Вакцинний штам clostridium perfringens тип в, що використовується для виготовлення вакцин проти анаеробних інфекцій сільськогосподарських тварин

Винахід відноситься до ветеринарної мікробіології, зокрема, до біотехнології вакцинного штаму Clostridium perfringens, який може бути використаний як основа для виготовлення асоційованих інактивованих вакцин: "Вельшисальм" (вакцина проти анаеробної ентеротоксемії і сальмонельозу тварин), "Вельшіпаст" (вакцина проти анаеробної ентеротоксемії і пастерельозу тварин), "Вельшікол" (вакцина проти анаеробної ентеротоксемії і колібактеріозу тварин) та входити до складу інших асоційованих вакцин, таких як "Пневмомастисан" (вакцина проти пневмоентеритів і маститів тварин), вакцини проти брадзоту овець, злоякісного набряку, некротичного гепатиту, а також вакцини "Актиносан" (вакцина проти актинобацильозу тварин). Вакцинний штам Clostridium perfringens тип В використовується в якості антигену для асоційованих концентрованих інактивованих вакцин проти анаеробних інфекцій тварин, так як має добре виражені імуногенні властивості. Представлений штам є класичним збудником анаеробної ентеротоксемії і дизентерії ягнят. Аналогом винаходу можуть бути виробничі штами Clostridium perfringens, на основі яких отримані концентрована гідроокис алюмінієва формолвакцина проти ентеротоксемії поросят та асоційована вакцина проти сибірки, анаеробної дизентерії та інфекційної ентеротоксемії овець [1, 2]. Метою даного винаходу є вакцинний штам Clostridium perfringens тип В, який володіє добре вираженими характерними для виду та стабільними морфологічними, культуральними, біохімічними і патогенними для лабораторних тварин властивостями. Штам був виділений з трупу вівці з типовими клінічними ознаками анаеробної ентеротоксемії і задепонований в офіційній колекції мікроорганізмів Державного науковоконтрольного інституту біоте хнології і штамів мікроорганізмів і має реєстраційний номер 131 (надалі назва штаму Clostridium perfringens тип В №131). Культурально-морфологічні властивості - факультативний анаероб, товста, нерухома паличка з заокругленими кінцями. В молодих культурах добре фарбується по Граму. В організмі тварин має типову форму палочки і утворює капсулу. Спори центральні або субтермінальні. В мазках із органів лабораторних тварин палички розміщуються поодиноко, попарно. На м'ясопечінкових середовищах бур хливий ріст із сильним помутнінням та газоутворенням, причому міхурці газу скопичуються на поверхні середовища у вигляді піни. Ріст спостерігається уже через 2-3 години після посіву. Через 2-3 дні ріст припиняється, на дні формується осад, середовище просвітлюється. На поверхні кров'яного агару спостерігаються круглі, випуклі колонії із світлою зоною гемолізу, спочатку сіруватою, а пізніше, при дії повітря світло-зеленою. На середовищі Вільсон-Блера утворює характерні колонії чорного кольору, або викликає потемніння середовища. Біохімічні властивості. Clostridium perfringens тип В №131 володіє різко вираженими цукролітичними властивостями і зброджує майже всі відомі вуглеводи, крім маніту, дульциту, рамнози. Розріджує желатину і дуже бур хливо звертає молоко. Патогенні властивості. Штам Clostridium perfringens тип В №131 активно продукує В-токсин, максимум концентрації через 15-24 години і є патогенним для білих мишей і морських свинок. Тип токсину визначався в реакції нейтралізації специфічними сироватками з послідуючим інфікуванням живою культурою. При внутрішньовенному введені білим мишам надосадової рідини 24-годинної бульйонної культури штаму Clostridium perfringens тип В №131 в об'ємі 0,5см 3 та розведенні 1:1000 спостерігається повільна загибель білих мишей протягом 18-24 годин. А при підшкірному чи внутрішньом'язовому введенні морським свинкам в об'ємі 1,0см 3 спостерігається повільна загибель тварин протягом 48-72 годин. Імуногенні властивості. Двічі парантерально щеплені білі миші анакультурою Clostridium perfringens тип В №131 в об'ємі 0,5см 3 захищає від контрольного зараження вірулентною культурою - цього ж штаму до 100% випадків. Винахід ілюструється наступними прикладами. Приклад 1 Білих мишей в кількості 10 голів масою 18-20г імунізували анакультурою штаму Clostridium perfringens №131 тип В підшкірно та 10 голів внутрішньочеревно в об'ємі 0,5см 3. Щеплення проводили двічі з інтервалом 10-12 діб. На 12 добу 2-го щеплення проводили гостре зараження вірулентною культурою штаму Clostridium perfringens №131 тип В. В якості контролю були не імунізовані білі миші. Приклад 2 Морських свинок масою 400г імунізували культурою Clostridium perfringens №131 тип В в кількості 10 голів внутрішньом'язово в ділянці внутрішньої поверхні стегна в об'ємі 1,0см 3. Щеплення проводили двічі з інтервалом 12 діб. На 14 добу проводили гостре зараження вірулентною культурою штаму Clostridium perfringens №131 тип В. Контролем були не імунізовані морські свинки. Було встановлено, що коефіцієнт ефективності імунізованих тварин складав до 90% при 100% загиблі морських свинок в контрольній групі. Проведені дослідження підтверджують, що запропонований штам володіє високою патогенністю і придатний до виробництва вакцини проти анаеробної ентеротоксемії овець і дизентерії ягнят. Літературні джерела 1. Патент 2141340 RU, А61К39/116 // А61К 39/07, 39/08. Ассоциированная вакцина против сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец и способ профилактики этих болезней /Гаврилов Β.Α., Селиверстов В.В., Бакулов И.А. и др.; №98107544/13; Заявлено 21.04.98; Опубликовано 20.11.99, Бюл. №32. -4с. 2. Риженко В.В., Марченко О.М., Бондар Т.О., Галка І.B., Риженко I.B., Кравцова О.Л., Черніков О.О. Актуальні питання профілактики анаеробних інфекцій людини і тварини //Бюлетень "Ветеринарна біотехнологія" IBM УААН, Київ, 2002. -№2. -С.199-204.