Спосіб визначення біологічної дії іонізуючого випромінювання

УКРАЇНА (19) 12926 (И) СІ (5і)5 G 01 N 33/_483//G 01 N 23/58; G01 N38/68 ОПИС ДО ПАТЕНТУ ДЕРЖАВНЕ ПАТЕНТНЕ ВІДОМСТВО НА ВИНАХІД (54) СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ БІОЛОГІЧНОЇ ДІЇ ІОНІЗУЮЧОГО ВИПРОМІНЮВАННЯ 1 (20) 95320344, 20.08.93 (21)5012850/SU (22)08.07.91 (24)28.02.97 (46)28.02.97. Бюл. N* 1 (56) 1. Авторское свидетельство СССР N? 1037767, кл. G 01 N 33/48. 2. Авторское свидетельство НРБ № 43822, кл. G 01 N 33/48. 1988. 3. Авторское свидетельство СССР Ns 1451600, кл. G 01 N 33/48. 1989. 4. Авторское свидетельство СССР № 784871, кл. А 61 В 10/00, G 01 N 23/00. 5. Авторское свидетельство СССР № 1295555, кл. А 61 К 39/00, G 01 N 33/49. 6. Авторское свидетельство СССР № 1588131, кл. G 01 N 33/48. 1989. 7. Бриллиант М.Д., Воробьев А.И., Гогина Е.Е. Терапевтический архив,М., Медици на, 1987, том ИХ, №6, с. 3-8. 8. Вечірній Київ. 1991, 22.02, № 37. 9. Авторское свидетельство СССР Ns 908323. 10. Timonen Т., Sakbela G. Isolation of human NK cells bya gradient cemrlfugation. J. Immunol. Methods. 1980, 36 p. 285-291. 11. Гмурман В.Е, Теория вероятности и математическая статистика. М., Высшая школа, 1972, с. 368. (72) Перехрестенко Петро Михайлович, Назарчук Лідія Василівна. Федоровська Олена Олексіївн а, Зві ркова Ал а Семені вна, Бідненко Світлана Іванівна, Клєвцов Юрій Олексійович (73) Київський науково-дослідний інститут гематології та переливання крові (UA) (57) Способ определения биологического действия ионизирующего излучения путем исследования периферической крови пациента, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что определяют частоту встречаемости высоких титров антипротейных антител, уровня гемоглобина и больших гранулосодержзщих лимфоцитов и при показателях титров антипротейных антител больше или равно 1:80, уровня гемоглобина больше или равно 170,0 г/л, больших гранулосодержащих лимфоцитов больше или равно 20,0% у (28,2±1,04)% - (74,2±1,02)% населения, устанавливают наличие длительного биологического действия ионизирующего излучения. с > ю о ю ON Изобретение относится к медицине и касается способов определения биологического действия ионизирующего излучения на население. Аварийные ситуации, возникающие на атомных электростанциях, ставят перед медициной ряд проблем. Одной из них является защита людей от воздействия малых доз ионизирующего излучения. До недавнего времени в лучевой патологии человека основное внимание уделялось лишь общему облучению большими экспозиционными дозами, составляющими 100 Рад и более и вызывающими острую лучевую болезнь. Вместе с тем, именно большие радиационные катастрофы, наряду с массивным поражением высокими экспозиционными дозами, одновременно приво 12926 Таблица 1 Е^ероятность обнаружений лиц с высокими уровнями антипротейных антител в сыворотке крови в динамике наблюдения Сроки исследования До аварии на ЧАЭС После аварии на ЧАЭС через 6 мес через 12 мес К-во обследованных лиц Вероятность выявления антипротейных антител в титрах 1:80 (М±т), % 836 5,30±0.52 257 290 28,20±1,04 74,20±1,02 Таблица 2 Вероятность обнаружения лиц с высокими уровнями гемоглобина и больших гранулосодержащих лимфоцитов в периферической крови в динамике наблюдения К-во обследованных Сроки Вероятность выявления (М±т), % лиц гемоглобина больших гранулосо170,0 г/л держащих лимфоцитов 20,0% До аварии 1056 не обнаружено 1,5±0,2 После аварии на ЧАЭС Через 6 мес 50,0±7,07 532 42,3±9,6 Через 12 мес 40,0±2,19 660 30,4 ±6,1 Упорядник Замовлення 4090 Техред М.Моргентал Коректор М. Керецман Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, КиТв-53, Львівська пл„ 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул.ГагарІна, 101 УКРАЇНА (19) UA,,,, 12926 (її) С1 (5і)5 G 01 N 33/483//G 01 N 23/58; _ G01 N38/68 ОПИС ДО ПАТЕНТУ ДЕРЖАВНЕ ПАТЕНТНЕ ВІДОМСТВО НА ВИНАХІД (54) СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ БІОЛОГІЧНОЇ ДІЇ ІОНІЗУЮЧОГО ВИПРОМІНЮВАННЯ 1 (20) 95320344, 20.08 93 (21)5012850/SU (22)08.07.91 (24)28.02.97 (46)28.02.97. Бюл. № 1 (56) 1. Авторское свидетельство СССР № 1037767, кл. G 01 N 33/48. 2. Авторское свидетельство НРБ Ns 43822, кл. G 01 N 33/48. 1988. 3. Авторское свидетельство СССР № 1451600, кл. G 01 N 33/48. 1989. 4. Авторское свидетельство СССР 11. Гмурман В.Е Теория вероятности и математическая статистика М., Высшая школа, 1972, с 368. (72) Перехрестенко Петро Михайлович, Назарчук Лідія Василівна. Федоровська Олена Олексіївн а. Зві ркова Ал а Семені вна, БІдненко Світлана Іванівна, Клєвцов Юрій Олексійович (73) Київський науково-дослідний інститут гематології та переливання крові (UA) 5. Авторское свидетельство СССР Ns 1295555, кл. А 61 К 39/00, G 01 N 33/49. 6. Авторское свидетельство СССР № 1588131, кл. G 01 N 33/48. 1989. 7. Бриллиант М.Д., Воробьев А.И., Гогина Е.Е. Терапевтический архив,М., Медици на. 1987, том ИХ, Ns6. с. 3-8 8 Вечірній Київ. 1991, 22.02. № 37. 9. Авторское свидетельство СССР № 908323. 10. Timonen Т., Sakbela G. Isolation of human NK cells bya gradient centrifugation. J. Immunol. Methods. 1980. 36 p. 285-291. (57) Способ определения биологического действия ионизирующего излучения путем исследования периферической крови пациента, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что определяют частоту встречаемости высоких титров антипротейных антител, уровня гемоглобина и больших гранулосодержащих лимфоцитов и при показателях титров антипротейных антител больше или равно 1:80, уровня гемоглобина больше или равно 170,0 г/л, больших гранулосодержащих лимфоцитов больше или равно 20,0% у (28,2±1,04)% - (74,2±1,02)% населения, устанавливают наличие длительного биологического действия ионизирующего излучения. Изобретение относится к медицине и касается способов определения биологического действия ионизирующего излучения на население. Аварийные ситуации, возникающие на атомных электростанциях, ставят перед медициной ряд проблем. Одной из них является защита людей от воздействия малых доз ионизирующего излучения. До недавнего времени в лучевой патологии человека основное внимание уделялось лишь общему облучению большими экспозиционными дозами, составляющими 100 Рад и более и вызывающими острую лучевую болезнь. Вместе с тем, именно большие радиационные катастрофы, наряду с массивным поражением высокими экспозиционными дозами, одновременно приво № 784871, кл. А 61 В 10/00. G 01 N 23/00. ю sO ю 12926 Т аблица 1 Вероятность обнаружений лиц с высокими уровнями антипротейных антител в сыворотке крови в динамике наблюдения Сроки исследования До аварии на ЧАЭС После аварии на ЧАЭС через 6 мес через 12 мес К-во обследованных лиц Вероятность выявления антипротейных антител в титрах 1:80 (М±т), % 836 5,30±0,52 257 290 28,20±1,04 74,20±1,02 Таблица 2 Вероятность обнаружения лиц с высокими уровнями гемоглобина и больших гранулосодер* жащих лимфоцитов в периферической крови в динамике наблюдения Вероятность выявления (М±т), % Сроки К-во обследованных лиц гемоглобина больших гранулосо170,0 г/л держащих лимфоцитов 20,0% 1056 не обнаружено 1,5±0,2 До аварии После аварии на ЧАЭС 50,0±7,07 42,3±9,6 Через 6 мес 532 40.0±2,19 30,4 ±6,1 Через 12 мес 660 Упорядник Замовлення 4090 Техред М.Моргентал Коректор М. Керецман Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, КиТв-53, Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул.ГагарІна, 101 УКРАЇНА (19) U А «и, 12926 С1 (505 G 01 N 33/483//G 01 N 23/58; G01 N38/68 ОПИС ДО ПАТЕНТУ ДЕРЖАВНЕ ПАТЕНТНЕ ВІДОМСТВО НА ВИНАХІД (54) СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ БІОЛОГІЧНОЇ Дії ІОНІЗУЮЧОГО ВИПРОМІНЮВАННЯ 1 (20) 95320344, 20.08.93 (21)5012850/SU (22)08.07.91 (24)28.02.97 (46)28.02.97. Бюл. № 1 (56) 1. Авторское свидетельство СССР № 1037767, кл. G 01 N 33/48. 2. Авторское свидетельство НРБ N? 43822, кл. G 01 N 33/48. 1988. 3. Авторское свидетельство СССР № 1451600, кл. G 01 N 33/48. 1989. 4. Авторское свидетельство СССР № 784871, кл. А 61 В 10/00, G 01 N 23/00. 5. Авторское свидетельство СССР № 1295555, кл. А 61 К 39/00, G 01 N 33/49. 6. Авторское свидетельство СССР Ns 1588131, кл. G 01 N 33/48, 1989. 7. Бриллиант М.Д., Воробьев А.И., Гогина Е.Е. Терапевтический архив,М., Медици на, 1987, том ИХ, № 6, с. 3-8. 8. Вечірній Київ, 1991, 22.02, № 37. 9. Авторское свидетельство СССР № 908323. 10. Timonen Т., Sakbela G. Isolation of human NK cells bya gradient centrifugation, J. Immunol. Methods. 1980, 36 p. 285-291. 11. Гмурман В.Е. Теория вероятности и математическая статистика. М., Высшая школа, 1972, с. 368. (72) Перехрестенко Петро Михайлович, Назарчук Лідія Василівна, Федоровська Олена Олексіївна, Звіркова Ала Семенівна, Бідненко Світлана Іванівна, Клєвцов Ррій Олексійович (73) Київський науково-дослідний інститут гематології та переливання крові (UA) (57) Способ определения биологического действия ионизирующего излучения путем исследования периферической крови пациента, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что определяют частоту встречаемости высоких титров антипротейных антител, уровня гемоглобина и больших гранулосодержащих лимфоцитов и при показателях титров антипротейных антител больше или равно 1:80, уровня гемоглобина больше или равно 170,0 г/л, больших гранулосодержащих лимфоцитов больше или равно 20,0% у(28,2±1,04)% - (74,2±1,02)% населения, устанавливают наличие длительного биологического действия ионизирующего излучения. С > го ю ю СК Изобретение относится к медицине и касается способов определения биологического действия ионизирующего излучения на население. Аварийные ситуации, возникающие на атомных электростанциях, ставят перед медициной ряд проблем. Одной из них является защита людей от воздействия малых доз ионизирующего излучения. До недавнего времени в лучевой патологии человека основное внимание уделялось лишь общему облучению большими экспозиционными дозами, составляющими 100 Рад и более и вызывающими острую лучевую болезнь. Вместе с тем, именно большие радиационные катастрофы, наряду с массивным поражением высокими экспозиционными дозами, одновременно приво О 12926 дят к облучению малыми дозами ионизирующего излучения. Известны способы: - определение биологического дейст вия ионизирующего излучения на бактерии, основанное на подсчете клеток, выживших после воздействия [1]; - определение In vitro индивидуальной чувствительности организма к излучению [2]; ~ определение повреждений клеток экстремальным физическим воздействием путем оценки их биоэлектрических показателей [3]; - определение поглощенной дозы иони зирующего излучения биологическими тка нями путем нагревания "исследуемого объекта (сыворотки крови) с последующим измерением его термохемилюминесценции И]: - оценка иммунного статуса человека по функциональной активности лимфоцитов с последующим определением хелперной и супрессорной активности [5]; - определение средней поглощенной дозы и равномерности облучения при ост ром радиационном поражении человека пу тем цитогенетического анализа по среднему числу аберрантных клеток и дицентриков на одну аберрантную клетку [6] Недостатками вышеуказанных способов являются: - в качестве тест-объектов для изучения влияния ионизирующего излучения избра ны в одних случаях бактерии, в других отдельные клетки тканей; - приведены результаты эксперимен тальных исследований влияния радиации на биологический объект; - применены сложные цитогенетические методы исследования, требующие спе циальной обработки. В качестве прототипа заявляемого способа мы избрали публикацию М.Д.Бриллиант с соавторами [7]. В работе представлены отдаленные результаты влияния на организм человека радиации, о чем свидетельствуют, спустя много лет после лучевого воздействия, развивающиеся опухоли, как это наблюдалось после атомного взрыва в Хиросиме и Нагасаки. Через It лет после взрыва 7,0% мужчин и 8,0% женщин, перенесших катастрофу в пределах трехкилометровой зоны, имели сниженное количество лейкоцитов (менее 4-109/л)( уменьшение подвижности и фагоцитарной активности иейтрофилов, снижение активности лероксидазы нейтрофилов. У 10,0% мужчин и 12% женщин из групп облученных было выявлено уменьшение числа тромбоцитов периферической крови и мегакариоцитов костного мозга. Недостатки прототипа: 5 - Представленные данные являются результатом обследования лиц, подвергшихся однократному воздействию радиации; - Не учтены реакции факторов гумо рального иммунитета населения, в частно10 сти, изменение содержания больших гранулосодержащих лимфоцитов, уровня гемоглобина и антимикробных антител. Задачей заявляемого изобретения является установление факта длительного 15 воздействия малых доз ионизирующего излучения на население. Под термином "малые дозы" подразумевается принятое в настоящее время ионизирующее излучение 0,5 бер. р]. 20 Поставленная задача решена тем, что в способе определения биологического действия ионизирующего излучения путем исследования периферической крови, согласно изобретению определяют частоту встречае25 мости высоких титров антипротейных антител, уровня гемоглобина и больших гранулосодержащих лимфоцитов и при показателях титров антипротейных антител >1:80 уровня гемоглобина >170,0 г/л, 30 больших гранулосодержащих лимфоцитов >20,0% у (28,2±1,04)% - (74,2±1,02)% населения, устанавливают нэпичие длительного биологического действия ионизирующего излучения. 35 Способ осуществляется следующим образом. В периферической крови людей, находившихся на протяжении от 6 месяцев до 1 года в зоне ионизирующего излучения по40 еле аварии на ЧАЭС, с помощью реакции пассивной гамагглютинации с эритроцитарным поливалентным НО-протейным диагностикумом [9] выявляют антипротейные антитела, определяют уровень гемоглобина 45 по общепринятой методике в гемометре Сали и подсчитывают содержание больших гранулосодержащих лимфоцитов по методу Tlmonen [10]. Кроме того, рассчитывают представительную выборку населения для 50 определения влияния ионизирующего излучения на организмы. Существенными признаками заявляемого способа являются: значительное увеличение частоты выявления в 55 периферической крови после аварии на ЧАЭС, - антипротейных антител в высоких тит рах ( 2:1:80) у населения; - высокого уровня гемоглобина; 12926 - повышенного содержания больших гранулосодержащих лимфоцитов. Таким образом, выявление лиц с повышенными показателями антипротейного иммунитета, гемоглобина и больших гранулосодержащих лимфоцитов периферической крови дает возможность установить факт воздействия малых доз ионизирующей радиации на население. Сущность изобретения характеризуется конкретными примерами. П р и м е р 1. До аварии на чернобыльской атомной электростанции (ЧАЭС) были обследованы практически здоровые взрослые люди, работники ряда крупных заводов г. Киева. В сыворотке периферической крови определяли титры антипротейных антител, уровень гемоглобина и больших гранулосодержащих лимфоцитов. Через 6 месяцев и 1 год после аварии на ЧАЭС в этих же коллективах исследования были проведены повторно. Результаты приведены в таблицах 1 и 2. П р и м е р 2. Расчет представительной выборки по способу определения биологического действия ионизирующего излучения. Представительная выборка (п) населения, по которой можно судить о влиянии малых доз ионизирующего излучения на население с вероятностью 0,95, рассчитывается по формуле [11] n>^-Pq, (1) где Р - вероятность появления события; q - 1 - Р; є - абсолютная величина допустимого максимального отключения от вероятности Р. Величина в может быть определена по формуле с ^(PA-mA)-(P-m^ (2) действия ионизирующего излучения по высоте титров антипротейных антител сыворотки крови. Расчет ведется по формулам (1) и (2). по абсолютным значениям (табл. 1). Р = 0,053; РА = 0,282. m = 0,0052; тд = 0,0104. Е =0,112; q = 1 -0,053-0,947. п> 10 15 4 • 0,053 • 0,947 _ 0,2 0,112 Таким образом, при обнаружении в группе численностью не менее 16 человек антипротейных антител в высоких титрах ( >1:80) можно сделать заключение о влиянии на население данного региона малых доз ионизирующего излучения. При этом частота встречаемости высоких титров антител (Р' = —, где N - количество лиц с высокими титрами антипротейных антител ^ 0,053 + 0,112. 25 Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о том, что после аварии на ЧАЭС наблюдалось значительное увеличение количества лиц с высоким уровнем показателей антипротейного иммунитета организма, гемоглобина и больших гранулосодержащих лимфоцитов периферической крови. Эти критерии мы избрали как основные для установления факта длительного (не менее 6 месяцев) воздействия ионизирующего излучения на население. 30 Обследованные лица не представляли жалоб на состояние здоровья, в то же время у них наблюдались приведенные изменения периферической крови. 20 где РА - вероятность аномалийного отклонения; ГПА ~ доверительный интервал анома- 35 лийной вероятности. Например, приводим расчет количества людей для определения биологического 40 45 50 Итак заявляемый способ дает возможность - судить о наличии длительного радиа ционного воздействия на часеление; - разработанные нами критерии просты в выполнении, не требуют специального оборудования, могут быть широко внедре ны в практическое здравоохранение. 12926 Таблица 1 Вероятность обнаружений лиц с высокими уровнями антипротейных антител в сыворотке крови в динамике наблюдения Сроки исследования До аварии на ЧАЭС После аварии на ЧАЭС через 6 мес через 12 мес К-во обследованных лиц Вероятность выявления антипротейных антител в титрах 1:80 (М±т), % 836 5,30±0,52 257 290 28,20±1,04 74,20±1,02 Таблица 2 Вероятность обнаружения лиц с высокими уровнями гемоглобина и больших гранулосодержащих лимфоцитов в периферической крови в динамике наблюдения К-во обследованных Вероятность выявления (М±т), % Сроки лиц гемоглобина больших гранулосо170,0 г/л держащих лимфоцитов 20,0% 1056 не обнаружено До аварии 1,5±0.2 После аварии на ЧАЭС 50,0±7,07 Через 6 мес 532 42,3±9,6 Через 12 мес 40,0±2,19 660 30.4 ±6,1 Упорядник Замовлення 4090 Техред М.Моргентал Коректор М. Керецман Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, КиТв-53, Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул.ГагарІна, 101