Спосіб кількісного визначення заліза (іі) у фармацевтичній композиції

Спосіб кількісного визначення заліза (II) у фармацевтичній композиції, що включає суміш діючих та допоміжних речовин, шляхом розчинення 3 Відомий спосіб визначення кількісного складу багатокомпонентного лікарського засобу жарознижуючої та антиалергійної дії методом оберненофазової ВЕРХ з ультрафіолетовим спектрофотометричним детектором, де аналіз ведуть у режимі лінійного градієнта концентрації ацетонітрилу в рухомій фазі протягом аналізу з використанням як рухомої фази суміші ацетонітрилу з фосфатним буферним розчином, при чому при аналізі препарату жарознижуючого, антиалергічної дії, що містить аскорбінову кислоту (АК), парацетамол, фенілефрину г/г та допоміжну речовину, протягом аналізу складу рухомої фази змінюється від фосфатного буферного розчину з рН 3,0 до суміші ацетонітрилу з фосфатним буферним розчином з рН 6,8 у співвідношенні 1:4 за об'ємом [Патент Російської Федерації № 2342655, МПК G01N 33/15, G01N 33/00, G01N 30/34, G01N 30/36, бюл. «Изобретения. Полезные модели», опубл. 27.12. 2008]. Відомий спосіб одночасного кількісного визначення складу багатокомпонентних лікарських препаратів методом обернено-фазової ВЕРХ за допомогою ультрафіолетового детектора. У способі проводять аналіз препаратів, що містять: (1) парацетамол, пропіфеназон, кофеїн, фенобарбітал, кодеїну фосфат або (2) парацетамол, аскорбінову кислоту, кодеїну фосфат, фенілефедріну гідрохлорид, хлорфеніламіну малеат або (3) парацетамол, теофілін, кофеїн, фенобарбітал, ефедрину гідрохлорид або (4) кодеїну фосфат, ніпагін, ніпазол - в одну стадію в режимі лінійного градієнта, при цьому склад рухомої фази змінюється від фосфатного буферного розчину з рН 3,0 до суміші його з ацетонїтрилом в об'ємному співвідношенні 1:1 [Патент Російської Федерації № 2267115, МПК G01N21/33, G01N30/36, G01N30/34, опубл. бюл. «Изобретения. Полезные модели», 27.12. 2005]. Найбільш близьким до запропонованого є спосіб фотометричного визначення заліза (II) у розчинах чистих солей і штучних сумішей, що включає переведення заліза (II) в комплексне з'єднання з алюміноном в слабокислому середовищі. До розчину заліза (II) з певним рН (слабо кисле середовище) додають алюмінон, розчинення поверхнево 66532 4 активної речовини і води до 10 мл об'єму з подальшим нагріванням на водяній бані [Патент Російської Федерації № 2416791, МПК G01N 31/22, G01N 21/78, бюл. «Изобретения. Полезные модели», опубл. 24.04. 2011]. До причин, що перешкоджають у найближчому аналозі та відомих аналогах одержанню технічного результату, якого досягають у запропонованому способі, слід віднести те, що спосіб їх здійснення, апаратурне та реагентне оснащення не дозволяють у достатній мірі підвищити рівень чутливості і вибірковості кількісного визначення окремих речовин у багатокомпонентних сумішах, спростити спосіб їх здійснення. В основу корисної моделі поставлена задача створити спосіб кількісного визначення заліза (II) у багатокомпонентній фармацевтичній композиції, який би дозволив підвищити рівень чутливості і вибірковості кількісного визначення окремих речовин у багатокомпонентних сумішах, спростити спосіб його здійснення. Поставлена задача вирішується тим, що у способі кількісного визначення заліза (II) у фармацевтичній композиції, що містить суміш діючих та допоміжних речовин, шляхом розчинення заліза (II) у кислому середовищі, згідно з корисною моделлю, кількісне визначення заліза (II) здійснюють методом атомно-абсорбційної спектрометрії, перед розчиненням заліза (II) здійснюють спалення таблеток фармацевтичної композиції, після чого проводять розчинення одержаного сплаву у концентрованій соляній кислоті при нагріванні до 6070 °C, а вимірювання атомної абсорбції заліза (II) проводять у повітряно-ацетиленовому полум'ї при довжині хвилі 248 нм. Технічний результат, якого досягають при здійсненні корисної моделі, полягає у створенні способу кількісного визначення заліза (II) у багатокомпонентній фармацевтичній композиції, який би дозволив підвищити рівень чутливості і вибірковості кількісного визначення окремих речовин у багатокомпонентних сумішах, спростити спосіб його здійснення. 5 66532 6 Таблиця 1 Порівняльна характеристика найближчого аналога та заявленого засобу Найближчий аналог Аналіз Фотометричне визначення Fe(II) Агрегатний стан Розчин солей або штучних суміші Спалювання температура час Розчин Fe(II) Переведення розчину Fe в комплексний стан: додавання ПАВ приготування ПАВ додавання алюмінона додавання води нагрівання температура час додавання 2 мл буферного розчину с рН 4,6 Заявлений засіб Атомно-абсорбційне визначення Fe(II) Подрібнений порошок пігулок препарату (біля 5г) Спалювання при t=550 °C протягом 1 години Сплав розчиняють в 20 мл конц. НСl (1:4) при нагріванні (60-70 °C) протягом 30 хв., додають води до 200 мл, перемішують, відфільтровують, до 10 мл отриманого розчину додають до 100 мл 0.1N HCI + 1 мл ПАВ 3,5 мл 2 %-го розчину желатину + 2 мл 2 %-го розчину полівінілового спирту і доведення водою до 50 мл 1 мл розчину алюмінона до 10 мл на водяній бані при t=80-90 °C протягом 15 хв. — Умови вимірювання: Довжина хвилі  540 нм Переваги запропонованого способу визначенні атомної абсорбції заліза (II): 1) зростає чутливість визначення у порівнянні з відомими способами; 2) висока відтворюваність аналізу; 3) спосіб достатньо вибірковий, визначенню не заважають присутність у вітамінно-мінеральному препараті кальцію, цинку, а також вітамінів. Приклад: 248 нм (в повітряноацетиленовому полум'ї) Вимірювання проводили на спектрометрі атомної абсорбції (Varian 220 FS Double Beam AA (USA) забезпеченому лампою з порожнистим катодом специфічним для заліза. Атомний спектр поглинання був отриманий і досліджений при довжині хвилі 248.3 нм в повітряно-ацетиленовому полум'ї. Умови аналізу Параметри Довжина хвилі Ширина щілини Полум'я типу Регресія Побудова градуювального графіка Для побудови градуювального графіка використовували 1000 ррт стандартний розчин. До 10,0 мл стандартного розчину заліза для атомної абсорбції (фірми Sigma-Aldrich) додавали до 100 мл 0,1N HCl до 100 мл (розчин А), з отриманого розчину проводили наступні розбавлення: брали 2, 3, 4, 5 і 6 мл і розбавляли в мірних колбах місткістю 100 мл 0,1N HCl. Розчини аналізували з отриман 248.3 нм 0.2 нм Повітря / ацетилен лінійна ням не менше 5 вимірювань для кожного в діапазоні 50-150 % від номінальної концентрації. Концентрації заліза для градуювального графіка: 50.0, 75.0, 100.0, 125.0 і 150.0 % від номінального вмісту заліза в препараті, що відповідає Cst,i = 2.0, 3.0, 4.0, 5.0 і 6.0 ррт в кінцевому розчині (табл.2) і вимірюють атомну абсорбцію заліза в полум'ї повітря/ацетилен при довжині хвилі 248.3 нм. 7 66532 8 Таблиця 2 Градуювальні розчини Концентрація мг/л 2 3 4 5 6 1 0,0499 0,0729 0,0962 0,1190 0,1406 Паралельні вимірювання 2 3 4 0,0493 0,0502 0,0501 0,0731 0,0723 0,0737 0,0959 0,0951 0,0956 0,1194 0,1190 0,1195 0,1396 0,1412 0,1403 Побудову градуювального графіка проводили в нормалізованих координатах. Масу заліза (II) в грамах знаходять по градуювальному графіку (Фіг. 1). Параметри лінійності для графіків: Cі = а + b*А і де Ai - інтенсивність абсорбції при вимірюванні розчинів Fe для градуювання; Сі - концентрація Fe, в г/л. Коефіцієнт кореляції лінійної стандартної 2 кривої R > 0.997. Підготовка розчину зразка. Подрібнені таблетки препарату (близько 5 г) поміщають в тигель і спалюють при 550±5 °C в муфельній печі протягом 1 години. Сплав розчиняють в 20 мл концентрованої НСl (1:4) при нагріванні (60-70 °C) протягом 30 хв. Потім розчин переводять в мірну колбу місткістю 200 мл, доводять водою до мітки, перемішують, відфільтрують и розбавляють 10.0 мл отриманого розчину у мірній колбі місткістю 100 мл до мітки за допомогою 0.1N НСІ і вимірюють атомну абсорбцію заліза в полум'ї повітря/ацетилен при довжині хвилі 248 нм. З отриманого розчину готують 9 модельних сумішей з вмістом заліза: 50.0, 62.5, 75.0, 87.5, 5 0,0498 0,0722 0,0949 0,1195 0,1407 Середнє 0,0499 0,0728 0,0955 0,1183 0,1405 100.0, 112.5, 125.0, 137.5 і 150.0 % від номінального вмісту (28.7 міліграм в таблетці) (Фіг.2). По знайдених значеннях абсорбції, за вирахуванням абсорбції контрольного досліду, і відповідним ним масам заліза (II) в грамах будують градуювальний графік. Градуювальний графік будують для кожної партії проб. Обробка результатів. Обчислення результатів вимірювань проводили за формулою: C,мг 200мл 100мл 100мл     М ср (г / таб)  Рез(мг / таб) 1000мл Мзраз (г ) 10мл 10мл де: С - концентрація зразку, мг/мл Мзраз М ср - маса зразка, г - середня маса, г/таб LC - номінальне значення заліза, мг/таб. Вміст заліза у вітамінно-мінеральному комплексі Жестикер повинен бути в інтервалі від 25.2 до 32.2 мг. 9 66532 10 Таблиця 3 Результати аналізу лінійності стандартних розчинів заліза і їх статистична обробка № модельного розчину 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Ai/Ast Ci/Cst Ai/st/Ci/st*100 52.25 63.98 76.34 89.32 101.26 112.36 124.50 134.66 145.34 50.864 62.918 75.646 88.974 101.278 112.708 125.187 135.619 146.626 102.7284 101.6863 100.9104 100.3885 99.97899 99.68736 99.45317 99.29231 99.12333 Середнє, Z % S % Відносне стандартне відхилення, z  %  t(95%,8) * sz  186 * sz  , Відносний довірчий інтервал, As  % Критичне значення для збіжності результатів As Критичне значення систематичної погрішності  Систематична погрішність Критерій незначущості ~    / 3  2,25 / 3  0,75 2) якщо не виконується 1), то   1.15 100.36 1,21 2,25 1,12 1.15   Z  100 систематичної Загальний висновок про методику Таким чином, проведені дослідження підтвердили, щоспосіб кількісного визначення заліза (II) у багатокомпонентній фармацевтичній композиції, повністю виконує поставлена у корисній моделі 0.36 погрішності 1) Виконується Виконується Коректна задача, що дозволяє підвищити рівень чутливості і вибірковості кількісного визначення окремих речовин у багатокомпонентних сумішах, спростити спосіб його здійснення. 11 Комп’ютерна верстка Л. Купенко 66532 Підписне 12 Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП ―Український інститут промислової власності‖, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601