Спосіб кількісного визначення похідних фентіазину

Реферат: UA 72208 U UA 72208 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до аналітичної та фармацевтичної хімії, а саме способів аналітичного визначення похідних фентіазину та може знайти застосування для кількісного визначення зазначених сполук у практиці центральних заводських лабораторій, хімічних і фармацевтичних підприємств, контрольно-аналітичних лабораторій та аптечних установ. Похідні фентіазину належать до групи синтетичних лікарських препаратів, які широко використовуються у медичній практиці як протиалергічні, нейролептичні, антипсихотичні, седативні, протисудомні, спазмолітичні (коронарнорозширюючі), протиаритмічні, а також протиблювотні засоби. Відомий спосіб кількісного визначення хлорпромазину, який полягає у окисненні випробуваного препарату надлишком нітратної кислоти у присутності натрію нітриту впродовж 15 хв. з наступним полярографічним визначенням утвореного продукту реакції - відповідного Sоксиду на фоні буферного розчину Бриттона-Робінсона з рН 1,8 [Oelschläger H. Polarographishe Bestimmug des Chlorpromazins über sein sulfoxid/ H. Oelschläger, K. Bunge // Arch. Pharm. 1974. B. 307, № 6. - S. 410-418]. До недоліків даного способу можна віднести його довготривалість - не менше 15 хв., а також використання як окисника концентрованої нітратної кислоти (65 % мас), що створює шкідливі та небезпечні умови праці. Найбільш близьким за технічною суттю та досягнутим результатом до заявленого способу є спосіб кількісного визначення похідних фентіазину (хлорпромазину, промазину та прометазину) методом диференційно-імпульсної полярографії у вигляді відповідних сульфоксидів, одержаних за допомогою нітритної кислоти [Belal F. / Differential-Pulse Polarographic Determination of Some N-Substituted Phenothiazine Derivatives in Dosage Forms and Urine Through Treatment with Nitrous Acid / F. Belal, S.M. El-Ashry, I.M. Shehata, M. A. El-Sherbery, D.T. El-Sherbery // Microchimica Acta. - 2000. - V. 135, № 3/4. - P. 147-154]. До аліквоти водного розчину визначуваного препарату додають розчини хлоридної кислоти та натрію нітриту і залишають на 2 хв. Після цього додають розчин амонію сульфамату і перемішують. Видаливши розчинений кисень, розчин з рН 1,7 полярографують при потенціалах - 0,4…-1,6 В стосовно хлоридосрібного насиченого калію хлоридом електрода порівняння. Вміст похідного фентіазину знаходять методом градуювального графіка. Відомий спосіб дозволяє здійснювати кількісне визначення похідних фентіазину в інтервалі -3 концентрацій досліджуваних сполук (0,02-0,6)∙10 моль/л. Недоліком даного способу є низька вибірковість, а відтак складність та довготривалість, зумовлена необхідністю руйнування надлишку окисника - нітритної кислоти, яка відновлюється на тій же ділянці потенціалів, що й продукт реакції - відповідний сульфоксид. Задачею корисної моделі є створення способу кількісного визначення похідних фентіазину, який шляхом використання нового окисника за кімнатної температури, дозволяє підвищити вибірковість способу та скоротити час виконання аналізу. Поставлена задача вирішується таким чином, що у способі кількісного визначення похідних фентіазину, який включає дериватизацію проби шляхом додавання до розчину випробуваного зразка окисника з подальшою реєстрацією полярограми одержаного розчину, на відміну від -2 прототипу передбачено, що як окисник використовують 2∙10 моль/л розчин калію гідрогенкароату. Всі параметри заявленого способу визначені дослідним шляхом. Експериментальним шляхом встановлено, що кислотність середовища розчинів суттєво чинить вплив на висоту полярографічної хвилі - кількісної аналітичної характеристики. Найвища висота хвилі спостерігається після змішування розчину зразка випробуваного похідного фентіазину з розчином мінеральної кислоти, наприклад сульфатної, а відтак з розчином калію гідрогенкароату. Максимальна активність калію гідрогенкароату у реакції спостерігалася при її -3 -3 концентрації ≤1∙10 моль/л при вмісті визначуваного похідного фентіазину в розчині ≤1∙10 моль/л. Встановлено, що оптимальна концентрація мінеральної кислоти, при якій спостерігалась найбільша швидкість утворення продукту реакції та досягається найвища хвиля, -2 становить 5∙10 моль/л. За відсутності калію гідрогенкароату у зазначених вище умовах впродовж 30 хв. (час спостереження) утворення продукту реакції не відбувалось. Найменша кількість калію гідрогенкароату стосовно визначуваного фентіазину може бути пояснена стехіометричним утворенням відповідного S-оксиду в кислому середовищі. Час кількісної взаємодії не перевищує 1 хв. (час спостереження). Експериментально встановлено, що потенціали півхвиль сульфоксидів похідних фентіазину достатньо уособлені від таких хвиль калію гідрогенкароату, щоб здійснювати кількісні вимірювання в присутності неконтрольованого надлишку окисника. Сукупність ознак заявленого способу є новою, невідомою з джерел інформації. 1 UA 72208 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Заявлений спосіб дозволяє спростити процедуру виконання аналізу уникаючи стадію руйнування окисника, а також підвищити вибірковість та загалом скоротити час здійснення аналізу. Як робочий стандартний зразок (РСЗ) прометазину гідрохлориду використовували субстанцію прометазину гідрохлориду виробництва КНР з відомим вмістом основної речовини. Аналізували Піпольфен 2,5 % розчин для ін'єкцій по 2 мл (1 мл містить 25 мг прометазину гідрохлориду, вода для ін'єкцій) виробництва Фармацевтичного заводу ЕГІС А.Т. БудапештУгорщина. Серії № 221270600. ® DIPHERGAN 5 мг/5 мл сироп 150 мл. 5 мл сиропу містить 4,78 мг прометазину гідрохлориду (згідно з вимогами специфікації QSP-0252-00A-01). Виробник Підприємство фармацевтичне Jelfa SA (Ельня Гура, Польща). № серії 021010. Приготування розчину робочого стандартного зразка препарату, 0,25 мг/мл. Наважку субстанції прометазину гідрохлориду з точним вмістом основної речовини 0,2500 г прометазину гідрохлориду розчиняють у 500 мл дистильованої води в мірній колбі на 1 л і доводять об'єм до позначки дистильованою водою при 20 °C і ретельно перемішують. Як РСЗ хлорпромазину гідрохлориду використовували субстанцію хлорпромазину гідрохлориду з вмістом основної речовини 100,3 % (за АНД-ДВ-ЗТ-ГФ-120), ЗТ Здоров'я, № серії 20081231 (КНР). Аналізували Аміназин 2,5 % розчин для ін'єкцій по 2 мл (1 мл містить 25 мг аміназину (хлорпромазину гідрохлориду), допоміжні речовини: натрію сульфіт безводний 1 мг, натрію метабісульфіт 1 мг, кислота аскорбінова 2 мг, натрію хлорид 8 мг, вода для ін'єкцій до 1,0 мл) АТ "Артеріум" Київ, Україна", № серії: 121029 (24,52 мг/мл). Аміназин-Здоров'я, таблетки (1 таблетка містить хлорпромазину 25 мг, допоміжних речовин 1,82 %: тальк, аеросил та титану діоксид) з вмістом хлорпромазину гідрохлориду 24,75 мг. № серії 80710. Приготування розчину робочого стандартного зразка препарату, 0,25 мг/мл. Наважку субстанції хлорпромазину гідрохлориду з точним вмістом основної речовини 0,2500 г хлорпромазину гідрохлориду розчиняють у 500 мл дистильованої води в мірній колбі на 1 л і доводять об'єм до позначки дистильованою водою при 20 °C і ретельно перемішують. Вольтамперометричні вимірювання здійснювали за допомогою спеціалізованого полярографа типу ПЛС, використовуючи триелектродну систему у зміннострумовому варіанті з прямокутною формою поляризуючої напруги та режимом полярографування "Однокрапельний". Індикаторним електродом був стаціонарний ртутний електрод клапанного типу, електродом порівняння служив насичений калій хлоридом хлоридосрібний електрод типу ЭВЛ-1М4, а допоміжним - платиновий електрод. Усі вимірювання здійснювалися при 20 °C. Як окисник використовували калію гідрогекароат у вигляді потрійної калійної солі ® (2KHSO5∙K2SO4∙KHSO4), - "Оксон " виробництва фірми DuPont, "extra pure". Активнодіючою речовиною її є калію гідрогенкароат, KHSO5. Вибір реагента обумовлений його комерційною доступністю, задовільною розчинністю у воді, порівняно високою оксидаційною здатністю, а також достатньою стійкістю під час зберігання та застосування. -2 ® Виготовлення 2∙10 моль/л розчину калію гідрогенкароату. Наважку порошку Оксону , яка містить 0,615 г основної речовини, кількісно переносять в колбу на 100 мл, розчиняють у 70 мл дистильованої води при перемішуванні і доводять об'єм дистильованою водою до позначки. Корисну модель здійснюють наступним чином. До водного розчину випробуваного похідного фентіазину додають розчин мінеральної кислоти, розчин окисника - калію гідрогенкароату, перемішують і реєструють полярограму на ртутному електроді на ділянці від -0,4 до 1,0 В (стосовно нас. хлоридосрібного електрода). Аналогічно виконують дослід з розчином робочого стандартного зразка чи випробуваним розчином з відомою обавкою похідного фентіазину. Вміст препарату розраховують методом порівняння. Корисна модель ілюструється прикладами. Приклад 1. 1,00 мл випробуваного 2,5 % розчину для ін'єкцій прометазину переносять у мірну колбу на 100 мл і доводять об'єм до позначки дистильованою водою при 20 °C І ретельно перемішують. За допомогою піпетки відбирають 4,00 мл одержаного розчину переносять у мірну -2 колбу на 100 мл, додають 10,0 мл 0,5 моль/л розчину сульфатної кислоти, 0,5 мл 2∙10 моль/л розчину калію гідрогенкароату, ретельно збовтують і доводять об'єм розчину до позначки. Наповнюють електролізер і реєструють полярограму, починаючи з -0,4 до 1,0 В. Вимірюють значення величини піку в мм і перераховують в мкА. Вміст прометазину знаходять методом стандарту. Побудова градуювального графіка. Визначення прометазину гідрохлориду у розчині для ін'єкцій. У мірні колби на 100 мл послідовно вносять 2,00; 4,00; 6,00; 8,00; 10,00; 12,00 мл 2 UA 72208 U 5 10 15 розчину РСЗ прометазину гідрохлориду, у кожну додають по 10,00 мл 0,5 моль/л розчину -2 сульфатної кислоти, 0,5 мл 2∙10 моль/л розчину калію гідрогенкароату, доводять об'єм до позначки дистильованою водою при 20 °C і ретельно перемішують. Послідовно одержані розчини переносять у електролізер і реєструють полярограми в інтервалі від -0,4 до -1,0 В. За даними висот піків полярограм будують градуювальний графік. Залежність величини сили струму піків з потенціалами відновлення прометазину гідрохлориду при - 0,76 В (І, мкА) від концентрації (с, моль/л) в інтервалі концентрацій від -5 -5 5 1,56∙10 до 9,35∙10 моль/л описується рівнянням: І=(0,38±0,01)∙10 ∙с (коефіцієнт кореляції r=0,998). Повторюваність сигналу (висоти піків струму відновлення прометазину з потенціалом -0,76 -5 В) при випробуванні розчину РСЗ прометазину гідрохлориду 3,12∙10 моль/л характеризується значенням RSD-0,03 (n=5; Р=0,95). Вміст прометазину гідрохлориду X, у мг до 1 мл розчину для ін'єкцій, розраховували за формулою: X с сm  Іх  100 (у розчині для ін'єкцій), Ісm де с сm - вміст прометазину гідрохлориду у розчині РСЗ, мг/мл; Іх - сила струму (висота піку) у робочому досліді, мкА; Ісm - сила струму (висота піку) у досліді з розчином РСЗ, мкА; 20 100 - коефіцієнт розбавлення. Результати кількісного визначення прометазину гідрохлориду у розчині для ін'єкцій Пiпольфен 2,5 % (Фарм. завод ЕПС А.Т., Угорщина) за розробленим способом наведені у табл. 1. Таблиця 1 Результати кількісного визначення прометазину у розчинах для ін'єкцій Пiпольфен 2,5 % по 2 мл Взято для аналізу препарату 1,00 мл (48,82 мг до 2 мл) розчину прометазину гідрохлориду для iн'єкцій, Фарм. завод ЕГІС A.T., Угорщина Знайдений вміст мг/мл 24,39 23,78 25,00 24,98 24,35 25,25 Метрологічні характеристики 24,20 *=+0,61 % x  24,56 S=0,526 S x  0,20 x  0,49 RSD=2,14 % =1,98 % Примітки: * Розрахунок здійснений за даними середнього вмісту, знайденого за допомогою референтного методу (Фармакопеї Великобританії) 25 30 35 Аналіз даних таблиці 1 свідчить про те, що заявлений спосіб за метрологічними характеристиками відповідає вимогам Державної фармакопеї України щодо валідаційних показників. Приклад 2. Визначення прометазину гідрохлориду у сиропі Diphergan. Біля 5,0 мл сиропу (точна наважка) розчиняють у мірній колбі на 50 мл в 30 мл 0,05 моль/л розчині сульфатної кислоти і доводять об'єм до позначки тим же розчином сульфатної кислоти при +20 °C. Відбирають за допомогою піпетки 10 мл одержаного розчину і переносять у мірну колбу на -2 100 мл, додають 10,0 мл 0,5 моль/л розчину сульфатної кислоти, 0,5 мл 1,9∙10 моль/л розчину калію гідрогенкароату, ретельно збовтують і доводять об'єм розчину до позначки. Наповнюють електролізер і знімають полярограму, починаючи з -0,4 до -1,0 В. Вимірюють значення величини піку в мм і перераховують в мкА. Вміст прометазину знаходять методом добавок. Для цього відбирають за допомогою піпетки 10 мл одержаного розчину випробуваного сиропу і переносять у мірну колбу на 100 мл, додають 4,00 мл розчину РСЗ прометазину гідрохлориду з вмістом прометазину 0,25 мг/мл, додають 10,0 мл 0,5 моль/л розчину сульфатної кислоти, 0,5 мл 1,9∙10 2 моль/л розчину калію пероксомоносульфату, ретельно збовтують і доводять об'єм розчину до 3 UA 72208 U позначки. Наповнюють електролізер і знімають полярограму, починаючи з -0,4 до -1,0 В. Вимірюють значення величини піку в мм і перераховують в мкА. Вміст прометазину гідрохлориду X, у мг до 5,00 мл сиропу, розраховували за формулою: X 5 10 a  d  I x  5,00  5 , Ix  a  Ix   mн де a - добавка прометазину гідрохлориду (1,0 мг) у мг; d - щільність сиропу, г/мл; Ix  a - сила струму (висота піку) у робочому досліді з добавкою, мкА; Ix - сила струму (висота піку) у робочому досліді, мкА; 5 - коефіцієнт перерахунку на вихідний об'єм розчину препарату; mн - наважка сиропу, г. ® Результати аналізу сиропу DIPHERGAN 5 мг/5 мл, Jelfa SA (Єльня Гура, Польща) на вміст прометазину гідрохлориду приведені у табл. 2. Вони свідчать про можливість вибіркового кількісного визначення прометазину гідрохлориду за новоопрацьованим способом без попереднього ізолювання препарату з лікарської форми: RSD=3,28 % (=+1,38 %). 15 Таблиця 2 Результати кількісного визначення прометазину у сиропі ® DIPHERGAN 5 мг/5 мл, Jelfa SA (Єльня Гура, Польща) (Р=0,95) Взято для аналізу препарату 6,4201 г сиропу прометазину гідрохлориду ® DIPHERGAN 5 мг/5 мл, Jelfa SA (Єльня Гура, Польща) Знайдений вміст мг/5 мл 4,89 4,77 5,01 4,95 4,61 Метрологічні характеристики мг/5 мл x  4,85 S=0,16 S x  0,007 x  0,20 RSD=3,28 % =4,08 % *=+1,38 % Примітка. * Розраховано за даними референтного методу Фармакопеї Великобританії 20 25 30 35 Аналіз даних таблиці 2 свідчить про те, що заявлений спосіб за метрологічними характеристиками відповідає вимогам Державної фармакопеї України щодо валідаційних показників. Крім того, наявність інших складників у аналізованому препараті не чинить впливу на результати, що свідчить про достатньо високу вибірковість способу. Відсутність додаткової операції руйнування надлишку непрореагованого окисника спрощує спосіб та скорочує час його здійснення. Приклад 3. Методика кількісного визначення хлорпромазину гідрохлориду у розчині для ін'єкцій. 1,00 мл випробуваного 2,5 % розчину для ін'єкцій аміназину переносять у мірну колбу на 100 мл і доводять об'єм до позначки дистильованою водою при 20 °C і ретельно перемішують. За допомогою піпетки відбирають 5,00 мл одержаного розчину переносять у мірну -2 колбу на 100 мл, додають 5,0 мл 1,0 моль/л розчину сульфатної кислоти, 0,5 мл 1,7∙10 моль/л розчину калію кароату, ретельно збовтують і доводять об'єм розчину до позначки. Наповнюють електролізер і знімають полярограму, починаючи з -0,4 до 1,0 В. Вимірюють значення величини піку в мм і перераховують в мкА. Вміст хлорпромазину знаходять методом стандарту. Побудова градуювального графіка. У мірні колби на 100 мл послідовно вносять 2,00; 4,00; 6,00; 8,00; 15,00 мл розчину РСЗ хлорпромазину гідрохлориду, у кожну додають по 5,00 мл 1,0 моль/л розчину сульфатної кислоти, доводять об'єм до позначки дистильованою водою при 20 °C і ретельно перемішують. Послідовно одержані розчини переносять у електролізер і реєструють полярограми в інтервалі від -0,4 до -1,0 В. За даними висот піків полярограм будують градуювальний графік. Залежність величини сили струму піків з потенціалами відновлення хлорпромазину гідрохлориду при - 0,70 В (І, мкА) від концентрації (с, моль/л) в інтервалі концентрацій від 1,4∙10 5 -4 5 до 1,06∙10 моль/л описується рівнянням: І=(0,427±0,002)∙10 ∙с (коефіцієнт кореляції r=0,998). 4 UA 72208 U 5 Повторюваність сигналу (висоти піків струму відновлення аміназину з потенціалом - 0,70 В -5 при випробуванні розчину РСЗ аміназину гідрохлориду 4,2∙10 моль/л характеризується значенням RSD 0,04 при n=5; Р=0,95). Вміст хлорпромазину гідрохлориду X, у мг до 1 мл розчину для ін'єкцій розраховували за формулою: X 10 с сm  І  100 (у розчині для ін'єкцій), Ісm де с сm - вміст хлорпромазину гідрохлориду у розчині РСЗ, мг/мл; І - сила струму (або висота піку, у мм) у робочому досліді, мкА; Ісm - сила струму (або висота піку, у мм) у досліді з розчином РСЗ, мкА; 100 - коефіцієнт розбавлення. Результати аналізу наведені у табл. 3. Таблиця 3 Результати кількісного визначення хлорпромазину у розчинах для ін'єкцій Аміназин 2,5 % в ампулах по 2 мл Взято для аналізу препарату 1,00 мл (24,52 мг до 1 мл)* розчину хлорпромазину гідрохлориду для ін'єкцій, AT Артеріум, Київ (Україна) № серії 121029 Знайдений вміст мг/мл 24,02 25,19 24,35 24,85 25,02 Метрологічні характеристики Р=0,95 x  24,59 S=0,77 S x  0,345 x  0,96 RSD=3,14 % =3,90 % *=0,27 % Примітка. *Середній вміст, вказаний у сертифікаті якості 15 20 Приклад 4. Методика кількісного визначення хлорпромазину гідрохлориду в таблетках по 25 мг. Біля 0,08 мг (точна наважка) розтертих в порошок таблеток розчиняють у 70 мл дистильованої води і доводять об'єм у мірній колбі на 100 мл до позначки дистильованою водою при 20 °C і ретельно перемішують. За допомогою піпетки відбирають 5,00 мл одержаного розчину переносять у мірну колбу на 100 мл, додають 5,0 мл 1,0 моль/л розчину сульфатної -2 кислоти, 0,5 мл 1,7∙10 моль/л розчину калію кароату, ретельно збовтують і доводять об'єм розчину до позначки. Наповнюють електролізер і знімають полярограму, починаючи з -0,4 до 1,0 В. Вимірюють значення величини піку в мм і перераховують в мкА. Вміст хлорпромазину знаходять методом стандарту. Вміст хлорпромазину гідрохлориду X, у мг до однієї таблетки, розраховували за формулою: X 25 30 с сm  І  m  100 , mн  Ісm де с сm - вміст хлорпромазину гідрохлориду у розчині РСЗ, мг/мл; І - сила струму (або висота піку, у мм) у робочому досліді, мкА; Ісm - сила струму (або висота піку, у мм) у досліді з розчином РСЗ, мкА; m - усереднена маса таблетки за 20-ти зважувань, г; mн - наважка розтертих таблеток, г; 100 - коефіцієнт розбавлення. Результати аналізу таблеток наведені в табл. 4. 5 UA 72208 U Таблиця 4 Результати кількісного визначення хлорпромазину у таблетках Аміназин-Здоров'я по 25 мг Взято для аналізу препарату 0,0824 г (24,75* мг хлорпромазину гідрохлориду до 1 табл.) порошку ТОВ Здоров'я, Харків (Україна) № серії 80710 Знайдений вміст мг/табл. 24,80 25,46 24,00 24,13 25,30 24,63 25,63 Метрологічні характеристики Р=0,95 x  24,85 S=0,64 S x  0,24 x  0,505 RSD=2,58 % =2,39 % *=+0,40 % Примітка. * Середній вміст, вказаний у сертифікаті якості 5 10 Аналіз даних таблиці 3 та 4 свідчить про те, що заявлений спосіб за метрологічними характеристиками відповідає вимогам Державної фармакопеї України щодо валідаційних показників. Крім того, наявність інших складників (натрій сульфіту, натрій метабісульфіту, натрій хлориду, кислота аскорбінова) у аналізованому розчині для ін'єкцій не чинить впливу на результати, що свідчить про достатньо високу вибірковість способу. Відсутність додаткової операції руйнування надлишку непрореагованого окисника спрощує спосіб та скорочує час його здійснення. Отже, заявлено новий спосіб кількісного визначення похідних фентіазину характеризується високою вибірковістю, задовільною відтворюваністю результатів, а також спрощує виконання аналізу та скорочує його тривалість. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 20 Спосіб кількісного визначення похідних фентіазину, що включає дератизацію проби шляхом послідовного додавання до проби зразка випробуваного похідного фентіазину розчину кислоти та розчину окисника з подальшою реєстрацією полярограм одержаного розчину, який відрізняється тим, що як окисник використовують 0,02 моль/л розчин калію гідрогенкароату, а розчин кислоти додають у концентрації 0,05 моль/л. Комп’ютерна верстка В. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 6