Спосіб моделювання мікросомального ферметативного імпринтінгу

Изобретение относится к области экспериментальной фармакокинетики и может быть использовано для изучения лекарственных препаратов и физиотерапевтических факторов, а также для разработки адекватных схем их применения. Известны три группы индукторов микросомальной ферментной системы печени: барбитураты, полициклические углеводороды и стероиды [1], для проявления индуцирующего эффекта которых необходимо кратное введение их в организм животных. Поскольку все эти индукторы химические соединения и наряду с индуцирующим эффектом сами метаболизируются в микросомальной ферментной системе, то исследование фармакокинетики других лекарственных препаратов может быть затруднено из-за взаимодействия индуктора и исследуемого лекарства. Наиболее близким является способ моделирования, использующий физический фактор - накожные аппликации пелоида температуры 42°С в течение 20 минут. Для создания модели необходимо 8-10 аппликаций, отпускаемых через день [2]. Для достижения эффекта индукции при применении данного способа необходимо одновременное действие теплового и химического факторов пелоида (т.к. при исключении химического фактора не наблюдается ускорение обеих гидроксилазных реакций в микросомах гепатоцитов), что затрудняет изучение исследуемых препаратов и фармакокинетики при сочетанном действии лекарственных средств и физиотерапевтических факторов. Модель воспроизводится в течение трех недель, что является длительным. В основу изобретения поставлена задача создания способа моделирования микросомального ферментативного импринтинга, в котором однократное лазерное облучение печени животного и исключение действия химического фактора индуктора, обеспечивает возможность исследования фармакокинетики лекарственных препаратов и их сочетаний с физиотерапавтическими факторами и благодаря этому повышается эффективность модели. Кроме этого упрощается и ускоряется способ моделирования, и достигается 100%-ная воспроизводимость модели. Поставленная задача решается тем, что в способе моделирования микросомального ферментативного импринтинга, использующем действие физического фактора, согласно изобретению, воздействуют однократно на печень экспериментального животного полупроводниковым лазером Ga-As, частотой 300 Гц, средней мощностью импульса 4,9 Вт, длиной волны 0,8-0,95 мкм, экспозицией 256 с. Совокупность существенных признаков заявляемого объекта обеспечивает получение следующего технического результата: - избран полупроводниковый лазер Ga-As с длиной волны 0,8-0,95 мкм, поскольку лазерное излучение именно от этого источника обладает проникающей способностью - глубина проникновения излучения в ткани до 6 см; - экспериментально доказано, что при использовании частоты 300 Гц, средней мощности импульса 4,9 Вт и экспозиции однократного воздействия на область печени 256 с достигается индуцирующий микросомальные энзимы печени эффект, о чем свидетельствует ускорение гидроксилазных реакций в микросомальной фракции печени. Воздействие лазером осуществлялось от аппарата "Узор" Калужского радиолампового завода. Пример 1. Крыса линии Вистар, вес 0,22 кГ, самец. Осуществлено воздействие на печень животного однократно полупроводниковым лазером Ga-As, частотой 300 Гц, средней мощностью импульса 4,9 Вт, длиной волны 0,8-0,95 мкм, экспозицией 256 с. Через 24 часа поле воздействия продолжительность гексеналового сна составила 13 минут, скорость N-деметилирования амидопирина в печени равна 32 нмоль × мин × мг-1. В микросомальной фракции печени скорость N-деметилирования диметиланилина составила 9,2 нмоль × мин × мг1 , а скорость п-гидроксилирования анилина - 1,06 нмоль × мин × мг-1. Пример 2. Крыса линии Вистар, вес 0,23 кГ, самец. Осуществлено воздействие на печень животного по предлагаемому способу. Через 24 часа крысе вводилось внутрибрюшинно антипирин в дозе 50 мг/кг и определялась его концентрация в плазме крови через 30, 60 и 120 минут. Концентрация в плазме составила: через 30 минут - 9,2 мкг/ мл через 60 минут - 7,4 мкг/мл через 120 минут - 5,8 мкг/мл. На основании полученных данных динамики концентрации в плазме крови антипирина произведен расчет основных фармакокинетических параметров: константа элиминации равна 2,27 ч-1, период полусуществования антипирина равен 18,3 минут, клиренс равен 26,5 мл/мин. Состояние активности микросомальной ферментной системы через 24 часа (момент введения исследуемого препарата) и через 48 часов (необходимый для исследования фармакокинетики интервал времени) достоверно выше исходного уровня (интактные животные).