Композиції на основі пробіотичних мікроорганізмів, гранули, які їх містять, спосіб їх одержання та їх застосування

1. Пробіотична композиція або премікс, що містить: - від 0,5 до 75 % живих або здатних до регенерації пробіотичних мікроорганізмів (а), вибраних із групи, яка включає пробіотичні дріжджі, тип пробіотичних бактерій, що містить молочнокислі бактерії, вибрані з лактобактерій, та біфідобактерії, за винятком паличкоподібних бактерій, та їх суміші, - від 10 до 95 % сполуки (б), вибраної із стінок дріжджів та дезактивованих дріжджів, та - від 0 до 95 % поживної добавки (в), що містить, зокрема, вітаміни та/або мікроелементи, та/або амінокислоти, та/або інші допоміжні речовини, призначені для тваринного корму, де відсотки виражені у вигляді відношення сухої маси до загальної маси композиції. 2. Пробіотична композиція за пунктом 1, яка переважно містить: 2 (19) 1 3 94941 4 7. Композиція за будь-яким з пунктів 1-6, в якій варіація вмісту сухої речовини пробіотичних мікроорганізмів, виміряна відповідно до тесту А, є позитивною, відповідно до тесту А, в період часу Т0, тобто перед змішуванням пробіотичних мікроорганізмів із стінками дріжджів та/або дезактивованими дріжджами, вміст сухої речовини пробіотичних мікроорганізмів вимірюють за методом ISO 1741, отримують значення DM0, в період часу Т = 14 днів, тобто через 14 днів після змішування пробіотичних мікроорганізмів із стінками дріжджів та/або дезактивованими дріжджами, вимірюють вміст сухої речовини пробіотичних мікроорганізмів, отримують значення DMT, після цього здійснюють наступний розрахунок: V = [(DMT – DM0)/DM0] х 100. 8. Пробіотична гранула, що містить: - пробіотичну композицію або премікс за будь-яким з пунктів 1-7, - поживну суміш, придатну для використання як корм для тварин. 9. Гранула за пунктом 8, де коефіцієнт виживання S пробіотичних мікроорганізмів більше ніж або дорівнює 20 %, переважно більше ніж або дорівнює 50 % та особливо переважно більше ніж або дорівнює 70 %. 10. Спосіб приготування гранул, який включає наступні стадії: - приготування пробіотичної композиції або преміксу за будь-яким з пунктів 1-7, - внесення пробіотичної композиції або преміксу в поживну суміш, придатну для використання як корм для тварин, переважно після латентного періоду впродовж принаймні 14 днів, - введення водяної пари при температурі від 60 °С до 100 °С при тиску в діапазоні від 0,5 до 3,5 бар в суміш, отриману на попередній стадії, та пресування. 11. Спосіб поліпшення стабільності пробіотичних гранул, який включає приготування пробіотичної композиції або преміксу за будь-яким з пунктів 1-7, що містить пробіотичні мікроорганізми та стінки дріжджів та/або дезактивовані дріжджі, та необов'язково поживну добавку, що містить, зокрема, вітаміни та/або мікроелементи, та/або амінокислоти, та/або інші допоміжні речовини, призначені для тваринного корму, цю композицію вносять в поживну суміш, придатну для використання як корм для тварин, перед введенням водяної пари, стадією грануляції та пресування. 12. Застосування пробіотичної композиції або преміксу за будь-яким з пунктів 1-7 як корму для тварин. 13. Застосування гранул за пунктом 8 або 9 або приготовлених способом за пунктом 10 як корму для тварин. Об'єктом даного винаходу є пробіотична композиція або премікс, що містить живі або здатні до регенерації пробіотичні мікроорганізми та стінки дріжджів та/або дезактивовані дріжджі, присутність стінок дріжджів та/або дезактивованих дріжджів дозволяє, зокрема, стабілізувати пробіотичні мікроорганізми. Ця композиція або премікс може застосовуватися для приготування гранул, які можна використовувати як корм для тварин. Термін "пробіотики" означає живі мікроорганізми, які при їх споживанні в достатній кількості, проявляють позитивну дію на організм-хазяїн шляхом поліпшення мікрофлори його кишечнику i переважають звичайні впливи поживних речовин. Вони є альтернативою застосуванню антибіотиків для харчування тварин. Найчастіше вони представляють собою бактерії або дріжджі, які присутні або в харчових продуктах або в харчових добавках. Існує чотири основі типи пробіотиків: - молочнокислі бактерії (лактобактерії та коки), - біфідобактерії людського або тваринного походження,' - різноманітні дріжджі, включаючи дріжджі типу Saccharomyces, - інші спороутворюючі бактерії, включаючи Bacillus subtillis та cereus. Мікроорганізми, вбиті нагріванням, не підпадають під визначення пробіотиків, навіть „незважаючи на те, що вони можуть викликати деякі лікувальні впливи. В більш широкому розумінні, термін "пробіотики" також охоплює харчові продукти, що містять такі мікроорганізми. Пробіотики все частіше застосовуються як для споживання людьми, так i для харчування тварин, особливо як замінник при введенні антибіотиків, особливо для повернення до більш здорового, більш природного та більш екологічно сприятливого харчування. При харчуванні тварин, ці мікроорганізми зазвичай додаються до гранульованого корму за допомогою преміксу, що також містить вітаміни, мікроелементи та амінокислоти. Проте введення пробіотичних мікроорганізмів в гранули не є простим, оскільки пробіотичні мікроорганізми найчастіше руйнуються в процесі гранулювання. Цю стадію при приготуванні гранул здійснюють в присутності водяної пари при температурах в інтервалі від 60°С до 100°С та при тиску в діапазоні від 0,5 до 3,5 бар, ці температура i вологість є такими, що мікроорганізми, як правило руйнуються. В патентній заявці ЕР 0 694 610, стійкість дріжджів видів Phaffia rhodozyma, які продукують барвник, азаксантин, та застосовуються в кормі для риб для надання червоного кольору вирощуваним форелі та лососю, поліпшували шляхом висушування в присутності цукру, такого як глюкоза. Однак цей випадок не застосовний для пробіотичних дріжджів, які повинні залишатися живими аж до їх перетравлювання тваринами для можливості виконання ними своїх функцій. 5 Несподівано та непередбачувано, винахідниками було виявлено, що пробіотичні мікроорганізми можуть проявляти підвищену стабільність в преміксах протягом періоду часу при змішуванні з стінками дріжджів /або дезактивованими дріжджами замість звичайно використовуваних носив для преміксів, таких як пшенична мука або карбонат кальцію. Це поліпшує стабільність протягом часу, що робить їх більш стійкими до грануляції. У фармакології та приготуванні кормів для сільського господарства уже було описано застосування стінок дріжджів. Ці стінки застосовують як наповнювач для приготування фармацевтичних таблеток, особливо як сполучні речовини із дезінтегруючими властивостями (Ozeki та ін., AAPS PharmSciTech, 2003,4(3) Е41) або як компонент покриття (ЕР 1 159 882, Yuasa та ін., Int J. Pharm., 2002, Apr 26,237(1-2) : 15-22). Проте, за даними заявника дотепер ніде не розглядалась можливість їх застосування для поліпшення стабільності живих або здатних до регенерації мікроорганізмів. Таким чином, існує нагальна потреба в пробіотичних мікроорганізмах, які стабільні вподовж періоду часу, такого, щоб забезпечити можливість здійснення ними очікуваного впливу на тварин, які їх споживають. Отже, об'єктом даного винаходу є пробіотична композиція або премікс, що містить: - від 0,5 до 75% живих або здатних до регенерації пробіотичних мікроорганізмів (а) вибраних із групи, яка включає пробіотичні дріжджі, тип пробіотичних бактерій, що містить молочнокислі бактерії, вибрані з лактобактерій, та біфідобактерій, за винятком паличкоподібних бактерій, та їх суміші, - від 10 до 95% сполуки (б), вибраної із стінок дріжджів та дезактивованих дріжджів, та - від 0 до 95% поживної добавки (в), що містить, зокрема, вітаміни, та/або мікроелементи, та/або амінокислоти, та/або інші допоміжні речовини, призначені для тваринного корму, де відсотки виражені у вигляді відношення сухої маси до загальної маси композиції. В даному винаході, вираз "здатні до регенерації" або "життєздатні" мікроорганізми слід розуміти як такі мікроорганізми, які, в присутності живильного середовища, відновлюють свою здатність до поділу та утворення колоній. Як приклад пробіотичних дріжджів, можна навести пробіотичні дріжджі, вибрані із групи, яка включає дріжджі роду Saccharomyces, переважно видів Saccharomyces cerevisiae, або роду Kluyveromyces, такі як Kluyveromyces marxianus та їх суміші. Переважними прикладами штамів Saccharomyces cerevisiae є штам Saccharomyces cerevisiae Sc47, депонований в NCYC за номером 47, штам Saccharomyces cerevisiae, депонований в колекції Пастера (CNCM) за номером l-1077, штам Saccharomyces cerevisiae, депонований в колекції Пастера (CNCM) за номером l-1079, штам Saccharomyces cerevisiae, депонований в колекції MUCL за номером 39 885, штам Saccharomyces cerevisiae, депонований в колекції CBS за номером 39 493.94, штам Kluyveromyces marxianus, 94941 6 депонований в колекції MUCL за номером 39434 та їх суміші. Найбільш переважно, композиція відповідно до даного винаходу містить дріжджі, які відповідають штаму Saccharomyces cerevisiae Sc47, депонованому в NCYC за номером 47. Таким чином, відповідно до найбільш переважного варіанту здійснення винаходу, вказана пробіотична композиція або премікс містить: - від 0,5 до 75%, переважно від 5 до 30% живих або здатних до регенерації дріжджів, - від 10 до 80%, переважно від 25 до 50% стінок дріжджів та/або дезактивованих дріжджів, - від 0 до 95%, переважно від 5 до 80% поживної добавки, де відсотки виражені у вигляді відношення сухої маси до загальної маси композиції. Ця композиція особливо переважна як корм для тварин з однокамерним шлунком. Стінки дріжджів, в основному, можуть бути вибрані із всіх сортів харчових дріжджів, наприклад, Saccharomyces cerevisiae. Особливо переважно, стінки дріжджів вибирають із дріжджів, які надходять у продаж під торговельними марками PRONARDY®, SAFMANNAN® або BIOMOS® компаній Prodessa, Biospringer та Alltech, відповідно. Стінки дріжджів можуть бути отримані за методами, добре відомими середньому фахівцю в даній галузі техніки, при цьому особливо переважним є аутоліз клітин дріжджів із наступним розділення за фізичними параметрами нерозчинної частини, яка містить стінки, від розчинної частини. В контексті даного винаходу, під дезактивованими дріжджами розуміють дріжджі, які не мають ніякої ферментативної активності. Як такі можуть використовуватися будь-який тип дезактивованих дріжджів, за умови що вони є харчовими, наприклад Saccharomyces їх отримують за методами, добре відомими фахівцю в даній галузі техніки, та особливо переважно за допомогою термічної обробки. Відповідно до найбільш переважного варіанту здійснення винаходу, дезактивовані дріжджі мають вміст сухої речовини, більше ніж 95%. Якщо застосовують суміш дезактивованих дріжджів та стінок дріжджі, то джерело походження дріжджів може бути однаковим або різним. Пробіотична композиція відповідно до винаходу характеризується дуже хорошою однорідністю. Не бажаючи обмежуватися будь-якою теорією, вважають, що присутність стінок дріжджів та/або дезактивованих дріжджів в композиції або преміксі відповідно до винаходу надає можливість стабілізувати пробіотичні мікроорганізми шляхом зменшення вмісту води в пробіотичних мікроорганізмах та стабілізації цієї води впродовж періоду часу. З одного боку, цей вміст води значно підвищується при застосуванні загальноприйнятого носія для преміксу, як описано в даній галузі, та який містить, зокрема, пшеничну муку або карбонат кальцію. Крім того, застосування карбонату може викликати проблеми, пов'язані із абразивністю та сегрегацією. Таким чином, відповідно до переважного варіанту здійснення, варіація вмісту сухої речовини 7 пробіотичних мікроорганізмів, VA, виміряна відповідно до наступного тесту А, є позитивною. Тест А В час Т0, тобто перед змішуванням пробіотичних мікроорганізмів із стінками дріжджів та/або дезактивованими дріжджами, вміст сухої речовини пробіотичних мікроорганізмів вимірюють за методом ISO 1741. Отримують значення DM0. В час Τ = 14 днів, тобто через 14 днів після змішування пробіотичних мікроорганізмів із стінками дріжджів та/або дезактивованими дріжджами, вимірюють вміст сухої речовини пробіотичних мікроорганізмів. Отримують значення DMT. Після цього здійснюють наступний розрахунок V = [(DMT - DM0)/DM0] × 100. Переважно, варіація вмісту сухої речовини пробіотичних мікроорганізмів V становить більше, ніж 0,5%, переважно більше, ніж 1%. Відповідно до переважного варіанту здійснення, композиція або премікс відповідно до винаходу додатково містить поживну добавку, що містить, зокрема, вітаміни та/або мікроелементи та/або амінокислоти та/або інші допоміжні речовини, призначені для тваринного корму. Вітаміни, які входять до складу композиції, вибирають із групи, яка включає: вітамін А, вітамін D3, вітамін Е, вітаміни В1, В2, В5, В6, В12, С, РР, біотин, фолієву кислоту, холін, вітамін K3 пантотенову кислоту та їх суміші. Мікроелементи, які входять до складу композиції можуть бути харчовими мінеральними солями. Їх вибирають із групи, яка включає: мідь, цинк, залізо, марганець, йод, селен та їх суміші. Амінокислоти, які входять до складу композиції, вибирають із групи, яка включає: метіонін, лізин, L-треонін, триптофан та їх суміші. Пробіотичну композицію або премікс, описані вище, можна безпосередньо вносити в кормові продукти для тварин Зазвичай, композицію відповідно до винаходу включають до складу кормових 7 10 продуктів в кількості від 5×10 до 5×10 КОУ (колонієутворюючих одиниць) пробіотичних мікроорганізмів на кг кінцевого кормового продукту, переваж8 10 но від 5×10 до 1×10 КОУ на кг кінцевого кормового продукту. Наприклад, якщо пробіотичний мікроорганізм композиції відповідно до винаходу представляє собою дріжджі Saccharomyces cerevisiae Sc47, які виробляються компанією Lesaffre під торпвельною маркою BIOSAF®, то композицію відповідно до винаходу можна вносити в корм для тварин, таким 9 чином, щоб отримати від 2,5 до 8×10 КОУ Saccharomyces cerevisiae Sc47 на кг кінцевого кормового продукту. Пробіотична композиція, описана вище, також може застосовуватися у пробіотичних гранулах, придатних, зокрема, як корм для тварин. Таким чином, відповідно до подальшого варіанту здійснення, винахід стосується пробіотичних гранул, які містять: - пробіотичну композицію або премікс, як описано вище, та - поживну суміш, підходящу для використання як корм для тварин. 94941 8 Як правило, гранули за винаходом містять один на тисячу за масою пробіотичних мікроорганізмів. Поживна суміш представляє собою суміш, яку звичайно використовує фахівець в даній галузі для приготування гранул, призначених як корм для тварин, її склад залежить від виду тварин, яким цей корм призначений, але зазвичай вона містить продукти рослинного походження, такі як, наприклад, пшенична мука та/або макуха соєвої олії або макуха рапсової олії та/або бурякові вижимки та/або кормова патока та/або сечовина, у співвідношеннях, які добре відомі фахівцю в даній галузі. Після цього премікс додають до напівфабрикатів (кормових продуктів), природа та кількість яких залежить від виду тварини. Цю поживну суміш необов'язково збагачують вітамінами та/або мікроелементами та/або амінокислотами та/або іншими допоміжними речовинами, призначеними для тваринного корму, які наведені нижче при описі пробіотичної композиції за винаходом. Гранули за винаходом готують за допомогою методу, який включає наступні стадії: - приготування пробіотичної композиції або преміксу відповідно до винаходу, - внесення вказаної композиції або преміксу в поживну суміш, підходящу для використання як корм для тварин, переважно після латентного періоду впродовж принаймні 14 днів, - введення водяної пари при температурі від 60°С до 100°С при тиску в діапазоні від 0,5 до 3,5 бар в отриману раніше суміш i пресування. Сприятливо, композиції або преміксу, що містить пробіотичні мікроорганізми, дозволяють відстоюватися принаймні протягом 15 днів, переважно принаймні протягом 1 місяця перед введенням їх до поживної суміші. Гранули, які отримують способом за винаходом, мають дуже хороший коефіцієнт виживання пробіотичних мікроорганізмів. Відповідно до переважного варіанту здійснення, коефіцієнт виживання пробіотичних мікроорганізмів при грануляції може бути визначено за коефіцієнтом S, який відповідає співвідношенню між кількістю КОУ після грануляції (КОУпг) та кількістю КОУ до грануляції (КОУдг), помноженому на 100. Коефіцієнт виживання мікроорганізмів в гранулах за даним винаходом є таким, що значення коефіцієнта S більше ніж або дорівнює 20%, переважно більше ніж або дорівнює 50% та ще більш переважно більше ніж або дорівнює 70%. Винахід також стосується способу поліпшення стабільності пробіотичних гранул, який включає приготування пробіотичної композиції або преміксу, що містить пробіотичні мікроорганізми та стінки дріжджів та/або дезактивовані дріжджі, та необов'язково поживну добавку, що містить, зокрема, вітаміни, та/або мікроелементи, та/або амінокислоти, та/або інші допоміжні речовини, призначені для тваринного корму, цю композицію вносять в поживну суміш перед введенням водяної пари, стадією грануляції та пресування. Як зазначалося вище, було виявлено, що стійкість до температури грануляції полягає, зокрема, 9 94941 в збільшенні або підтриманні вмісту сухої речовини пробіотичних мікроорганізмів, що містяться в композиції відповідно до винаходу. Гранули за винаходом або отримані способом за винаходом, призначені для застосування як корм для тварин. Винахід дозволяє забезпечити контрольоване надходження пробіотичних мікроорганізмів в їжу, за умови, що кінцева кількість живих пробіотичних мікроорганізмів в кормі для тварин становить принаймні 20% кількості, застосовуваної для приготування композиції або гранул відповідно до винаходу. Даний винахід більш докладно ілюструється наступними прикладами та фігурами. При цьому слід врахувати, що наведені приклади представлені лише для ілюстрації даного винаходу i ніяким чином не можуть розглядатися як такі, що обмежують заявлений винахід. Приклади: Приклад 1: Використовувані матеріали 10 Приклади заявленого винаходу здійснюють з використаннями таких матеріалів: Пробіотичні дріжджі представляють собою дріжджі, які надходять у продаж під торговельною маркою BIOSAF® (в подальших прикладах буде застосовуватися лише термін BIOSAF®) Продукт BIOSAF® представляє собою концентрат живих клітин штаму дріжджів Saccharomyces cerevisiae 10 Sc47, 1×10 КОУ/г BIOSAF® (NCYC - 47). Цей продукт призначений виключно для харчування тварин, він виробляється у формі мікрогранул та проявляє стабільність до нагрівання аж до 80°С. Застосовувані стінки дріжджів складаються із стінок Saccharomyces cerevisiae i їх готують за допомогою аутолізу з наступним центрифугуванням. Застосовувані дезактивовані дріжджі складаються із стінок Saccharomyces cerevisiae i їх готують за допомогою термічної обробки. Фізичні характеристики наведені нижче в таблиці 1: Таблиця 1 Стінки дріжджів Розмір частинок Насипна густина г/см Вологість % 3 Серединний діаметр = 182,4 мкм 68% частинок, які мають діаметр в інтервалі від 80,6 до 412,8 мкм 0,452 3,5 Дезактивовані дріжджі Серединний діаметр = 178,4 мкм 68% частинок, які мають діаметр в інтервалі від 103,9 дo 306,4 мкм 0,629 4,5 BIOSAF® Серединний діаметр = 1354,2 мкм 68% частинок, які мають діаметр в інтервалі від 992,5 до 1847,8 мкм 0,797 7,0 Приклад 2: 2.1 Приготування преміксів Різноманітні суміші (премікси 1 - 3), склад яких наведено в таблиці 2 нижче, готували вручну: Таблиця 2 Компонент BIOSAF® Стінки дріжджів Дезактивовані дріжджі Пшенична мука Поживна добавка Премікс 1 14% 14% 72% Відсотки розраховані за масою відносно загальної маси преміксу. Премікс 3 відповідає композиції, яка входить до складу гранул відомого рівня техніки. 2.2 - Варіація вмісту сухої речовини Вміст сухої речовини, присутньої в BIOSAF в кожному з преміксів 1-3, визначали відповідно до Премікс 2 14% 86% Премікс 3 14% 14% 72% Премікс 4 14% 86% офіційного стандарту ISO 1741 в періоди часу Τ = 1 день, 2 днів, 7 днів та 14 днів. Отримані результати представлені на фігурі 1. Варіація вмісту сухої речовини відповідно до тесту А наведена в таблиці нижче: V = [(DMT-DM0)/DM0] × 100 Таблиця 3 Премікс/час контакту Премікс 1 Премікс 2 Премікс 3 1 день +0,1% +0,4% -0,9% Слід зазначити, що час контакту між BIOSAF® та іншими компонентами преміксу відграє виріша 2 Дні +0,5% +0,5% -0,9% 7 Днів +0,6% +0,8% -1,0% 14 Днів +0,7% +1,2% -1,2% льну роль, оскільки він узгоджується з вологістю продуктів, яка урівноважується. Якщо часовий фа 11 94941 ктор є несприятливим для суміші BIOSAF®пшенична мука, то повинно пройти принаймні 14 днів у випадку носія на основі стінок дріжджів та/або дезактивованих дріжджів. Приклад 3 У попередніх дослідженнях було показано, що спосіб змішування може пошкоджувати BIOSAF® продукт, роблячи його більш схильним поглинати вологість з навколишнього середовища. Отже, надзвичайно важливим є виробництво преміксів стінок дріжджів-BIOSAF® в промислових умовах для підтримання позитивного впливу вказаних стінок дріжджів. 3.1 Приготування преміксу відповідно до промислового процесу BIOSAF зберігали в силосній ямі висотою від 5 до 6 метрів. В процесі приготування дріжджі транспортували на 50 метрів в змішувач за допомогою вертикального пневматичного транспортера (перенесення в щільну фазу) діаметром 10 см. Вхідний отвір для повітря (попередньо оброблений, висушений та охолоджений) надає можливість проштовхувати продукт по транспортері послідовно порція повітря за порцією продукту. На виході транспортера, у зважувальному кошику перевіряють вагу продукту перед надходженням в плужний змішувач, в який одночасно подають суміш. Застосовуваний змішувач представляє собою плужний змішувач зі швидкістю обертання 120 обертів/хв, а тривалість змішування становить 60 секунд. Після цього кінцевий премікс подають для пакування у мішки або на безтарне пакування. Склад промислово приготовлених преміксів наведено в таблиці нижче: Таблиця 4 Компонент BIOSAF® Стінки дріжджів Дезактивовані дріжджі Пшенична мука Поживна добавка Премікс Премікс Премікс 1а 3а 5 14% 14% 56% 14% 44% 14% 72% 72% 3.2 - Варіація вмісту сухої речовини Варіація вмісту сухої речовини BIOSAF® залежить від часу, протягом якого проводили дослідження цих різних преміксів, як описано в прикладі 2. Аналогічно до преміксів, приготовлених вручну, вміст сухої речовини в BIOSAF® знижується в преміксі, що містить пшеничну муку (премікс За) він змінюється від 93% до 91,7%. Вміст сухої речовини в преміксах відповідно до винаходу залишається постійним в преміксі 1а (14% стінок дріжджів), але підвищується на 0,3% після контактування протягом 1 місяця в преміксі 5 (44% стінок дріжджів). Вплив стінок дріжджів на вміст вологи в BIOSAF® є менш помітним, якщо суміш готували в промислових умовах, незважаючи на це, не відбу 12 вається зниження вмісту сухої речовини в BIOSAF®, як це спостерігається при використанні загальноприйнятих носіїв для преміксів (наприклад на основі пшениці). Приклад 4: 4.1 Приготування гранул Гранулювальну обробку здійснювали на лабораторному пресі із фіксованим плоским дискомекструзійним мундштуком (прес KAHL. 14 - 175 3 кВт, який має діаметр та товщину каналів 4 та 20 мм відповідно (таким чином, що коефіцієнт стиснення дорівнює 5)). Пакувальна машина (INRA, Нант, Франція) із 32 обертовими лопатями мала довжину 544 мм та об'єм 3,75 л. Двигун потужністю 2,2 кВт контролювався регулятором швидкості, який регулює пропускну здатність. Температуру встановлювали на рівні роботи пакувальної машини (при 80 та 90°С). Готували дві партії гранул в умовах, описаних вище. Першу партію гранул готували, пропускаючи водяну пару при температурі 80°С, а другу партію - пропускаючи водяну пару при температурі 90°С. Премікси використовували одразу після їх приготування. Склад гранул наведено нижче: Пшениця Макуха соєвої олії Макуха рапсової олії Бурякові вижимки Кормова патока Сечовина Премікс 3а Премікс 5 Гранула 1 29,3% 25% 20% 20% 3% 2% 0,7% Гранула 2 29,3% 25% 20% 20% 3% 2% 0,7% 4.2 Дослідження стійкості гранул Для кожної партії гранул, визначали коефіцієнт виживання BIOSAF®. Результати викладені нижче: Гранула Гранула 1 Гранула 2 80°С 9,4% 23,9% 90°С 2,6% 5,4% Способи розрахунків: % стійкості або коефіцієнт виживання = кількість клітин, які здатні до регенерації, в гранулах (в КОУ/г) × 100/кількість клітин, які здатні до регенерації, в складі для грануляції безпосередньо перед грануляцією (в КОУ/г). Отримані результати вказують на дуже низький коефіцієнт виживання, який свідчить про низьку стійкість до грануляції BIOSAF®, введеного в премікс 3а (гранула 1)в порівнянні із партіями BIOSAF®, введеними до преміксу 5 відповідно до винаходу (гранула 2). Приклад 5: Аналогічно до прикладу 4, готували гранули із застосуваннями преміксів 3а та 5, склад яких наведено у прикладі 3. Проте ці премікси готували за один місяць до грануляції. 13 Пшениця Макуха соєвої олії Макуха рапсової олії Бурякові вижимки Кормова патока Сечовина Премікс 3а Премікс 5 94941 14 Гранула 1 29,3% 25% 20% 20% 3% 2% 0,7% Гранула 3 29,3% 25% 20% 20% 3% 2% 0,7% 4.2 Дослідження стійкості до грануляції Для кожної партії гранул, стійкість до грануляції оцінюють шляхом визначення коефіцієнту виживання BIOSAF®. Результати представлені нижче: Гранула Гранула 1 Гранула 2 80°С 4,6% 27,9% Отримані результати свідчать про те, що гранули відповідно до винаходу мають стійкість до грануляції, і отже, коефіцієнт виживання в шість разів вищий за порівнювані гранули Комп’ютерна верстка Т. Чепелева Підписне Тираж 24 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601