Спосіб спектрофотометричного визначення ніфедипіну в таблетках

Реферат: UA 92005 U UA 92005 U 5 10 15 Корисна модель належить до галузі фармації, зокрема до способів хімічного аналізу, а саме до контролю якості лікарських форм промислового виробництва, які містять ніфедипін. За даними літератури кількісне визначення ніфедипіну в субстанції можна визначати методом цериметрії [1], який характеризується невисокою стійкістю титрантів; методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) [7], який характеризується великою вартістю обладнання і високими вимогами до кваліфікації персоналу; термографії [4], недоліком якого є розкладення ніфедипіну під час аналізу. Відомо також застосування фотоколориметричних методів для кількісного визначення ніфедипіну: спектрофлуориметрія [6], УФспектрофотометрія, розраховуючи вміст діючої речовини методом стандарту та методом питомого показника поглинання, а також метод екстракційної спектрофотометрії [2, 3, 5, 8]. Усі ці методи характеризуються своєю похибкою вимірювання і мають як ряд переваг, так і ряд недоліків, пов'язаних з неселективністю колориметричних реакцій, нестійкістю забарвлених сполук, невисокою специфічністю та точністю проведення аналізу, складністю пробопідготовки. Відомим аналогом до корисної моделі є спосіб кількісного визначення ніфедипіну в однокомпонентних таблетках: точну наважку таблеткової маси, що відповідає 0,03 г ніфедипіну розчиняють у 2 мл хлороформу доводять об'єм до 100 мл безводним етиловим спиртом, перемішують та фільтрують. 5 мл одержаного розчину доводять безводним етанолом до 100 мл і спектрофотометрують за довжини хвилі 333нм. Вміст ніфедипіну розраховують за питомим показником поглинання A 1см  140 [9]. Основним недоліком аналога можна вважати визначення концентрації розчинів ніфедипіну способом показника поглинання. Використання показника поглинання для розрахунку кількісного вмісту ніфедипіну зменшує специфічність методу, тому що допоміжні речовини можуть поглинати світло за аналітичної довжини хвилі, і це заважатиме коректному проведенню аналізу. Даний метод є дуже чутливим до класу приладу, тобто різні прилади дають значні відхилення величини поглинання для одного й того ж розчину. Також недоліком даного методу можна вважати використання безводного етанолу як розчинника, що ускладнює аналіз через високу його гігроскопічність. Тобто даний метод не дозволяє точно визначити кількісний вміст ніфедипіну в умовах різних лабораторій. В основу корисної моделі поставлена задача створити простий спосіб кількісного визначення ніфедипіну в таблетках, який би дозволяв зменшити похибку пробопідготовки та забезпечити необхідну точність, відтворюваність та специфічність результатів аналізу при проведенні контролю якості. Поставлена задачая вирішується таким чином, що спосіб спектрофотометричного визначення кількісного вмісту ніфедипіну у таблетках, що включає приготування аналітичного розчину з подальшим його спектрофотометруванням та розрахунком кількісного вмісту ніфедипіну, згідно з корисною моделлю, що приготування аналітичного розчину проводять шляхом розчинення таблеткової маси ніфедипіну у 95 % етиловому спирті, також готується розчин стандартного зразка, оптичну густину розчинів вимірюють за довжини хвилі 336 нм, причому оптичну густину кожної проби вимірюють тричі з вийманням кювети завтовшки 1 см, а кількісний вміст ніфедипіну розраховується за стандартним способом Всі параметри заявленого способу визначені дослідним шляхом. Придатність заявленої методики підтверджується валідаційними характеристиками згідно з вимогами ДФУ [10, 11]. Оптичну густину досліджуваних розчинів доцільно визначати спектрофотометричним способом за довжини хвилі 336 нм, оскільки на даній ділянці спектра для молекули ніфедипіну спостерігається пологий максимум поглинання. -5 Розведення досліджуваних розчинів до 410 г/мл забезпечує величину значення оптичної густини в межах 0,4-0,7, що суттєво підвищує точність заявленого способу. Корисна модель здійснюється наступним чином: Аналітичний розчин препарату: Точну наважку порошку таблеток, еквівалентну 50 мг ніфедипіну поміщають в колбу місткістю 50 мл розчиняють в 50 мл 95 % етиловому спирті, перемішують 25 хв, фільтрують, підкидаючи перші 10 мл фільтрату. 2 мл фільтрату поміщають в колбу місткістю 50 мл і доводять до мітки 95 % етиловим спиртом. Стандартний розчин: 50,0 мг (точна наважка) стандартного зразка (СЗ) ніфедипіну (що відповідає вимогам ДФУ) розчиняють у 95 % етиловому спирті і доводять об'єм розчину тим самим розчинником до 50,0 мл, беруть аліквоту 2 мл і переносять її в колбу місткістю 50,0 мл, доводячи до мітки 95 % етиловим спиртом. Оптичну густину аналітичного та стандартного розчинів вимірюють за аналітичної довжини хвилі 336 нм відносно розчину порівняння - 95 % етиловий спирт. Вимірювання оптичної густини 1% 20 25 30 35 40 45 50 55 1 UA 92005 U 5 10 15 20 отриманих розчинів проводять тричі з вийманням кювети з використанням кювети завдовжки 1 см при температурі 20±2 °C за однакових умов з мінімальним інтервалом у часі. У порівнянні з аналогом, корисна модель характеризується рядом переваг: по-перше, для кількісного вмісту ніфедипіну запропоновано використання стандартного способу, який дозволяє нівелювати похибку обладнання, вплив температури і враховує вплив мірного посуду та пробопідготовки на невизначеність аналізу, по-друге, використання як розчинника 95 % етилового спирту дозволяє спростити процес розчинення та уникнути похибку аналізу на відміну від безводного етанолу, який є дуже гігроскопічним. Концентрація аналітичного розчину і розчину робочого стандарту підібрана таким чином, що оптична густина на спектральній ділянці, що досліджується, знаходиться в межах від 0,4-0,7, що сприяє підвищенню точності аналізу. Для корисної моделі кількісного визначення проведено вивчення наступних метрологічних характеристик: робасність, збіжність, прецизійність, правильність, лінійність. Отриманні валідаційні характеристики узгоджені з критеріями відповідності згідно з вимогами ДФУ [10,11]. Корисна модель пояснюється прикладами. Приклад 1. Для дослідження корисної моделі було вивчено лінійність, збіжність та правильність. Вивчення характеру залежності величини оптичної густини від концентрації ніфедипіну проводили за стандартизованою процедурою валідації, при цьому використовуючи 9 вихідних розчинів з точними наважками концентрацій (від 80 % до 120 % із кроком 5 %). Кожний модельний розчин вимірювали тричі. Отримані результати були статистично оброблені та визначено, що вимоги до параметрів лінійної залежності, правильності та збіжності стосовно корсиної моделі виконуються на всьому діапазоні концентрацій. Дані розрахунків наведені у таблиці 1. 25 Таблиця 1 Статистично оброблені результати метрологічних характеристик Метрологічні характеристики Лінійність Кутовий коефіцієнт лінійної залежності b Sb Вільний член лінійної залежності а Sa Коефіцієнт кореляції методики r Збіжність та правильність Середнє Z% Відносне стандартне відхилення SZi% Відносний довірчий інтервал Δz Критерій невизначеності систематичної похибки δ Висновок 30 Критичні значення Отримані значення а, % = 3,8 0,9954 0,006773 0,5256 0,6816 0,9998 R0=0,9957 100,07 ΔAs % = 2,4 δ, %ω = 0,4762 0,2561 0,4762 0,07 Відповідає Дані, отримані у результаті вивчення валідаційних характеристик лінійності, збіжності та правильності, характеризуються їх відповідністю до критеріїв прийнятності корисної моделі. Приклад 2. Важливе значення для випробовування корисної моделі має вивчення параметрів стабільності та робасності, які полягають у визначенні стійкості розчинів ніфедипіну до впливу різних зовнішніх факторів. Дослідження стабільності розчину випробуваного зразка та розчину стандартного зразка проводили шляхом вимірювання оптичної густини кожні 15 хвилин протягом 60 хвилин. Показники стабільності зазначених розчинів у часі наведені у таблиці 2. 2 UA 92005 U Таблиця 2 Вивчення стабільності у часі розчинів випробуваного та стандартного зразків Розчин Випробуваний Стандартний 5 Термін дослідження стабільності nt, хв 0 15 30 45 60 0,565 0,566 0,568 0,569 0,570 0,566 0,566 0,567 0,568 0,568 Середнє RSDt, % 0,5676 0,567 0,365 0,176 Δt, % 0,576 0,278 max δ, % 0,77 Дані наведені у таблиці 2 свідчать про стійкість розчинів випробуваного та робочого стандартного зразків у часі. Встановлено, що вплив плацебо на сумарне поглинання препарату складає % A 1см  140 . 1 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Це означає, що фонове поглинання є незначущим і методика характеризується належною специфічністю. Статистично оброблені експериментальні дані свідчать, що заявлений спосіб характеризується точністю та може бути відтворний в умовах інших аптек та лабораторій з контролю якості лікарських засобів. Таким чином, корисна модель відповідає вимогам ДФУ, є простим, доступним і може бути використана для аналізу якості в умовах аптек та лабораторій з контролю якості лікарських засобів. Джерело інформації: 1. British Pharmacopoeia. - London. The Stationary Office. - 2001. - Vol. 1-2. - 3199 p. 2. El-Yazbi Fawzy Α. A computerized spectrophotometric method for the determination a atenolol and nifedipine in the presence of degradation products of nifedipine / El-Yazbi Fawzy Α., Kovar KarlArtur // Sci. pharm. - 1998. - Vol. 6, № 4. - P. 325-333. 3. Elwalily A.M. Stability indicating first derivative spectrophotometric assay for nifedipine in its on a diode array spectrophotometr / Elwalily A.M., Korany M.A., El-Anwar F.M., Zamel S.M. // Anal. Lett. - 1992. - Vol. 25, № 1.-P. 81-98. 4. R.O.C. Filho. Stability stadies on nifedipine tablets using thermogravimetry and differential scanning calorimetry / R.O.C. Filho, P.l.B.M. Franco, E.G. Concei, M.I.G. Leles // J. of Thermal Analysis and Calorimetry. - 2008. - Vol. 93 (2).-P. 381-385. 5. N. Rahman. Extractive spectrophotometric methods for the determination of nifedipine in pharmaceuticals formulations using bromocrеsol green, bromophenol blue, bromothymol blue and eriochrome black Τ / N. Rahman, N.A. Khan, S.N.H. Azmi // Farmaco. - 2004. - Vol. 59 (1). - P. 47-54. 6. Sheika M. Al-Ghannam. Spectrofluorometric determination of nicardipine, nifedipine and isradipine in pharmaceutical preparations and biological fluids / Sheika M. Al-Ghannam, Abeer M. AlOlyan // Cent. Eur. J. Chem. - 2008. - Vol. 6 (2). - P. 222-228. 7. Vertzoni M.V. Sensitive and simple liquid chromatographic method with ultraviolet detection for the determination of nafedipine in canine plasma / Vertzoni M.V., Rеppas C., Archontaki H.A. // Anal. Chim. Acta. - 2006. Vol. 573-574.-P. 298-304. 8. Международная фармакопея / ВОЗ. - 3-е изд. - Женева: ВОЗ, 1995 -.Т.4: Испытания, методы и общие требования. Спецификации для контроля качества фармацевтических препаратов, вспомогательных веществ и дозированных лекарственных форм. - 3-е изд. - 425 с. th 9. Pharmacopoeia of the People's Republic of China. - 8 ed. - People's Medical Publishing House. - 2005. - Vol. 2. - 909 p. 10.Державна Фармакопея України /Державне підприємство "Науково-експертний фармакопейний центр". - Доповнення 1. - Харків: РІРЕГ. - 2004. - 520 с. 11.Державна Фармакопея України /Державне підприємство "Науково-експертний фармакопейний центр". - Доповнення 2. - Харків: РІРЕГ. 2008. - 608 с. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб спектрофотометричного визначення кількісного вмісту ніфедипіну у таблетках, що включає приготування аналітичного розчину з подальшим його спектрофотометруванням та розрахунком кількісного вмісту ніфедипіну, який відрізняється тим, що приготування аналітичного розчину проводять шляхом розчинення таблеткової маси ніфедипіну у 95 % етиловому спирті, готують розчин стандартного зразка, оптичну густину розчинів вимірюють за 3 UA 92005 U довжини хвилі 336 нм, причому оптичну густину кожної проби вимірюють тричі з вийманням кювети завтовшки 1 см, а кількісний вміст ніфедипіну розраховують за стандартним способом. Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4