Засіб для лікування захворювань кісток, фармацевтична композиція, спосіб лікування захворювань кісток

Применение тетраэфиров пиридиниламинометилиденбифосфоновой кислоты формулы NH-"0R4 ,(1) в которой каждый из радикалов от Ri до Р4представляет собой линейную или разветвленную насыщенную Ci-Cs-алкильную группу, каждый из X и Y представляет собой независимо друг от друга водород, линейную или разветвленную насыщенную Ci-Cs-алкильную группу, галоген, гидроксильную группу, Ci-Cs-алкокси, бензилокси, ацилокси, нитрогруппу, трифторметильную группу или NR5R6, где Rs и R6 могут быть одинаковыми или различаться и представляют собой водород СгСб-алкил, или -ацил в качестве активного агента средства для лечения заболеваний костей, таких как остеолитическая болезнь кости, связанная со злокачественным новообразованием, болезнь Педжета, а также первичный и вторичный остеопороз 2 Применение по п 1, отличающееся тем, что СгСб-алкил, включая также алкильную группу, КІСТОК, ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, СПОСІБ входящую в состав алкокси и ацильнои группы, представляет собой метил или этил, а галоген представляет собой хлор 3 Применение по п 1 или п 2, отличающееся тем, что группы от Ri до Р4 одинаковы и предпочтительно представляют собой этил 4 Применение по п 3, отличающееся тем, что пиридинильная группа представляет собой 2пиридинил 5 Применение по п 1, отличающееся тем, что активный агент представляет собой тетраэтиловый эфир[(2пиридиниламино)метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(3-гидрокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(6-метокси-3пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловыйэфир[(4пиридиниламино)метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(5-хлор-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(5-метокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(6-амино-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(3-нитро-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловыйэфир [[(3,5-дихлор-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(6-гидрокси-3пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(5-гидрокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(3-хлор-5трифторметилпиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, о 0 0 го 43918 тетраэтиловый эфир[[(2-хлор-3пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(6-хлор-3пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(5-нитро-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты или тетраэтиловый эфир[[(5-бензилокси-2пиридинил) амино]метилиден]бифосфоновой кислоты 6 Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний костей, таких как остеолитическая Настоящее изобретение относится к специфической группе тетраэфиров пиридилбифосфоновой кислоты для использования их в качестве лечебного средства, в частности, для использования в случаях заболевания кости Бифосфонаты представляют собой терапевтические средства, применяемые для лечения патологического разрушения кости различного происхождения, таких, как заболевание костей остеолитической природы, связанное со злокачественными новообразованиями, болезнь Педжета и остеопороз Они являются аналогами физиологических неорганических пирофосфатов Основная Р-С-Р структура бифосфонатов позволяет образовывать большое число различных соединений либо за счет изменения боковых цепей атомов углерода, либо за счет добавления групп на фосфаты В целом, бифосфонаты ингибируют остеокласты, клетки, которые ответственны за резорбцию кости Известные бифосфонаты связываются с костным матриксом, при этом они входят в рассасывающиеся остеокласты и снижают активность таких остеокластов Они ингибируют резорбцию кости как in vitro, так и in vivo Для известных бифосфонатов характерны ограниченное всасывание из желудочно-кишечного тракта, быстрое исчезновение в костной ткани и выделение с мочой в неизменном виде В основе настоящего изобретения лежит идея создания производных бифосфонатов с высокой биологической доступностью при пероральном приеме, которые, кроме того, обладают низкой афинностью к кости Это позволило бы избежать побочных явлений без потери антирезорбционнои активности В патентах US4447256, DE3831578 (Suzuki et el ), JP55089210, JP55098105, JP55043054, Р55043055 (Ниссан Кемикал Индастрис) раскрывается способ получения некоторых тетраалкиловых эфиров пиридиламинометиленбифосфоновой кислоты В соответствии с этими патентами, описываемые соединения могут использоваться в качестве гербицидов В патенте ЕР337706 (Isomura et al) раскрывается получение циклил- или гетероциклилзамещенных тетраэфиров аминометиленбифосфоновой кислоты, в которых кольцевой заместитель болезнь кости, связанная со злокачественным новообразованием, болезнь Педжета, а также первичный и вторичный остеопороз, отличающаяся тем, что содержит фармацевтически приемлемый носитель и эффективное количество соединения по любому из пп 1-5 7 Способ лечения заболеваний костей, таких как остеолитическая болезнь кости, связанная со злокачественным новообразованием, болезнь Педжета, а также первичный и вторичный остеопороз, включающий введение в организм млекопитающего, пораженного заболеванием, эффективного количества соединения по любому из пп 1-5 или композиции по п 6 частично или полностью насыщен Тетраэфиры не были исследованы В патенте US4973576 (Sakamoto et al) раскрываются некоторые изоксазолилзамещенные тетраалкиловые эфиры аминометиленбифосфоновой кислоты, которые были испытаны при лечении артрита Биологическая доступность их при пероральном приеме низкая В патенте ЕР282309 раскрываются азоламинометиленби-фосфоновые кислоты и их низшие алкиловые эфиры Тетраэфиры не были исследованы В патенте ЕР325482 раскрываются циклоалкил-аминомети-ленбифосфоновые кислоты и их эфиры Тетраэфиры не были исследованы Настоящее изобретение относится к группе пиридил-бифос-фонатов с новым фармакологическим и фармакокинетическим профилем Эти новые пиридилбифосфонаты не ингибируют резорбцию кости in vitro, но способны ингибировать резорбцию кости iv vivo Пиридилбифосфонаты не связываются с костным матриксом и по всей видимости нуждаются в метаболической активации Таким образом, настоящее изобретение относится ктетра-алкиловым эфирам пиридиламинометиленбифосфоновой кислоты, которые могут быть не обязательно замещены на пиридиновом кольце, в частности, к производным метиленбифосфоновой кислоты общей формулы (фиг) в которой 43918 каждый из радикалов от Ri до R4 представляет собой линейную или разветвленную насыщенную Сі-Сб-алкильную группу, каждый из X и У представляет собой независимо друг от друга водород, линейную или разветвленную насыщенную Сі-Сб-алкильную группу, галоген, гидроксильную группу, Сі-Сб-алкокси, бензилокси, ацилокси, нитрОГруППу, ТрифТОрмеТИЛЬНуЮ Группу ИЛИ NR5R6, где Rs и R6 могут быть одинаковыми или различаться и представляют собой водород, С1-С5алкил, или -ацил, предназначенным для использования их в качестве терапевтических средств Группы X и У, а также аминогруппа эфирной структуры в метиленбифосфоновои кислоте могут замещать одно из любых положений от 2 до 6 в пиридильном кольце Группы X и У представляют собой предпочтительно водород или гидроксильные группы, в последнем случае предпочтительны одна или две гидроксильные группы Пиридильная группа представляет собой предпочтительно 2пиридильную группу Галоген представляет собой фтор, хлор, бром или йод Сі-Сб-алкильньїе группы представляют собой линейную или разветвленную группу, такую как метил, этил, п-, і-пропил, п-, і- и t-бутил или пентил, предпочтительно метил или этил Алкильная группа в алкокси группе, как и в случае X и У, может иметь приведенное выше значение, которое предпочтительно означает метил или этил Ацил в определении ацилокси-группы, как в случае X и У или в определении Rs или R§, представляет собой предпочтительно низшую алкильную карбонильную группу, которая содержит от 1 до 5 атомов углерода и имеет значение, данное выше, предпочтительно это метил или этил Группы от Яі ДО F?4, предпочтительно имеют одинаковые значения и преимущественно являются этилом Предпочтительные соединения настоящего изобретения представлены приведенными ниже соединениями тетраэтиловый эфир [(2пиридиниламино)метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(3-гидрокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир[[(6-метокси-3пиридил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [(4пиридиниламино)метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(5-хлор-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(5-мето кс и-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(6-амино-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(З-нитро-2 6 пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(3 ,5-дихлор-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(б-гидрокси-3пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(5-гидрокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(З-хлор-5тр и фтор мети лпиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(2-хлор-Зпиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(6-хлор-Зпиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(З-бензилокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(5-нитро-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(5-бензилокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты N - замещенные тетраэфиры (аминоалкилиден) бифосфоновой кислоты могут быть получены с помощью известного способа, то есть при взаимодействии аминозамещенного соединения с алкилортоформиатом и дальнейшем взаимодействии полученного таким образом в качестве интермедиата иминоэфирного производного с диалкилфосфитом либо в полученном виде, либо в очищенной форме По второму методу подходящий аминопиридин вначале вступает в реакцию со смесью муравьиной кислоты/уксусным ангидридом Полученный формамид взаимодействует затем с тригалогенидом фосфора и триал килфосфитом Тетраэфиры аминоалкилидинбифосфоновой кислоты могут быть также получены в ходе взаимодействия аминопиридинового производного с галогенметилфосфонатом и последующей реакции полученного таким образом соединения после бромирования с триал килфосфитом (Schrader et al Synthesis (1986), 372) Описываемые соединения используются для лечения у млекопитающих заболеваний кости, таких как остеолитические болезни кости, связанные со злокачественными новообразованиями, болезнь Педжета, а также первичный и вторичный остеопороз Активность описываемых соединений была подтверждена в исследованиях на животных и in vitro Методы и результаты таких исследований представлены ниже У нормально растущих крыс репрезентативное соединение в виде тетраэтилового эфира [(2-пиридиниламино)метилиден]бифосфоновой кислоты снижал спонтанную резорбцию кости, как показывал метод оценки по выведению тетрациклина с мочой и у хронически 43918 предварительно меченных крыс Указанные соединения были также эффективны для предупреждения разрежения кости в случаях экспериментального пороза, индуцированного разрезом седалищного нерва у крыс Не было показано никакого воздействия in vitro на культуру ткани черепа мышей, как показал тест на высвобождение кальция Этот результат позволяет предположить, что соединение метаболизируется раньше, чем может быть обнаружен фармакологический эффект Родительское соединение не демонстрирует какого-либо связывания на кристаллах гидроксиапатита in vitro Фармакокинетика соединени - тетраэтилового эфира [(2-пиридиниламино)метилиден]бифосфоновой кислоты была исследована на крысах Небольшие количества внутривенной дозы выделялись в виде родительского соединения в течение 24 часов в мочу, поддерживая представление о его метаболизации Примерно половина пероральной дозы упомянутого соединения подвергалась всасывания в организме крыс Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение,не ограничивая его каким-либо образом Пример 1 Синтез тетраэтилового эфира [(2пиридиниламино)метилидин]бифосфоновой кислоты 2-аминопиридин (0,2моля) смешивают с триэтилортоформиатом (0,8моля) и этератом трифторида бора и нагревают смесь при температуре 150°С в течение 4часов, в результате чего происходит отгонка образованного в реакции этанола Триэтил-ортоформиат отгоняют в вакууме К реакционной смеси добавляют диэтилфосфит (0,4моля) и нагревают смесь при температуре 150°С до отгонки образованного этанола Смесь охлаждают и грубый продукт очищают с помощью хроматографии (элюент дих-лорметан-метанол, 1 1) Выход составляет 29 граммов (37%) Полученный продукт имеет следующие физико-химические характеристики 31 Р-ЯМР (CDC13) 15,52pp m, 1 Н-ЯМР(С0С1 3 ) Таблица 1 рр Протоны 1,27 4,21 4,78 5,57 6,52 12Н 8Н 1Н 1Н 1Н Мультиплетность m m d dt d 6,67 1Н m 7,44 1Н m 8,11 1Н d Масс-спектр (El MaSS) Обозначения СНз CH 2 NH CH CH (автомат ) CH (автомат ) CH (автомат ) CH (автомат ) 8 380 М, 334М-ЕІГОН, 243 М-Р(О) (ОС2Н5)2 Пример 2 Получение тетраэтилового эфира [[(5-хлор-2пиридинил)амино]метилиден-бифосфоновой кислоты 5-хлор-2-аминогафидин (0,2моля) смешивают с триэтилортоформиатом (0,8моля) и этератом трифторида бора и нагревают смесь при температуре 15О°С в течение 4 часов Образовавшийся в ходе реакции этанол отгоняют Триэтилортоформиат отгоняют в вакууме К реакционной смеси добавляют диэтилфосфит (0,8моля) и нагревают смесь при температуре 150°С до отгонки образовавшегося этанола Смесь охлаждают, а грубый продукт чистят с применением хромотографии (элюент дихлорме-тан-метанол 1 1) Выход составляет 26,5граммов (32%) ( Р-ЯМР 15,20ррт, CDC13) Сходным образом могут быть получены тетраэтиловый эфир [[(3,5-дихлор-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты (31Р-ЯМР, 14, 59 ppm, CDC13), тетраэтиловый эфир [[(З-хлор-5тр и фтор мети лпиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты (31Р-ЯМР, 14, 15 ppm, CDC1 3 , тетраэтиловый эфир [[(5-гидрокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты (масс-спектр (El MaSS) 396 М, 350 М-ЕЮН, 259 М-Р(О)(ОС2Н5)2, тетраэтиловый эфир [[(5-нитро-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты (31Р-ЯМР, 13, 97 рр, CDC13), тетраэтиловый эфир [[(5-бензилокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(5-мето кс и-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(3,5-диметокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты Пример 3 Получение тетраэтилового эфира [[(3гидрокси-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты 2-амино-З-гидроксипиридин подвергают 0бензилированию с помощью бензилхлорида в двухфазной системе при наличии катализатора фазового переноса ( Bristol et al Synthesis 1981, 971) 2-амино-З-бензилоксипиридин (0,1 моля) растворяют в дихлорметане, а полученный раствор охлаждают до температуры 0°С К раствору добавляют 50мл муравьиной кислоты/уксусного ангидрида (5 3) и перемешивают полученную смесь в течение ночи при комнатной температуре Реакционную смесь концентрируют, а остаток промывают диизопропиловым эфиром с получением 11,4г З-бензилоксипиридил-2-формамида, 10мл трихлорида фосфора и 1,5мл три этил фосфита нагревают при температуре 60 - 70°С в течение 1 часа К раствору добавляют 3-бензилоксипиридил-2-формамид (0,01 моля) и перемешивают 43918 10 полученную смесь в течение 5 часов при комнаттетраэтиловый эфир [[(5-ацилокси-2ной температуре Реакционную смесь концентрипиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кисруют и чистят хроматографически (элюентдихлоты лорметан-метанол, 2 1) с получением 0,8г тетраОценка воздействия на спонтанную резоэтилового эфира [[(З-бензилокси-2рбцию кости с помощью теста на выведение тетрациклина с мочой у предварительно меченых пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кикрыс слоты Бензильную группу гидрогенизируют с получением 0,4г тетраэтилового эфира [[(3Использовали самцов крыс Спрэг-Доли гидрокиси-2(Spraque-Dawley) Начиная с первой недели жизни крысам инъецируют подкожно раствор, содержапиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой ки3 щий 10мкСі/мл (7 - H(N) тетрациклина, раствослоты (масс-спектр (El Mass) 396 М, 350 М-ЕЮН, ренного в физиологическом растворе Инъекции 259 М-Р(О)(ОС2Н5)2 проводят 2 раза в неделю в течение б недель Аналогичным образом могут быть получены Каждое животное получает в целом 20мкСі радиотетраэтиловый эфир [[(6-бензокси-Зактивного тетрациклина Все крысы получают пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кинормальную пищу, необходимую для растущих слоты, животных и воду libitum Через неделю после протетраэтиловый эфир [[(6-гидрокси-Зведения последней инъекции радиоактивного тетпиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кирациклина крыс взвешивают и начинают кормлеслоты ние с применением диеты для взрослых Пример 4 животных На 5-й день крыс распределяют слуПолучение тетраэтилового эфира [[(6-хлор-Зчайным образом по группам и помещают в индипиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кивидуальные метаболические камеры В течение слоты 10 дней проводят сбор 24-часовой мочи Начиная Диэтилйодметилфосфонат получают в соотсо 2 дня вводят подкожно в различных дозах ежеветствии с методикой Cade, J Chem Soc , 1959, дневно в течение б дней соединение 1, представ2266 ляющее собой Тетраэтиловый эфир [(26-хлор-З-аминопиридин алкилируют с примепиридиниламино)метилиден]бифосфоновой кинением диэтил-йодметилфосфаната и амида наслоты, растворенное в физиологическом раствотрия в качестве основания в соответствии с изре Контрольным животным давали физиологичевестными методиками Полученный диэтиловый ский раствор Объем мочи измеряли и определяли эфир 6-хлор-З-пиридиниламинорадиоактивность в образцах мочи с помощью метилфосфоновой кислоты (0,5моля) и Nжидкостносцинтилляционного счетчика Для опребромсукцинимид (0,5моля) в безводном четырехделения максимального ингибирования выведехлористом углероде облучают в течение 2-х часов ния тетрациклина вычисляли данные в виде отс помощью лампы в 200V Твердые вещества отношения результатов для фильтровывают, промывают остаток в четырехукобработанных/контрольных животных на каждый сусном хлористом углероде и концентрируют в день вакууме Полученный диэтиловый эфир 6-хлор-Зпиридиниламино(бромметил)фосфоновой кислоВыведение неметаболизированного тетрацикты (0,1 моля) нагревают в тетрагидрофуране с лина с мочой отражает его удаление из кости в триэтилфосфитом (0,1 моля) при 50°С в течение 4ходе резорбтивных процессов и таким образом х часов Реакционную смесь концентририуют в позволяет проводить постоянный мониторинг вакууме Продукт чистят хроматографически процесса резорбции кости Как показано в таблице (элюент дихлорметан-метанол, 9 1) Выход со1 (соединение 1), имеет место зависимое от дозы ставляет 5,1 грамм ингибирования выведения радиоактивного тетрациклина, что указывает на ингибирование процесАналогичным способом могут быть получены са резорбции кости тетраэтиловычй эфир [[(2-хлор-Зпиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, тетраэтиловый эфир [[(6-метокси-Зпиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кислоты, Воздействие на спонтанную тетраэтиловый эфир [(4резорбцию кости у крыс пиридиниламино)метилиден]бифосфоновой кислоты, Таблица 2 тетраэтиловый эфир [[(6-амино-2пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой киИнгибирование выведения слоты, (мг/кг) тетрациклина (%) тетраэтиловый эфир [[(З-нитро-2п среднее знапиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой кичение (СО) слоты, 1 1 5 12,2(6,4) тетраэтиловый эфир [[2-хлор-З2 10 5 19,8(5,9) пиридинил)амино]метилиден]бифосфоновой ки3 100 5 50,0 (6,1) слоты, 4 200 5 72,9 (2,6) 12 11 43918 Воздействие на индуцированный иммотиреоид-ного гормона (ПТГ, ЮнМ), было измерено билизацией остеопороз у крыс ингибирующее воздействие на такую стимулированную резорбцию Как показано в таблице 4, in Крыс-самцов Спрэг-Доли (Spraque-Dawlei ), vitro не было продемонстрировано ингибирования весящих 200 ± 25г, случайным образом распредерезорбции кости, за исключением случаев примеляют по весу по группам и проводят анастезию с нения очень высоких нефизиологических конценпомощью Гипнорма/Мебуната и Темгезии траций Для определения наличия связывания (Hypnorm/Mebunat and Temqesic) Делают заднесоединения 1 с минеральными компонентами косбоковое сечение на правом или левом бедре, обти тетрагидрат С-двунатрии-клодронта и кринажая седалищный нерв и вырезают участок в сталлы гидроксиапатита инкубируют при комнат0,5см Мышцы и кожу сшивают, а животное поменой температуре в буфере на основе щают в камеру Противоположную относительно барбитуровой кислоты при физиологическом знабоковой стороны конечность оставляют без возчении рН в присутствии и в отсутствие соединения действия Соединение 1, растворенное в физио1 в разных концентрациях Через два часа инкулогическом растворе, вводят посредством подбации смесь центрифугируют и в супернатанте кожной инъекции ежедневно в различных дозах, измеряют процент общей специфически связанначиная со 2 дня до операции и затем до 20 дня ной радиоактивности Вплоть до концентрации после нейрэктомии Контрольным животным да500мкМ не было отмечено связывания соединевали только физиологический раствор Животных ния 1 с гидроксиапатитом (таблица 4) с двойной меткой с флуорохромом, получавших Действие на кость in vitro его через установленные временные интервалы, умерщвляют на 21 день после нейрэктомии и удаляют участки бедра Бедра помещают в метилмеТаблица 4 такрилат, разрезают и окрашивают Метафизарный вторичный спонгиоз и диафизарный Ингибирование Связывание с кортикальный слой костей бедра животных подмкмоль/л ПТТ-сти мулиминеральными вергают гистоморфометрическому анализу У конрованнои рекомпонентами трольных крыс общая площадь кости бедра снизорб- ции 100 кости жается в иммобилизованной конечности Как (ПТГ-х) /ПТГ показано на таблице 2, соединение 1 уменьшает в Ингибирование, зависимом от дозы режиме площадь бедренной % (СО) кости в иммобилизованной конечности При этом 1 1 Нет ингибироно не было обнаружено какого-либо разрушительного вания воздействия на уровень отложения минеральных 2 5 но нет связывакомпонентов в кортикальном слое кости (данные не представлены) ния 3 10 Нет ингибироно вания Влияние на остеопороз у крыс, индуцированный 4 100 Нет ингибиронет связываиммобилизацией вания ния 5 200 но нет связываТаблица 3 ния 6 500 но нет связываОбщая площадь костей ния бедра в иммобилизованной 7 1000 12,9(1,3) но конечноети/ % Контроль п Среднее значение н о = не обнаружено (СО) Фармакокинетика 20 5,3 (0,6) Биологическую доступность определяли, ис1 1,0 4 6,0(1,3) ходя из величины общего количества соединения, мг/кг выделяемого с мочой в течение 24 часов или на 2 37,5 5 17,3(2,0) основе данных по концентрации его в сыворотке мг/кг крови в различные временные точки после перо3 75,0 5 24,5 (2,5) рального или внутривенного введения Образцы мг/кг мочи и крови анализируют на наличие исследуемого соединения 1 с применением метода высо4 200,0 7 35,5(1,7) коэффективной жидкостной хроматографии В мг/кг количестве ниже 10% от принимаемой перорально дозы и 14% от вводимой внутривенно дозы соедиДействие на кость in vitro нение выделялось в качестве родительского соНоворожденных мышей метили с помощью единения в течение 24 часов (таблица 5, биологиподкожных инъекций 45 Са в течение четырех дней ческая доступность 58%) Биологическая до умерщвления Фрагменты кости свода черепа доступность соединения 1, оцениваемая по конполучали с помощью микроиссечений из теменцентрации его в крови, составляла 44% ных костей, после их предварительной инкубации в культуральной среде с индометацином, промыПоказатели выведения соединения с мочой, вали и затем культивировали в течение трех дней AUCo—>• и биологическая доступность соединения при наличии соединения 1 и в его отсутствие Ре1 после введения единичной внутривенной или зорбция кости стимулировалась введением парапероральной дозы* Таблица 5 Выведение за 024 часа % дозы 14 43918 13 F, % Ас/ Со -> ч* м кг/мл F, % перор 7,8 в/в 58 13,6 60,7 44 138,7 Доза 114мг/кг F = биолгическая доступность AUCo—>= Площадь под кривой зависимости содержания в крови от времени ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 - 90