Спосіб прогнозування розвитку неалкогольної жирової хвороби печінки у дітей на фоні метаболічного синдрому

Реферат: Спосіб прогнозування розвитку неалкогольної жирової хвороби печінки (НАЖХП) у дітей на фоні метаболічного синдрому (МС) включає дослідження крові із застосуванням полімеразної ланцюгової реакції. Розраховують прогностичний ризик виникнення захворювання шляхом сумації прогностичних коефіцієнтів (в балах) найбільш інформативних клінічних ознак. По сумарному показнику встановлюють низький, середній чи високий ступінь ризику розвитку НАЖХП. Додатково дітям із високим ступенем ризику проводять визначення в крові одиничного нуклеотидного поліморфізму Рrо12Аlа гену PPAR2. Виявлений генотип Рrо12Рrо є одним із додаткових факторів ризику розвитку НАЖХП, а наявність алеля 12Аlа асоційована з протективним ефектом розвитку МС та асоційованих з ним захворювань, зокрема НАЖХП. UA 93977 U (54) СПОСІБ ПРОГНОЗУВАННЯ РОЗВИТКУ НЕАЛКОГОЛЬНОЇ ЖИРОВОЇ ХВОРОБИ ПЕЧІНКИ У ДІТЕЙ НА ФОНІ МЕТАБОЛІЧНОГО СИНДРОМУ UA 93977 U UA 93977 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме до медичної генетики та педіатрії, і може бути використана для прогнозування розвитку неалкогольної жирової хвороби печінки у дітей з надмірною масою тіла та ожирінням, які мають прояви метаболічного синдрому. Згідно з даними останніх досліджень з'являється все більше доказів того, що неалкогольна жирова хвороба печінки (НАЖХП) являється однією з найбільш частих патологій печінки в дитячому та підлітковому віці (Бєлоусов Ю.В. Жировий гепатоз у дітей: дефініція та діагноз / Ю.В. Бєлоусов, Е.Н. Бабаджанян // Сучасна педіатрія. - 2010. - №5(33). - С. 107-109). Асоціативний зв'язок НАЖХП з ожирінням, інсулінорезистентністю та дисліпідемією дає підстави розглядати її як печінкову маніфестацію метаболічного синдрому (МС). Патогенез НАЖХП на сучасному етапі залишається до кінця невивченим. Останнє десятиліття характеризується зростаючим інтересом до вивчення молекулярно-генетичних механізмів розвитку мультифакторіальних патологій, до яких належить і неалкогольна жирова хвороба печінки. Саме тому пошук інформативних маркерів, які регулюють ключові ланки патогенезу жирового гепатозу та стеатогепатиту в дитячому віці, є однією із пріоритетних задач сучасної медицини, оскільки рання діагностика генетично обумовлених метаболічних порушень у дітей з ожирінням дозволить виділити групи ризику розвитку НАЖХП та дозволить своєчасно розпочати первинну профілактику захворювання. Відомі способи діагностики розвитку метаболічного синдрому у дорослих та дітей: (Пат. 3193, Україна, МПК G01N 33/577. Спосіб діагностики метаболічного синдрому / Гиріна О.М., (UA), Гирін В.В., (UA); Карлова О.О. (UA).; заявник та патентовласник: Національний медичний університет ім. Богомольця (UA), Гиріна О. М., (UA), Гирін В. В., (UA); Карлова О.О. (UA). - № u2004032225; заявл. 26.03.2004; опубл. 15.10.2004, бюл. № 10/2004), (Пат. 58612, Україна, МПК А61В 5/00. Спосіб діагностики інсулінорезистентності у хворих на метаболічний синдром та цукровий діабет 2 типу/ Кайдашев Ι.Π (UA), Лавренко А. В. (UA), Расін С.Μ., (UA), Расін М.C.(UA); заявник та патентовласник: ВДНЗУ «Українська медична стоматологічна академія» (UA), Кайдашев І.Π (UA), Лавренко А.В. (UA), Расін С.Μ., (UA), Расін Μ.C.(UA). - № u201006907; заявл. 04.06.2010; опубл. 26.04.2011, бюл. № 8/2011), (Пат. 57761, Україна, МПК А61Β 5/107. Спосіб диференційної діагностики метаболічного синдрому у осіб молодого віку з ознаками ожиріння/ Хижняк О.О. (UA), Суліма Т.Н. (UA), Черевко І.Г. (НА), Тихонова Т.Μ. (UA), Гогетідзе Т.Г. (UA), Левченко Т.П. (UA); заявник та патентовласник: Державна установа «Інститут проблем ендокринної патології ім. В. Я. Данилевського Академії медичних наук України» (UA), Хижняк О.О. (UA), Суліма Т.Н. (UA), Черевко І.Г. (UA), Тихонова Т.Μ. (UA), Гогетідзе Т.Г. (UA), Левченко Т.П. (UA). - № U201010324; заявл. 25.08.2010; опубл. 10.03.2011, бюл. № 5/2011). В останні часи з'явились роботи, присвячені ранній діагностиці розвитку неалкогольної жирової хвороби печінки у дорослих та дітей з проявами метаболічного синдрому: (Пат. 55957, Україна, МПК GO IN 33/68. Спосіб діагностики неалкогольного стеатогепатиту у пацієнтів з надлишковою масою тіла та ожирінням / Братчук О.О. (UA); заявник та патентовласник: Національний медичний університет ім. Богомольця (UA), Братчук О.О. (UA). - № u201009783; заявл. 06.08.2010; опубл. 27.12.2010, бюл. № 24/2010), (Пат. 66346, Україна, МПК А61В 8/00. Спосіб діагностики неалкогольного стеатогепатозу / Боднар П. М. (UA), Динник О.Б. (UA), Михальчишин Г.П. (UA), Берегова Т.В. (UA), Кобиляк Н.М. (UA), Кухарський В. М. (UA), Прибитько І.Ю. (UA); заявник та патентовласник: Національний медичний університет ім. Богомольця (UA), Боднар П. М. (UA), Динник О.Б. (UA), Михальчишин Г.П. (UA), Берегова Т. В. (UA), Кобиляк Н.М. (UA), Кухарський В.М. (UA), Прибитько I.Ю. (UA). - № u201109510; заявл. 29.07.2011; опубл. 26.12.2011, бюл. № 24/2011), (Пат. 46796, Україна, МПК А61В 8/00, GO IN 33/00. Спосіб неінвазивної діагностики фіброзу печінки у хворих на неалкогольну жирову хворобу печінки на тлі метаболічного синдрому / Бабак О. Я. (UA); Колеснікова О. В. (UA); Просоленко К.О. (UA); Гніденко К.Ю. (UA); заявник та патентовласник: Державна установа «Інститут терапії ім. Л. Т. Малої Академії медичних наук України» (UA), Бабак О.Я. (UA); Колеснікова О. В. (UA); Просоленко К.О. (UA); Гніденко К.Ю. (UA). - № и200906320; заявл. 18.06.2009; опубл. 11.01.2010, бюл. № 1/2010). На сьогоднішній день актуальними є роботи, присвячені вивченню генетичних основ розвитку захворювань, що мають мультифакторіальну природу, до яких належать найбільш розповсюдженні неінфекційні патології: артеріальна гіпертензія (АГ), атеросклероз, цукровий діабет (ЦД) та метаболічний синдром (Бирюкова Ε.В. Молекулярно-генетические, гормональнометаболические и клинические аспекты метаболического синдрома: диссертация на соискание ученной степени д.м.н.: 14.00.03 / Бирюкова Е.В. - Москва, 2009., 270 с). Найбільш близьким до запропонованого є спосіб визначення генотипу PPARG2 у групі дорослих пацієнтів української популяції з проявами артеріальної гіпертензії (АГ) та метаболічного синдрому (МС) (Кайдашев И.П. Молекулярно-биологические аспекты гипертонической болезни: роль полиморфизма 1 UA 93977 U 5 10 15 20 25 30 35 40 белков ренин-ангиотензивной системы и рецепторов, активирующих пролиферацию пероксисом / Кайдашев И.П., Ждан В.М., Расин М.С., Савченко Л.Г. и др. Украинский кардиологический журнал 2010; 1: 65-75.). В рамках даної роботи визначалась поширеність Рrо12Аlа поліморфізму гену PPARG2 та його асоціація з особливостями клінічного перебігу гіпертонічної хвороби (ГХ) у дорослих чоловіків з проявами метаболічного синдрому. Встановлено, що найбільш несприятливим для розвитку МС та асоційованої з ним артеріальної гіпертензії (АГ) є генотип Рrо12Рrо гену PPARG2, а наявність алеля 12Аlа може виявляти протективний ефект щодо розвитку даної патології. Однак визначення поширеності Рrо12Аlа поліморфізму гену PPAR в дитячій популяції та встановлення його ролі у формуванні основних компонентів метаболічного синдрому та асоційованої з ним неалкогольної жирової хвороби печінки у дітей на сьогоднішній день в нашій країні не проводилося. В основу корисної моделі поставлена задача створити спосіб прогнозування розвитку неалкогольної жирової хвороби печінки у дітей та підлітків з надмірною масою тіла та ожирінням шляхом удосконалення відомого способу, використовуючи розроблений прогностичний алгоритм, що включає в себе дані анамнезу, антропометрії, функціональних порушень печінки та стану вуглеводного й ліпідного обмінів. Дітям з виявленим високим ризиком розвитку НАЖХП обґрунтовано призначення поглибленого генетичного дослідження Рrо12Аlа поліморфізму гену PPAR для більш поглибленого скринінгу групи пацієнтів, схильних до даної патології та її ускладнень. Поставлену задачу вирішують створенням способу прогнозування розвитку неалкогольної жирової хвороби печінки у дітей з надмірною масою та ожирінням, що включає дослідження крові зі застосування полімеразної ланцюгової реакції, який, згідно з корисною моделлю, відрізняється тим, що розраховують прогностичний ризик виникнення захворювання за методикою альтернативного послідовного аналізу Вальда. Згідно з даною методикою, шляхом сумації умовних величин, що характеризують інформативність окремих показників, можна отримати конкретну інформацію для отримання індивідуального прогнозу. На першому етапі розрахунків серед сукупності факторів були виділені ті, які вірогідно відрізнялися при зіставленні їх частоти в досліджуваних групах дітей з неалкогольною жировою хворобою печінки та пацієнтів з екзогенно-конституційним ожирінням. Під час виконання цього етапу ми використовували критерій вірогідності хи-квадрат. Другим етапом став розрахунок величини діагностичного коефіцієнту (ДК), який здійснювали за формулою: ДК=10*lg(Р1/Р2), де: ДК - діагностичний коефіцієнт; Р1 - відсоток частоти досліджуваного фактора в дітей з НАЖХП; Р2 - у групі пацієнтів з ЕКО. Значення величини ДК може мати як позитивний, так і негативний знак. По досягненню в результаті послідовного алгебраїчного сумування значень ДК порогової суми ±13 балів процедура завершується і з рівнем надійності 95,5 % прогнозується або відсутність ризику розвитку НАЖХП у дитини (-13 балів), або наявний мінімальний ризик розвитку захворювання, якщо порогова сума досягає +13 балів. Якщо сумарний показник складає +20 або +30 балів, то вірогідність точного прогнозу сягає 99 % та 99,9 %, відповідно. Ризик розвитку захворювання збільшується до середнього (при сумі від 13 до 60 балів) та дуже високого (при сумі понад 60 балів). 45 2 UA 93977 U Таблиця Алгоритм прогнозування НАЖХП у дітей з надмірною масою тіла та ожиріння п/п Градація показника Показник 1. 2. Маніфестація ожиріння до 5 років 3. Стаж ожиріння > 5 років 4. Спадковість за ожирінням у матері 5. Спадковість за ЦД 2 у родичів по лінії матері 6. є немає є немає є немає є немає є немає 0,8(ж); 0,9(ч); >0,8(ж); >0,9(ч) 30,0 +1-2 +2-3 +>3 є немає 42 43 39 40 2 2,1-4 4,1 3 3,1-4,0 4,1 4 4,1-5,1 5,2 1,0 1,01-1,4 1,41 0,26-0,9 1,0 0,9 1,0-1,39 1,4 2,5 2,6-3,5 3,6 10,9 11,0-20,0 21,0 3,3 3,4 6 6,1 Маса тіла при народженні3СВ (+3); гепатомегалія - є (+5); АЛТ - 116 Од/л (+8); ACT 76 Од/л (+6); тимолова проба 3,1 Од (+1); фібриноген - 2,4 г/л (-1); ЗХ - 4,05 ммоль/л (-5); ТГ - 3,05 ммоль/л (+9); ЗХ ЛПДНЩ - 1,1 ммоль/л (+7); ЗХ ЛПВЩ - 0,74 ммоль/л (+9); КА - 4,47 Од (+8); ІРІ - 19,2 мкОд/мл (0); індекс НОМА - 4,4 Од (+6); ФНП-альфа - 13 пг/мл (+4). Алгебраїчна сумація ДК перших 7 ознак алгоритму ( ДК=+15 балів) дозволила досягти діагностичного порогу із рівнем надійності 95,5 %, що відповідає мінімальному ризику розвитку захворювання, а сумація перших 11 ознак дозволила підвищити надійність діагнозу до 99,9% ( ДК=+37 балів). Загальна сума набраних балів: +76 (відповідає високому ризику розвитку захворювання). Подальше комплексне обстеження, яке проводилося для виключення уражень печінки вірусної, аутоімунної етіології та спадкових порушень обміну, підтвердило наявність у дитини неалкогольної жирової хвороби печінки. Дитині призначено дослідження геномної ДНК для виявлення поліморфних ділянок Рrо12Аlа гену PPAR2. У результаті рестрикції у дитини визначено генотип Рrо12Рrо гену PAR2, наявність якого асоційована з найвищим ризиком розвитку МС у дітей та асоційованих з ним захворювань, зокрема неалкогольної жирової хвороби печінки. Запропонованим способом в умовах педіатричного відділення № 1 Полтавської обласної дитячої клінічної лікарні та ендокринологічного відділення Дитячої міської клінічної лікарні було обстежено 67 дітей з верифікованою неалкогольною жировою хворобою печінки та екзогенноконституційним ожирінням. Доцільність запропонованого методу обумовлена високою достовірністю, малоінвазивністю, безпечністю у застосуванні. Даний спосіб дозволяє проводити поглиблений скринінг серед дітей з надмірною масою тіла та ожирінням для виявлення потенційного ризику розвитку неалкогольної жирової хвороби печінки. Позивний ефект полягає в більш поглибленій оптимізації прогнозування розвитку НАЖХП у дітей з проявами метаболічного синдрому, включаючи генетичний скринінг, для можливості вчасного превентивного лікування і використання методів комплексної профілактики захворювання, що, в свою чергу, підвищить медичну допомогу дітям та позитивно позначиться на показниках якості життя. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 45 50 55 Спосіб прогнозування розвитку неалкогольної жирової хвороби печінки (НАЖХП) у дітей на фоні метаболічного синдрому (МС), що включає дослідження крові із застосуванням полімеразної ланцюгової реакції, який відрізняється тим, що розраховують прогностичний ризик виникнення захворювання шляхом сумації прогностичних коефіцієнтів (в балах) найбільш інформативних клінічних ознак, сумарний показник, що сягає рівня +13 балів, відповідає низькому ступеню ризику захворювання, сума 13-60 балів становить середній ризик, а показник + >60 балів вказує на високий наявний ризик розвитку НАЖХП, додатково дітям із високим ступенем ризику проводять визначення в крові одиничного нуклеотидного поліморфізму Рrо12Аlа гену PPAR2, виявлений генотип Рrо12Рrо є одним із додаткових факторів ризику розвитку НАЖХП, а наявність алеля 12Аlа асоційована з протективним ефектом розвитку МС та асоційованих з ним захворювань, зокрема НАЖХП. 5 UA 93977 U Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 6