Спосіб отримання алкенових похідних чи їх солей

Изобретение касается ациклических ненасыщенных соединений, в частности способов получения алненовых производных общей формулы п^ г )(~С 6 Нф~п-ІЦ) » где n = 1 или 2; R ( и R^-H или OH; Rg= Н, О » ООЦ Н или 2-(К,Ы-диметиламино)-этоксил; R.=-С1 или Вг, или их солей, обладающих эстрогенной, антиэстрогенной,прогестановой,противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых активных соединений указанного класса. Синтез ведут реакцией Изобретение относится к получению новых соединении, а именно алкеновых производных общей формулы соединения формулы R -СЇІ^-^СЇ^)^" -CH(-C 6 H^-n-R 6 )-C(O)-C 6 H + -n-R 7 , где п имеет указанные значения, Rs- тетрагидропиран-2-илокси или беизилоксн: R6= И или тетрагидропнран-2-ішокси, R-j-H, метокси или тетрагидропиран-2илокси, с соединением общей формулы R 8 -C 6 H 4 -n-MgBr, где R3~H, метокси, 2-(Л,М-диметиламино)этокси или тетрагидропнран-2-илокси• Образукщее_ся соединение, в котором R R 6 R 7 и R- -тетрагидропиран-2-нлокси или бензилокси, подвергают кислотному гидролизу с последующей дегидратацией и замещением гидроксильной группы на С1 или Вг и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли, Испытания показыБатот, что максимальный эстрогенный эффект соединения примера 1 слабее, чем у гексестрола и диэтилстильбэстрола,но оно может антагонизировать эстрот енный эффект этих соединении при их совместном применении. Кроме того, это соединение ингибирует рост MCF-7 опухоли клеток in v i t r o . Так, увеличение числа выживших клеток в 2 раза по сравнению в контролем наблюдается при концентрации в 10 раз меньшей, чем для гексестрола и диэтилстильбзетрола. 5 табл. . 1508955 где R^H R 2 - водород или гидроксил; R^- водород,іидроксил,метоксил, или 2-(М,К-диметиламино)этоксил; _ R + - хлор или бром; п - 1 или 2, или их солей, которые обладают э с т р о генной, антиэстрогенной, п р о г е с т а новой и противоопухолевой активностью J0 и могут найти применение в медицине. Цель изобретения - разработка на основе известного метода способа п о лучения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойства- 15 ми , Изобретение иллюстрируется следующими примерами, П р и м е р I ,а 4- [(Тетрагидропиран-2-ил)окси} -1,2-дифенилбутан20 -1-он. Смесь, содержащую 19 ? 6 г д е з о к с и б е н з о и н а , 2 0 , 9 г тетрагидропиран-2-нлэфир-эащищенного бромэтанола, I ,0 г ТЭБАХ и 50 мл 48%-ного раствора гид- 25 роокиси н а т р и я , перемешивают в т е ч е ние 2 ч при 75°С, Далее добавляют в о д у , продукт экстрагируют в толуоле. Раствор толуола промывают1 водой и сушат сульфатом натрия . В заключе30 ние растворитель выпаривают,' Получают количественный выход, но маслообразный продукт содержит около 20% О-алкилированного продукта, b . Получение 4-[(Тетрагидропи35 ран-2-ил)оксиЗ~1,1,2-трифенилбутан-1-ола. Готовят комплекс Гриньяра в без- 1 водных условиях с использованием * 3,6 г магниевой стружки в 25 мл б е з 40 водного тетрагидрофурана, которые реагируют с 23,6 г бромбензола в 50 мл безводної о тетрагидрофурана. Далее добавляют о с т а т о к , полученный после выпаривания на стадии а , в 75 мл 45 безводного тетрагидрофурана а Реакционную смесь кипятят с обратным х о лодильником в течение 2 ч . Охлажденную смесь выливают в насыщенный р а с т вор хлорида аммония. После перемешивания встряхиванием отделяют органичес- 50 кий с л о й . Процесс экстракции повторяют с использованием эфира. Далее органические слои объединяют и сушат сульфатом натрия, В заключение р а с т 55 воритель выпаривают, c, 1,1 ( 2-Трифенилбутан-1,4-диол. Остаток, полученный в р е з у л ь т а т е выпаривания на стадии в , подвергают растворению в смеси, содержащей 400 І'Л абсолютного этанола, 10 г концентрированной серной кислоты и 75 мл воды. Эту смесь перемешивают в т е ч е ние 2 ч при комнатной т е м п е р а т у р е , з а тем полученный раствор нейтрализуют с использованием 2 М раствора гидроокиси натрия. Далее,этанол выпаривают, и к остатку добавляют в о д у . Затем полученный продукт экстрагируют в э т и л а ц е т а т е . Этилацетатный раствор сушат сульфатом натрия, и р а с т в о р и тель выпаривают. Полученный продукт перекристаллизовывагот из толуола. Выход составляет 16,5 г (52% от д е з о к с и б е н з о и н а ) , т . п л . 185~187°С, Спектр-ПМР (CD30D) & : 2,06 (2Н, g K ) ; 3,83 (2Н,Т); 3,92 (1Н, Т ) ; 4,76 (2Н, с ) ; 6 , 8 5 - 7 , 4 5 (13Н,М); 7,68 С2Н, g g ) . П р и м е р 2 . а. 4-[(Тетрагидропиран-2~ил)окси]2-фенил~1~(4-метоксифенид)-бутан-1-он. Соединение получают из 22,6 г 4-метоксидезоксибензоина и 20,9 г тетрагидропирай-2-йл-эфир-защищенного бромэтанола в соответствии с методикой, „описанной ' в примере 1. Ь, 4 - [( Тетр аги др опирай-2-й л) OKCHJ-1,2~дифенил+1-(4-метоксифенил)бутан- 1-ол № , S S и RS, SR1. Изомеры (RR, SS) получают из о с татка после выпаривания, приготовленного в примере 1а и 28,1 г 4~броманизола в соответствии с методикой, описанной в примере 1Ъ„ Изомеры (RS,SR) получают из о с т а т ка после выпаривания, приготовленного в примере 1Ь, и 23,6 г бромбензола в соответствии с той же самой методикой, что и указанные выше изомеры (RR, S S ) , с , 1,2-Дифенил-1-(4—метоксифенил)бутан-1,4-диол (RR,SS и RS,SR). Изомеры (RR,SS) получают из о с т а т ка после выпаривания изомеров (RR,SS), произведенных на стадии Ъ в с о о т в е т с т вии с методикой, описанной в примере 1 с Продукт подвергают перекристаллизации из т о л у о л а . Выход составляет 13,9 г (40% от д е з о к с и б е н з о и н а ) . Т.пл.124-126°С. (RS ,SR)-H3oMepbi получают в р е з у л ь тате выпаривания остатка (RS.SK) и з о меров , полученных на стадии а в с о ответствии с той же самой методикой, что и (RS,SS)-H30MepEJ,указанные выше, 1508955 Продукт подвергают перекристалпри комнатной температуре, Гастнорилизации из толуола, Выход составлятель выпаривают, и о с т а т о к , получен" ет 16,0 г (46% от 4-метоксибензоиный после выпаривания, растворяют в н а ) . Т.пл. 172-174°С. горячем петролейном эфире. Нераствоd. 1 ,2-Дифенил-1-(4-метокси- '• римый материал удаляют фильтрацией. фенил)-]-бутен-4-ол (Z и Е ) . Маточный раствор выпаривают и Смесь изомеров ( Z , E ) . Реакцию остаток , полученный после выпариваосуществляют в безводных условиях. ния , перекристаллизовывают из метаВначале 34,8 г 1,2-дифенил-1-(4-ме- j нола. Выход продукта составляет •роксифенил)бутан-1 ,4-диола р а с т в о 26,7 г (68%). Т . п л . П 6 - П 8 ° С . ряют в 200 мл ангидрида уксусной к и с Спектр П Р (СБСЦ) £ : 3,01 ( 2 Н , т ) ; М лоты» Далее добавляют 30 мл ацетил3,28 ( 2 Н , т ) ; 3,67 ( З Н , с ) ; 6,54 (2Н,д); хлорида. Полученную смесь выпаривав 6,8 ( 2 Н , д ) ; 7,17 ( 5 Н , с ) ; 7,32 ( 5 Н , с ) . ют в течение 2 часов при 100°С,после ч е - ] Масс-спектр: т / е 392/394 (М + В6), го растворитель выпаривают (промежу2 9 9 ( 6 5 ) , 2 2 1 ( 7 9 ) , 191(94), 121(100), 'точный продукт представляет собой ч и с 91(50). тый (г,Е)-4-ацетокси- 1,2-дифенил-1-(4П р и м е р З . а. 4- [(Тетрагидрометоксифенил)-1-бутен). Далее добавниран-2-ил)окси~|-1 ,2~дифенил-1-4-[4ляют 200 мл 94%-ного этанола, 20 мл 20 (2-(Ы,Ы-диметил-амино)этокси]фен1ш]буводы и 45 мл 20%-ного раствора гидротан-1-ол (RR,SS и RS, SR) окиси натрия к указанному остатку, (R,R и SS) изомеры получают из выобразовавшемуся после выпаривания. паренного осадка, полученного в приПолученную смесь кипятят с обратным мере 1а, и 36,6 г l-6poN-4~[2-(N > N-r холодильником, в течение I ч . Раствор 25 диметиламино)этокси] бензола по метонейтрализуют 2 М хлористоводородной дике примера 1. кислотой, после чего этанол выпари(RS,SR) изомеры получают следую— вают. К остатку добавляют воду, и щим путем, продукт экстрагируют в этилацетате* b . 1,2-Дифенил-1-[4[2-(Ы^-димеЭтилацетатный раствор сушат над суль- зо тиламино) э ток си"] фенил"] бу тан-1 ,4-диол фатом натрия, и растворитель выпари-' (RR,SS и RS,SR). вают. Выход чистой смеси изомеров (RR,SS)-H3OMepbi получают из выпа(Z;Е в соотношении 7:3) является колирепного осадка (RR,SS)-H3OMepoB, почественным^ т . п л . 91-105*С. лученных на стадии а соответственно Остаток, полученный после выпари- _ по методике примера 2 с , исключая только т о , что используют 20 г конвания смеси изомеров, перекристаллицентрированной серной кислотыі Выход зовывают из смеси, состоящей из г е к 19,5 г (48% из д е з о к с и б е н з и о н а ) . Т . п л . сана и этанола, в соотношении 9 5 : 5 , 165-167 С (из толуола), после чего получают 14,5 г (44%) (RS,SR)-H3oMepbi были получены та( г ) - и з о м е р а , т . п л . 121-123 С. 40 ким же путем. Т . п л . 139-341 С (из тоСпектр roiPfCDCJ,)^ : 1,28 ( Ш , с ) ; луола) . 2 , 7 3 ( 2 Н , т ) ; 3 , 5 7 ( 2 Н , т ) ; 8,63 ( З Б , с ) ; с . 1,2-Ди фенил-1- [4-[2-N,N-диме6,53 (2Н,д); 6,80 ( 2 Н , д ) ; 7,15 (5Н,м); тиламино)этоксиj фенил1-І-бутен-4-ол• 7,29 ( 5 Н , с ) . (Z и Е ) . Масс-спектр m/e: (M ,79) ,299 "(100), По методике примера 2d получают 221 ( 4 6 ) , 191 ( 7 0 ) , 121 (46).91 ( 6 0 ) . смесь изомеров Z и Е. (Е)-изомер, Т.пл. 107-И0°С. Выделение ( г ) - и з о м е р а , как свободСпектр П Р (СОСЛг) S ' 1,31 ( 1 Н , с ) ; М ного основания. 2,80 ( 2 H , T ) V 3,61 ( 2 Н , т ) ; 3,81 (ЗН ; v с ) ; 6,80-7,35 (14Н,м). 50 Смесь изомеров (Z:E в соотношении е . 4-Бром-1,2-дифенил-1-(4-метокт- • 2:1) подвергают перекристаллизации из сифенил)-1-бутен ( Z ) . толуола, в результате чего получают 33,0 г (Z)-l,2~дифенил-1-(4-меток15,9 -г (41%) ( г ) - и з о м е р а , имеющего сифенил)-!-бутен-4-ола растворяют т . п л . П0-112°С. в 500 мл безводного ацетснитрила.Да- 55 Спектр П Р (CDC13) $ : 2 , 2 8 ( 6 Н , с ) ; М лее при перемешивании добавляют 2,60 ( 2 Н , т ) ; 2 , 7 1 ( 2 н , т ) ; 3,53 ( 2 Н , т ) ; 39,3 г трифенилфосфипа и 49,8 г 3 , 8 9 ' : ( 2 Н , т ) ; 6,53 ( 2 Н , д ) ; 6,78 (2Н,д); тетрабромида углерода. Процесс пере7,32 ( 5 Н , с ) , 7,28 (511,с). мешивания проводят в течение 1 ч 7 "1508955 Выделение (Х)-изомера в виде хлористоводородной соли. Смесь изомеров (Z:Е в соотношении* 2:1) подвергают растворению в этаноле, и затем д о б а в ляют избыточное количество концентрированной хлористоводородной кислоты. Растворитель выпаривают , и далее полученный остаток дважды подвергают с перекристаллизации из этанола, в р е зультате чего получают 12,3 г (29%) ( г ) - и з о м е р а в виде хлористоводородной соли, Т . п л . 166-168°С (из а ц е т о на) , 15 Гидрохлорид (г)-изомера также получают из (Z) изомерного основания, (г)-изомер растворяют в этаноле Далее пропускают черев раствор газообразный хлористый водород» В за20 ключение растворитель выпаривают. Выделение (Е)-изомера. Маточные растворы, полученные при выделении гидрохлорида (г)-изомера, объединяют и растворитель выпаривают, 25 Выпаренный остаток подвергают п е р е кристаллизации из ацетона, в р е з у л ь тате чего получают 9,7 г (23%) ( Е ) изомера в виде соли гидрохлорида. 30 Т . п л , 235-237 С, (Е)-изомер может быть отделен от соли тем же самым с п о собом, что и смесь изомеров, у к а з а н ных выше. Температура плавления (Е)-изомера, как свободного основания, составляет 129—131° С (из толуо- 35 л а) . Спектр П Р (CDC1,) S :2,31 ( 2 Н , с ) ; М 2,71 ( 2 Н , т ) ; 2,78 ( 2 Н , т ) ; 3,57 ( 2 Н , т ) ; 4,05 ( 2 Н , т ) ; 6,87 ( 2 Н , т ) ; 6,94 (5Н,*с); 7,10 ( 5 Н , с ) ; 7,21 ( 2 Н , д ) . 40 d. 4-Хлор-1,2-дифенил-1 [4~[2-(N,Nдиметиламино)-этокси] фенил] -1-бутен (Z и Е ) . (Z)-изомер. Реакцию проводят в безводных условиях. Вначале 42,4 г 45 ( Z ) - l ,2-дифенил-1-[4-[2-(їі,її-диметиламино) этокси] фенил] -1 -бутєн-4-ола растворяют в 250 мл хлороформа. Далее по каплям добавляют-23,8 г тионилхлорида. Полученную смесь кипятят 50 с обратным холодильником!в течение 3 ч , Иэ полученного продукта выпаривают растворитель и затем продукт перекристаплизовывают из э т и л а ц е т а т а . Выход хлористоводородной соли с о с т а в ляет 36,7 г (83%). Продукт имеет тем" 55 пературу точки плавления, равную 194-196 С. Этот продукт может быть отделен от солевой формы с помощью 1 М 8 раствора карбоната натрия, после че~ го продукт экстрагируют в толуоле, Толуольный рзствор сушат, и растворитель выпаривают, Т . л л . Ю8-П0 С (из ацетона). Спектр П Р (CDC1 3 )£ : 2,27 ( 6 Н , с ) ; М 2,63 ( 2 Н , т ) ; 2,91 ( 2 Н , т ) ; 3,41 ( 2 Н , г ) ; 3,92 ( 2 Н , т ) ; 6,54 ( 2 Н , д ) ; 6,79 ( 2 Н , с ) ; 7,15 ( 5 Н , с ) ; 7,31 ( 5 Н , с ) . Масс-спектр: т/е 405/407 (М , 7 / 3 ) , 72 ( 2 0 ) , 58 ( 1 0 0 ) . Соль лимонной кислоты может быть получена следующим образом. Вначале 40,6 г ( г ) - и з о м е р а , в виде свободного основания, растворяют в 175 мл теплого ацетона и 24,5 г лимонной кислоты в 100 мл теплого ацетона. Затем растворы соединяют, и смесь охлаждают. Цитрат собирают фильтрацией, его температура плавления 160-162° С. (Е)-изомер. Соединение-получают "из (Е)-1,2-дифенил-1-[4-[2-(К,Ндиметиламино)этокси^]фенилJl~6yTeH~ - 4 - о л а , по той же самой методике,что и соответствующий (Z)~H3OMep „ Хлористоводородную соль кристаллизуют из толуола. Выход составляет 35,8 г (81%), т . п л , 183-185°С. Этот продукт может быть отделен от солевой формы по той же самой методике, что и соответствующий (г)-изомері, Температура плавления равна 6 9 - 7 1 ° С (из г е к с а н а ) . Х П спектр ЯМР '(С С 1 Э ) : 2,34(6Н,с); 2,74 ( 2 Н , т ) ; 2,97 ( 2 Н , т ) ; 3 , 4 3 ( 2 Н , т ) ; 4,08 ( 2 Н , т ) ; 6,80-7,30 (14Н,м). Масс-спектр: т / е 405/407 ( М + 7 / 3 ) , 72 ( 1 9 ) , 58 ( 1 0 0 ) . П р и м е р 4 . а . 4-Бензилокси-1,2-дифенилбутан~1~он. Соединение получают из 19,5 г дезоксибензоина и 21,5 г бензилэфирного защищенного бромэтанола в соответствии с методикой, указанной в примере 1а. b . 4-Бензилокси-1,2-дифенил-1-(4~ тетрагидропнран-2-ил-окси фенил)бутан-1-ол (RR,SS). Соединение получают из о с т а т к а , п о лученного после выпаривания, как указано в примере 4а, и из 38,6 г тетрагидропиран-2-ил эфирного защищенного 4-бромфенола в соответствии с методикой, описанной в примере 1Ь. c , 4-Зензилокси-І,2-дифенкл-!-(4~ оксифенил)-бутан-1-ол (RR,SS), Соединение получают из о с т а т к а , полученного выпариванием из стадии а, 10 Выделение (Z) изомера. Смесь гидроокиси натрия с метиленхпоридным маточным раствором помешают в разделительную воронку. Слой метиленхлорида удаляют, а водный слой нейтрализуют с помощью концентрированной хлористо"водородной кислоты, после чего осуществляют экстракцию с использованием , этилацетата, Этилацетатный раствор сушат над сульфатом натрия, растворитель выпаривают. (Z)-Изомер подвергают перекристаллизации из смеси метанолвода в соотношении 5 0 : 5 0 . Выход с о с тавляет 6,2 г (31%), продукт имеет т.пл„169-171 С. Спектр П Р (ацетон-dg) о : 2,70 М ( 2 Н , г ) ; 3,52 ( 2 Н , т ) ; 6,48 ( 2 , д ) ; 6,74 ( 2 Н , д ) ; 7,15 ( 5 Б , с ) ; 7,32 (511,с); S,08 ) 1 И , с ) . Масс-спектр: т/е 315 (М , 3 5 ) , 2 8 5 ( 3 8 ) , 207 ( 5 4 ) ; 191 ( 3 7 ) ; 1°? (40) j 91 ( 1 0 0 ) . Натриевую соль (2)-изомера получают как описано выше для (Е)-изомер а . Т.пл.205-217°С. f* 4-хлор-1,2-дифенил-1-(4-оксифенил)-1-бутен (Z и Е ) . Используя методику примера 3d-, получают количественный выход, т . п л . 85-87 С (из метанола). 1508955 в соответствии с методикой, описанной* в примере 1 с . d. 1, 2-Дифенші-1-(4-оксифенил)бутан- 1,4-диол.5 Остаток, полученный после выпаривания на стадии Ь, подвергают р а с т в о рению в 300 мл 94%-ного этанола. Далее добавляют 2 г катализатора - 5% палладия, нанесенного на активированный у г о л ь . Полу ченную р е акцн о иную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере водорода до тех пор,пока,не израсходуется 1 эквивалент водорода. Катализатор отфильтровывают. 15 Далее растворитель выпаривают, и полученный продукт кристаллизуют из толуол а . Выход составляет 12,7 г (38% от\ дезоакспбеизоина), т.пл.192-194°С. е . I,2-Дифенил-2-(4-оксифенил)-1- 20 бутєн-4-ол (Z и Е ) . По методике примера 2d получают названное соединение. Выход чистой смеси изомеров (Z:E в соотношении 1:1) 25 составляют 22,8 г (72%), т . п л . 1 6 4 167°С. Отделение(Е)-изомера. Вначале 20,0 г смеси изомеров подвергают _растворению в теплом метилен-, 30 хлориде, затем добавляют и Пыточное количество 2 М раствора гидроокиси ' натрия, После смешения или встряхивания смесь подвергают фильтрации» Осадок- который представляет собой (Е) изомер в форме натриевой соли суспен- if дируют в 2 М хпористоводородной кислот е . Далее (Е)-изомер экстрагируют в этилацетате как свободный фенол, Этилацетатный раствор сушат сульсЬатсм 40 натрия, и растворитель выпаривают. •(Е)-Изомер перекристаллизовывают из смеси вода-метанол, в соотношении 5 0 : 5 0 . Выход составляет 7,2 г (36%) т . п л . 165-167°С. Спектр П Р (CD.COCl*)? 2 ,78(2H S т) ;45 М 3,54 ( 2 Н , т ) ; 6,83 (2И,д); 6,90-7,35 (12Н,м); 8,32 ( 1 Н . с ) . Масс-спектр: т / е 316 (М , 6 4 ) , 285 ( 1 0 0 ) , 207 ( 8 7 ) , 191 ( 5 8 ) ; 50 107 ( 5 5 ) , 91 ( 9 4 ) . Натриевая соль может быть получена как описано выше. Другой метод заключается в растворении чистого (Е)-изомера в этаноле, добавлении сс эквивалентного количества гидроокиси натрия в этаноле и выпаривании растворители. Натриевую соль промывают ацетоном. Полученная при этом соль имеет т . п л . 215-226 С. Спектр П Р (CD30D )8 М : 2,67 . ( 2 Н , т ) ; 3,38 ( 2 Н , т ) ; 4,76 ( 1 , с ) ; 6,42 ( 2 Н , д ) ; 6,70 ( 2 Н , д ) ; 7,15 ( 5 Н , с ) ; 7,30 ( 5 Н , с ) . Масс-спектр: т / е : 334/336 (М І, 9 4 / 3 2 ) , 285 ( 7 1 ) , 207 ( 7 8 ) , 191 ( 5 6 ) , 183 ( 1 9 9 ) ; 107 ( 5 5 ) , 91 ( 8 6 ) . (Е)-изомер. (Е)-Изомер получают по той же самой методике, что у к а з а но выше для ( г ) - и з о м е р а . Полученный продукт промывают петролейпым эфиром. Был достигнут почти количественный выход. Т . п л . 109-1 12 а С Спектр ПМР "(CD3OD)5 : 2,96 ( 2 Н , т ) ; 3,42 ( 2 Н , т ) ; 4,79 (1Н,с>; 6,79 (2Н,д); 6,93 ( 5 Н , с ) ; 7,12 ( 2 Н , д ) ; 7,12 ( 5 Н , с ) . П р и м е р 5 . 4-£(Тетрагидропиран-2-ил)окси]-1,2-бис[[4-(тетрагидропиран-2-ил)окси1 фенил]} бутан-1-он. а„ Соединение получают из 39,6 г 4 , 4 ' ~бис(тетрагидропиран-2-ил)оксидезоксибензоина и 20,9 г тетрагидропиран-2-ил-эфир-защищенного бромэтанола в соответствии с методикой, описанной в примере 1а, Ъ. 4 - £(Тетрах'идрошіран-2-ил)окси] ~ 1-фенил-1,2-бис [[4-(тетрагидропи II 12 1508955 ран-2-ил)окси] фенил] бутан- 1-ол (RS, тан-1,4-днол в примере 1 с . ПолученSR). ный продукт перекристаллизовьшают из Соединение получают из остатка, толуола. Выход составляет 11,1 г произведенного в результате выпарива(32% от бензоксибензоина),продукт ния в примере 5 а , и 23,6 г бромбензоимеет т . п л . 182-184 С. ла в соответствии с методикой, опиd. I,2-Дифенил-1-(4-оксифенил)санной в примере 1Ъ. 1-пентен-5-ол (2 и Е ) . Используя методику примера 2d, c . I-Фенил-1,2-бис(4-оксифенил)бутан-1,4-диол (RS,SR). в результате получают смесь произ10 водных пентенола (Z:E в соотношении Соединение получают из остатка, 1:1). Выход составляет 5,6 г (17%) полученного после выпаривания на с т а дии b в соответствии с методикой, т . п л . 157-163°С. описанной в примере 1 с . Полученный Изомеры разделяют по методике, продукт перекристаллизовывагот из толу-j 5 описанной в примере 5е для их гомолоола. Выход составляет 8,4 г (24% от гов. 4,4 -бис £(тетрагидропиран-2-ил - о к (Е)-Изомер подвергают перекристалси]дезоксибенэоина), продукт имеет лизации из смеси метанол:вода в с о т.гш.213-215°С. отношении 2 : 3 , т . п л . 167-169 С. Спектр П Р (CD^OD) S : 1,36-1,74 М d. ]-Фенил-1,2-бис(4-оксифенил)20 і-бутан-4-аіі (Z,E) . (2Н,м); 2,44-2,67 (2Н,м); 3,42 35,0 г 1-фенил-1,2-бис(4-оксифе( 2 Н , т ) ; 4,75 (2Н, с ) ; 7,76 (2Н,м); нил)бутан~1,4~диола дефлегмируют в 6,91 (ЗН,мс); 7,05 ( З Н , д ) ; 7, 9 течение 1,5 ч в смеси, содержащей (5Н,с). 250 мл этанола и 10 мл концентрироМасс-спектр; т / е 330 (М , 1 0 0 ) , 25 ванной хлористоводородной кислоты. 265 ( 3 9 ) , 207 ( 7 3 ) , 183 ( 8 9 ) , Раствор обрабатывают древесным у г л е м . 307 ( 5 7 ) , 91 ( 9 0 ) . После фильтрации растворитель выпари(Z)-Изомер перекристаллизовьшают вают, а остаток после выпаривания из смеси: рода-метанол в соотношении подвергают рекристаллизации из толуо- 30 1:2, продукт имеет т . п л . 164-167°С. л а . Выход смеси изомеров (Z:E 1:1) 1,35-1,72 Спектр ПМР (CDaOD составил 19,2 г (58%), а т . п л . 1823 (2Н,м); 2,77-2,5 (2Н,м); 3,39 ( 2 Н , т ) ; 196°С. 4,74 ( 2 Н , с ) ; 6,40 ( 2 Н , д ) ; 6,68 (2Н,д); ПМР-спектр (CD-^OD)? : 2,64 ( 1 Н , т ) ; 7.12 ( 5 Н , с ) ; 7,26 ( 5 Н , м . с ) . 2,74 ( 1 Н , т ) ; 3,50 ( 2 Н , т ) ; 4,77 ( З Н , с ) ; - Масс-спектр: т / е 330 (М + , 100). 6,38-7,33 (13Н,м). 285 ( 1 9 ) , 207 { 7 0 ) , 183 ( 9 7 ) , 1 1 5 ( 7 6 ) , П р и м е р б . 91 ( 8 1 ) . a. 5- [(Тетрагидропиран-2-ил)окси}е . 5-Хлор~1,2-дифенил-1-(4-окси1,2-дифениллентан-1-он» фенил)-пентен ( Z , E ) . Соединение получают Из 19,6 г 40 Используя методику примера 3d, подеэоксибензоина и 22,3 г тетрагидролучают в результате смесь, состоящую пиран—2-ил—эфир—защищенного 3~бромиз ( Z ) - и (Е)-изомеров. Изомерную пропанола в соответствии с методикой, смесь подвергают перекристаллизации описанной в примере 1а. из петролейного эфира с получением в b . 5- [_(Тетрагидропиран-2-ил)окси1 - 45 результате 7,7 г (22%) (г)-изомера, 1,2-дифенил~1-£[4-(тетрагидропиранпродукт имеет т.пл.116-118 С. 2-ил) окси*]феншГ]пентан-1-ол (RR, SS) . Спектр П Р (CD3OD) S : 1,56-1,94 ( м ) ; М Соединение получают из остатка 2,74-2,66 (2Н,м); 3,35 ( 2 Н 9 т ) ; 4,74 выпаривания, полученного в примере (IH, с ) ; 6,4] ( 2 Н , д ) ; 6,49 ( 2 Н , д ) ; 6 а , и 38,6 г тетрагидропиран-2-ил50 7.13 ( 5 Н , с ) ; 7,22-2,41 (5Н,м). эфир-защищенного 4-бромфенола в с о П р и м е р 7 в 4-Бром-1,2-дифенииответствии с методикой, описанной в I— L4—[]^—CN,N—дыметилазмино)этокси] примере 1Ь. фенил]-1-бутен ( Z ) . c. 1,2-Дифенил-1~(4-оксифенил)пенСмесь, содержащую 38,7 г ( Z ) - l , 2 тан-1,5-диол (RR,SS). „ дифенил-1-[4~(К,Н-диметиламино)Соединение получают в результате STOKCHJфенил - 6 у т е н - 4 - о л а , 5 2 , 4 г тривыпаривания о с т а т к а , произведенного фенилфосфина, 6 6 , 4 г тетрабромида на стадии Ъ, с помощью того же самоуглерода и 400 мл сухого ацетонитри0 го метода, что и 1,1,2-трифенилбула встряхивают в течение 2 ч при 22 С, 1і 1508955 после чего обрл ^пи.шшиися продукт в роксипроїестеронл или молекул, подвиде осадка отдемнкп фильтрацией. вергаемых исследованию. Также были Выход 2 І , ] і (47%), т . п л . 114изучены такие комбинации как молеку116 С (перекристаллизация из метанола + эстраднол и молекулл + медро5 ла). к с и п р о ї е с т е р о н . Количество живущі їх Спектр П Р (CDClj)S : 2,27 ( 6 Н , с ) , М клеток спустя 4 ч, 24 ч и 48 ч ин2,63 ( 2 Н , т ) ; 2,88-3,09 (2Н,м); 3,19кубации определяют методом биолюминес3,40 (2Р,м); 3,92 ( 2 Н , т ) ; 6,54 (2Н,д); ценции (внутриклеточное определе6,79 (2Н,д); 7,15 ( 2 Н , с ) ; 7,31 ние АТФ). Противоопухолевый эффект 10 (5Н,с). исследуют в живом оріанияме по отноТ.пл.цитрата 165-167° С. шению к вызванной ДМВА-аденокарциноме молочной железы крысы, способСоединения I проявляют эстрorенной к трансплантации молочной железы, ную, антизстроїенную, прогестановую и аденокарциноме яичников, и способи противоопухолевую активность, 15 ной к трансплантации простатической Средство к эстрогенным рецепторам чешуйчатой клеточной карциномы, в ^определяют на основе способности мосоответствии со следующими методами. лекул конкурировать с ЗН-меченым и 1 7-бетаэстрадиолом, в препаратах,цитоАденокарцинома молочной железы зола маток крыс. После инкубации ли- 20 была вызвана с помощью ДМВА у самок ганды, не связанные с рецептором, и крыс в в о з р а с т е 35-40 д н е й . Обработлиганды, связанные с рецептором, подка молекулами. подвергаемыми исследовергают разделению с помощью известнованию, была начата после того, как го метода с использованием декстрана удавалось пальпировать опухоли. Р а з и активированного у і л я . 25 мер опухоли и количество опухолей оценивали два р а з а в неделю. Размеры Эстроген-антиэстрогенный (прогесопухолей в контрольной группе, обратеронный) эффект "в живом организме" ботанных только растворителем, сравбыл определен следующим образом. нивали с опухолями в группах, подЭстрoreиные свойства молекул были верг аемых исследованию. определены с помощью подкожного вво- 30 да молекул, суспендированных в кунАктивность молекул против других жутном масле, неразвившимся мышам в опухолей была исследована путем в в е возрасте 21 день, в течение трех посдения молекул с помощью желудочной ледовательных дней. На четвертый день трубки животным, которым быля осущемышей умерщвляли, и производили взвеши- ствлена имплантация способной к вание матки, Эстраднол (положительный трансплантации мышиной саркомы матки контроль) увеличивал вес матки. Все или простатической крысиной аденоматки коррелируют с эстрогенным эфсаркомы. фектом молекул. Ежедневно или два раза в неделю Антиэстрогенные эффекты молекул 40 пр он зв одили в в од препар ат а . При э том были определены аналогичным образом использовали MNRI мыши (самки весом прина неразвившихся мышах, . В этом слумерно 20 і ) и крысы породы Фишер-344 чае также была исследована способность (самцы весом примерно 200 г ) . Эстраммолекул ингибировать увеличение веса устинфосат использовали в качестве ' матки, вызванное зстроїеном. .? позитивного контроля , ТрансплантиПрогестановые эффекты были изучерованная крысам эдепокарцинома молочны аналогичным образом как и эстрогенной железы была развита путем инокуные. Ацетат медроксипрогестерона, ляции элементов , -вызванной Д В к а р МА который приводит к увеличению в е циномы, подкожно здоровым взрослым са матки, был использован для срав__ самкам крыс. Опухоль, которая давала нения. существенный р о с т , использовали для Противоопухолевый эффект был изудальнейшей трансплантации. Другие чен "вне организма•" следующим обраспособные к трансплантации опухоли зом. были инокулированы подкожно, в виде Рост NCF-7 клеточной линии ( а д е промытой клеточной суспензии (10 нокарцинома молочной железы людей, клеток/животные). известная как зависящая от э с т р о г е [ на) оценивают в присутствии или в Соединения I показали хорошее отсутствии эстрадиола, ацетата медсредство к эстрогенным рецепторам,что 15 1 6 1508955 было измерено с помощью м е т о д а , и с крыс, карпиновым простоты крыс и пользующего декетранактивирОБэнный саркомы матки мышей. уголь. В т а б л . 3 приведены данные по Полученные результаты приведены в противоопухолевым эффектам определент а б л . 1, ных соединений формулы I . ПредставЭстрогенный эффект соединений I , ленные результаты показывают слеизмеренный исходя из их способности дующее: увеличивать вес матки неразвнвшихся 10 -концентрация соедиЭффект мышей, был всегда значительно меньше 10 нения, при которой обесэстрогенного эффекта эстрадиола, к о печивается 50% ингибироторый был использован для положительвание роста клеток 6 ного контроля. +++ 1СГ-5 х 10~ М 6 Эстрогенный эффект соединений I ++ 5 х 10~ - ІОГ^М 5 и 2 может быть обнаружен только при -с + + Ю-*- 5 х 10" М более высоких концентрациях. При д о 5 х КГ* Мзировке, равной 5 мг/кг живого в е с а , Обобщенные данные эстрогенных/анэффект первого был на 50% меньше, тиэстрогенных и прогесгановых эфчем эффект эстрадиола при дозировке фектов соединений I приведены ниже. 0,05 мг/кг живого в е с а . 20 Соединение 1 ( т а б л . 1 ) Опыт Соединения 1-3 ( т а б л , 1 ) обладают Без доба- Эстрогенный Прогестаиовый антиэстрогенными эффектами, что было вок Антиэстрсгеновое ( 27% измерено по их способности ингкбироС эстрав а т ь увеличение веса матки неразвиг-. снижение диолом вшихся мышей, вызванной эстрадно25 0,05 х лом. 0 ,05 мг/кг 1 живого Соединение 1 при д о з е , равной веса 0,5 мг/кг живого в е с а , и соединении 2 С медрокси-Слзбое ингибирование, и 3 при дозировке, равной 5 мг/кг прогестеро- 14% снижение по сравживого в е с а , вызывают соответственно 30 ном нению с контрольным 2 7 , 25, 20%-ное ингибирование эффек- > та увеличения веса матки у мышей в ы 0 ,06 мг/кг званное * эстрадиолом. живого в е - * са I . Соединения, подвергнутые испытаниПрогестановые эффекты соединения I 35 ям 9 оказались очень эффективными вне были определены, как описано ранее„ организма по отяооїению к MCF-7 клетАцетат медроксипрогестерона, исполькам молочной железы и путем увеличезуемый в качестве положительного контния концентрации гибель клеточной роля^ вызывал ингибированпе веса матки неразвившихся мышей до 40%. 40 линии была достигнута с помощью кажд о г о из соединений в Соединение I , кроме того, обладает Противоопухолевые эффекты соедиантиэстрогенными и эстрогенными свойнил I ''в живом организме" определен ствами, и как было установлено, так~ при испытаниях против аденокарциноми же обладает прогестановыми свойства7 ми. и вызывает незначительное ингиби- Лс молочной железы крыс, вызванной ДМВА. 45 Противоопухолевый эффект соединения 1 рование медроксипрогестерона при наиобнаружен "ъ диапазоне доз от 1 ,0 до более низких изученных д о з в 30 мг/кг живого в е с а . При наиболее В т а б л , 2 и 3 представлены обобщенвысокой дозе было установлено, что ные данные эстрогенных (антиэстрогенных и прогестановых эффектов). Про50 рост опухоли полностью прекращался (см.табл04). & центные данные относятся к увеличеРазмер относится к произведению нию (снижению веса маток мышей). (ширина) х (высота) опухоли. СкоПротивоопухолевые эффекты со єдине** рость роста определяется разницей ний I были испытаны вне организма* по отношению к линии MCF-7 человеческой 55 между размерами по сравнению с теми размерами, которые были в первый_ клеточной аденокраценомы молочной жедень лечения. Противоопухолевый эфлезы, и "в живом организме" против фект меньший, чем тот, который проаденокарциноми молочной железы крыс. являет соединение 1 против рака мрвызванной Д В карциномы яичников МА 17 Б клеточных культурах используют острогенную рецепторную положительную раковую клеточную линию грудной железы человека tMCF-7 клетку культивировали в присутствии г е к с е с т р о л а , д и э т и л І ІЗ стияьбэстрола и торемифена. Концентр ацни к яждого со еди н єни я бы пи 10-10, 10-9, 10-8, 10-7, 10-6 и 10-5 молъ/л. Число живых клеток за-писывали при каждой концентрации и вычисляли в процентах контроля ( б е з добавления г о р м о н о в ) . Из данных т а б л . 5 в и д н о , что максимальный эстрогенный эффект торемифена даже при высоких д о з а х с л а б е е , ч е м у гексестрола и диэтилстильбэстрор о л а ; торемифен способен а н т а г о н и з и р о в а т ь эстрогенный эффект г е к с е с т р о ла и д и э т и л с т и л ь б э с т р о л . Все три соединения могут ингибиров а т ь рост MCF-7 опухоли клеток i n v i t r o по способу в зависимости от концентрации: торемифен более д е й с т венный ингибитор р о с т а клеточной опухоли, чем г е к с е с т р о л и д и э т и л с т и л ь - / б э с т р о л . Так концентрация торемифена, которая увеличивает число выживших клеток в половину при сравнении с контролем, в 10 раз ниже чем к о н центрация г е к с е с т р о л а и д и э т и л с т и л ь бэстрола. Таким образом, предлагаемый с п о соб позволяет синтезировать новые соединения I , обладающие высокой э с т р о г е и н о й , антиэстрогенной , п р о гестановой и противоопухолевой а к т и в ностью. 1508955 лочнои железы, в ы з в а н н о ю ДОБА, наблюдался для соединения 2 , і Эффект соединения I против к а р циномі»! яичников у крыс и саркомы матки у мышей был испытан на способах к трансплантации опухолях с и с п о л ь з о в а нием методов, описанных выше. Спустя две недели лечения при д о з е 100 мг/кг живого в е с а размер саркомы матки был to на 30% меньше, чем соответствующий параметр у контрольных э к з е м п л я р о в , и спустя 10 дней лечения при д о з е 5 мг/кг живого в е с а размер карциномы яичников кры*с был на 20% меньше по 15 сравнению с контрольными э к з е м п л я р а ми. Острая токсичность LD 5 0 , у мышей и з м е н я е т с я от 1000 до 3200 мг/кг жив о г о в е с а для соединений, п о д в е р г а е - 20 мых исследованию. Клиническая д о з и ровка для в з р о с л о г о человека при оральном виде изменяется в диапазоне от 10 до 200 мг в д е н ь . Проведено .сравнение биологической 25 активности соединения ] (торемифена) с диэтилстильбэстеролом и г е к с е с т р о лом. Методы р о с т а MCF-7 клеточной линии и э строї'ен-антиэстр or енного ( п р о г р е с - 30 теронного) эффекта, основанного на взвешивании матки, описаны выше. Были получены следующие результаты, Разница между соединением 1 и г е к сестролом так же как и между соедине35 нием I и диэтилстильбэстролом изучена утеротрофическим анализом на мышах и эстрогенной рецепторной положительной клеточной линии грудной железы ч е ловека. 40 Утеротрофический а н а л и з , описывающий эстрогенные свойства молекул и клеточных к у л ь т у р , показывает активность молекул, ингибирующих рост р а к о вой ОПУХОЛИ. дс В утеротрофическом анализе г е к с е строл и диэтилстильбэстрол были введены подкожно мышам в д о з а х 5 и 5 0 [ Ц г / к г . Тёоремифен был введен в количестве 5 0 , 500 и 5000 fur/кг. Р а з - 50 мер матки ( в е с , в мг) делится на вес животного (выраженного в г) в каждой группе,данные представлены в Составитель И.Бочарова • Техред 'л.Сердгокова "• Корректор Л.Патай Закаэ 7418 Тираж 352 " . Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская н а б . , д . 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина.