2-[5-(4-диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-n-[5-(4-метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол-2-іл]ацетамід, що виявляє протипухлинну активність

Реферат: 2-[5-(4-Диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4-метоксифеніл)-1,3,4оксадіазол-2-іл]ацетамід формули: O H N N S H3C O O N CH3 що виявляє протипухлинну активність. O N N O CH3 , UA 69858 U (54) 2-[5-(4-ДИМЕТИЛАМІНОБЕНЗИЛІДЕН)-2,4-ДІОКСОТІАЗОЛІДИН-3-ІЛ]-N-[5-(4-МЕТОКСИФЕНІЛ)1,3,4-ОКСАДІАЗОЛ-2-ІЛ]АЦЕТАМІД, ЩО ВИЯВЛЯЄ ПРОТИПУХЛИННУ АКТИВНІСТЬ UA 69858 U UA 69858 U 5 10 15 20 25 Корисна модель належить до синтезу нових гетероциклічних сполук і фармації, зокрема одержання біологічно активних сполук, що виявляють протипухлинну активність, і може бути використана в клінічній медицині як онкологічний лікарський засіб. Відомі лікарські засоби з протипухлинною активністю, наприклад, мюстофоран [Компендиум 2010 - лекарственные препараты / Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. - К.: МОРИОН, 2010. - С. Л-1023-Л-1024]. Мюстофоран - цитостатичний антимітотичний засіб, за хімічною будовою належить до похідних нітрозосечовини з алкілюючою та карбамілюючою дією. Цей лікарський засіб має необхідні лікувальні властивості, проте при його тривалому прийманні у пацієнтів спостерігаються численні побічні реакції, основні з яких мають гематологічний характер. При цьому можуть уражатись три лінії клітин крові, що супроводжується виникненням анемії, а також тромбоцитопенії і лейкопенії. Серед 5-арилзаміщених 1,3,4-оксадіазолів є ряд сполук з антинеопластичною активністю, з яких варто відзначити 5-(2-гідроксифеніл)-2,3-дигідро-1,3,4-оксадіазол-2-тіон [A. S. Aboraia, Н. М. Abdel-Rahman, N. М. Mahfouz, M. A. El-Gendy. Novel 5-(2-hydroxyphenyl)-3-substituted-2,3dihydro-l, 3,4-oxadiazole-2-thione derivatives: Promising anticancer agents. Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2006, 14, 1236-1246], а також ряд 3-аміноалкілпохідних на його основі. Для гетероциклічних похідних 4-тіазолідинону одним із пріоритетних напрямків фармакологічного скринінгу є пошук потенційних протипухлинних агентів. Серед них особливу увагу викликають 5-ариліден-3-(бензтіазол-2-іламіно)-2-тіоксотіазолідин-4-они [D. Havrylyuk, L. Mosula, B. Zimenkovsky, O. Vasylenko, A. Gzella, R. Lesyk. Synthesis and anticancer activity evaluation of 4-thiazolidinones containing benzothiazole moiety. European Journal of Medicinal Chemistry, 2010, 45, 5012-5021], які володіють високою протипухлинною активністю. Тому пошук нових синтетичних протипухлинних засобів із групи похідних тіазолідиндіону-2,4 з 1,3,4-оксадіазольним фрагментом у молекулах є актуальним для сучасної фармацевтичної і медичної хімії. В основу корисної моделі поставлено задачу створення ефективного протипухлинного засобу з низькими побічними явищами. Поставлена задача вирішується тим, що синтезований 2-[5-(4-диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4-метоксифеніл)-1,3,4оксадіазол-2-іл]ацетамід формули: O H N N S H3C 30 35 40 45 50 O O O N N N O CH3 CH3 , що виявляє протипухлинну активність. Синтезована сполука є жовтим кристалічним порошком, розчинним у ДМСО і ДМФА, малорозчинним в оцтовій кислоті, нерозчинним в спирті, ацетоні, воді та ефірі. Для доказу складу і структури синтезованої сполуки були використані відомі фізико-хімічні методи, зокрема спектроскопія ПМР та елементний аналіз. Одержані результати свідчать про відповідність синтезованої сполуки заявленій. Заявлену сполуку одержують в результаті алкілування калійної солі 5-(4диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідину 2-xлopo-N-[5-(4-метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол2-іл]ацетамідом. Реакцію проводять в середовищі ДМФА та етанолу (1:1) в присутності калію йодиду як каталізатора. Для визначення активності 2-[5-(4-диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5(4-метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол-2-іл]ацетаміду попередньо проведено прескринінг протипухлинної активності на 58 лініях ракових клітин людини, діючи на них лише однією дозою -5 препарату (10 моль/л) [A. Monks, D. Scudiero, P. Skehan et al. Feasibility of a high-flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines. J. Nat. Cancer Inst. 1991, 83(11), 757-766]. За результатами проведеного прескринінгу 2-[5-(4-диметиламінобензиліден)-2,4діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4-метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол-2-іл]ацетаміду встановлено, що середнє значення відсотку росту клітин відносно контролю становить 67,20 % та зазначена сполука характеризується певною специфічністю дії до окремих ліній раку ЦНС (SF-295: 1 UA 69858 U 5 10 15 20 13,78 %), раку нирок (САКІ-1:15,46 %), раку яєчників (NCI/ADR-RES:24,53 %) та недрібноклітинного раку легень (NCI-H460:26,13 %). На основі результатів прескринінгу проведено ґрунтовний протипухлинний in vitro скринінг [R. Н. Shoemaker. The NCI60 Human Tumour Cell Line Anticancer Drug Screen. Nature Reviews / Cancer, 2006, 6, 813-823], який полягав у тестуванні сполуки, що заявляється, на 59 лініях людських ракових клітин у мінімум 5 концентраціях при 10-кратному розведенні. Протиракова активність 2-[5-(4-диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол-2-іл]ацетаміду вивчалась на клітинних лініях лейкемії (Leukemia) (CCRF-CEM, HL-60(TB), К-562, MOLT-4, RPMI-8226), недрібноклітинного раку легень (Non-Small Cell Lung Cancer) (A549/ATCC, EKVX, HOP-62, HOP-92, NCI-H226, NCI-H23, NCIH322M, NCI-H460, NCI-H522), епітеліального раку (Colon Cancer) (COLO 205, HCC-2998, HCT116, HCT-15, HT29, KM12, SW-620), раку ЦНС (CNS Cancer) (SF-268, SF-295, SF-539, SNB-19, SNB-75, U251), меланоми (Melanoma) (LOX IMVI, MALME-3M, M14, MDA-MB-435, SK-MEL-2, SKMEL-28, SK-MEL-5, UACC-257, UACC-62), раку яєчників (Ovarian Cancer) (IGROV1, OVCAR-3, OVCAR-4, OVCAR-5, OVCAR-8, NCI/ADR-RES, SK-OV-3), раку нирок (Renal Cancer) (786-0, A498, ACHN, CAKI-1, RXF 393, SN12C, TK-10, UO-31), раку простати (Prostate Cancer) (PC-3, DU-145), раку молочної залози (Breast Cancer) (MCF7, MDA-MB-231/ATCC, HS 578T, BT-549, T47D, MDA-MB-468). В умовах експерименту 2-[5-(4-диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол-2-іл]ацетамід проявив високу протиракову активність при дослідженнях на 59 клітинних лініях, результати яких наведено в таблиці. Таблиця Протиракова активність 2-[5-(4-диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол-2-іл]ацетаміду Протиракова активність in vitro Лінія клітин раку lg GI50 lg TGI 1 2 3 4 CCRF-CEM -5,56 >-4,00 HL-60(TB) -5,47 >-4,00 Лейкемія (Leukemia) K-562 -5,50 >-4,00 MOLT-4 -5,41 >-4,00 RPMI-8226 -5,27 >-4,00 A549/ATCC -5,40 >-4,00 EKVX -5,41 >-4,00 HOP-62 -5,24 >-4,00 HOP-92 -4,99 >-4,00 Недрібноклітинний рак легень (Non-Small Cell NCI-H226 -5,00 >-4,00 Lung Cancer) NCI-H23 -5,03 >-4,00 NCI-H322M -5,39 >-4,00 NCI-H460 -5,45 >-4,00 NCI-H522 -5,48 >-4,00 Рак простати (Prostate PC-3 -5,24 >-4,00 Cancer) DU-145 -5,04 >-4,00 COLO 205 >-4,00 >-4,00 НСС-2998 -5,06 >-4,00 НСТ-116 -5,36 >-4,00 Епітеліальний рак НСТ-15 -5,48 >-4,00 (Colon cancer) НТ29 -5,22 >-4,00 КМ12 -5,31 >-4,00 SW-620 -5,32 >-4,00 SF-268 -5,38 >-4,00 SF-295 -5,50 -4,05 SF-539 -5,20 >-4,00 Рак ЦНС (CNS Cancer) SNB-19 -5,24 -4,08 SNB-75 -4,88 -4,36 U251 -5,45 -4,70 2 UA 69858 U Меланома (Melanoma) Рак яєчників (Ovarian Cancer) Рак нирок Cancer) (Renal Рак молочної залози (Breast Cancer) LOX IMVI MALME-3M M14 MDA-MB-435 SK-MEL-2 SK-MEL-28 SK-MEL-5 UACC-257 UACC-62 IGROV1 OVCAR-3 OVCAR-4 OVCAR-5 OVCAR-8 NCI/ADR-RES SK-OV-3 786-0 A498 ACHN CAKI-1 RXF393 SN12C TK-10 UO-31 MCF7 MDA-MB-231/ATCC HS 578T BT-549 T-47D MDA-MB-468 -5,49 -5,69 -5,24 -5,31 -4,51 -5,26 >-4,00 -5,50 -5,17 -5,22 -5,23 >-4,00 -5,38 -5,71 -4,74 -5,33 -5,27 -5,34 -5,64 -5,11 -5,27 -5,36 -5,46 -5,28 -5,28 -4,79 -5,30 -5,06 -5,11 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 -4,32 >-4,00 -4,53 >-4,00 >-4,00 -4,58 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 >-4,00 -4,03 Як видно з даних, наведених у таблиці, речовина, що заявляється, у концентрації менше 10 моль/л пригнічує ріст пухлинних клітин на 50 % на 55 з 59 досліджуваних ліній та створює -4 повне інгібування росту пухлинних клітин у концентрації менше 10 моль/л на 8 з 59 досліджуваних ліній. Таким чином, сполука, що заявляється, проявляє високу протипухлинну активність і є перспективним протираковим засобом. Для розуміння запропонованої корисної моделі нижче наведено приклад одержання 2-[5-(4диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4-метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол-2іл]ацетаміду. Сполуку синтезують таким чином. Синтез 2-[5-(4-диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4-метоксифеніл)1,3,4-оксадіазол-2-іл]ацетаміду. Суміш 0,002 моль калійної солі 5-(4-диметиламінобензиліден)2,4-діоксотіазолідину, 0,0022 моль 2-хлоро-N-[5-(4-метоксифеніл)-1,3,4-оксадіазол-2іл]ацетаміду та декілька кристалів калію йодиду в 5 мл ДМФА та 5 мл етанолу нагрівають протягом 3 год. у колбі зі зворотнім холодильником. Осад, який утворився після повного охолодження реакційної суміші, відфільтровують, промивають водою, етанолом та ефіром і перекристалізовують із суміші ДМФА-EtOH (1:2). Одержують жовтий порошок з Т топл. 239-240 °C, вихід - 67 %. Знайдено, %: N 14,60; S 6,69. C23H21N5O5S. Вирахувано, %: N 14,45; S 6,83. 1 ЯМР Н,  , м. ч.: 3,02с (6Н, N(CH3)2), 3,82с (3Н, ОСН3), 4,60с (2Н, СН2СО), 6,82д (2Н, аром., J=8,6 Гц), 7,12д (2Н, аром., J=8,5 Гц), 7,48д (2Н, аром., J=8,5 Гц), 7,83-7,85м, (3Н, СН, аром.). 4 5 10 15 20 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 25 2-[5-(4-Диметиламінобензиліден)-2,4-діоксотіазолідин-3-іл]-N-[5-(4-метоксифеніл)-1,3,4оксадіазол-2-іл]ацетамід формули: 3 UA 69858 U O H N N S H3C O O N O N N O CH3 CH3 , що виявляє протипухлинну активність. Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4