Спосіб підтримки життєздатності аерококів

Реферат: Винахід належить до галузі мікробіології, стосується способу підтримки життєздатності аерококів, що включає вирощування культур аерококів на 3-5 % кров'яному агарі у чашках Петрі при температурі 27-47 ºC впродовж 7-12 діб, подрібнювання сухого залишку до UA 114242 C2 (12) UA 114242 C2 дрібнодисперсного стану та внесення у стерильні ампули, які піддають запаюванню, і його зберіганні в стерильних ампулах у холодильній камері при температурі 3-5 ºC UA 114242 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Винахід належить до мікробіології, насамперед, до розмноження, утримування, консервування мікроорганізмів або їхніх композицій, переважно бактерій та живильних середовищ для них, і може бути використаною в лабораторній практиці. Відомий спосіб підтримки життєздатності аерококів, що включає вирощування культур аерококів на поживних середовищах і їх подальше зберігання у закритих ємностях при заданій температурі, за умов періодичних пересівань на свіжі агаризовані середовища із заданим інтервалом, залежним від різновиду мікроорганізмів, температурі зберігання та властивостей поживного середовища. Як закриті ємності залучають контейнери або пробірки з кришками, гумовими або ватно-марлевими пробками, обгорнуті парафіном. Залучення мінімального агаризованого середовища, на відміну від комплексного, уповільнює швидкість метаболізму, ріст бактерій, зменшує частоту пересівів, виключає застосування складних з'єднань для збереження фізіологічних властивостей аерококів. Зберігання аерококів при кімнатній температурі зменшує висихання культур, а при температурі 5-8 ºС у холодильній камері гальмує швидкість метаболізму. Частоту пересівів визначають експериментальним чином, прагнучи уникнути селекцію варіантів. Для зниження ймовірності селекції мутантів поодинокі колонії у пересівних культурах зазвичай не виділяють. Після кожного з пересівів перевіряють чистоту культури, стан фенотипічних властивостей, а втрату запобігають збереженням дублікатів [1]. За цих умов термін життєздатності аерококів становить 3-5 міс. Процес виключає необхідність застосування дороговартісного устаткування [2, 3]. Основні недоліки аналога недостатній термін підтримки життєздатності аерококів, технологічні та експлуатаційні зручності, такі як перевитрати часу, трудомісткість, випадки селекції, зміни біологічних властивостей, втрати, забруднення культур, обов'язковість дотримання регламенту, проведення пересівань, застосування зайвих обсягів лабораторного посуду, поживних середовищ, випадкові помилки маркірування, наклеювання етикеток тощо [4-5]. Більш наближеним до дійсного винаходу серед об'єктів аналогічного призначення за найбільшою кількістю істотних ознак є спосіб підтримки життєздатності аерококів, що включає вирощування культур аерококів на поживних середовищах та їх зберігання у закритих ємностях у холодильній камері при температурі 3-5 ºС, у відповідності з котрим, культури аерококів вирощують у пробірках, на скошеному поживному агарі, у товщі агаризованого середовища (стовпчиках) або у рідкому поживному середовищі, вирощені культури аерококів заливають 2 см шаром стерильної мінеральної олії, яку заздалегідь стерилізують у сушильній шафі при температурі 170 ºС впродовж 1-2 год., і контролюють стан їхньої життєздатності впродовж терміну зберігання. Застосування мінеральної олії сприяє захисту культур аерококів від висихання, знижує метаболізм, збільшуючи термін їх життєздатності до 3 років, за умови обов'язкових періодичних пересівань через кожні 6 міс. Залучення нестерильних олій недоцільне з причин забруднення та втрати штамів [6]. Недоліками прототипу є недостатній термін життєздатності аерококів, трудомісткість підтримки її довготривалості, технологічні та експлуатаційні незручності, які зумовлені недостатніми поживними властивостями застосовуваних середовищ, фізіологічними та біологічними особливостями мікроорганізмів роду Aerococcus, що вимагає вирощування їх нових колоній [7]. Натомість, перевитрати поживних середовищ, мінеральних олій, лабораторного обладнання, засобів стерилізації, задіяних між пересіваннями, характеризують процес як дороговартісний. В основу винаходу поставлена задача винайти спосіб підтримки життєздатності аерококів, застосування котрого сприяло б збільшенню терміну життєздатності аерококів, зниженню трудомісткості, технологічних, експлуатаційних незручностей і собівартості шляхом застосування кров'яного агару як поживного середовища та іммобілізації в нім клітин аерококів. Вищезазначений технічний результат досягається тим, що при використанні у відомому способі підтримки життєздатності аерококів, що включає вирощування культур аерококів на поживних середовищах та їх зберігання у закритих ємностях у холодильній камері при температурі 3-5 ºС, відповідно до винаходу, як закриті ємності залучають стерильні ампули, які піддаються запаюванню, як поживне середовище-3-5 % кров'яний агар, при цьому добову культуру аерококів засівають на нього у чашках Петрі, інкубують її при температурі 27-47 ºС впродовж 7-12 діб, а сухий залишок подрібнюють до дрібнодисперсного стану та вносять у стерильні ампули перед запаюванням. Причинно-наслідковий зв'язок сукупності істотних ознак запропонованого рішення задачі з вищенаведеним технічним результатом полягає в наступному. Залучення стерильних ампул, що піддаються запаюванню, як закритих ємностей, забезпечує не лише стерильні, але й оптимальні мікрокліматичні умови для зберігання мікроорганізмів роду Aerococcus, без втрати їх біологічних і фізіологічних цінностей, властивостей поживного середовища, виключаючи випадки селекції, втрат або забруднення 1 UA 114242 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 культури, потреби у кришках, гумових або ватно-марлевих пробках, зайвому посуді та обладнанні для цього, необхідність збереження дублікатів культури, стерилізації, парафінування та залучення стерильної мінеральної олії, що інформує про зменшення трудомісткості, низки вищенаведених незручностей та собівартості підтримки життєздатності аерококів. Застосування 3-5 % кров'яного агару допускає реалізацію більш високої поживної активності, що, з урахуванням фізіологічних та біологічних властивостей більшості з різновидів мікроорганізмів роду Aerococcus, забезпечує можливість підтримки їх життєздатності впродовж 3-5 років, без пересівань. В експлуатаційному та технологічному аспектах виключаються багатоетапність вирощування, пересіви між ними, скошування агару, заливні, стерилізуючи й дозуючі маніпуляції з мінеральною олією, контролювання стану життєздатності аерококів протягом терміну зберігання, а в економічному вилучається стерилізація мінеральної олії, енергоспоживання сушильною шафою. Залучення