Комплекс кобальту (ііі) з полідентатними основами шифу , що має протипухлинну активність

Комплекси кобальту (III) з тетрадентатними основами Шифу загальної формули (І) Винахід стосується нових комплексів кобальту (III) з тетрадентатними основами Шифу, що мають протипухлинну активність і можуть бути використані у медицині, а саме онкологи, при лікуванні хворих на ЗЛОЯКІСНІ пухлини Покращення результатів лікування онкологічних хворих має велике соціальне та економічне значення, тому що дозволяє збільшити КІЛЬКІСТЬ людей, що повертаються до суспільно-корисної праці Консервативне лікування злоякісних пухлин полягає в променевій та хіміотерапії ВІДОМІ хіміотерапевтичні препарати досить успішно використовуються при лікуванні хворих на цілу низку злоякісних пухлин, але у багатьох випадках не вдається досягти бажаного успіху В той же час використання хіміотерапії не може бути замінено променевою терапією у тих хворих, у яких діагностуються метастази Ці обставини диктують необхідність створення нових, більш ефективних, менш токсичних та селективних цитостатичних препаратів хімічної природи Відомо, ЩО відкриття Розенбергом [1] високої протипухлинної активності цисдіхлордіамінплатини стимулювало дослідження можливого використання у хіміотерапії злоякісних пухлин сполук інших металів Використання протипухлинних препаратів, які містять метал, грунтується на тому факті, що білки та нуклеїнові кисло Y де Y - СІ , R1 - СНз, R2 - Н або СІ, R3 - СН 3 або CF3, а аксіальний ліганд L являє собою азотисті основи біогенної природи або їх синтетичні аналоги, зокрема нікотинамід, ізонікотинамід, що мають протипухлинну активність ти клітин мають високу здібність до координації з іонами металів Більш швидкий метаболізм пухлинних клітин дозволяв сподіватись на більшу у порівнянні з нормальними клітинами взаємодію комплексів, які містять метал, з бюмолекулами пухлин Найбільш виразний та стійкий протипухлинний ефект виявився у елементів VIII групи, а саме у комплексів платини, причому у цисізомерних комплексів [2] Відомо, ЩО ЦІ комплекси утворюють у клітинах позитивно заряджені «частинки» платини, котрі зв'язуються з ДНК, утворюючи комплекси «платина-ДНК» різної хімічної природи, які спричиняють виключення ДНК з нормального функціонування та у подальшому загибель клітин Здатність гальмувати ріст перещеплюваних пухлин завдяки утворенню нових зв'язків у ланцюгах ДНК виявилась у комплексів нікелю, палладію, родію та іридію [3] Зараз вивчаються у експерименті комплекси рутенію, галлію, ванадію та інших перехідних металів [4 - 9] Проте лише комплекси платини знайшли своє місце у КЛІНІЧНІЙ практиці, зокрема такі препарати платини як цисплатина, карбоплатин, платидіам та ІНШІ В той же час ці препарати виявляють досить значну нефротоксичність, яка є провідною та дозолімітуючою токсичністю препаратів платини Незважаючи на появу нових препаратів платини, які мають значно меншу нефротоксичність, цей негативний эффект препаратів, що містять плати О о> ю ю 57599 ну, лишається Враховуючи ту обставину, що препарати платини виявились ефективними протипухлинними агентами, а сама платина є перехідним металом, виник посилений інтерес до інших перехідних металів, як потенційних протипухлинних засобів Серед низки перехідних металів, які вивчалися у експерименті (платина, цинк, залізо, родій, рутеній, мідь) найбільшу увагу привертає метал кобальт (трьохвалентний), який є електронно-аффінним, утворює координаційний ковалентний зв'язок з основами ДНК, найлегше серед інших перехідних металів відновлюється, виявляє виразнішу у порівнянні з іншими перехідними металами радюсенсибілізуючу активність як у ппоксичних, так і у оксигенованих пухлинах [10, 11] Ці властивості спричинили підвищення інтересу до комплексів кобальту, які досить активно вивчаються у різних лабораторіях [8, 9, 11 -14] Слід ВІДМІТИТИ декілька робіт зі сполуками, які містять трьохвалентний кобальт Teicher et al [11] синтезували такі комплекси як [нітро-біс(2,4пентандюнато)(піридин)кобальт(ІІІ)] та [нітробіс(2,4-пентандюнато){біс(2хлоретил)амш}кобальт(ІІІ)] та показали наявність цитостатичної активності у цих сполук, особливо у другої, а також їх здатність посилювати дію опромінення та гіпертермії Denny et al [12] запропонували використовувати комплекс "кобальт(ІІІ)азотистий іприт", котрий за умов гіпоксії може відновлюватись з відщепленням вільного ліганду, який має цитостатичну активність Досліди in vitro підтвердили активність цієї речовини, але було встановлено, що, по-перше у цього комплексу відсутній радюсенсибілізуючий ефект і, по-друге, зареєстрована його невисока метаболічна активність Цікаве також спостереження Jung et al [13] щодо здібності деяких змішаних алкенкарбонільних комплексів кобальту гальмувати ріст перещеплюваних пухлин Ці та ІНШІ роботи характеризують підвищений інтерес до комплексів кобальту з метою створення на їх основі ефективних та селективних протипухлинних та модифікуючих препаратів Слід при цьому зазначити, що комплекси кобальту здатні проникати в клітину, на що вказують дані відносно ідентифікації у деяких органів щурів білку DCT1, який здійснює транспорт у клітину ІОНІВ різних металів, зокрема кобальту [15] Важливою є також здатність кобальту накопичуватись у пухлинних тканинах, що вже використовується у діагностиці [16] В той же час ефективність субстанцій, що вміщують кобальт, у якості протипухлинних або модифікуючих засобів і досі не продемонстрована у широких експериментальних дослідженнях, тим більше не має відомостей про їх використання у КЛІНІЧНІЙ практиці Найбільш близьким до об'єкта, що заявляється, за складом, будовою та біологічною активністю є комплекс кобальту(ІІІ), котрий має символічну формулу [Со(асас2Єп)(І\ІНз)2]СІ, де асасгеп - представляє собою хелатируючий тетрадентатний ліганд з двома кисневими та двома азотними донорними атомами кожний, а саме аніонний залишок Шиффової основи з ацетилацетону та етілендіамшу, котрі взяті у співвідношенні 1 2 [17], структурна формула якого наведена нижче, де Ri, R3 - СН3, R2 - Н, L - ІЧНзта Y - СІ Даний комплекс кобальту(ІІІ) обраний нами за прототип Y Відомо, ЩО комплекс-прототип поряд з протизапальною та бактерицидною діями виявляє також і протипухлинну активність по відношенню до асцитної форми перещеплюваного раку Ерліха [17] Цей комплекс гальмував проліферацію клітин раку Ерліха (асцитна форма), що призводило до гальмування росту пухлини на 32% та подовження життя мишей у 2 5 рази Але при цьому спостерігались прояви токсичності, що викликало проблеми з дозами та схемами введення Механізмом дії комплексу-прототипу вважається його здатність "гасити" ВІЛЬНІ радикали, зокрема активні кисневі радикали, які утворюються при розвитку пухлини та и прогресії Саме цей механізм - поглинання вільних радикалів, які постійно утворюються у тканині пухлини, є базовим механізмом протипухлинної дії комплексу Інші механізми не наводяться Задачею винаходу, що заявляється, є розширення арсеналу біологічно-активних речовин, а саме цитостатичних агентів для консервативного лікування злоякісних пухлин без проявів надмірної токсичної дії, які б забезпечували одержання суттєвого протипухлинного ефекту Вказана задача вирішується за рахунок нових комплексів кобальту(ІІІ) з тетрадентатними основами Шифу, де у структурі вищенаведеного комплексу-прототипу аксіальний ліганд L представляє собою біогенні азотисті основи природнього походження (вітаміни - наприклад нікотинамід, амінокислоти - наприклад, гістидин або нуклеїнові основи, зокрема аденін) або їх близькі синтетичні аналоги (наприклад, ізонікотинамід) Азотистими основами визнано називати сполуки, котрі містять трьохвалентний азот та володіють за рахунок його неподіленої електронної пари властивостями основи Льюіса, тобто здатністю координувати з катіонами металів у якості лігандів, а також приєднувати протон, утворюючи амонієві солі Нові комплекси кобальту(ІІІ) з тетрадентатними основами Шифу отримані по методу, який використовують при синтезі комплексів кобальту(ІІІ) з плоскими полідентатними лігандами сильного поля [18] Синтез здійснюють без виділення проміжкових продуктів 1) синтез комплексу кобальту(ІІ) з таким лігандом із солі кобальту(ІІ) та вільного ліганду у анаеробних умовах, 2) введення в комплекс, що утворився, двох аксіальних лігандів - монодентатних основ Льюіса L, та 3) окислення комплексу кобальту(ІІ), що утворюється, до ВІДПОВІДНОГО комплексу кобальту(ІІІ) киснем або іншим підходящим окислювачем Нижче представлена структурна формула нового комплексу кобальту(ІІІ) з тетрадентатними 57599 основами Шифу, де у якості аксіального ліганду L нікотинамід L - ніс, Y ~ СІ Нікотинамід (шс) Його одержано наступним чином До теплого (45°С) розчину СоСІ2 х 6Н2О (1 19г, 5 0 ммолей) у 30мл МеОН в атмосфері аргону за умов перемішування добавляють попередньо одержаний за методикою [19] бісацетилацетонетілендіамш (1 54г, 6 0 ммолей) Через 1 годину відкривають доступ повітря до реакційної суміші та добавляють нагрітий до 45°С розчин нікотинаміду (2 56г, 21 0 ммоль) у ЗОмл МеОН Суміш перемішують 5 годин, суспензію, що утворилась, охолоджують до кімнатної температури, розчин відокремлюють від осаду та концентрують у вакуумі водоструйного насосу до об'єму 15мл 3 отриманого маслоподібного залишку за умов перемішування відокремлюється осад, котрий відфільтровують, промивають ефіром та висушують на фільтрі у потоці повітря Після переосадження з МеОН одержують 1 65г [Co1 (acac2en)(Nic)2]CI (вихід 58 8%) Елементний аналіз обчислено для C24H30CIC0N6O4 C, 51 43, Н, 5 40, СІ, 6 32, N, 14 99, знайдено, С, 51 39, Н, 5 58, СІ, 6 46, N, 15 02 М м 560 4 За аналогічною методикою отримані ІНШІ комплекси з використанням у якості азотвміщуючих аксіальних лігандів ізонікотинаміду, пстидшу, а також аміаку (Відомий раніше комплекс кобальту(ІІІ) з аміаком синтезували з метою порівняння його властивостей з новими комплексами кобальту) ЦІЛЬОВІ продукти являють собою порошки червоно-коричневого кольору Підібрані умови якісного експрес-аналізу комплексів та їх розчинів методом іонообмінної тонкошарової хроматографії (ТШХ) і високочутливого та селективного КІЛЬКІСНОГО визначення вмісту домішок в їх зразках методами поверненофазової високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) та капілярного електрофорезу Для ідентифікації комплексів (таб 1) використовують дані електронної спектроскопії (положення максимумів та значення коефіцієнтів екстинкції деяких комплексів) та іонообмінної тонкошарової хроматографії (ТШХ) на S1O2 (пластинки "Сілуфол" фірми "Kavaher" (Чехія), елюент - 0 1М розчин ацетату натрію у суміші метанол - вода = 4 1 по об'єму) В останньому випадку критерієм чистоти є наявність однієї плями на пластинці Значення факторів рухливості Rf також наведені у таблиці 1 Контроль чистоти комплексів здійснюється методом капілярного електрофорезу (КЕ) (таблиця 1) Для підтвердження передбаченої структури комплексів використовуються дані 1Н ЯМР- та ІКспектрів (таблиця 2) Комплекси у твердому стані СТІЙКІ у темряві та безпечні при зберіганні Нові комплекси, що заявляються, являють собою катіонні комплекси кобальту трьохвалентного (Co'"), шестикоординаційні, октаедричні Вони містять 1) тетрадентатні ліганди (N2O2) з основ Шифа, котрі майже плоскі, екваторіальні та являють собою діанюнні залишки ВІДПОВІДНИХ ОСНОВ Шифа та 2) аксіальні ліганди - монодентатні азотисті основи, котрі розташовані вздовж полярної осі у координаційному октаедрі в транс-положенні один до одного Бруто-формула комплексу з нікотинамідом у якості аксіального ліганду C24H28CICON6O4 M м 560 86 Вміст основної діючої речовини складає не менше 99,8% і не більше 100,0% (за даними спектрофотометричного визначення) рН водного розчину 5,98 ± 0,02 (0,08% розчин субстанції у воді, t = 25°С), потенціометричне визначення Комплекс помірно розчинний в етиловому спирті та метиловому спирті, легко розчинний у воді Прозорість розчину 0,8%-вий розчин комплексу у воді повинен бути прозорим у порівнянні з розчинником - водою Кольоровість розчину спектр поглинання розчину в області 200 - 400нм має максимум при 341 ± 2нм - з оптичною ЩІЛЬНІСТЮ (D341) не менше 0,40 ±0,02 Комплекс розкладається за умов нагріву вище 180-200°С Сумарний вміст домішок не повинен перебільшувати 0,5% Комплекси, що заявляються, різнобічно охарактеризовані, а їх характеристики представлені в таблицях 1 - 3, на фігурі і на схемі Для встановлення їх складу та структури використані методи елементного аналізу, МР ядер Н (на Фурьеспектрометрі фірми "Брукер" при частоті 400МГц, в розчинах в CD3OH та D2O) та ІЧ-спектроскопм (у твердій фазі з КВг), а будова комплексу з нікотинамідом, котрий виявляє найбільшу протипухлинну активність, безпосередньо визначена рентгеноструктурним аналізом (фігура) При цьому, зокрема, було показано, що обидва нікотинамідних ліганди пов'язані з кобальтом через атоми азоту піридинових кілець, а не амідогрупи Досліджена кінетика заміщення аксіальних лігандів в комплексі, у першу чергу на воді (аквація), та більш повільного наступного процесу деструкції аквакомплексу, що утворюється (схема) Встановлено, що комплекс з нікотинамідом значно більш стійкий у розчинах, ніж аналогічний йому відомий комплекс з аміаком Встановлені кореляції між ХІМІЧНИМИ властивостями досліджуваних комплексів, зокрема їх реакційною здатністю, і фізико-хімічними характеристиками, зокрема окислювально-відновними потенціалами, та їх протипухлинною активністю Таблиця 1 7 57599 8 Дані тонкошарової хроматографії, капілярного електрофорезу та електронної спектроскопії комплексів з різними аксіальними лігандами ТШХ, 100Rf КЕ умов опт чист, %* UV-VIS (H2O), Хим, (s) [Co(acac2en)(NH3)2]CI 40 99 8 [Co(acac2en)(Nic)2]CI 35 99 9 [Co(acac2en)(iso-Nic)2]CI 41 99 8 358 (пл) (3235) 335 (6377) 235 (пл) (20926) 215(27000) 339 (пл) (6335) 261 (пл) (18739) 238 (пл) (26432) 214(48653) 338 (пл) (5430) 260 (пл) (15120) 216(36590) Комплекс * Відповідає співвідношенню інтенсивностей поглинання основної речовини та домішок при довжині хвилі ЗЮнм у 0 1М буферному розчині ацетату етилендіамонію, що містить 20% МеОН Таблиця 2 Віднесення сигналів у спектрах 1Н ЯМР комплексів з різними аксіальними лігандами (CD3OD, 400МГц) Комплекс Сигнал 5, м д CH3-C=N СН3-С=О -(СН2)2 -НС= [Co(acac2en)(NH3)2]CI [Co(acac2en)(Nic)2]CI 2 ЗО (s) 2 11 (s) 2 44 (s) 2 35 (s) 3 78 (s) 3 83 (s) 5 245 (s) 5 158(s) [Co(acac2en)(iso-Nic)2]CI 2 09 (s) 2 35 (s) 3 81 (s) Протони аксіальних лігандів 5 141 (s) 7 518 (t) 8 161 (d) 8 350 (d) 8 548 (s) 7 770 (d) 8 167 (d) Таблиця З Деякі характеристики комплексів кобальту(ІІІ) зтетрадентатними основами Шифу Символічна формула [Со(асас2еп)І_2]Х Активні частинки, які утворюються при "метабоАктивні форми кисню (АФК) лізмі" комплексів Перекисне окислення, розклад перекисів (неспецифічЗдатність каталізувати реакції за участю АФК на пероксидазната каталазна активності) рО2-залежність Присутня Рівновага кобальт(ІІ)-кобальт(ІІІ) Швидка Комплекси кінетично лабільні, швидкість заміщення акСтабільність у водних розчинах сіальних лігандів (L) на воду (аквації) залежить від їх природи Комплекси кобальту(ІІІ) з тетрадентатними основами Шифу, що заявляються, при введенні пухлиноносію за різними схемами призводять до гальмування росту первинних пухлин на 60 - 80%, гальмування розвиту метастазів у легенях на 90 99%, подовження життя пухлиноносмв у 2 - 3 рази, при введенні комплексу у поєднанні з платидіамом або опроміненням спостерігався виразний сенсибілізуючий ефект комплексу, що втілюється у посиленні дії платидіаму (збільшується у два рази КІЛЬКІСТЬ повних регресій пухлини за умов поєднання платидіаму з комплексами) та опромінення рівнозначний протипухлинний ефект опромінення за дози 20Гр на фракцію при застосуванні самого опромінення та дози 10Гр при застосуванні його у поєднанні з комплексами кобальту Нові комплекси кобальту(ІІІ) з біогенними азотними основами та їх синтетичними аналогами у якості ліганду завдяки їх порівняно високій кінетичній стабільності доходять до біологічних мішеней (тканини, клітини) не розкладеними та відновлюються у ппоксичній пухлинній тканині з утворенням вільних радикальних частинок, переважно кисневих, які атакують бюмолекули пухлинної клітини, насамперед молекулу ДНК Продукти метаболізму комплексів можуть також індукувати аутоокислення бюмолекул клітини Слід зазначити, що активність по відношенню до ДНК здатні також виявляти 57599 10 іони Со(ІІ), що утворюються при відновленні кобачину комплексу з ізонікотинамідом у якості аксіальту(ІІІ), що міститься у комплексі з тетрадентатльного ліганду у дозі бмг/кг маси Після 10-і ін'єкції ними основами Шифу, а біогенні азотисті основи тварин забивали та проводили підрахунок КІЛЬКОСта їх синтетичні аналоги, котрі звільнюються при ТІ та об'єму метастазів у легенях Гальмування цьому, можуть проявити біологічний ефект завдяросту метастазів склало за КІЛЬКІСТЮ метастазів ки своїм характерним фізюлого-бюхімічним влас90%, за об'ємом одного метастаза - 85%, за об'тивостям Ця многокомпонентна дія на бюмолекуємом метастатичної маси - 90% Приклад 5 Миші, ли та структури пухлинної клітини та пухлинну з перещепленою у м'язу стегна аденокарциномою тканину в цілому призводить до гальмування промолочної залози Са755, починаючи з третього дня ліферації пухлинних клітин та росту пухлини і до після перещеплення щодоби впродовж 10 діб модифікації чутливості пухлинних клітин до проздійснювали в/ч ІН'ЄКЦІЮ 0 1% розчину комплексу з меневої та хіміотерапії, що втілюється в терапевнікотинамідом у якості аксіального ліганду у дозі тично значущому протипухлинному ефекті 12мг/кг маси Після 10-і ін'єкції тварин забивали та визначали масу пухлини Гальмування росту пухСинтез нових комплексів та застосування вилини становило 76 3% находу не пов'язане з великими технічними складностями Приклад 6 Миші, З перещепленою у м'язу стегна аденокарциномою молочної залози Са755, Все вищенаведене підтверджує реальну можпочинаючи з третього дня після перещеплення ливість використання даного винаходу у медичній щодоби впродовж 10 діб здійснювали в/ч ІН'ЄКЦІЮ хімії, фармації та КЛІНІЧНІЙ практиці Суть практичного використання комплексів 0 1% розчину комплексу з ізонікотинамідом у якосрозкривають такі приклади ті аксіального ліганду у дозі 12мг/кг маси Після 10і ін'єкції тварин забивали та визначали масу пухПриклад 1 Щуру з перещепленою карцинолини Гальмування росту пухлини становило 79% мою Герена внутрішньовенно (в/в) вводили 0 1% розчин комплексу з нікотинамідом у якості аксіальПриклад 7 Щуру з перещепленою карциноного ліганду у дозі 10мг/кг маси тіла тварини Відмою Герена в/в вводили 0 1% розчин комплексу з разу ж після ін'єкції починали локальне нагрівання нікотинамідом у якості аксіального ліганду у дозі пухлини за допомогою МВЧ-апарату «Медрадюе15мг/кг маси тіла тварини Через 60 хвилин пухлилектроніка» (2450Мгц) Через 10 хвилин темперану опромінювали один раз у дозі ЮГр (апарат тура пухлини сягала 41 °С, яку надалі підтримуваРУМ-17, напруга 180кВ, ток 1 мА, фільтри 0 5мм Си ли протягом 60 хвилин Таку процедуру проводили + 1 0мм АІ, КФР 25см, показник поглиненої дози тричі з інтервалом у 2 доби Гальмування росту 1 23Гр/хв) Гальмування росту пухлини дорівнюпухлини (ГРП) дорівнювало 95 3% вало 70 5%, повна регресія пухлини спостерігалась у 75% випадків Приклад 2 Щуру з перещепленою карциноПриклад 8 Щуру з перещепленою карциномою Герена в/в вводили 0 1% розчин комплексу з мою Уокер-256 в/в вводили 0 1% розчин комплексу ізонікотинамідом у якості аксіального ліганду у дозі з ізонікотинамідом у якості аксіального ліганду у 15мг/кг Відразу після ін'єкції починали локальне дозі 15мг/кг маси тіла тварини Через 90 хвилин нагрівання пухлини за допомогою МВЧ-апарату після ін'єкції В/В ВВОДИЛИ платидіам у дозі (2450МГц) Через 12 хвилин температура пухлини 0 75мг/кг Таку схему повторювали чотири рази з сягала 41 °С, яку надалі підтримували протягом 60 інтервалом у 2 доби Гальмування росту пухлини хвилин Таку процедуру проводили тричі з інтердорівнювало 98%, повна регресія пухлини спостевалом у 2 доби Гальмування росту пухлини скларігалась у 75% випадків ло 79% Наведені приклади чітко демонструють протиПриклад 3 Миші, З перещепленою у кінцівку пухлинний та антиметастатичний ефект комплеккарциномою Льюіс, на 14 добу після перещепленсів, а також значне підвищення протипухлинного ня проводили ампутацію КІНЦІВКИ З пухлиною Поефекту локальної гіпертермії, платидіамута опрочинаючи з наступного дня щодоби впродовж 10 діб мінення У разі опромінення фактор зміни дози здійснювали внутрішньочеревну ІН'ЄКЦІЮ 0 1% роздорівнює 2,0 одиницям чину комплексу з нікотинамідом у якості аксіального ліганду у дозі 12мг/кг маси Після 10-і ін'єкції Вивчення протипухлинної та модифікуючої дії тварин забивали та проводили підрахунок КІЛЬКОСкомплексів проводили на 6 групах тварин Вище ТІ та об'єму метастазів у легенях Гальмування подано типові приклади для кожної з цих груп Узаросту метастазів склало за КІЛЬКІСТЮ метастазів гальнені дані, отримані в результаті проведених 90%, за об'ємом одного метастаза - 87%, за об'експериментів, зведені в таблицях 4 - 9, які подано ємом метастатичної маси - 97% нижче При цьому прояви загальної та специфічної токсичності були меншими у порівнянні з комплекПриклад 4 Миші, З перещепленою у кінцівку сом-прототипом та значно меншими у порівнянні з карциномою Льюіс, на 14 добу після перещепленпрепаратами платини ня проводили ампутацію КІНЦІВКИ З пухлиною Починаючи з наступного дня щодоби впродовж 10 діб здійснювали внутрішньочеревну ІН'ЄКЦІЮ 0 1% роз 57599 11 12 Таблиця 4 Показники протипухлинної та сенсибілізуючої активності комплексу з нікотинамідом у якості аксіального ліганду на прикладі карциноми Геренута карциносаркоми Уокер-256 щурів* Схема терапії Контроль Комплекс Гіпертермія (43°С, 60 хв) Комплекс + гіпертермія (41 °С, 60 хв) Опромінення (20Гр) Комплекс + промінення (ЮГр) Контроль Комплекс Платидіам (0 75мг/кг) Платидіам (1 5мг/кг) Комплекс + платидіам (0 75мг/кг) Гальмування росту пухлини (%) карцинома Герена 0 73 34 81 80 70 5 карциносаркома Уокер-256 0 46 63 95 98 Повна регресія пухлини (%) 0 10 0 17 75 75 0 20 45 80 75 Початковий розмір пухлин -1 0см Таблиця 5 Показники хіміосенсибілізуючої активності комплексу з ізонікотинамідом у якості аксіального ліганду на прикладі меланоми В-16 мишей* без метастазів(%) Гальмування росту первинної пухлини (%) 0 45 0 0 ЗО 15 50 68 КІЛЬКІСТЬ мишей Схема терапії Контроль Комплекс Платидіам (1мг/кг) Комплекс + платидіам (0 5мг/кг Гальмування роз- Гальмування розвивитку метастазів за тку метастазів за показником КІЛЬКО- об'ємом усієї метаСТІ метастазів у статичної маси на легенях (%) мишу(%) 0 0 75 76 75 39 71 72 Перещеплювання здійснювалось під шкіру в області стегна Таблиця 6 Показники антиметастатичної активності комплексу з нікотинамідом у якості аксіального ліганду на прикладі перещеплюваних пухлин мишей меланоми В-16 та карциноми легенів Льюіс* КІЛЬКІСТЬ мишей Схема терапії без метастазі в(%) контроль комплекс 0 40 контроль комплекс 0 33 Гальмування розвитку Гальмування розвитметастазів за показку метастазів за поником КІЛЬКОСТІ мета- казником об'єму одстазів у легенях (%) ного метастазу (%) меланома В-16 0 0 71 96 карцинома легенів Льюіс 0 0 84 5 97 Гальмування розвитку метастазів за об'ємом усієї метастатичної маси на мишу (%) 0 99 0 99 5 * Перещеплювання здійснювалось у випадку меланоми В-16 під шкіру в області стегна, у випадку карциноми легенів Льюіс - у подушечку лапи з наступною (на 14-й день після перещеплення) ампутацією лапки з розвинутою пухлиною 13 14 57599 Таблиця 7 Показники активності різних комплексів кобальту (гальмування росту первинної пухлини, %) Комплекс, де аксіальним лігандом є аміак нікотинамід ізонікотинамід Карцинома Герена 72 74 74 Карциносаркома Уокер-256 46 60 62 Аденокарцинома молочної залози Са755 76 79 77 Меланома В-16 50 65 57 Таблиця 8 Сенсибілізуюча активність різних комплексів кобальту Комплекс, де аксіальним лігандом є Гіпертермія (43°С) аміак + гіпертермія (41 °С) нікотинамід + гіпертермія (41 °С) ізонікотинамід + гіпертермія (41 °С) 20 Гр аміак + ЮГр нікотинамід + ЮГр ізонікотинамід + ЮГр Платидіам (1 5мг/кг) аміак + платидіам (0 75мг/кг) нікотинамід + платидіам (0 75мг/кг) ізонікотинамід + платидіам (0 75мг/кг) Платидіам (1 Омг/кг) аміак + платидіам (0 5мг/кг) нікотинамід + платидіам (0 5мг/кг) ізонікотинамід + платидіам (0 5мг/кг) Гальмування росту первинної пухлини (%) карцинома Герена 35 86 81 84 80 65 70 5 75 карциносаркома Уокер-256 95 90 98 95 15 68 70 67 Повна регресія пухлини (%) 0 0 17 15 75 70 75 72 5 80 73 75 77 5 * * * * * Показник не визначали Таблица 9 Показники антиметастатичної активності різних комплексів кобальту на прикладі карциноми легенів Льюіс Комплекси, де аксіальним лігандом є аміак нікотинамід ізонікотинамід Миші без метастазів (%) 35 33 34 КІЛЬКІСТЬ мета стазів (%) 84 84 5 84 З таблиць видно, що комплекси, що заявляються, виявляють значну протипухлинну, особливо антиметастатичну активність, а також суттєву термо, хімю-та радюсенсибілізуючу дії Джерела посилання 1 Rosenberg В, vanCamp L, Trosko JE, Mansour VH Nature 1969, 222 385-6 2 Rosenberg В In Clinical Chemotherapy (ed Kuemmerle HP), vol 3 Antmeoplastic Chemotherapy (eds Berkarda B, Karrer K, Mathe G) ThiemeStratton, New York & Georg Thieme Stuttgart-New York, 1984 2 4 5 - 2 6 3 3 Уильяме Д Металлы жизни Москва Мир, 1975 191 - 2 2 3 4 Sava G, Pacor S, Mestrom G, Alessio E Clin Exp Metastasis 1992, 10 273-80 Об'єм одного метастазу (%) 43 96 87 Об'єм метастазів на мишу (%) 95 99 94 5 Шляховенко В А , Загоруйко Л И , Козак В В и соавт Экспериментальная Онкология 1999, 21 73-5 6 Webster LK, Olver IN, Stokes KH, Sephton RG, Hillcoat BL, Bishop JF Cancer Chemother Pharmacol 2000, 45 55-8 7 Evangelou A, Karkabounas S, Kalpouzos G et al Cancer Lett 1997, 119 221-5 8 El-Naggar MM, El-Weseef AM, El-Halafawy KM, EJ-Sayed IH Cancer Lett 1998, 133 71-6 9 Hall IH, Lackey CB, Kistler TD, Durham RW, Russel JM, Grimes RN Anticancer Res 2000, 20, 2345-54 10 Teicher BA, Jacobs JL, Cathcart KNS et al Radiat Res 1987, 109 36-46 11 Teicher BA, Abrams MJ, Rosbe KW, Herman 15 57599 TS Cancer Res 1990, 50 6971-5 12 Denny WA, Wilson WR, Hay MP Br J Cancer 1996, 74, Suppl27 S32-8 13 Jung M, Kerr DE, Senter PD Archiv Pharmazie1997, 330 173-6 14 Pernn LC, Wilson WR, Denny WA, McFadyen WD Anti-Cancer Drug Design 1999, 14 231-41 15 Gunshin H , Mackenzie В , Berger U V et al 16 Nature 1997, 388 482 16 Collins DA, Hogenkamp HP, O'Connor MK et al Mayo Clin Proc 2000, 75 568-80 17 Don Z, Gerschon D US Patent (19), Pat No 5,258,403, Date of Pat Nov 2, 1993 (прототип) 18 BigottoAetal Inorg Chirm Acta Rev, 1970, 4 41 19 McCarthy JPetal JACS 1955, 77 5820-4 HZO Co" Co" H2O ( Co" H2O complexes of Cofll) & otter decomposition Схема. Шляхи перетворень комплексів у водних розчинах Н22В Н22А Фіг. Структура комплексу [Co(acac2en)(nicb]CI Комп'ютерна верстка А Крулевський Підписано до друку 05 07 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна