Інгібітори нейтральної ендопептидази (nep) та розчинної людської ендопептидази (hsep) для профілактики й лікування нейродегенеративних розладів

1. Застосування сполуки загальної формули (1) C2 2 (19) 1 3 82008 4 3. Застосування за п. 1, яке а також її фармацевтично прийнятні солі та відрізняє ться тим, що зазначені фармацевтичні прекурсори. композиції містять принаймні одну сполуку загальної формули (5) 6. Застосування за п. 1, яке відрізняє ться тим, що зазначена сполука являє собою O H трет-бутил-((3S)-3-{[(1N P {[(бензилоксі)(етокси)фосфорил]метил}циклопенти R 7O л)карбоніл]амін}-2-оксо-2,3,4,5-тетрагідро-1H-1OR 8 O N бензазепін-1-іл)ацетат формули (8) O OR 4 O H N O P , (5) O де позначки мають значення, наведені у п. O O N 1, усі стереоізомери, а також їх фармацевтично O прийнятні солі та прекурсори. CH 3 O 4. Застосування за п. 1, яке відрізняє ться тим, що зазначена сполука являє собою (2R)-2-{[1-({[(3S)-1-(карбоксиметил)-2-оксо2,3,4,5-тетрагідро-1Н-1-бензазепін-3іл]амін}карбоніл)циклопентил]метил}-4фенілбутаноєву кислоту формули (6) O HO H N O O N OH O , (6) а також її фармацевтично прийнятні солі та прекурсори. 5. Застосування за п. 1, яке відрізняє ться тим, що зазначена сполука являє собою (2R)-2-{[1-({[(3S)-1-(карбоксиметил)-2-оксо-2,3,4,5тетрагідро-1H-1-бензазепін-3іл]амін}карбоніл)циклопентил]метил}-4-(1нафтил)бутаноєву кислоту формули (7) O HO H N O O N O CH 3 CH 3 , (8) а також її фармацевтично прийнятні солі та прекурсори.. 7. Застосування за пп. 1-6, яке відрізняє ться тим, що фармацевтично прийнятні солі вибрані з групи, яка включає солі літію, кальцію, магнію та цинку, причому переважно фармацевтично прийнятною сіллю є сіль кальцію. 8. Застосування за будь-яким з пп. 1-6, яке відрізняється тим, що зазначеному лікуванню піддають травматичні пошкодження мозку та пошкодження спинного мозку. 9. Застосування за будь-яким з пп. 1-6, яке відрізняється тим, що зазначеному лікуванню піддають гострий розсіяний енцефаломієліт, спричинені епілепсією пошкодження мозку, бактеріальний або вірусний менінгіт та енцефаломенінгіт, коров'ячий сказ, отруєння нейротоксинними сполуками та радіаційні пошкодження мозку. 10. Застосування за будь-яким з пп. 1-6, яке відрізняє ться тим, що зазначеній профілактиці піддають ішемічний інсульт та спричинені ішемічним інсультом неврологічні пошкодження. OH O , (7) Винахід стосується нового застосування відомих похідних бензазепину, бензоксазепину, бензотіазепин--N-оцтової кислоти та фосфонзаміщених похідних бензазепинону, які мають інгібувальну активність щодо нейтральної ендопептидази (NEP) та/або людської розчинної ендопептидази (hSEP). Сполуки за винаходом є придатні для виготовлення фармацевтичних композицій для профілактики та лікування нейродегенеративних розладів. Винахід стосується застосування заявленої сполуки для виготовлення лікарського засобу, що чинить лікувальну дію. Ця корисна дія розкривається тут або стане очевидною для фа хівця з наступного опису на підставі його професійних знань. Винахід також стосується 5 82008 6 застосування сполуки за винаходом при заміщена (С1-С6)алкілом, (С1-С6)-алкоксі або виготовленні засобу для лікування або галогеном, і нафтил-(С1-С6)-алкіл, попередження хвороби або хворобливого стану. R7 та R8 - незалежно один від одного є водень Зокрема, винахід стосується нового застосування або група, що утворює біолабільний ефір для лікування або попередження хвороби або фосфонової кислоти. хворобливого стану, яке розкривається тут або Винахід охоплює всі сполуки формули (1), їх стане очевидне для фахівця з наступного опису на рацемати, суміші діастереомерів та окремі підставі його знань. У варіантах здійснення стереоізомери, а також їх фармацевтично винаходу йдеться про застосування окремих прийнятні солі. Отже, сполуки, де замісники на сполук за винаходом для вироблення лікарського потенційно асиметричних атомах вуглецю засобу. знаходяться у R-конфігурації або S-конфігурації, У [заявці US 20030045449] описано, що належать до винаходу. інгібітори матричної металопротеази є корисні при Прекурсори - це сполуки, які не є активними лікуванні нейропегенеративних розладів. самі по собі, але перетворюються на один або Проблема полягає в тому, що інгібітори матричної кілька активних метаболітів. Прекурсори - то металопротеази - це дуже широка група біооборотні похідні молекул лікарських речовин, протеазних інгібіторів, а до того, згідно з цією які використовуються для подолання якихось заявкою, металопротеазні інгібітори мають перешкод на користь молекули вихідної лікарської входити до фармацевтичної композиції, яка також речовини. До цих перешкод належать, зокрема, містить N-NOS інгібітор. розчинність, проникність, стабільність, Завданням цього винaxoду є виявлення пресистемний метаболізм таобмеження конкретних металопротеазних інгібіторів, здатних припільності [Medicinal Chemistry: Principles та самостійно справляти терапевтичну дію. Practice, 1994, ISBN 0-85186-494-5, Ed.: F. D. King, Нами несподівано встановлено, що похідні p.215; J. Stella, "Prodrugs as therapeutics", Expert бензазепину, бензоксазепину, бензотіазепин--NOpin. Ther. Patents, 14(3), 277-280, 2004; P. оцтової кислоти та фосфонзаміщеного Ettmayer et al., "Lessons learned from marketed and бензазепинону, які мають інгібувальнуу активність invertigationalprodrugs", J.Med.Chem., 47, 2393щодо нейтральної ендопептидази (NEP) та/або 2404, 2004]. Прекурсори, тобто сполуки, які, людської розчинної ендопептидази (hSEP), чинять потрапляючи до людського організму будь-яким захисну дію в моделі травматичного пошкодження відомим чином, метаболізуються на сполуки мозку на тваринах. Така властивість робить їх формули (1), належать до обсягу винаходу. корисними при виготовлення фармацевтичних Зокрема, це стосується сполук з гідроксігрупами. композицій для профілактики й лікування Такі сполуки здатні реагувати з органічними нейродегенеративних розладів. кислотами, даючи сполуки формули (І), де Сполуки за винаходом є відомі з присутня додаткова група, яка легко [Європейських патентів ЕР 0733642, ЕР 0916679 відщеплюється після введення до організму, та ЕР 1468010], де наведені подробиці їх синтезу, наприклад, такі, як енамін, основа Манніха, й описуються загальною формулою (1): похідне гідроксил-метилену, похідне О(ацілоксіметиленкарбамату), карбамат, ефір, амід або енамінон. Фармацевтично прийнятні солі можна одержувати відомими способами, наприклад, змішуючи сполуку за винаходом з катіоном відповідного металу або органічною основою, скажімо, аміним. Ця мета може бути досягнута одержанням солей металів сполук зазначеної загальної R1 - гр упа формули (2) або (3): формули (1), де іоном металу є іон літію або іон двовалентного металу. Переважно солями двовалентних металів є солі кальцію, магнію та цинку. Найприйнятнішою є сіль кальцію. Зокрема, винахід стосується сполук загальної формули (4): А представляє СН 2, О або S, R2 та R3 - незалежно один від одного є водень або галоген, R4 та R6 - незалежно один від одного є водень або група, що утворює біолабільний карбоксильний ефір; R5 обраний з групи, що містить (С1С6)алкоксі(С 1-С6)алкіл, який може бути заміщений (С1-С6)алкоксі, феніл-(С1-С6)-алкілом та фенілоксі(С1-С6)-алкілом, де фенільна група може бути де позначки мають значення, наведені вище. Більш детально, винахід стосується сполук загальної формули (5): 7 82008 8 титану, лактоза, манітол та інші сахари, тальк, молочний білок, желатин, крохмаль, целюлоза та її похідні, тваринні і рослинні жири, як риб'ячий жир, соняшникова, арахісова або кунжутна олія, поліетиленгліколь та розчинники, як стерильна вода, одно- та багатоатомні спирти, наприклад, гліцерин. Сполуки за винаходом вживаються, як де позначки мають значення, наведені вище. правило, у складі фармацевтичних композицій. Найприйнятнішими діючими речовинами Такі композиції можуть існувати, наприклад, у згідно з винаходом є: вигляді таблеток, жуйних таблеток, капсул, (2R)-2-{[1-({[(3S)-1-(карбоксіметил)-2-оксорозчинів, парентеральних розчинів, супозиторіїв, 2,3,4,5-тетрагідро-1H-1-бензазепин-3суспензій та в інших формах, які описані тут або іл]амін}карбоніл)циклопентил]метил}-4стануть очевидними для фахівців на підставі цього фенілбутаноєва кислота (6): опису та їхні х професійних знань. У варіантах здійснення винаходу передбачається фармацевтичний набір в одній або кількох посудинах, заповнених одним або кількома компонентами фармацевтичної композиції згідно з винаходом. До таких посудин можуть додаватися різноманітні друковані матеріали, наприклад, інструкції з застосування, або повідомлення за формою, встановленою державним органом, який (2R)-2-{[1-({[(3S)-1-(карбоксіметил)-2-оксорегулює виробництво, застосування або продаж 2,3,4,5-тетрагідро-1Н-1бензазепин-3фармацевтичної продукції, що містить дозвіл іл]амін}карбоніл)циклопентил]іметил}-4-(1цього органу на виготовлення, застосування або нафтил)бутаноєва кислота (7): продаж препарату для споживання людьми або тваринами. Конкретні композиції, що містять сполуки за винаходом, описані у [заявках WO 03/068266 та WO 04/062692]. Окремі сполуки, які описані тут, наведені суто для докладної ілюстрації винаходу й ніяким чином не обмежують його обсяг. Інші варіанти здійснення винаходу стануть очевидні для фахівця з наступного опису на підставі його професійних трет-бутил-((3S)-3-{[(1знань. Отже, опис та приклади носять суто {[{бензилоксі)(етоксі)фосфорил]метил}циклопенти ілюстративний характер, а обсяг та сутність л)карбоніл]амін}-2-оксо-2,3,4,5-тетрагідро-1Н-1винаходу визначаються виключно формулою. бензазепин-1-іл)ацетат (8): Травматичне пошкодження мозку: уповільнене вмирання нейронів Методика Пристрій для завдання контузії. Пристрій для завдання контузії являє собою трубку з нержавіючої сталі довжиною 40см з отворами через кожний 1см для попередження стиску повітря усередині. Щурів лінії Вістар масою 230270г анестезують хлоралгідратом (400мг/кг Фармацевтичні композиції внутрішньочеревно) й виконують краніотомію на Сполукам за винаходом можна надавати правій півкулі. Пристрій скеровує падаючий вантаж форм, придатних для введення до організму, на пластину над поверхнею твердої мозкової відомими способами, зокрема, з використанням оболонки перпендикулярно поверхні черепа, допоміжних речовин, як от рідкі або тверді носії. розвиваючи зусилля 380г-см за допомогою Фармацевтичні композиції за винаходом можна вантажу масою 20г, і таким чином завдають вводити ентерально, орально, парентерально контузії мозку. Дозволяється максимальне (внутрішньом'язово або внутрішньовенно), заглиблення до поверхні мозку 2,5мм, щоб не ректально або локально (відносно якої-небудь допустити механічного пробою його твердої частини тіла). Вони можуть мати форму розчинів, оболонки. Центр пластини стереотаксично порошків, таблеток, капсул (у тому числі зсувають на 1,5мм позаду та 2,5мм убік від мікрокапсул), мазей (кремів чи гелей) або брегми. Протягом 3 днів після травми мозку щурів супозиторіїв. До складу таких композицій можуть піддають перфузійній фіксації розчином 4% входити відомі у фармації рідкі або тверді параформальдегіду у фосфатному буфері. наповнювачі та розбавники, розчинники, Внутрішньомозковошлуночкові ін'єкції: емульгатори, мастила, запашники, барвники Сполуки (5-15мкл) вводять до шлуночку мозку за та/або буферні речовини. Часто вживаються такі допомогою шприця Гамільтона. Ін'єкції виконують допоміжні речовини, як карбонат магнію, двоокис за 5хв, 15хв-8год після травми за такими 9 82008 10 стереотаксичними координатами: АР=-0,5мм, L=Доцільне дозування становить 0,0012мм та V=-5,5 відносно брегми [Swanson, L. W. 1000мг/кг, переважно 0,1-100мг/кг маси тіла (1992) Brain Maps: Structure of the Rat Brain , хворого. Elsevier, Amsterdam]. Результати фармакологічних випробувань Внутрішньовенні ін'єкції: Сполуки вводять У описаній вище моделі травматичного внутрішньовенно з 1-мл шприця з голкою 26-го пошкодження мозку сполуки формул 6 та 7 розміру. Голку штрикають до лівої стегнової вени показують залежну від дози нейрозахисну дію. Ця після невеличкого надрізу шкіри. Сполуки вводять дія помітна навіть при внутрішньовенному у кількості 1мл/кг маси тіла протягом 30с. введенні сполук 6 та 7 через 8 годин після травми. Мoрфометричний аналіз у гіпохампі: Залежність від дози нейрозахисної дії Пошкодження у підполі САЗ гіпокампу визначають випробуваних сполук стереологічно на 5 різних рострокаузальних рівнях Вимірюють залежність від дози нейрозахисної від 10,21 до 11,21мм [Swanson, L. W. (1992) Brain дії сполук формул 6 та 7 при внутрішньовенному Maps: Structure of the Rat Brain, Elsevier, введенні дорослим щурам лінії Вістар через 15хв Amsterdam] та через три доби після завдання після травми. Визначають щільність нейронів у травми через медіолатеральну вісь. Для кількісної підполі СА3 гіпокампу за вищенаведеною оцінки втрат нейронів у гіпокампі використовують методикою. Вимірюють щільність нейронів у прийом стереологічного розтину [Cruz-Orive, L. Μ. СА3±стандартне відхилення (=SED) на 6 & Weibel, E. R. (1990) Am. J. Physiol. 258, L148стереотактичних рівнях у лівій нетравматизованій L156], щоб визначити кількісну щільність (NV) півколі мозку контрольних щурів та щурів, які пірамідальних нейронів. При взятті проб отримували сполуки формул 6 та 7. Результати застосовують незсувну лічильну рамку наведені у табл.1. В усіх наступних таблицях "n" позначає кількість щурів у гр упі. (0,05мм´0,05мм; висота дісектора 0,01мм) та високоапертурний об'єктив (´40). Нормальні нейрони визначають за наявністю типових ядер з чистою нуклеоплазмою та чітко виражених Щільність нейронів СА3 гіпокампу, кліти ядерець, оточених цитоплазмою з вмістом речовини Нісля. Межа між підполями СА2 та СA3 розглядається як точка, де розріджене Стереотакт. Контрольні ліві; Контрольні праві; Сполука фо розташування великих пірамідальних клітин рівень (n=8) (n=8) (N= переходить у щільно упаковану картину 10.21 148,57±2,23 90,29±5,54 112,5± пірамідальних клітин підполя СA3. Довільна лінія, 10.41 154,29±3,73 84,86±7,29 103,75± яка з'єднує бічні кінці шарів клітин зубчастих 10.61 158,86±3,44 77,71±5,82 101,75± гранул, вважається з'єднанням між підполями СА3 10.81 155,71±4,07 76,57±13,45 98,50± та СА4. 11.01 150,86±1,95 85,71±10,98 96,75± Сполуки за винаходом є корисні при 11.21 148,29±1,38 92,86±8,71 101,75± профілактиці та лікуванні таких нейродегенеративних розладів, як ішемічний Введення плацебо до правого шлуночка мозку інфаркт, травматичне пошкодження мозку, гострий щурів, що зазнали травми голови, призводить до розсіяний енцефаломіелит, аміотрофічний бічний зменшення щільності нейронів у СА3 гіпокампу до склероз (ALS), пігментарний ретинит, м'яке 48% контрольної величини, тоді як впорскування погіршення сприйняття, хвороба Альцгеймера, 10мкг сполуки (6) або сполуки (7) частково хвороба Піка, старече недоумство, хвороба попереджує втрату нейронів у гіпокампі. Вільсона, прогресуючий над'ядерний параліч, Дисперсійний аналіз ("ANOVA") показує суттєву підкоркове слабоумство, слабоумство внаслідок захисну дію при попередженні втрати нейронів у атеросклерозу, слабоумство внаслідок СНІДу, СА3 гіпокампу для обох випробуваних речовин. дегенерація мозочку, синдроми спинальноДія після внутрішньовенного введення мозочкової дегенерації, атаксія Фрідрайха, При впорскуванні плацебо щільність нейронів мозочкова атаксія, пошкодження мозку у С А3 гіпокампу зменшується до 53% контрольної епілептичного походження, пошкодження хребта, величини, тоді як впорскування 30 або 300мг/кг синдром бентежних ніг, хвороба Гантінгтона та випробуваної речовини формули (7) частково хвороба Паркінсона, чорнострічкова дегенерація, попереджує втрату нейронів у гіпокампі, причому васкуліт мозку, мітохондріальні енцефаломіопатії, доза 300 мг/кг діє найбільш ефективно. цероїднийл іпофусціноз нейронів, атрофія м’язів Дисперсійний аналіз ("ANOVA") показує суттєву хребта, лізосомні розлади, які зачіпають захисну дію при попередженні втрати нейронів у центральну нервову систему, лейкодистрофії, СА3 гіпокампу для обох випробуваних доз розлади циклу сечовипускання, енцефалопатії досліджуваної речовини (Р