Спосіб отримання рослинної субстанції з седативною та антидепресивною дією

Реферат: Спосіб отримання фармакологічно активної рослинної субстанції з седативною та антидепресивною дією включає технологічний етап екстрагування. Як рослинну сировину використовують квітки лілійника гібридного (Hemerocallis hybrida var. "Stella De Oro"). Процес екстрагування проводять шляхом перколяції рослинної сировини квіток лілійника гібридного 55 % спиртом етиловим у співвідношенні 1:8. Екстракцію проводять шестикратно для максимального виснаження сировини. Шрот екстрагують водою очищеною. Витяги об'єднують і згущують до одержання густого екстракту в роторному вакуумному випарнику. UA 119040 U (12) UA 119040 U UA 119040 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель стосується фармації і медицини, а саме способів отримання екстракційних препаратів з лікарської рослинної сировини, зокрема екстракційних препаратів із седативною та антидепресивною дією, для корекції невротичних та неврозоподібних розладів. При широкому розповсюдженні стресових ситуацій, невротичних та неврозоподібних розладів, що потребують корекції седативними засобами та антидепресантами, зростає попит на лікарські засоби рослинного походження і виникає необхідність розширення їх асортименту. У зв'язку з актуальністю проблеми розповсюдженості функціональних розладів центральної нервової системи перспективним є застосування безпечних і ефективних засобів корекції легких проявів неврозу препаратами на основі лікарської рослинної сировини: настойки валеріани лікарської, настойки меліси лікарської, настойки м'яти перцевої та настойки кропиви собачої [1]. Однак, всі вони готуються на етанолі, що обумовлює деякі обмеження при застосуванні в дитячій практиці, у вагітних, жінок, що годують, у водіїв та інших осіб. Відомий спосіб отримання субстанції у формі сухого екстракту з антидепресивною активністю з трави звіробою, що полягає в попередній обробці сировини звіробою органічним розчинником, а після висушування сировини екстракцію проводять водою очищеною з подальшим висушуванням екстракту [2]. Недоліком способу є те, що отриману сировину попередньо знежирюють протягом 3-4 діб ацетоном, що обумовлює токсичність готового екстракту та тривалість виготовлення. В основу корисної моделі поставлено задачу вдосконалити відомий спосіб, в якому шляхом зміни технологічного прийому, спрямованого на максимально повне вилучення з рослинної сировини біологічно активних речовин, що дозволить отримати не лише якісно новий лікарський засіб, а і забезпечити його високим вмістом біологічно активних речовин. З джерел літератури відомо, що препарати із квіток рослин роду Лілійник (Hemerocallis L.) проявляють вплив на нервову систему і використовуються в народній медицині Китаю, Японії та країн Північної Америки для лікування депресії, безсоння та інших психоемоційних розладів [5, 7]. При вирішенні технічного завдання було взято до уваги результати попередніх досліджень про вплив екстрагенту, його концентрації, технологічних характеристик рослинної сировини, вибору методу екстрагування та дотримання температурних і часових режимів, а також співвідношення сировина: готовий продукт на якісні та кількісні показники вихідного готового лікарського засобу. Шляхом підбору нами було встановлено, що для отримання густого екстракту з квіток лілійника гібридного (Hemerocallis hybrida var. "Stella De Oro") з найбільш повним вилученням екстрактивних речовин, флавоноїдів, гідроксикоричних кислот і поліфенольних сполук оптимальним є використання в якості екстрагенту етилового спирту 55 % і екстрагування подрібненої рослинної сировини у співвідношенні "сировина: екстрагент" 1:8 методом перколяції. Також у ході комплексного фітохімічного дослідження квіток лілійника гібридного (Hemerocallis hybrida var. "Stella De Oro") нами був встановлений якісний склад і кількісний вміст біологічно активних речовин - вуглеводів, амінокислот, органічних кислот, макро- і мікроелементів, комплексу фенольних сполук (флавоноїдів, гідроксикоричних кислот, дубильних речовин), ефірної олії, що можуть здійснювати вплив на центральну нервову систему [4, 5, 10]. Спосіб одержання рослинної субстанції з квіток лілійника гібридного (Hemerocallis hybrida var. "Stella De Oro"), передбачає технологічний етап екстрагування етиловим спиртом 55 % методом перколяції, причому подрібнену рослинну сировину попередньо замочують достатньою кількістю екстрагенту протягом 4 год. в перколяторі, заливають екстрагентом у співвідношенні 1:8 і настоюють при кімнатній температурі протягом 24 год. при періодичному перемішуванні, після чого витяг зливають і знову подають на сировину, настоювання здійснюють протягом 30 хв., повторюючи цикли екстракції 6 разів для максимального виснаження сировини. Співвідношення "сировина: екстрагент" становить 1:8, що є необхідним і достатнім для здійснення процесу екстракції. Здійснення настоювання при кімнатній температурі сприяє збереженню термолабільних екстрактивних речовин та дозволяє уникнути додаткових витрат енергоносіїв. Сукупність ознак, що характеризують заявлений нами спосіб сприятиме найповнішому вилученню комплексу біологічно активних речовин з вираженою седативною та антидепресивною дією. Спосіб здійснюють наступним чином. Подрібнену до розміру частинок, які проходять крізь сито з діаметром отвору № 11200 (з максимальним допуском для отвору 0,77 мм), рослинну сировину (квітки лілійника гібридного (Hemerocallis hybrida var. "Stella De Oro "), змочують достатньою кількістю (80 мл) етилового спирту 55 %, чим стимулюють процес екстрагування та 1 UA 119040 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 сприяють ефективному вилученню екстрактивних речовин із сировини, залишають на 4 год. при кімнатній температурі для набухання. Потім сировину заливають етиловим спиртом 55 % у співвідношенні 1:8, настоюють протягом 24 год. при кімнатній температурі, періодично перемішуючи. Витяг зливають і знову подають на сировину, перемішують і настоюють протягом 30 хв. Для максимального виснаження сировини екстрагування проводять 6 разів по 30 хв. Далі спиртовий витяг зливають і фільтрують. Шрот віджимають, заливають водою, підігрітою до 8590 °C, у співвідношенні 1:10 і екстрагують на водяній бані протягом 2 год., охолоджують, фільтрують крізь паперовий фільтр. Спиртовий і водний витяги об'єднують, згущують до 1:5 об'єму і висушують на роторному вакуумному випарнику до стану максимально густого екстракту. При цьому загальне співвідношення "сировина: готовий продукт" становить 2,4:1 (1 г густого екстракту відповідає 2,4 г рослинної сировини). Приклад 1 100 г подрібнених до розміру частинок, які проходили крізь сито з діаметром отвору № 11200, повітряно-сухих квіток лілійника гібридного (Hemerocallis hybrida var. ''Stella De Oro") змочували достатньою кількістю (80 мл) екстрагенту (етилового спирту 55 %) і залишали на 4 год. при кімнатній температурі для набухання в перколяторі. Потім замочену сировину заливали 800 мл етилового спирту 55 %, настоювали протягом 24 год. при кімнатній температурі при періодичному перемішуванні. Після першого циклу екстрагування витяг зливали і знову подавали на сировину, перемішували і настоювали протягом 30 хв. Для максимального виснаження сировини екстрагування проводили 6 разів по 30 хв. Спиртовий витяг зливали, шрот віджимали і піддавали екстракції водою очищеною, підігрітою до 85-90 °C, у співвідношенні 1:10 і настоювали на водяній бані протягом 2 год. Одержані спиртовий і водний витяги об'єднували, перемішували, фільтрували крізь паперовий фільтр, згущували до 1:5 об'єму шляхом упарювання при температурі 80-90 °C. Згущений витяг висушували до одержання максимально густого екстракту в роторному вакуумному випарнику при температурі 50-60 °C. Вихід густого екстракту складав 41,68 %, загальне співвідношення "сировина: готовий продукт" становило 2,4:1 (1 г густого екстракту відповідає 2,4 г рослинної сировини). Отриманий готовий продукт - густий екстракт - однорідна в'язка маса темно коричневого кольору, солодкуватого смаку, зі своєрідним приємним запахом і вологістю 9,5 %, розчинна у теплій воді, нерозчинна в хлороформі, у спирті етиловому 96 % утворює пластівчастий осад. Приклад 2 Дослідження седативної активності густого екстракту з квіток лілійника гібридного (Hemerocallis hybrida var. "Stella De Oro") проводили на 18 білих нелінійних мишах-самцях масою 18-25 г, яких розподілили на 3 групи (n=6) відповідно до препарату, що вони його одержували: 1 група - контрольна; 2-3 групи - експериментальні, тваринам яких вводили густий екстракт квіток лілійника гібридного сорту "Stella De Оrо" у вигляді водного розчину внутрішньошлунково у дозах 100 та 250 мг/кг відповідно. Досліджуваний екстракт вводили в профілактичному режимі протягом 5 днів, востаннє - за 30 хв. до проведення тестів. Тваринам контрольної групи у такому ж режимі вводили у шлунок воду очищену в аналогічному об'ємі (0,1 мл на 10 г маси тіла). Для встановлення впливу рослинної субстанції на поведінкові реакції та емоційний стан інтактних тварин використовували загальноприйнятий тест відкритого поля [3]. Ця модель дозволяє встановити загальний збуджувальний або пригнічувальний характер впливу препаратів, що досліджуються, на ЦНС. Після 5 хвилин перебування в темній клітці мишу розміщували в центрі поля. Тестовий період тривав 3 хв. Дослідження з виявлення ефекту густого екстракту лілійника гібридного сорту "Stella De Оrо" у поведінковому тесті відкритого поля виконували синхронно з відповідним контролем, оскільки ефекти значною мірою залежать від хронофармакологічного чинника. Оцінку впливу на поведінку тварин проводили за такими критеріями: кількість пересічених квадратів (локомоторна активність), вертикальних стійок та обстежених отворів (орієнтовно-дослідницька діяльність). Також реєстрували показники вегетативного супроводу емоційних реакцій: кількість фекальних болюсів, актів уринації та грумінгу. Результати дослідження представлені в табл. 1. 2 UA 119040 U Таблиця 1 Вплив густого екстракту квіток лілійника гібридного сорту "Stella De Оrо" на поведінку мишей у тесті відкритого поля (М±m) Показники (за 3 хв) Локомоторна активність (кількість перетнутих квадратів) Орієнтувальнодослідницька діяльність: - кількість обстежених отворів - кількість стійок - сума Вегетативний супровід емоційних реакцій: - болюси - уринації - грумінг - сума Сума усіх видів активності Контроль (n=6) ЕЛГ, 100 мг/кг (n=6) ЕЛГ, 250 мг/кг (n=6) 25,83±4,99 29,67±5,58 (↑ 15 %) 14,83±2,17* (↓ 43 %) 22,17±2,61 3,17±1,58 25,34±2,73 21,67±3,96 7,83±2,47 29,50±6,00 (↑ 16 %) 18,00±3,79 3,33±1,38 21,33±4,67 (↓ 16 %) 0,17±0,17 0,00 0,83±0,31 1,00±0,26 0,33±0,21 0,00 0,83±0,40 1,17±0,54 (↑ 17 %) 60,83±10,50 (↑ 17 %) 0,50±0,34 0,17±0,17 0,00* 0,67±0,33 (↓ 33 %) 36,83±6,71 (↓ 29 %) 52,17±5,96 Примітки: 1. * - статистично достовірні відмінності відносно контролю (р