіологічних препаратів в лабораторних умовах, а також для продукування біологічних сполук на основі культури клітин або живого організму шовкопряда в цілому Відоме живильне середовище для вирощування дубового шовкопряда [А с 1724141 СССР, МКИ А01К67/04 Питательная среда для выращивания дубового шелкопряда / Н С Мороз (СССР) - №4777859/15, Заявлено 3110 89, Опубликовано 07 04 92 Бюл №13 - 8с ] контрольний варіант, в склад якого входять сушені листя дуба, порошок з шроту сої, агар-агар, вуглеводень і вода дистильована, в якості вуглеводню воно містить глюкозу а також аскорбінову кислоту, порошок з целюлози, сорбінову кислоту, ретанол-ацетат, рибофлавін, тіамш-бромід, нікотинамід і відходи з гонад кальмарів або риб при слідуючому співвідношенні компонентів, маса %, порошок з листя дуба черешчатого 18,96 - 26,67, порошок з шроту сої 2,19 - 3,04, агар-агар 2,56 - 3,34, глюкоза 2,50 3,33, аскорбінова кислота 2,46 - 3,33, порошок з целюлози 4,06 - 5,73, сорбінова кислота 0,07 0,10, ретанол-ацетат 0,05 - 0,07, рибофлавін 0,04 0,08, тіамш-бромід 0,03 - 0,06, нікотинамід 0,04 0,07, відходи з гонад кальмарів або риб 0,25 - 0,35, остаток - вода дистильована Відходи з гонад 00 (О 46858 кальмарів або риб містять в розрахунку на суху речовину, фосфору 4,12%, кальцію 2,69%, калію 0,43%, натрію 0,57%, білкова частина ВІДХОДІВ складає 53,01% і в неї входить, в розрахунку ммоль на один грам сухої маси лізин 356,21, гістидин 76,99, арганін 122,44, аспарагін 358,60, треонін 183,90, гліцин 329,74, аланін 292,00, цистеїн 29,27, валін 189,12, метіонін 36,57, ізолейцин 161,91, лейцин 265,83, тирозін 97,43, фенілаланін 115,40, ліпідна частина суміші, що складала 2,89% сухої маси, містить фосфоліпіди (лецитін, фосфатид іл-етаноламш, сфінгоміелін) 1,45%, холестерин 0,43%, ВІЛЬНІ жирні кислоти 0,86%, тригл іцерин 0,15 На вищеописаному живильному середовищі гусениць дубового шовкопряда до кінця третього віку вирощували в чашках Петрі, а починаючи з четвертого - в картонних або дерев'яних коробках, верхня частина яких закривалась поліетиленовою плівкою Живильне середовище у вигляді нарізаних шматочків розміщували на папір (типу фільтрувальний ) вподовж стінок Підстилку, екскременти і нез'їдений корм вилучали через кожні дві доби При догляді за гусеницями дотримувались загальних рекомендацій, що відображені в технології по вирощуванню дубового шовкопряда моновольтинної породи Поліський тасар в промислових умовах (Мороз Н С, Аретинская Т Б, Вититнев И В и др Рекомендации по выкормке дубового шелкопряда Полесский тассар в промышленных условиях Украинский НИИ научно-технической информации и технико-экономических исследований Госплана УССР, Киевское отделение №4270-88-304-110, Киев, 1988 - 5 с ) Недоліком відомого живильного середовища є те, що вигодівля на ньому гусениць шовкопрядів не забезпечує високий приріст їх маси, темпів розвитку, плодючості, виживання на протязі постембріонального розвитку Винаходом ставиться завдання збільшення приросту маси тіла гусениць, темпів їх розвитку, плодючості, виживання на протязі постембріонального розвитку при цілорічному і сезонному вирощуванні шовкопрядів в штучних умовах Поставлене винаходом завдання досягається тим, що склад штучного живильного середовища для ВИГОДІВЛІ гусениць шовкопрядів, в порівнянні з "відомим ЖИВИЛЬНИМ середовищем", додатково містить комплекс фітоекдістероідів і складається з 5-оксіекдістерону, екдістерону, 1-оксіекдістерону, 26-оксіекдістерону в вагових співвідношеннях 1 75 1 0,20, біологічно активну суміш, що містить лізин - 10,14 - 12,10%, гістидин - 1,87 - 2,28%, арганін - 6,75 - 7,36%, аспарагінова кислота - 7,01 7,77% треонін - 4,36 - 5,70%, серин - 2,99 - 3,88%, глютамінова кислота - 5,00 - 5,49%, пролін - 7,88 8,66%, гліцин - 8,82 - 9,47%, аланін - 12,48 13,38%, цистеїн - 1,76-1,86%, валін -8,34-6,29%, метіонін - 3,06 - 2,30, ізолейцин - 4,78 - 4,00%, лейцин - 4,78 - 4,00%, тірозин - 1,65 - 1,00%, фенілаланін - 5,84 - 4,50%, цинкову сіль 3метилпіридину при наступному ВМІСТІ компонентів, маса % Листя дуба черешчатого 20,57 - 28,44 Порошок з шроту сої 2,04 - 2,88 Глюкоза 2,03 - 2,54 Вітамін С 2,35 - 2,89 Порошок з целюлози 4,18-5,80 Цинкова сіль 30,03 - 0,05 метилпіридину 0,04 - 0,09 Сорбінова кислота 2,52 - 3,28 Агар-агар 0,03 - 0,05 Ретанол-ацетат 0,03 - 0,06 Рибофлавін 0,02 - 0,04 Тіамш-бромід 0,02 - 0,04 Нікотинамід 0,29 - 0,39 БІОЛОГІЧНО активна суміш 0,0003 - 0,0005 Комплекс фітоекдістероідів 65,8497 - 53,4495 Вода Ефективність запропонованого штучного живильного середовища досліджували на китайському дубовому шовкопряді (Antheraea pernyi G -M) моновольтинної породи Поліський тасар і непарному шовкопряді (Оспепа dispar L) Закарпатської популяції Штучне живильне середовище для вирощування шовкопрядів готували слідуючим чином Свіжозібране листя дуба черешчатого для гусениць 1 - 3 віку заготовляли в першій половині червня, а для гусениць 4 - 6 віку - в першій половині липня Сушили листя загальноприйнятим способом на горищі або під спеціальним дахом з доброю вентиляцією, розкладаючи листя не більше як в три шари на цупкому папері Сушене листя зберігали не більше одного року в закритих паперових мішках в сухих неопалюваних приміщеннях з доброю вентиляцією Перед приготуванням штучного живильного середовища сушене листя подрібнювали за допомогою електромлинка до отримання однорідного тонко змеленого порошку Порошок з сушеного листя дуба, згідно варіантів граничних і середніх величин компонентів, представлених в таблиці, змішували з порошком шроту з сої, глюкозою, порошком з целюлози, сорбіновою кислотою, порошком біологічно активної суміші, охолодженим до + 50°С водяним розчином агар-агара, розчинами цинкової солі 3-метил піридину, сорбінової кислоти, ретанол-ацетату, рибофлавіну, тіамш-броміду, нікотинаміду, 5-оксіекдістерону, екдістерону, 1оксіекдістерону і 26-оксіекдістерону В отриману суміш штучного живильного середовища додавали невитрачений залишок води і ще раз ретельно перемішували до отримання однорідної консистенції Для отримання кормових пластинок, охолоджене до + 10°С штучне живильне середовище розкачували між поліетиленовою плівкою Стримані кормові пластинки, товщиною 1 - 1,5мм, скручували в поліетиленові рулони і зберігали в холодильнику при температурі + 2 4°С не більше 12 днів Готуючи штучне живильне середовище, в якості біологічно активної суміші використовували водний розчин люфілізованого автолізату суміші вільних амінокислот, отриманих в результаті дії протеолітичних ферментів на пілорічні придатки лососьових риб БІОЛОГІЧНО активна суміш в розрахунку на суху масу містить повний набір 46858 амінокислот, таких як лізин - 10,14 - 12,10%, гістидин - 1,87 - 2,28%, арганін - 6,75 - 7,36%, аспарагінова кислота - 7,01 - 7,77% , треонін - 4,36 - 5,70%, серин - 2,99 - 3,88%, глютамінова кислота - 5,00 - 5,49%, пролін - 7,88 - 8,66%, гліцин - 8,82 9,47%, аланін - 12,48 - 13,38%, цистеїн - 1,76 1,86%, валін - 8,34 - 6,29%, метіонін - 3,06 - 2,30, ізолейцин - 4,78 - 4,00%, лейцин - 4,78 - 4,00%, тірозин - 1,65 - 1,00%, фенілаланін - 5,84 - 4,50% Для гусениць 1 - 3 віку під час приготування штучного живильного середовища використовували порошок з сушеного листя дуба, зібраного в першій половині червня, а для гусениць 4 - 6 віку - в першій половині липня На протязі всього періоду ВИГОДІВЛІ гусениць вигодовували в дерев'яних або картонних коробках зверху закритих поліетиленовою плівкою Штучне живильне середовище, нарізане невеликими кусочками, розміщували на цупкому папері вподовж стінок вигодівельних коробок По мірі поїдання, штучне живильне середовище добавляли два рази на добу Екскременти і залишки корму вилучали з коробок через кожні дві - три доби На протязі всього періоду ВИГОДІВЛІ підтримували температуру повітря + 22 - 24°С, відносну вологість 80%, довжину світлового дня 14 - 16 годин і інтенсивність провітрювання два рази на добу При загальному догляді за шовкопрядами враховували загальні рекомендації відображені в технології по вирощуванню дубового шовкопряда моновольтинної породи Поліський тасар в промислових умовах (Мороз Н С , Аретинская Т Б , Вититнев И В и др Рекомендации по выкормке дубового шелкопряда Полесский тассар в промышленных условиях // Украинский НИИ научно-технической информации и техникоэкономических исследований Госплана УССР Киевское отделение №4270 - 88 - 304 -110, Киев 1988 -5С) Гусениць контрольних варіантів китайського дубового шовкопряда (Antheraea pernyi G -M) і непарного шовкопряда (Оспепа dispar L) вирощували на штучному живильному середовищі в склад якого входять сухі листя дуба, порошок з шроту сої, агар-агар, вуглевдень і вода дистильована, в якості вуглеводню воно містить глюкозу і додатково аскорбінову кислоту, порошок з целюлози, сорбінову кислоту, ретанол-ацетат, рибофлавін, тіамін-бромід, нікотинамід і відходи з гонад кальмарів або риб при слідуючому співвідношенні компонентів, маса %, порошок з листя дуба черешчатого 18,96 - 26,67, порошок з шроту сої 2,19 - 3,04, агар-агар 2,56 - 3,34, глюкоза 2,50 - 3,33, аскорбінова кислота 2,46 3,33,порошок з целюлози 4,06 - 5,73, Собшова кислота 0,07-0,10 Таблиця Вміст компонентів в штучному живильному середовищі, що використовувалось для ВИГОДІВЛІ гусениць дубового і непарного шовкопрядів дослідних варіантів Концентрація, маса % варіанти Назва компонентів А Листя дуба черешчатого Порошок з шроту сої Глюкоза Вітамін С Порошок з целюлози Цинкова сіль 3-метилпіридину Сорбінова кислота Агар-агар Ретанол-ацетат Рибофлавін Тіамін-бромід Нікотинамід Комплекс фітоекдістероідів БІОЛОГІЧНО активна суміш Вода В С D Е 15,08 1,66 1,78 1,63 2,85 0,01 0,02 1,74 0,01 0,02 0,01 0,01 0,0001 0,11 75,0699 20,57 2,04 2,03 2,35 4,18 0,03 0,04 2,52 0,03 0,03 0,02 0,02 0,0003 0,29 65,8497 23,65 2,41 2,35 2,58 4,97 0,04 0,06 2,85 0,04 0,04 0,03 0,03 0,0004 0,33 60,6196 28,44 2,88 2,54 2,89 5,80 0,05 0,09 3,28 0,05 0,06 0,04 0,04 0,0005 0,39 53,4495 35,12 3,44 3,65 3,89 6,80 0,07 0,11 4,01 0,07 1,00 0,09 0,09 0,0006 0,43 41,2294 ретанол-ацетат 0,05 - 0,07, рибофлавін 0,04 0,08, тіамін-бромід 0,03 - 0,06, нікотинамід 0,04 0,07, відходи з гонад кальмарів або риб 0,25 - 0,35, остаток - вода дистильована Відходи з гонад кальмарів або риб містять в розрахунку на суху речовину, фосфору - 4,12%, кальцію - 2,69%, калію - 0,43%, натрію - 0,57%, білкова частина ВІДХОДІВ складає 53,01% і в неї входить, в розрахунку ммоль на один грам сухої маси, лізин 356,21, гістидин - 76,99, аргінін -122,44, аспарагін 358,60, треонін - 183,90, гліцин - 329,74, аланін 292,00, цистеїн - 29,27, валін - 189,12, метіонін 36,57, ізолейцин - 161,91, лейцин - 265,83, тирозін - 97,43, фенілаланін - 115,40, ліпідна частина суміші, що складала 2,89% сухої маси, містить фосфоліпіди (лецитін, фосфатиділ-етаноламш, сфінгоміелін) 1,45%, холестерин 0,43%, ВІЛЬНІ жирні кислоти 0,86%, тригліцерин 0,15 На вищеописаному живильному середовищі гусениць дубового шовкопряда до кінця третього віку 46858 вирощували в чашках Петрі, а починаючи з четвертого - в картонних або дерев'яних коробках, верхня частина яких закривалась поліетиленовою плівкою Живильне середовище у вигляді нарізаних шматочків розміщували на папір (типу фільтрувального ) вподовж стінок Підстилку, екскременти і нез'їдений корм вилучали через кожні дві доби При догляді за гусеницями дотримувались загальних рекомендацій, що відображені в технології по вирощуванню дубового шовкопряда моновольтинної породи Поліський тасар в промислових умовах (Мороз Н С, Аретинская Т Б, Вититнев ИВ и др Рекомендации по выкормке дубового шелкопряда Полесский тассар в промышленных условиях Украинский НИИ научно-технической информации и технико-экономических исследований Госплана УССР, Киевское отделение №4270-88-304-110, Киев, 1988 -5с) Винахід ілюструється наступними фігурами Фіг 1 Розвиток (Оспепа dispar L ) при ВИГОДІВЛІ гусениць на штучному живильному середовищі варіант А - ряд 1, В - ряд 2, С - ряд З, D - ряд 4, Е ряд 5, контроль - ряд 6 Фіг 2 Розвиток (Antheraea pernyi G-M) при ВИГОДІВЛІ гусениць на штучному живильному середовищі варіант А - ряд 1, В - ряд 2, С - ряд З, D - ряд 4, Е - ряд 5, контроль - ряд 6 Фіг 3 Приріст маси за добу при ВИГОДІВЛІ гусениць (Оспепа dispar L) на штучному живильному середовищі варіант А - ряд 1, В - ряд 2, С - ряд З, D - ряд 4, Е - ряд 5, контроль - ряд 6 Фіг 4 Приріст маси за добу при ВИГОДІВЛІ гусениць (Antheraea pernyi G -M) на штучному живильному середовищі варіант А - ряд 1, В - ряд 2, С - ряд З, D - ряд 4, Е - ряд 5, контроль - ряд 6 Фіг 5 Виживання гусениць (Оспепа dispar L) при ВИГОДІВЛІ на штучному живильному середовищі варіант А - ряд 1, В - ряд 2, С - ряд З, D - ряд 4, Е - ряд 5, контроль - ряд 6 Фіг 6 Виживання гусениць (Antheraea pernyi G -M) при ВИГОДІВЛІ на штучному живильному середовищі варіант контроль - ряд 1, А - ряд 2, В ряд З, С - ряд 4, D - ряд 5, Е - ряд 6 Фіг 7 Плодючість непарного шовкопряда при вирощуванні гусениць на штучному живильному середовищі (середні величини з десяти повтори остей) Фіг 8 Плодючість дубового шовкопряда при вирощуванні гусениць на штучному живильному середовищі (середні величини з десяти повтори остей) На фігурах 1 і 2 наведені дані про вплив штучного живильного середовища на динаміку розвитку гусениць непарного (Оспепа dispar L) і дубового (Antheraea pernyi G -M) шовкопрядів Згідно отриманих результатів, найкращі показники розвитку гусениць одержані в варіантах В, С і D В цих варіантах розвиток гусениць другого віку непарного шовкопряда був на 10,44%, 12,35% і 10,01%, а гусениць першого віку дубового шовкопряда на 19,66%, 25,00% і 13,68% коротшим, ВІДПОВІДНО, в порівнянні з варіантом за відомим способом Підрахунки показують, що в варіантах В, С і D період розвитку гусениць на протязі п'яти ВІКІВ коротший на 135,84, 204 і 185,52 8 години у дубового шовкопряда і на 102,96, 146,44 і 117,36 години у непарного шовкопряда, ВІДПОВІДНО, в порівнянні з варіантом за відомим способом Згідно даних, представлених на фігурах 3 і 4, непарний і дубовий шовкопряди, при ВИГОДІВЛІ на запропонованому штучному живильному середовищі як при граничних, так і середніх величинах КІЛЬКОСТІ компонентів, що входять в склад середовища, по приросту маси гусениць за добу перевершили комах, вирощених в аналогічних умовах на штучному живильному середовищі варіанту за відомим способом Підсумок результатів досліджень показує, що подальше збільшення КІЛЬКІСНИХ величин компонентів штучного живильного середовища і зниження вмісту води в ньому, як це показано в варіанті Е, не збільшує суттєво приріст маси тіла гусениць за добу і з економічної сторони є недоцільним Динаміка виживання гусениць при ВИГОДІВЛІ непарного і дубового шовкопрядів на штучному живильному середовищі представлена на фігурах 5 і 6 Встановлено, що найкращі показники виживання гусениць шовкопрядів при ВИГОДІВЛІ на запропонованому штучному живильному середовищі в варіантах В, С і D Так, КІЛЬКІСТЬ виживших гусениць на кінець п'ятого віку у варіантах В, С і D у непарного шовкопряда на 26,02%, 35,01% і 20,30%, а дубового шовкопряда на 15,29%, 18,40% і 17,79%, ВІДПОВІДНО, була більшою в порівнянні з варіантом за відомим способом Дані, представлені на фігурах 7 і 8, свідчать про те, що плодючість непарного і дубового шовкопрядів при ВИГОДІВЛІ гусениць на дослідному штучному живильному середовищі значно більша в порівнянні з контролем Найбільша КІЛЬКІСТЬ ЯЄЦЬ була відкладена самицями з варіантів В, С і D Так, в варіантах В, С і D, самицями непарного шовкопряда було відкладено яєць на 21,01%, 28,00% і 23,40%, а дубового шовкопряда - на 18,65%, 23,43% і 21,04%, ВІДПОВІДНО, більше в порівнянні з варіантом за відомим способом Аналіз експериментальних досліджень, що виражені у вигляді цифрового матеріалу і розміщені у вигляді гістограм на фігурах 1 - 8, показує, що за всіма вивченими показниками ДОСЛІДНІ варіанти суттєво переважають показники варіанта за відомим способом Запропоноване в якості корму штучне живильне середовище для непарного і дубового шовкопрядів просте за своїм вмістом і не потребує спеціального обладнання для його приготування За рахунок застосування запропонованого штучного живильного середовища покращуються біологічні показники шовкопрядів, збільшується виживання гусениць на протязі розвитку, зменшується час розвитку в постембріональний період, значно збільшується приріст маси за добу гусениць при їх постійному або сезонному вирощуванні в штучних умовах, таким чином досягається новий позитивний ефект Дослідно - виробничі випробування штучного живильного середовища на дубовому шовкопряді, проведені на експериментальній базі по вирощуванню дубового шовкопряда при 46858 Кам'янському ЛІСНИЦТВІ Глибокського міжгосподарського лісгоспу Чернівецької області Встановлено, що використання штучного живильного середовища дозволяє скоротити термін розвитку шовкопряда в постембріональний період, підвищує виживання гусениць, збільшує приріст маси тіла гусениць і в кінцевому результаті значно збільшується вихід шовку - сирцю в розрахунку на один грам грени дубового шовкопряда Так, в результаті використання дослідного 10 штучного живильного середовища для вирощування шовкопрядів відмічено скорочення терміну розвитку гусениць на 151,33 години і збільшення виживання шовкопряда в постембріональний період розвитку на 27,43% ВІДПОВІДНО результатів випробування, за рахунок використання запропонованого штучного живильного середовища вдалося збільшити вихід шовку - сирцю в розрахунку на один грам грени на 20,63% ФІГ. 1 Фіг. 2 Фіг. З Фіг. 4 11 46858 12 3 4 Вік гусениць Фіг. 5 • Ряді ШРяд2 ЯРядЗ аРяд4 «Ряд5 аРядб Фіг. 6 Фіг. 7 •А.ретуі ІІІІІІ Фіг. 8 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044)456-20- 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71