4′-нітроанілід 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти, який проявляє нейролептичну, антигіпоксичну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну та фунгістатичну активність

Реферат: Винахід належить до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема, до хімічної сполуки 4'нітроаніліду 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти. Суть винаходу полягає в одержанні нової індивідуальної хімічної сполуки 4'-нітроаніліду 4,6дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти загальної формули: Br COOH NHCO(CH2)2CONH NO2 Br , що проявляє нейролептичну, антигіпоксичну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну та фунгістатичну активність. B r CO O H NC ( H 2 O HO 2CN C ) H B r N2 O UA 109897 C2 (12) UA 109897 C2 UA 109897 C2 5 10 15 20 25 30 Винахід належить до хіміко-фармацевтичної галузі, зокрема до синтезу нових індивідуальних хімічної сполук у ряду дикарбонових кислот з нейролептичною, антигіпоксичною, протизапальною, анальгетичною та діуретичною активністю. Психоседативні засоби широко використовуються у неврологічній практиці, хірургії. Вони регулюють психологічні функції, емоційний стан та поведінку людини. При застосуванні нейролептиків може виникнути безсоння, підвищена збудливість і неспокій, страх, головний біль. Можлива біль у животі, висипи на шкірі. При тривалому прийманні можуть виникати затримка сечі, атонія кишечнику. У період лікування можуть спостерігатися набряки, а також інші ускладнення. Тому розробка нових нейролептичних засобів з багатоспрямованою дією та з мінімальними побічними ефектами є актуальною проблемою сучасної медицини. Відомі лікарські засоби з окремими видами фармакологічної активності: нейролептичний засіб аміназин, засіб з діуретичної та антигіпоксичною дією гіпотіазид, засоби з протизапальною та анальгетичною дією диклофенак натрію і анальгін, засіб з фунгістатичною дією фурацилін (Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: ООО "Издательство Новая Волна", 2005. 1200 с.: ил. - С. 52, 499, 170, 159, 852). Головним недоліком препаратів порівняння є серйозні побічні ефекти, серед яких безсоння, підвищена збудливість і неспокій, страх, головна біль, біль у животі, висипи на шкірі, затримка сечі, атонія кишечнику, набряки (аміназин), гіпокалімія (гіпотіазид), ерозійно-виразкові ураження і кровотеча у травному тракті (диклофенак натрію), пригнічення кровотворення при тривалому вживанні (анальгін), гіпохлоремія (гіпотіазид) тощо. Нітрофурал (фурацилін) - при зовнішньому використанні можливі дерматити. При зостасосуванні всередину можливо зниження апетиту, блювота, нудота, запаморочення голови, алергійний висип. Найближчою за хімічною структурою до заявленої сполуки є Д - (+) - глюколиламонієва сіль 4'-броманілід-4,6-дихлор-2-карбоксисукцинанілової кислоти (II) (Пат. України № 77354 - по заявці № 200505160; Заявл.: 30.05.05; Опубл.: 15.1106. Бюл. № 11), який проявляє нейролептичну та антигіпоксичну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну та фунгістатичну активність. В основу винаходу постановлена задача створення нової хімічної сполуки, що проявляє високу нейролептичну, антигіпоксичну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну та фунгістатичну активність при низькій токсичності і може бути використана як діюча речовина у складі фармацевтичних препаратів різних лікарських форм: розчинів для парентерального використання, таблеток, капсул, м'яких лікарських засобів тощо. Задача, що поставлена, вирішується шляхом одержання індивідуальної хімічної сполуки 4'броманілід 4,6-дихлор-2-карбоксисукцинанілової кислоти, загальної формули: Br COOH NHCO(CH2)2CONH 35 40 45 50 NO2 Br , який проявляє нейролептичну, антигіпоксичну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну та фунгістатичну активність. Сполука, яка заявляється, утворена взаємодією N-іміду 4-нітросукцинанілової кислоти, який утворюється при дії на 4-нітросукцинанілової кислоти тіонілхлориду та 2-аміно-3,5дибромбензойної кислоти в еквімолекулярних співвідношеннях в середовищі безводного діоксану. 4'-Нітроанілід 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти це кристалічна речовина, розчинна в діоксані, ацетоні, диметилформаміді (ДМФА), диметилсульфоксиді (ДМСО), не розчинна у воді, гексані. Будова сполуки підтверджена за допомогою елементного аналізу та ІЧспектрів, а індивідуальність - методом хроматографії у тонкому шарі сорбенту. Винахід ілюструється наступними прикладами: Приклад 1. До 2,38 г (0,01 моль) 4-нітросукцінанілової кислоти додають 1,4 г (0,02 моль) тіонілхлориду і кип'ятять 15 хвилин. Надлишок тіонілхлориду відганяють і після охолодження реакційну суміш змішують із розчином безводного діоксану (10 мл), в якому знаходиться 2,94 г (0,01 моль) 2-аміно-3,5-дибромбензойної кислоти та 0,78 г (0,01 моль) піридину, та залишають на 3 години, після чого розводять водою. Осад, відфільтровують, сушать. 1 UA 109897 C2 Вихід 4,89 г (95 %). Т. плавлення 195-198 °C C17H13Br2N3О6 М.м. 515,12 Знайдено: С, %:39,60; N, %: 8,22; Н, %: 3,02 Вирахувано: С, %:39,64; N, %:8,16; Н, %: 2,54 -1 ІЧ-спектр у KВr, см : 3472, 3357, 1716, 1673, 1607, 1572, 1533, 1450, 1423, 1394, 1345, 1307, 1261, 1224,1180, 1138, 1106, 1065, 706, 584. Rf=0,51 (ацетон - гексан 1:1). Rf=0,38 (ацетон - гексан - етанол 4:1:1). 5 10 Приклад 2. Вивчення нейролептичної активності заявленої сполуки (І), прототипу (II) та препарату порівняння аміназину проводили на щурах лінії Вістар вагою 160-180 г на моделі наркотичного сну. Щурам дослідних груп вводили внутрішньоочеревинно натрію етамінал у дозі 30 мг/кг. Тривалість наркотичного сну контрольної групи тварин приймали за 100 %. Щурам першої групи вводили 4'-нітроанілід 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти (І) у дозі 5 мг/кг, тварини другої групи одержували Д - (+) - глюколиламонієву сіль 4'-броманілід-4,6-дихлор2-карбоксисукцинанілової кислоти (II), а третьої групи - аміназин у аналогічних дозах. Критеріями оцінки були обрані: тривалість наркотичного сну та токсичність - ДЛ50 (середня смертельна доза) - статистично розрахована доза речовини, введення якої викликає загибель 50 % стандартної групи піддослідних тварин протягом певного терміну спостереження. Результати вивчення нейролептичної активності та токсичності заявленої сполуки (І), прототипу (II), та аміназину наведені у таблиці 1. 15 Таблиця 1 Вивчення нейролептичної активності та токсичності 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2карбоксисукцинанілової кислоти (І), прототипу (II) та аміназину у щурів Сполука І II Аміназин 20 25 Доза, мг/кг 5,0 5,0 5,0 Довготривалість наркотичного сну, % 230,7 220,6 140,6 ДЛ50, мг/кг >4500 >3500 51,0 Дані таблиці 1, свідчать, що сполука І за нейролептичною дією перевищує активність аміназину на 90 %, а прототипу на 10,1 %. Заявлена сполука (І) у 1,29 рази менш токсична прототипу (II) та у 88,24 рази ніж аміназин. Приклад 3. Антигіпоксичну активність 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти (І), прототипу (II) та препарату порівняння - гіпотіазиду вивчали у дослідах на щурах вагою 160-180 г в умовах гострої гіпобаричної гіпоксії за стандартною моделлю. Критеріями оцінки були обрані час загибелі стандартної групи піддослідних тварин протягом певного терміну спостереження та ДЛ50. Результати вивчення антигіпоксичної активності та гострої токсичності заявленої сполуки (І), прототипу (II), та гіпотіазиду наведені у таблиці 2. Таблиця 2 Вивчення антигіпоксичної активності та токсичності 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2карбоксисукцінанілової кислоти (І), прототипу (II) та гіпотіазиду у щурів Сполука І II Гіпотіазид 30 Доза, мг/кг 5,0 5,0 7,4 Довготривалість життя %, до контролю 382,9 370,6 144,2 ДЛ50, мг/кг >4500 >3500 74,0 За антигіпоксичною дією сполука (І) є більш активної ніж сполука за прототипом (II) та гіпотіазид, тому що проявляє активність у дозі меншій в 1,48 рази ніж рефренс-препарат (гіпотіазид). За антигіпоксичним ефектом сполука I перевищує дію гіпотіазиду у 2,66 рази, близька до сполуки за прототипом (II) при меншій токсичності. Приклад 4. Вивчення протизапальної активності сполуки (І) проводилось на моделі карагенінового набряку у білих лабораторних мишах масою 18-22 г. 2 UA 109897 C2 5 Критеріями оцінки були обрані: ДЕ50 (доза середня ефективна) - кількість речовини, яка викликає певний ефект у 50 % стандартної групи піддослідних тварин протягом певного терміну спостереження; ДЛ50, терапевтичний індекс відношення середньої смертельної дози до середньої ефективної дози речовин; терапевтичний індекс по диклофенаку натрію відношення терапевтичного індексу вивченої речовини до терапевтичного індексу диклофенаку натрію. Результати вивчення протизапальної активності та токсичності 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2карбоксисукцинанілової кислоти (І), прототипу (II) та препарату порівняння - диклофенаку натрію наведені у таблиці 3. Таблиця 3 Протизапальна активність та токсичність 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти (І), прототипу (II) та диклофенаку натрію Сполука ДЕ50, мг/кг ДД50, мг/кг ТІ=ДЛ50/ДЕ50 І II Диклофенак натрію 10,0 11,8 >4500 3500 450,0 296,6 Відносний ТІ по диклофенаку натрію 9,92 6,53 8,0 363 45,38 1,0 10 15 20 Як видно із таблиці 3, сполука І має виражену протизапальну активність, за широтою терапевтичного ефекту перевищує сполуку за прототипом у 1,52 рази, а також класичний НПЗЗ (диклофенак натрію) у 9,92 рази. Приклад 5. Вивчення анальгетичної активності сполуки І, прототипу II та анальгіну проводили на моделях "гарячої пластинки" на білих щурах 180-220 г. Як і у попередньому прикладі, за критерії оцінки активності прийняті ДЕ50; ДЛ50, терапевтичний індекс; терапевтичний індекс по анальгіну - відношення терапевтичного індексу вивченої речовини до терапевтичного індексу анальгіну. Результати вивчення анальгетичної активності та токсичності 4'-нітроаніліду 4,6дибромсукцинанілової кислоти (І), прототипу (ІІ) та препарату порівняння - анальгіну наведені у таблиці 4. Таблиця 4 Анальгетична активність та токсичність 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти (І), прототипу (II) та анальгіну у щурів Сполука 30 ДЛ50, мг/кг ТІ=ДЛ50/ДЕ50 І II Анальгін 25 ДЕ50, мг/кг 11,3 9,3 55,0 >4500 >3500 1197 398,23 376,34 21,76 Відносний ТІ по анальгіну 18,30 17,30 1,0 Як видно за даними таблиці 4, сполука, що заявляється (І), за широтою терапевтичної дії перевищує анальгін у 18,30 рази, активніший та менш токсичніший за прототип. Приклад 6. Вивчення діуретичної активності проводилось за методом Е.Б. Берхіна на білих щурах лінії Вістар 120-160 г. Кожна дослідна група складалась із 7 тварин. В якості препаратів порівняння використовували сполуку за прототипом (II) та гіпотіазид. Сполуку І та гіпотіазид вводили у дозі 50 мг/кг. Сечу збирали на протязі 4 годин. Результати вивчення діуретичної активності заявленої сполуки та гіпотіазиду описані у таблиці 5. 3 UA 109897 C2 Таблиця 5 Діуретична активність та токсичність 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти (І), прототипу (II) та гіпотіазиду у щурів Сполука І II Гіпотіазид 5 10 Доза, мг/кг 50,0 50,0 50,0 Активність, % 385 365,4 212,0 ДЕ50, мг/кг >4500 >3500 320,0 Як видно за даними таблиці 5 сполука (І) за діуретичним ефектом перевищує дію гіпотіазид у 1,82 рази, активніша за прототип при меншій токсичності. Приклад № 7. Фунгістатичну активність сполуки 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2карбоксисукцинанілової кислоти (І) та нітрофуралу (фурациліну) вивчено у дослідах in vitro із використанням поживного середовище Сабуро (рН=6,5-6,7). Навантаження складало 500000 репродуктивних тілець штамів Candida albicans або Trichophyton gipseum в 1 мл середовища. Протигрибкову дію оцінювали за мінімальною мікостатичною концентрацією (ММК), вираженою в мкг/мл. Результати вивчення протигрибкової активності та токсичності 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2карбоксисукцинанілової кислоти (І), прототипу (II) у порівнянні з нітрофуралом наведені в таблиці 6. Таблиця 6 Протигрибкова активність та токсичність 4'-нітроаніліду 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти (І), прототипу (II) та нітрофуралу Сполука І II Нітрофурал Штами грибків, ММК (мкг/мл) Candida albicans Trichophyton gipseum 22,3 25,0 34,2 31,2 64,0 62,5 DL50 (внутрішньо очеревино) мг/кг >4500 >3500 82,0 15 20 25 30 35 Як видно за результатами дослідження, наведеними у таблиці 6, сполука І за фунгістатичною активністю перевищує нітрофурал (фурацилін) по відношенню до Candida albicans та Trichophyton gipseum у 2-2,5 рази. Прототип проявляє більш низьку активність та більш високу токсичність. Таким чином, заявлено сполуку з високою у нейролептичною, антигіпоксичною, протизапальною, анальгетичною, діуретичною та фунгістатичною активністю при низькій токсичності. Заявлена сполука може знайти застосування у псіхіатрічній практиці при лікуванні психозів; у хірургічній практиці для нейролептанальгезії, потенціюванні дії наркотичних засобів, анальгетичних, снодійних засобів, мало вираженому анальгетичному ефекті при не порожнинних мало травматичних операціях із збереженням спонтанного дихання, для ввідного і базисного наркозу в хірургії, акушерстві, гінекології, особливо у хворих, що знаходяться у стані гіпоксії, у дитячій хірургії, при проведенні наркозу у осіб похилого віку. Наявність протизапальної та анальгетичної дії дає можливість використовувати речовину при лікуванні нейродерматозів, гіпертермії, що стійка до антипіретиків. Присутність діуретичного ефекту дозволяє позбавитись можливої затримки сечі у січовику. При синтезі заявленої сполуки використовуються реактиви доступні, дозволені у фармацевтичній промисловості. Речовина одержується за простою технологією, може бути відтворена у промислових умовах, є стійкою, що підвищує термін зберігання, а також має широку біологічну дію. Перелічені фактори дозволяють рекомендувати заявлену речовину в якості субстанції для розробки високоефективних лікарських засобів у різних лікарських формах. 4 UA 109897 C2 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 4'-Нітроанілід 4,6-дибром-2-карбоксисукцинанілової кислоти загальної формули: Br COOH NHCO(CH2)2CONH NO2 Br 5 , що проявляє нейролептичну, антигіпоксичну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну та фунгістатичну активність. Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5