Фармацевтична композиція для лікування раку або доброякісних проліферативних хвороб у ссавців, спосіб лікування, фармацевтична композиція для інгібування ненормального росту клітин у ссавців та спосіб інгібування

1 Фармацевтична композиція для лікування раку або доброякісних проліферативних хвороб у ссавців, що включає інгібітор ФТази, інгібітор HMG СоА редуктази і фармацевтично прийнятний носій, в якій інгібітор ФТази і інгібітор HMG СоА редуктази присутні в кількостях, що роблять композицію ефективною при лікуванні раку або доброякісних проліферативних хвороб, і в якій інгібітор ФТази вибирають з (а) сполуки формули І R1 О В ЯКІЙ R1 і R2 незалежно вибирають з групи, що містить (СН2)р(5-10 членний гетероцикл), -(СН2)р(Сб-Сю арил), аліл, пропарпл і С-і-Сє алкіл, в яких р приймає значення від 0 до 3, згадиний алкіл і алкільний замісник згаданих R1 і R2 груп, необов'язково, заміщені від 1 до З R9 замісників, арил і гетероциклічний замісник згаданих R1 і R2 груп, необов'язково, заміщені від 1 до 3 замісниками, незалежно вибраними з галогену і R9, R3 є -(СН 2 )т(1- або 2-адамантил), -(СН2)гп(Сз-Сю циклоалкіл), -(СН2)т(Сб-Сю арил), С-і-С-ю алкіл, Xа Xі (А) (В) в яких m приймає значення від 0 до 6, і згаданий циклоалкіл і алкіл, необов'язково, містять 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, X 1 , X 2 і X 3 кожний незалежно С1-С7 алкілен, що необов'язково, містить 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, X 4 є зв'язком або С1-С7 алкіленом, що необов'язково, містить 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, і в формулі (В) замісник X 4 приєднаний до будь-якого атому вуглецю в X 1 заміснику, R4 є Сб-Сю арилом, 5-10 членним гетероциклом або С-і-Сб алкілом, де R4 групи, необов'язково, заміщені від 1 до З R замісників, кожний R5 незалежно вибирають з групи, що містить галоген, нітро, ціано, феніл, -C(O)OR 6 , -SO 2 NR 6 R 7 -NR 6 R 8 , -C(O)R 6 -OR 6 , 6 8 6 8 8 8 6 C(O)NR R -OC(O)NR R , -NR C(O)NR R , -NR 8 C(O)R 6 , -NR8C(O)O(CrC4 алкіл), 8 8 6 C(NR )NR R , - C ( N C N ) N R V , - C ( N C N ) S ( C r C 4 алкіл), - N R 8 C ( N C N ) S ( C r C 4 алкіл), -NR 8 C(NCN)NR 8 R 6 , - N R 8 S O 2 ( C r C 4 алкіл), -S(O) n (Ci-C 4 алкіл), в яких п приймає значення від 0 до 2, -NR 8 C(O)C(O)NR 8 R 6 , -NR 8 C(O)C(O)R 8 , тіазоліл, імідазоліл, оксазоліл, піразоліл, триазоліл, тетразоліл і Сі-С 4 алкіл, необов'язково заміщений від 1 до 3 атомів фтору, кожний R 6 1 R7 незалежно водень або Сі-С 4 алкіл, кожний R8 незалежно R 6 a 6 o -OR 6 , і, кожний R9 незалежно вибирають з ціано, R6, -OR6, -OC(O)R 6 , -C(O)OR 6 -C(O)NR 6 R 7 , -NR 6 R 7 , -NR 6 R 8 , -SO 2 NR 6 R 7 і C r C 4 алкіл заміщений гідрокси, (б) сполуки формули ПА або ІІВ ^ 1 ( ^ --• с. ^ 00 о ю 57081 Cf-L-Неї1 CH,-Het" ІІБ В ЯКИХ R1 - водень, галоген (наприклад, хлор, фтор, бром або йод), ціано, гідрокси, нітро, трифторметил, NHR5, -NR5R5, R5, -OR5 або -S(O)m-R5, R 2 e-(CH 2 ) n -Ya6o-OCOR 5 , R3 є 4-, 3-, або 2-піридил, піримідиніл, піразиніл, 2фтор-4-піридил або З-фтор-4-піридил, R4 є 1-адамантил або 2-адамантил, Y- водень, гідрокси аміно, ціано, -NHR5, -NR5R5, NHCOR5, -NHCO2R , галоген, OR5, -S(O)mR5, СО2Н, -CO2R5, -CONR5R5, -CONHR5, -CONH2, COR5, -CH=CHCO2R5, -OCOR5, феніл, феніл заміщений W, -C=CCO2R5, -CH=CHR5 або -C=CR5, кожний R5, незалежно, (С1-С4) розгалужений або нерозгалужений алкіл, феніл або бензил, в якій згаданий феніл і фенільнии фрагмент, згаданого бензилу можуть, необов'язково, бути заміщені галогеном, гідрокси, нітро, ціано, аміно, (С1-С4) розгалуженим або нерозгалуженим алкілом, (С1-С4) розгалуженим або нерозгалуженим алкокси, фенілом, бензилом, (С1-С4) алкіламшо, ді[(Сі-С4) алкіл]аміно або -S(O)m-(Ci-C4) розгалуженим або нерозгалуженим алкілом, кожний W, незалежно, галоген, R5, гідрокси, -OR5, нітро, аміно, -NHR5, -NR5R5, ціано або -S(O)m-R5, m дорівнює 0, 1 або 2, п приймає значення від 1 до 7, р дорівнює 0 або 1, Е і Е2 вибирають, незалежно, з водню, галогену, (Сі-Сз) алкілу, гідрокси, (Сі-Сз) алкокси, нітро, трифторметил у, ціано, аміно, (Сі-Сз) алкіламшо і ді[(Сі-Сз) алкіл]амшо, Het' і Het" вибирають, незалежно, з 6 членного гетероциклічного кільця, що містить від одного до чотирьох атомів азоту в структурі кільця, необов'язково заміщений одним замісником, вибраним з (Сі-Сз) алкілу, галогену, гідрокси, (Сі-Сз) алкокси, аміно, (Сі-Сз) алкіламшо і ді[(Сі-Сз) алкіл]амшо, (в) сполуки формули III R3 жний з яких одинарним звязком приєднаний до атому вуглецю кільця А), коли Z зв'язаний простим зв'язком в кільцем А, і коли згадані нафтил, феніл і фенільнии замісник згаданого бензилу можуть, необов'язково, бути заміщені від одного до трьох замісників, незалежно вибраних з (С-і-Сє) алкілу, необов'язково, заміщеного від одного до трьох атомів фтору, (С-і-Сб) алкокси, необов'язково, заміщеного від одного до трьох атомів фтору, галогену (наприклад, хлор, фтор, бром або йод), аміно, (С-і-Сб) алкіламшо, [ді(С-і-Сб) алкіл]амшо, ціано, нітро, (С-і-Сб) алкіл-SOn-, в якій п дорівнює 0, 1 або 2, -СООН, -СОО(Сі-С6) алкілу і -C(O)NH(CrC6) алкілу, X e N R 1 a6oCHR 1 , R1 є воднем, (С-і-Сб) алкілом або (С-і-Сє) алкілфенілом, коли кільце А насичене (тобто, коли кільце А не містить подвійних зв'язків) І R1 відсутній, коли кільце А містить подвійний зв'язок, R2 вибирають з нафтилу, фенілу, (С-і-Сє) алкілфенілу, 1-адамантилу, 2-адамантилу, (Ci-Cs) розгалуженого або не роз гал уже ного алкілу, (Сз-С-ю) циклоалкілу і (Cs-Сзо) біциклічного або трициклічного алкілу, в яких згадані (Сз-С-ю) циклоалкіл і (CsС30) біциклічний або трициклічний алкіл можуть, необов'язково, бути заміщені пдроксигрупою, і в яких згадані адамантильні групи можуть, необов'язково, бути заміщені від 1 до 3 замісників, незалежно вибраними з (С-і-Сб) алкілу, галогену або гідрокси, і R3 і R4, незалежно, вибирають з бензилу, в якому фенільнии фрагмент згаданого бензилу може, необов'язково, бути заміщений аміно або нітрогрупою, водню, фенілу, (І\ЬС)-(Сі-Сб) алкілу, (С-і-Сє) алкіл-О-С(=О)-(Сі-Сб) алкілу і Het-CH2, в якому Het вибирають з 2-, 3- або 4-піридинілу, фурилу, тетрапдрофурилу, піримідилу, піразинілу, піразолілу, ізоксазолілу, тюфенілу і триазолілу, при умові, що (а) не більше, ніж одна з двох пунктирних ЛІНІЙ, в будь якій сполуці, може являти собою подвійний зв'язок, (б) коли Z є (Н, Н), X є СН2, (в) коли Z є киснем або (Н, Н) і X є CHR , R1 повинен бути воднем, (г) коли Z є сіркою і X є NR1, R1 повинен бути воднем, і (д) один з R3 і R4 повинен бути Het-CH2, і (г) сполука IV .0 IV но 2 с в якій обидві пунктирні лінії, необов'язково, являють собою подвійний зв'язок, Z є киснем або сіркою, коли подвійний зв'язок присутній в КІЛЬЦІ А, тоді Z є гідрокси групою, (С-і-С-ю) алкіл-S-, (С-і-С-ю) алкіл-SO-, (С-і-С-ю) алкіл-SOr, адамант-2-ил-З-, нафтил-S-, бензил-S-, фенілC(=O)CH2-S-, (Сі-С6) anKin-O-C(=O)-CH2-S- або (Н,Н) (тобто, Z являє собою два атоми водню, ко і фармацевтично прийнятні солі вказаних вище сполук 2 Фармацевтична композиція згідно з п 1, в якій інгібітор HMG СоА редуктази вибирають з групи, що містить аторвастатин, правастатин, ловастатин, компактин, флувастатин і симвастатин, і фармацевтично прийнятні солі вказаних вище сполук 3 Спосіб лікування раку або доброякісних проліферативних хвороб у ссавців, що полягає у призначенні згаданому ссавцю фармацевтичної композиції згідно з будь-яким з пунктів 1 або 2 4 Фармацевтична композиція для інгібування не 57081 нормального росту клітин у ссавців, що містить інгібітор ФТази, інгібітор HMG СоА редуктази і фармацевтично прийнятний носій, в якій інгібітор ФТази і інгібітор HMG СоА редуктази присутні в кількостях, що роблять композицію ефективною для інгібування ненормального росту клітин, і в якій інгібітор ФТази вибирають з (а) сполуки формули І R1 .О або СН,-НеГ Н А в якій R1 і R2 незалежно вибирають з групи, що містить (СН2)р(5-10 членний гетероцикл), -(СН2)р(Сб-Сю арил), аліл, пропарпл і С-і-Сє алкіл, в яких р приймає значення від 0 до 3, згадиний алкіл і алкільний замісник згаданих R 1 і R2 груп, необов'язково, заміщені від 1 до З R9 замісників, арил і гетероциклічний замісник згаданих R1 і R2 груп, необов'язково, заміщені від 1 до 3 замісниками, вибраними з галогену і R9, R3 є -(СН 2 )т(1- або 2-адамантил), -(СН2)гп(Сз-Сю циклоалкіл), -(СН2)т(Сб-Сю арил), С-і-С-ю алкіл, -Xі (А) (В) в яких m приймає значення від 0 до 6, і згаданий циклоалкіл і алкіл, необов'язково, містять 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, X 1 , X 2 і X 3 кожний незалежно С1-С7 алкілен, що необов'язково, містить 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, X 4 є зв'язком або С1-С7 алкіленом, що необов'язково, містить 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, і в формулі (В), замісник X 4 приєднаний до будь-якого атома вуглецю в X 1 заміснику, R4 є Сб-Сю арилом, 5-10 членним гетероциклом або С-і-Сб алкілом, де R4 групи, необов'язково, заміщені від 1 до З R замісників, кожний R5 незалежно вибирають з групи, що містить галоген, нітро, ціано, феніл, -C(O)OR 6 , -SO 2 NR 6 R 7 -NR 6 R 8 , -C(O)R 6 -OR 6 , C(O)NR 6 R 8 -OC(O)NR 6 R 8 , -NR 8 C(O)NR 8 R, -NR 8 C(O)R 6 , -NR 8 C(O)O(Ci-C 4 алкіл), 8 8 6 C(NR )NR R , - C f N C N J N R V , - C ( N C N ) S ( C r C 4 алкіл), -NR 8 C(NCN)S(C r C 4 алкіл), -NR 8 C(NCN)NR 8 R 6 , - N R 8 S O 2 ( C r C 4 алкіл), -S(O) n (Ci-C 4 алкіл), в яких п приймає значення від 0 до 2, -NR 8 C(O)C(O)NR 8 R 6 , -NR 8 C(O)C(O)R 8 , тіазоліл, імідазоліл, оксазоліл, піразоліл, триазоліл, тетразоліл і Сі-С 4 алкіл, необов'язково заміщений від 1 до 3 атомами фтору, кожний R 6 1 R7 незалежно водень або Сі-С 4 алкіл, кожний R8 незалежно R 6 a 6 o -OR 6 , і, кожний R9 незалежно вибирають з ціано, R6, -OR6, -OC(O)R 6 -C(O)OR 6 , -C(O)NR 6 R 7 , -NR 6 R 7 , -NR 6 R 8 , SO2NR 6 R і С1-С4 алкіл, заміщений гідрокси, (б) сполуки формули ПА або ІІВ в яких R1 - водень, галоген (наприклад, хлор, фтор, бром або йод), ціано, гідрокси, нітро, трифторметил, NHR 5 , -NR 5 R 5 , R5, -OR 5 або -S(O) m -R 5 , R2e-(CH2)n-Ya6o-OCOR5, R3 є 4-, 3-, або 2-піридил, піримідил, піразиніл, 2фтор-4-піридил або З-фтор-4-піридил, R4 є 1-адамантил або 2-адамантил, Y - водень, гідрокси аміно, ціано, -NHR 5 , -NR 5 R 5 , NHCOR 5 , -NHCO2R , галоген, OR 5 , -S(O) m R 5 , СО 2 Н, -CO2R5, -CONR 5 R 5 , -CONHR 5 , -CONH 2 , COR 5 , -CH=CHCO 2 R 5 , -OCOR 5 , феніл, феніл заміщений W, -C=CCO 2 R 5 , -CH=CHR 5 або -C=CR 5 , кожний R5, незалежно, (Сі-С 4 ) розгалужений або нерозгалужений алкіл, феніл або бензил, в якій згаданий феніл і фенільний фрагмент, згаданого бензилу можуть, необов'язково, бути заміщені галогеном, гідрокси, нітро, ціано, аміно, (Сі-С 4 ) розгалуженим або нерозгалуженим алкілом, (Сі-С 4 ) розгалуженим або нерозгалуженим алкокси, фенілом, бензилом, (Сі-С 4 ) алкіламшо, ді[(Сі-С 4 ) алкіл]аміно або -S(O) m -(Ci-C 4 ) розгалуженим або нерозгалуженим алкілом, кожний W , незалежно, галоген, R5, гідрокси, -OR5, нітро, аміно, -NHR 5 , -NR 5 R 5 , ціано або -S(O) m -R 5 , m дорівнює 0, 1 або 2, п приймає значення від 1 до 7, р дорівнює 0 або 1, Е і Е 2 вибирають, незалежно, з водню, галогену, (С-і-Сз) алкілу, гідрокси, (С-і-Сз) алкокси, нітро, трифторметил у, ціано, аміно, (С-і-Сз) алкіламшо і ді[(Сі-Сз) алкіл]амшо, Het' і Het" вибирають, незалежно, з 6 членного гетероциклічного кільця, що містить від одного до чотирьох атомів азоту в структурі кільця, необов'язково заміщений одним замісником, вибраним з (С-і-Сз) алкілу, галогену, гідрокси, (С-і-Сз) алкокси, аміно, (С-і-Сз) алкіламшо і ДІ[(С-І-СЗ) алкіл]амшо, (в) сполуки формули III R3 .R* в якій обидві пунктирні лінії, необов'язково, являють собою подвійний зв'язок, Z є киснем або сіркою, коли він зв'язаний подвійним зв'язком з кільцем А, тоді Z є пдроксигрупою, (Сі-Сю) алкіл-S-, (С-і-С-ю) алкіл-SO-, (С-і-С-ю) алкілSO2-, адамант-2-ил-З-, нафтил-S-, бензил-S-, фе 57081 Hin-C(=O)CH2-S-, (Ci-C6) anKin-O-C(=O)-CH2-S- або (H,H) (тобто, Z являє собою два атоми водню, кожний з яких одинарним зв'язком приєднаний до атому вуглецю кільця А), коли Z одинарний зв'язок в КІЛЬЦІ А, і коли згадані настильний, фенільний і фенільний замісник згаданого бензилу можуть, необов'язково, бути заміщені від одного до трьох замісників, незалежно вибраних з (С-і-Сє) алкілу, необов'язково, заміщеного від 1 до 3 атомами фтору, (С-і-Сб) алкокси, необов'язково, заміщеного від одного до трьох атомів фтору, галогену (наприклад, хлор, фтор, бром або йод), аміно, (С-і-Сє) алкіламшо, [ди(С-і-Сб) алкіл]амшо, ціано, нітро, (С-і-Сб) алкіл-SOn-, в якій п дорівнює нулю, одному або двом, -СООН, -СОО(С Г С 6 ) алкілу і C(O)NH(Ci-C6) алкілу, X e N R 1 a6oCHR 1 , R1 є воднем, (С-і-Сб) алкілом або (С-і-Сє) алкілфенілом, коли кільце А насичене (наприклад, коли кільце А не містить подвійних зв'язків) І R1 відсутній, коли кільце А містить подвійний зв'язок, R2 вибирають з нафтилу, фенілу, (С-і-Сє) алкілфенілу, 1-адамантилу, 2-адамантилу, (Ci-Cs) розгалуженого або не роз гал уже ного алкілу, (Сз-С-ю) циклоалкілу і (Cs-Сзо) біциклічного або трициклічного алкілу, в яких згадані (Сз-С-ю) циклоалкіл і (CsС30) біциклічний або трициклічний алкіл можуть, необов'язково, бути заміщені пдроксигрупою, і в яких згадані адамантильні групи можуть, необов'язково, бути заміщені від одного до трьох замісників, незалежно вибраних з (С-і-Сє) алкілу, галогену або гідрокси, і R3 і R4, незалежно, вибирають з бензилу, в якому фенільний фрагмент згаданого бензилу може, не Цей винахід стосується використання інгібіторів фарнезилтрансферази (ФТази) в комбінації з інгібіторами пдроксиметилглутарил коензиму А (HMG СоА) редуктази для лікування раку у ссавців Онкогени - це гени, що кодують протеїнові компоненти шляхів сигнальної трансдукції, у випадку активації яких відбувається ненормальне стимулюванням росту клітин і мітогенез Експресія онкогенну в клітинах, що ростуть, приводить до змін в клітинах, що характеризуються здатністю клітин до росту на м'якому агарі і росту клітин у вигляді щільного локусу, в якому відсутнє контактне інгібування, як в трансформованих клітинах Мутації і/або надекспресія деяких онкогенів часто пов'язується з раком у людей і іншими захворюваннями, що викликані ненормальним (наприклад, нерегулюємий) ріст клітин Наприклад, ріст доброякісних і злоякісних пухлин може бути викликаний експресією, що активується Раз онкогеном або активується Ras протеїном, іншим геном, ніж той, що був підданий онкогенній мутації, Ненормальний ріст клітин, що відбувається в доброякісних і злоякісних клітинах інших проліферативних захворювань може викликатися ненормальної активацією Ras, Видозмінені онкогенні форми Ras часто знаходять в багатьох людських ракових утвореннях, найбільш переважно, в біль 8 обов'язково, бути заміщений аміно або нітрогрупою, водню, фенілу, (І\ЬС)-(Сі-Сб) алкілу, (С-і-Сє) алкіл-О-С(=О)-(Сі-Сб) алкілу і Het-Cbb, в якому Het вибирають з 2-, 3- або 4-піридинілу, фурилу, тетрапдрофурилу, піримідилу, піразинілу, піразолілу, ізоксазолілу, тюфенілу і триазолілу, при умові, що (а) не більше, ніж одна з двох пунктирних ЛІНІЙ, в будь-якій сполуці, може являти собою подвійний зв'язок, (б) коли Z є (Н, Н), X є СЬЬ, (в) коли Z є киснем або (Н, Н) і X є CHR , R1 повинен бути воднем, (г) коли Z є сіркою і X є NR1, R1 повинен бути воднем, і (д) один з R3 і R4 повинен бути Het-CH2, і (г) сполука IV .0 IV но 2 с і фармацевтично прийнятні солі вказаних вище сполук 5 Фармацевтична композиція згідно з п 4, в якій інгібітор HMG СоА редуктази вибирають з групи, що містить аторвастатин, правастатин, ловастатин, компактин, флувастатин і симвастатин, і фармацевтично прийнятні солі вказаних вище сполук 6 Спосіб інгібування ненормального росту клітин у ссавців, що полягає у призначенні згаданому ссавцю фармацевтичної композиції згідно з будь-яким пунктом 4 або 5 шості ніж 50% колоній і панкреатичних карценом (Kohl et al , Sciance, Vol 260,1 834 до 1837,1993) Ras онкогени експресують в приблизно в 40% твердих злоякісних пухлин, що є несприятливими до звичайної хіміотерапії K-Ras ізоформа експресує приблизно в 90% панкреатичних пухлин і приблизно 40% ректальних і легеневих ракових утворень H-Ras ізоформа експресує в приблизно 40% головних і шийних ракових утворень N-Ras ізоформа експресує в більшості ракових утворень щитовидної залози і приблизно 25% гострих проявлень меєлоідної лейкемії Для того, щоб одержати потенціал, що перетворює нормальні клітини у ракові клітини або доброякісні клітини, що показують ненормальний розвиток, як визначено нижче, попередники Ras онкопротешів повинні бути піддані фарнезилацм цистешового залишку, розташованого з карбоксильного кінця тетрапептиду Інгібітори ферменту, що каталізують цю модифікацію, фарнезилпротештрансфераза, є досить корисною для використання в якості антиракового агенту для пухлин, в яких Ras відповідає за зміни в КЛІТИНІ K-Ras ізоформа може бути ДВІЧІ фарнезильована і гераніл-геранільована в непошкоджених клітинах Потенційні інгібітори фарназил ферменту (ФТази), що є високоселективними для ФТази проти геранілгеранілтрансферази І (ЗОТази І) можуть бути нездатні до блокування прениляції мутантно 57081 го K-Ras і таким чином, неефективним до інгібування росту експресуємих K-Ras пухлинних клітин Представлений винахідник знайшов, що призначення малих доз інгібітору HMG СоА редуктази в комбінації з протеїн селективним інгібітором ФТази веде до блокування K-Ras прениляцм і КRas функції, також як H-Ras прениляцм і функції Активність протешпренілтрансферази ФТази і GGTa3H і залежить від концентрації ізопреноідного субстрату, фарнезилі геранілгеранілпірофосфату, ВІДПОВІДНО Мевалонат - перший зафіксований штермедіат ізопреноідного шляху і його синтез залежить від активності HMG СоА редуктази Такі сполуки, як ловастатин і компактны, які міцно зв'язуються з HMG СоА редуктазою, блокубть утворення мевалонату і таким чином блокують ізопреноідний шлях Вони таким чином інгібують як ФТазу, так і GGTa3y I Терапевтична ефективність сполук двох вищезгаданих класів лікарських засобів (інгібітор ФТази і інгібітор HMG СоА редуктази) є синергічної Представлений винахідник знайшов, що спільне призначення інгібітору ФТази і інгібітору HMG СоА редуктази сприяє зменшенню КІЛЬКОСТІ КОЖНОГО з препаратів, їх комбінація, як і очикувалось є ефектиною у випадках, коли окремо, кожний з агентів, є неефективним Японська патентна публікація JP 7316076A, що була опублікована 5 грудня, 1995, розкриває антипухлинну фармацевтичну композицію, що містить лімонен, який не є інгібітором ФТази і правастатин, що є інгібітором HMG СоА редуктази, і показує зменшення об'єднаних мевалонових кислот-похідних ізопренових сполук в Ras і Ras залежних протеїнах Представлений винахід стосується фармацевтичної композиції для лікування раку або доброякісних проліферативних хвороб у ссавців, що включає інгібітор ФТази, інгібітор HMG СоА редуктази і фармацевтичне прийнятний носій, в якій активні шґредієнти такої композиції (наприклад, інгібітор ФТази і інгібітор HMG СоА редуктази) присутні в кількостях, що робить композицію ефективною при лікуванні раку або доброякісних проліферативних хвороб Цей винахід також стосується способу лікування раку або доброякісних проліферативних хвороб у ссавців, включаючи людину, що полягає у призначенні згаданому ссавцю ефективної антипухлинної або антипроліферативної КІЛЬКОСТІ фармацевтичної композиції, що містить інгібітор ФТази, інгібітор HMG СоА редуктази і фармацевтичне прийнятний носій Цей винахід також стосується способу лікування раку або доброякісних проліферативних хвороб у ссавців, включаючи людину, що полягає у призначенні згаданому ссавцю інгібітору ФТази і інгібітору HMG СоА редуктази у КІЛЬКОСТІ, при якій комбінація цих двох активних агентів ефективна для лікування раку або доброякісних проліферативних хвороб Цей винахід також стосується фармацевтичної композиції для інгібування ненормального росту клітин у ссавців, включаючи людину, що включає інгібітор ФТази, інгібітор HMG СоА редуктази і фармацевтичне прийнятний носій, в якій активні інг 10 редієнти такої композиції (наприклад, інгібітор ФТази і інгібітор HMG СоА редуктази) присутні в кількостях, що робить композицію ефективною для інгібування ненормального росту клітин Цей винахід також стосується способу інгібування ненормального росту клітин у ссавців, включаючи людину, що полягає у призначенні згаданому ссавцю інгібітору ФТази і інгібітору HMG СоА редуктази в КІЛЬКОСТІ, при якій комбінація цих двох активних агентів ефективна для інгібування ненормального росту клітин Під терміном "лікування", що використовується тут, слід розуміти попередження, або уповільнення розвитку, або інгібування прогресуючих захворювань, для яких цей термін використовується Під терміном "ненормальний ріст клітин", що використовується тут, слід розуміти ріст клітин, що не залежить від нормальних регуляторних механізмів (наприклад, втрата механізму контролю) Що розуміють під ненормальним ростом (1) пухлинні клітини експресовані активованим Ras онкогеном, (2) пухлинні клітини, в яких активується Ras протеїн, і як результат онкогенні мутації в інших генах, і (3) доброякісні і ЗЛОЯКІСНІ пухлини інших проліферативних захворювань, в яких зустрічається аберантна Ras активація Прикладами таких доброякісних проліферативних захворювань є псоріаз, доброякісні простатичні гіпертрофії і повторні стенози Пацієнти, що можуть лікуватись інгібітором ФТази в комбінації з інгібітором HMG СоА редуктази, згідно з способами цього винаходу або використовуючи фармацевтичні композиції винаходу включають, наприклад, пацієнтів, яким поставлено діагноз рак легенів, рак кісток, рак підшлункової залози, рак шкіри, рак голови і шиї, шкірні або внутрішньоочні меланоми, ракчеревини, рак яєчників, рак прямої кишки, рак анального області, рак шлунку, рак товстої кишки, рак грудної клітини, гінекологічні пухлини (наприклад, саркоми черевини, карцинома фалопієвих труб, карцинома ендометри, карцинома шийки, карцинома піхви або карцинома вульви), хвороба Ходгкінса, рак стравоходу, рак малої кишки, рак ендокринної системи (наприклад, рак щитовидної залози, паращитовидної залози або надниркових залоз), саркоми м'яких тканин, рак сечовивідних шляхів, рак пенісу, рак простати, хронічна або гостра лейкемія, дитячі тверді пухлини, лімфоцитарні лімфоми, рак крові, рак нирок або сечоводу (наприклад, карцинома клітин нирок, карцинома ниркової лоханки) або неоплазми центральної нервової системи (наприклад, первинна лімфома ЦНС, пухлини спинної ВІСІ, гліоми основи мозку або пітуїтарні аденоми) Як зазначено вище, пацієнти, що можуть лікуватись інгібітором ФТази в комбінації з інгібітором HMG СоА редуктази згідно з способами цього винаходу або з використанням фармацевтичних композицій винаходу, також включають пацієнтів, що страждають від ненормального росту клітин Більш специфічне втілення цього винаходу стосується вищезгаданих фармацевтичних композицій і способів лікування, в яких інгібітор ФТази вибирають з (а) сполуки формули 11 57081 в якій 1 2 R і R незалежно вибирають з групи, що містить -(СН2)р(5-10 членний гетероцикл), -(СЬІ2)р(СбСю арил), аліл, пропарпл і С-і-Сє алкіл, в яких р приймає значення від 0 до 3, згаданий алкіл і алкі1 2 льний замісник згаданих R і R груп, необов'язко9 во, заміщені від 1 до З R замісників, арил і гете1 2 роциклічний замісник згаданих R і R груп, необов'язково, заміщені від 1 до 3 замісників виб9 раних з галогену і R , 3 R є -(СН 2 )т(1- або 2-адамантил), -(СН 2 )т(СзС-іо циклоалкіл), -(СН2) т (Сб-Сю арил), Сі-Сю алкіл, -хк уз Х х* Xі X4—-j або (А) (В) в яких т приймає значення від 0 до 6, і згаданий циклоалкіл і алкіл, необов'язково, містять 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, X 1 , X 2 1 X 3 кожний незалежно С1-С7 алкілен, що необов'язково, містить 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, X 4 є зв'язком або С1-С7 алкіленом, що необов'язково, містить 1 або 2 ПОДВІЙНІ або потрійні зв'язки, і в формулі (В), замісник X 4 приєднаний до X 1 замісника, до будь якого атому вуглецю в X 1 замісника, R4 є Сб-Сю арилом, 5-10 членним гетероциклом або С-і-Сб алкілом, де R4 групи, необов'язково, заміщені від 1 до З R5 замісників, кожний R5 незалежно вибирають з групи, що містить галоген, нітро, ціано, феніл, -C(O)OR 6 , -SO 2 NR 6 R 7 , -NR 6 R 8 , -C(O)R 6 , -OR6, 6 8 6 8 8 8 6 C(O)NR R , -OC(O)NR R , -NR C(O)NR R , -NR 8 C(O)R 6 , -NR 8 CfO)O(Ci-C 4 алкіл), C(NR 8 )NR 8 R , - C ( N C N ) N R V , - C ( N C N ) S ( C r C 4 алкіл), -NR 8 C(NCN)S(C r C 4 алкіл), -NR 8 C(NCN)NR 8 R 6 , - N R 8 S O 2 ( C I - C 4 алкіл), - S ( O ) n ( C r C 4 алкіл), в яких п 8 8 6 приймає значення від 0 до 2, -NR C(O)C(O)NR R , 8 8 -NR C(O)C(O)R , тіазоліл, імідазоліл, оксазоліл, піразоліл, триазоліл, тетразоліл і Сі-С 4 алкіл, необов'язково заміщений від 1 до 3 атомів фтору, кожний R6 і R 7 незалежно водень або Сі-С 4 алкіл, кожний R8 незалежно R 6 a6o -OR 6 , і, кожний R9 незалежно вибирають з ціано, R6, OR 6 , -OC(O)R 6 , -C(O)OR 6 , -C(O)NR 6 R 7 , -NR 6 R 7 , - N R 6 R , -SO 2 N R V і С Г С 4 алкіл заміщений гідрокси, (б) сполуки формули R2 .м m CH2-Hef CH,-Hef або ІІВ 12 в яких 1 R - водень, галоген (наприклад, хлор, фтор, бром або йод), ціано гідрокси, нітро, трифторме5 5 5 5 5 5 тил, -NHR , -NR R , R , -OR або -S(O) m -R , 2 5 R e-(CH2)n-Ya6o-OCOR , 3 R є 4-, 3-, або 2-піридил, піримідиніл, 2-фтор4-піридил або З-фтор-4-піридил, R є 1-адамантил або 2-адамантил, 5 5 Y - водень, гідрокси, зміно, ціано, -NHR , -NR , 5 5 5 -NHCOR , -NHCO 2 R , галоген, OR , 5 5 5 5 5 -S(O) m R , -СО2Н, -CO 2 R , -CONR R , -CONHR , 5 5 5 -CONH2, -COR , -CH=CHC0 2 R , -OCOR , феніл, 5 5 феніл заміщений W, -C=CCO 2 R , -CH=CHR або 5 C=CR , 5 кожний R , незалежно, (Сі-С 4 ) розгалужений або нерозгалужений алкіл, феніл або бензил, в якій згаданий феніл і фенільний фрагмент, згаданого бензилу можуть, необов'язково, бути заміщені галогеном, гідрокси, нітро, ціано, зміно, (Сі-С 4 ) розгалуженим або нерозгалуженим алкілом, ( d С 4 ) розгалуженим або нерозгалуженим алкокси, фенілом, бензилом, (Сі-С 4 )алкіламшо, д и [ ( С г С 4 )алкіл]амшо або -S(O) m -(Ci-C 4 ) розгалуженим або нерозгалуженим алкілом, кожний W , незалежно, галоген, R5, гідрокси, OR , нітро, зміно, -NHR 5 , -NR 5 R 5 , ціано, або -S(O) 2 R5, m дорівнює 0, 1 або 2, п приймає значення від 1 до 7, р дорівнює 0 або 1, Е і Е 2 вибирають, незалежно, з водню, галогену, (Сі-Сз)алкілу, гідрокси, (С-і-Сз)алкокси, нітро, трифторметилу, ціано, аміно, (Сі-Сз)алкіламшо і ди[(Сі-Сз)алкіл]амшо, Het' і Het" вибирають, незалежно, з 6 членного гетероциклічного кільця, що містить від одного до чотирьох атомів азоту в структурі кільця, необов'язково заміщений одним замісником вибраним з (Сі-Сз)алкілу, галогену, гідрокси, (С-і-Сз) алкокси, аміно, (Сі-Сз)алкіламшо і ди[(Сі-Сз)алкіл]амшо, (в) сполуки формули 5 R3 .R* в якій, обидві пунктирні лінії, необов'язково, представляють собою подвійний зв'язок, Z є киснем або сіркою, коли подвійний зв'язок присутній в КІЛЬЦІ А тоді Z є гідрокси групою, ( d Cio)anKin-S-, (Ci-Cio)anKin-SO-, (C-i-C-ioJanKin-SCb-, адамант-2-in-S-, нафтил-S-, бензил-S-, фенілC(=O)CH 2 -S-, (Ci-C 6 )anKT-O-C(=O)-CH 2 -Sабо (H,H) (наприклад, Z представляє два атоми водню, кожний з яких одинарним зв'язком приєднаний до атому вуглецю кільця А), коли Z одинарний зв'язок в КІЛЬЦІ А, і коли згадані нафтильний і фенільний фрагмент згаданого бензилу можуть, необов'язково, бути заміщені від одного до трьох замісників, незалежно вибраних з (Сі-Сє)алкілу, необов'язково, заміщеного від одного до трьох атомів фтору, (С-і-Сб)алкокси, необов'язково, заміщеного від одного до трьох атомів фтору, галогену (наприклад, 57081 14 13 хлор, фтор, бром або йод), амшо, ( d інгібітор ФТази вибирають з сполуки формули і, Сб)алкіламшо, [ди(Сі-Сб)алісг]аміно, ціано, нітро, зазначеної вище, в якій R3 є (Сі-Сб)алкіл-ЗОп-, в якій п дорівнює нулю, одному або двом, -СООН, -СОО(Сі-С6)алкіл і -C(O)NH(C r Сє)алкіл, X3 X* XisNR1 a6oCHR 1 , R1 є воднем, (Сі-Сє)алкілом або ( d V Сб)алкілфенілом, коли кільце А насичене (наприабо клад, коли кільце А не містить подвійних зв'язків) І (В) (А) R1 відсутній, коли кільце А містить подвійний зв'яв якихХ 1 , X2,, X 3 1 Х4 такі, як зазначено вище зок, Інше, більш специфічне втілення цього винаR2 вибирають з нафтилу, фенілу, ( d ходу, стосується будь якої вищезгаданої фармаСє)алкілфенілу, 1-адамантилу, 2-адамантилу, ( d цевтичної композиції і способів лікування, в яких Cs) розгалуженого або не роз гал уже ного алкілу, інгібітор ФТази вибирають з сполуки формули І, (Сз-Сю) циклоалкілу і (Cs-Сзо) біциклічного або зазначеної вище, в якій R4 є фенілом, необов'язкотрициклічного алкілу, в яких згадані (Сз-Сю) цикво, заміщеним від 1 до З R5 замісників лоалкіл і (Cs-Сзо) біциклічний або трициклічний Інше, більш специфічне втілення цього винаалкіл можуть, необов'язково, бути заміщені пдроходу, стосується будь якої вищезгаданої фармаксигрупою, і в якій згадані адамантильні групи моцевтичної композиції І способів лікування, в яких жуть, необов'язково, бути заміщені від одного до інгібітор ФТази вибирають з сполуки вказаної нижтрьох замісників, незалежно вибраних з ( d че Сє)алкілу) галогену або гідрокси, 2-[2-(4-бромфеніл)-2-оксоетиліден]-5,5-бісі R3 і R4, незалежно, вибирають з бензилу, в піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилякому фенільний фрагмент згаданого бензилу мобіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, же, необов'язково, бути заміщений зміно або ніт4-{[5-оксо-4і4-біс-піридин-4-ілметил-1-(2,6,6рогрупою, водень, феніл, (N=C)-( Сі-Сє)алкіл, ( d триметилбіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)Св)алкіл-О-С(=О)-( Сі-Сє)алкіл і Het-CH2, в якому імідазолідин-2-іліден]ацетил}бензонітрил, Het вибирають з 2-[2-(4-хлорфеніл)-2-оксоетиліден]-5,5-біс2-, 3- або 4-піридинілу, фурилу, тетрапдрофупіридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилрилу, піримідинілу, піразинілу, піразолілу, ізоксабіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, золілу, тюфенілу і триазолілу, 2-[2-(3,4-дихлорфеніл)-2-оксоетиліден]-5,5-біспри умові, що (а) не більше ніж одна з двох піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилпунктирних ЛІНІЙ, в будь якій сполуці, може являти біцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, собою подвійний зв'язок, (б) коли Z є (Н, Н), X є 2-[2-(3-нітрофеніл)-2-оксоетиліден]-5,5-бісСН2, (в) коли Z є киснем або (Н, Н) і X є CHR1, R1 піридин-4-ілметил-3-(2,3,6-триметил1 повинен бути воднем, (г) коли Z є сіркою і X є NR , біцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, R1 повинен бути воднем, і (д) один з R3 і R4 пови2-[2-(4-метоксифеніл)-2-оксоетиліден]-5,5-біснен бути Het-CH2, і піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметил(г) сполука біцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, 2-[2-(3-метоксифеніл)-2-оксоетиліден]-5,5-бісо піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилобіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, 2-[2-(2-метоксифеніл)-2-оксоетиліден]-5,5-бісIV піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилбіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, 2-(2-біфеніл-4-іл-2-оксоетиліден]-5,5-біспіридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилно,с біцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, і фармацевтичне прийнятні солі вказаних ви2-(2-нафтален-2-іл-2-оксоетиліден]-5,5-бісще сполук піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилІнше, більш специфічне втілення цього винабіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, ходу, стосується будь якої 2-[2-(4-фторфеніл)-2-оксоетиліден]-5,5вищезгаданої фармацевтичної композиції і біс-піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилспособів лікування, в яких інгібітор ФТази вибирабіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, ють з сполуки формули І, зазначеної вище, в якій 2-[2-(2,4-дифторфеніл)-2-оксоетиліден]-5,5-бісR1 і R2 обидва -(СН2)р(5-10 членний гетероцикл), в піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилякому р дорівнює 1 або 2 біцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, Інше, більш специфічне втілення цього вина4-{[5-оксо-4,4-біс-піридин-4-ілметил-1-(2,6,6ходу, стосується будь якої вищезгаданої фарматриметилбіцикло[3,1 1]гепт-3-ил)-імідазолідин-2цевтичної композиції і способів лікування, в яких іліден]ацетил}бензонітрил інгібітор ФТази вибирають з сполуки формули і, 2-[2-(4-нітрофеніл)-2-оксоетиліден]-5,5зазначеної вище, в якій R3 є -(СН2)т(пшан), в якому біс-піридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилт дорівнює 0,1 або 2, і, більш переважно, коли R3 є біцикло[3 1,1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, пінанметилом 2-[2-оксо-2-фенілетиліден]-5,5-бісІнше, більш специфічне втілення цього винапіридин-4-ілметил-3-(2,6,6-триметилходу, стосується будь якої вищезгаданої фармабіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)імідазолідин-4-он, цевтичної композиції і способів лікування, в яких 57081 16 15 2-{2-оксо-2-[4-(2Н-тетразол-5іліден)ацетил]бензонітрил, іл)феніл]етиліден}-5,5-біс-піридин-4-ілметил-34-[(1-циклогексилметил-5-оксо-4,4-біс-піридин(2,6,6-триметил-біцикло[3 1 13гепт-34-іл метил імідазол ід ин-2илметил)імідазолідин-4-он, іліден)ацетил]бензонітрил, 3-{[5-оксо-4,4-біс-піридин-4-ілметил-1-(2,6,63-гексил-2-(2-оксо-2-фенілетиліден)-5,5-бістриметилбіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)піридин-4-ілметил-імідазолідин-4-он імідазолідин-2-іліден]ацетил}бензонітрил, 3-нафтален-1-іл-2-(2-оксо-2-фенілетиліден)етиловий естер 4-{[5-оксо-4,4-біс-піридин-45,5-біс-піридин-4-ілметилімідазолідин-4-он, ілметил-1-(2,6,6-триметил-біцикло[3 1 1]гепт-33-адамантан-1-іл-2-(2-оксо-2-фенілетиліден)илметил)імідазолідин-2-іліден]ацетил}бензойноі 5,5-біс-піридин-4-ілметилімідазолідин-4-он, кислоти, 3-адамантан-1-іл-2-[2-(4-нітрофеніл)-22-[2-оксо-2-(4оксоетиліден]-5,5-біс-піридин-4-ілметилімідазолідин-4-он, трифторметилфеніл)етиліден]-5,5-біс-піридин-4ілметил-3-(2,6,6-триметилбіцикло[3 1 1]гепт-34-[(1-бензил-5-оксо-4,4-біс-піридин-4илметил)імідазолідин-4-он, іл метил імідазол ід ин-2-іліден)ацетил]-бензонітрил, 2-[2-(4-метансульфонілфеніл)-2-оксоетиліден]4-[(1-аліл-5-оксо-4,4-біс-піридин-45,5-біс-піридин-4-ілметил-3-(2,6,6іл метил імідазол ід ин-2-іліден)ацетил]бензонітрил, триметилбіцикло[3 1 1]гепт-34-[(1-метил-5-оксо-4,4-біс-піридин-4илметил)}мідазолідин-4-он, іл метил імідазол ід ин-2-іліден)ацетил]-бензонітрил, 4-{[1-(6,6-диметилбіцикло[3 1 1]гепт-24{[1-(2,2-діетоксиетил)-5-оксо-4(4-біс-піридинилметил)-5-оксо-4,4-біс-піридин-4-ілметил4-іл метил імідазол ід ин-2імідазолідин-2-іліден]ацетил}бензонітрил, іліден]ацетил}бензонітрил, 4-[(1-біцикло[2 2 2]оІсг-1-илметил-5-оксо4-[(1-адамантан-2-илметил-5-оксо-4,4-біс4,4-біс-піридин-4-ілметилімідазолідин-2піридин-4-іл метил імідазолідин-2іліден)ацетил]бензонітрил, іліден)ацетил]бензонітрил, 4-{[1-(2-етил-6,6-диметилбіцикло[3 1 1]гепт-34-[(1-адамантан-2-ил-5-оксо-4,4-біс-піридинилметил)-5-оксо-4,4-біс-піридин-44іл метил імідазолідин-2-іліден)ацетил]іл метил імідазол ід ин-2-іліден]ацетил}бензонітрил, бензонітрил, 4-{[1-(2-бензил-6,6-диметилбіцикло[3 1 1]гепт4-[(5-оксо-1-феніл-4,4-біс-піридин-43-илметил)-5-оксо-4,4-біс-піридин-4іл метил імідазол ід ин-2-іліден)ацетил]-бензонітрил, іл метил імідазол ід ин-2-іліден]ацетил}бензонітрил, та, 4-{[1 -(2-ізопропеніл-6,64-{[4-третбутилфеніл-5-оксо-4,4-біс-піридин-4іл метил імідазол ід ин-2-іліден)ацетил]-бензонітрил, диметилбіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)-5-оксо-4,4і фармацевтичне прийнятні солі таких сполук біс-піридин-4-ілметилімідазолідин-2іліден]ацетил}бензонітрил, Інше, більш специфічне втілення цього вина4-{[1-(2-ізопропіл-6,6ходу, стосується будь якої вищезгаданої фармацевтичної композиції і способів лікування, в яких диметилбіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)-5-оксо-4,4інгібітор HMG СоА редуктази, що міститься в таких біс-піридин-4-ілметилімідазолідин-2композиціях або використовується в способах виіліден]ацетил}бензонітрил, бирають з групи, що містить аторвастатин, права4-({1-[2-(1-метоксиімшоетил)-6,6статин, ніацин, гемфіброзил, клофібрат, ловастадиметилбіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил]-5-оксо-4,4тин, флувастатин, сімвастатин і компактин, і біс-піридин-4-іл метил імідазолідин-2фармацевтичне прийнятні солі вищезгаданих споіліден}ацетил)бензонітрил, лук 4-{[1-(6,6-диметил-2метиленбіцикло[3 1 1]гепт-3-илметил)-5-оксо-4,4Інше, більш специфічне втілення цього винабіс-піридин-4-ілметилімідазолідин-2ходу, стосується будь якої вищезгаданої фармаіліден]ацетил}бензонітрил, цевтичної композиції і способів лікування, в яких інгібітором HMG СоА редуктази, що міститься в 4-{[1-(2-пдрокси-2-пдроксиметил-6,6таких композиціях або використовується в спосодиметилбіцикло[3,1 1]гепт-3-илметил)-5-оксо-4,4бах є аторвастатин біс-піридин-4-ілметилімідазолідин-2іліден]ацетил}бензонітрил, Інше, більш специфічне втілення цього вина4-{[1-(6,6-диметил-2-оксобіцикло[3 1 1]гепт-3ходу, стосується будь якої вищезгаданої фармаилметил)-5-оксо-4,4-біс-піридин-4цевтичної композиції і способів лікування, в яких іл метил імідазол ід ин-2-іліден]ацетил}бензонітрил, інгібітором HMG СоА редуктази, що міститься в таких композиціях або використовується в спосо3-третбутил-2-(2-оксо-2-фенілетиліден)-5,5бах є ловастатин біс-піридин-4-ілметилімідазолідин-4-он, 4-{[1-(2,2-диметилпропіл)-5-оксо-4,4-бісІнше, більш специфічне втілення цього винапіридин-4-ілметил-імідазолідин-2-іліден]ходу, стосується будь якої вищезгаданої фармацевтичної композиції і способів лікування, в яких ацетил}бензонітрил, інгібітор ФТази, що міститься в таких композиціях 4-[[1 -{2-адамантан-1 -ілетил)-5-оксо-4,4-бісабо використовується в способах вибирають з піридин-4-іл метил імідазолідин-2іліден)ацетил]бензонітрил, (а) сполуки формули НА, як зазначено вище, в яких R3 є 4-піридилом, 4-піримідинілом або 23-циклогексил-2-(2-оксо-2-фенілетиліден)-5,5фтор-4-піриділом, біс-піридин-4-іл метил Імідазолідин-4-он, 4-[(1 -адамант-1 -илметил-5-оксо-4,4-біс(б) сполуки формули НА, як зазначено вище, в піридин-4-іл метил імідазолідин-2яких R2 є -(CH2)nY, 17 (в) сполуки формули ПА, як зазначено вище, в 2 яких R є -(CbbJnY і значення п лежать в інтервалі від 1 до 5, (г) сполуки формули НА або ІІВ, як зазначено 1 1 2 4 вище, в яких кожний R , Е , Е і R , якщо вони присутні, є атомами водню, і (д) сполуки формули НА, як зазначено вище, в 2 1 яких R є -(CH2)n-Y, R 4-піридилом, 45 піримідинілом або 2-фтор-4-піриділом, R є (С1-С2) 5 4 алкілом і Y є -CO 2 R , ціано, -CONHR , 5 5 CH=CHCO 2 R або -OCOR , Інше, більш специфічне втілення цього винаходу, стосується будь якої вищезгаданої фармацевтичної композиції і способів лікування, в яких інгібітором ФТази, що міститься в таких композиціях або використовується в способах не є лімонен або d-лімонен Під терміном "алкіл", що використовується тут, якщо не вказано інше, розуміють насичений моновалентний вуглеводневий радикал, що має розгалужену, нерозгалужену або циклічну будову або їх комбінацію Під терміном "галоген", що використовується тут, розуміють хлор, фтор, бром або йод Вищезгадані сполуки формул І, ПА, ІІВ, III та IV можуть містити один або більшу КІЛЬКІСТЬ хіральних центрів і таким чином можуть існувати в 2 або більшій КІЛЬКОСТІ енантюмерних і діастерюмерних форм Під вищевказаним визначенням слід розуміти, що в сполуки формули І, ІА, ІІВ, III та IV включені всі енантюмери, діастерюмери і ІНШІ стереоізомери цих сполук, і що очевидно всі їх суміші В наступних цитуємих документах згадуються сполуки, що проявляють активність інгібіторів ФТази і які можуть бути використані в комбінації з інгібітором HMG СоА редуктази в фармацевтичних композиціях і способах цього винаходу, а також описуються способи одержання деяких з них Міжнародна патентна заявка PCT/US92/11292, що була подана в US і опублікована 22 липня 1993, під номером W O 93/14085, Патент US 4,876,259, виданий 24 жовтня1989, Патент US H1345 виданий 2 серпня 1994, Патент US 5,260,332, виданий 9 листопада 1993, Патент US 5,262,435, виданий 16 листопада 1993, Патент US 5,369,125, виданий 29 листопада 1994, Міжнародна патентна публікація W O 93/24633, опублікована 9 грудня 1993, Міжнародна патентна публікація W O 94/03597, опублікована 17 лютого 1994, Міжнародна патентна публікація W O 94/16069, опублікована 21 червня1994, G L Button, et al , 209 Національні збори американського ХІМІЧНОГО товариства, Анахайм, Каліфорнія, 2 - 6 квітня, 1995, розділ медична ХІМІЯ Med Chem , Abs No 032, Міжнародна патентна публікація W O 95/00497, опублікована 5 січня 1995, Патент US 5,260,479, опублікований 9 листопада 1993, Міжнародна патентна публікація W O 95/10514, Міжнародна патентна публікація W O 95/10515, Міжнародна патентна публікація W O 95/10516, Міжнародна патентна публікація W O 95/12572, опублікована 11 травня 1995, Міжнародна патентна публікація, W O 95/11917, опублікована 4 травня 1995, Міжнародна патентна публікація W O 94/26723, опублікована 24 листопада 1994, Міжнародна патентна публікація W O 95/25086, опублікована 21 вересня 1995, Kanda et ai , 57081 18 AFMC, Міжнародний медично-хімічний симпозіум AIMECS 95, Токіо, ЯПОНІЯ, Постер, Р7М153, 4 вересня 1995, Міжнародна патентна публікація W O 96/10037, опублікована 4 квітня 1996, Міжнародна патентна публікація 96/10035, опублікована 4 квітня 1996, Міжнародна патентна публікація W O 96/10034, опублікована 4 квітня 1996, Міжнародна патентна публікація W O 96/10011, опублікована 6 квітня 1996, Міжнародна патентна публікація W O 96/10011, опублікована 6 квітня 1996, Міжнародна патентна публікація W O 96/09821, опублікована 4 квітня 1996, Міжнародна патентна публікація W O 96/09820, опублікована 4 квітня 1996, Qum et ai , 211 Національні збори американського ХІМІЧНОГО товариства, Новий Орлеан, Луїзіана, 24 - 28 березня 1996, Лекції, СОМР 012, 24 березня 1996, Міжнародні патентні публікації W O 96/06609 та W O 96/06604, обидві опубліковані 7 березня 1996, Європейська патентна заявка ЕР 696,593, опублікована 14 лютого 1996, Hartman, G D , 14 Міжнародний симпозіум медичної хімії, Маастріхт, Нідерланди, 8 - 1 2 вересня 1996, Лекція, SL-08 З, 10 вересня 1996, Міжнародна патентна публікація W O 96/30363, опублікована 3 жовтня 1996, Міжнародна патентна публікація W O 96/30343, опублікована 3 жовтня 1996, Міжнародна патентна публікація WO 97/03050, Міжнародна патентна публікація W O 94/26723, опублікована 24 жовтня 1994, Міжнародна патентна заявка РСТ/ІВ95/00189, що була подана в US 20 березня, Патентна публікація US 08/236,743, з датою подачі 29 березня 1994, попередня американська публікація, що мала назву "Адамантил заміщені оксіндоли в якості фармацевтичних агентів", подана 28 травня 1996, винахідниками R,A, Volkmann та J Р, Lyssikatos, Патент US 5,350,867, виданий 27 вересня 1994, Патент US 5,352,705, виданий 4 жовтня 1994, Патент US 5,565,489, виданий 15 жовтня 1996, Європейська патентна заявка ЕР 750,609, опублікована 2 січня 1997, Європейська патентна заявка 461,869, опублікована 18 грудня 1991, та Міжнародна патентна публікація 96/21456, опублікована 18 липня 1996 В наступних цитуємих документах згадуються сполуки, що проявляють активність інгібіторів HMG СоА редуктази і які можуть бути використані в комбінації з інгібіторами ФТази в фармацевтичних композиціях і способах цього винаходу, а також описуються способи одержання деяких з них Патент US 4,681,893, виданий 21 липня 1987, Патент US 5,273,995, виданий 28 грудня 1993, Патент US 5,385,929, виданий 31 січня 1995, Патент US 4,957,971, виданий 18 вересня 1990, Патент US 5,102,893, виданий 7 квітня 1992, Патент US 4,957,940, виданий 18 вересня 1990, Патент US 4,950,675, виданий 21 серпня 1990, Патент US 4,929,620, виданий 29 травня 1990, Патент US 4,923,861, виданий 8 травня 1990, Патент US 4,906,657, виданий 6 березня 1990, Патент US 4,868,185, виданий 19 вересня 1989, Патент US 5,124,482, виданий 23 червень 1992, Патент US 5,003,080, виданий 26 березня 1991, Патент US 5,097,045, виданий 17 березня 1992, Патент US 5,149,837, виданий 22 вересня 1992, Патент US 4,906,624, виданий 6 березня 1990, Патент US 4,761,419, виданий 2 серпня 1988, Патент US 19 4,735,950, виданий 5 квітня 1988, Патент US 4,808,621, виданий 28 лютого 1989, Патент US 4,647,576, виданий 3 березня 1987, Патент US 5,118,882, виданий 2 червня 1992, Патент US 5,214,197, виданий 25 травня 1993, Патент US 5,321,046, виданий 14 червня 1994, Патент US 5,260,440, виданий 9 листопада 1993, та Патент US 5,208,258, виданий 4 травня 1993, Патент US 5,369,125, виданий 29 листопада 1994, Патент US Н1345, виданий 2 серпня 1994, Патент US 5,262,435, виданий 16 листопада 1993, та Патент US 5,260,332, виданий 9 листопада 1993, Британська патентна публікація GB 2,055,100, опублікована 25 лютого 1981, Патент US 4,499,289, виданий 12 лютого 1983, Патент US 4,645,854, виданий 24 лютого 1987, Патент US 4,613,610, виданий 23 вересня 1986, Патент US 4,668,699, виданий 6 травня 1987, Патент US 4,851,436, виданий 25 липня 1989, Патент US 4,678,806, виданий 7 липня 1987, Патент US 4,772,626, виданий 20 вересня 1988, Патент US 4,855,321, виданий 8 серпня 1989, Європейська патентна заявка ЕР 244364, опублікована 4 листопада 1987, Патент US 4,766,145, виданий 23 серпня 1988, Патент US 4,876,279, виданий 24 жовтня 1989, Патент US 4,847,306, виданий 11 липня 1989, Патент US 5,049,696, виданий 17 вересня 1991, Європейська патентна заявка ЕР 245,990, опублікована 19 листопада 1987, Європейська патентна заявка ЕР 251,625, опублікована 7 січня 1988, Патент US 4,719,229, опублікована 12 січня 1988, Японська патентна публікація 63014722, опублікована 21 лютого 1988, Патент US 4,736,064, виданий 5 квітень 1988, Патент US, 4,738,982, виданий 19 квітня 1988, Патент US 4,845,237, виданий 4 липня 1989, Європейський патент ЕР 306,263, виданий 18 березня 1992, Патент US 5,026,708, виданий 25 червня 1991, Патент US 4,863, 957, виданий 5 вересня 1989, Патент US 4,946,841, виданий 7 серпня 1990, Європейський патент 339358, виданий 13 липня 1994, Патент US 4,937,264, виданий 26 червня 1998, Патент US 4,876,366, виданий 24 жовтня 1989, Патент US 4,921,974, виданий 1 травня 1990, Патент US 4,963,538, виданий 16 жовтня 1990, Патент US 5,130,306, виданий 14 липня 1992, Патент US 4,900,754, виданий 13 лютого, 1990, Патент US 5,026,698, виданий 25 червня 1991, Патент US 4,977,161, виданий 11 грудня 1990, Патент US 4,927,851, виданий 22 травня 1990, Європейська патентна заявка ЕР 373,507, опублікована 20 червня 1990, Патент US 4,939,143, виданий 3 червня 1990, Патент US 4,939,159, виданий 3 липня 1990, Патент US 4,940,727, виданий 10 липня 1990, Патент US 5,116,870, виданий 26 травня 1992, Австралійський патент AU 635,545, виданий 25 березня 1993, Патент US 5,098,391, виданий 24 березня 1992, Патент US 5,294,724, виданий 15 березня 1994, Патент US 5,001,255, виданий 19 березня 1991, Патент US 5,149,834, виданий 22 вересня 1992, Патент US 5,089,523, виданий 18 лютого 1992, Європейська патентна заявка ЕР 465,265 опублікована 8 січня 1992, Патент US 5,476,846, виданий 19 грудня 1995, Патент US 5,321,046, виданий 14 червня 1994, Патент US 5,106,992, виданий 21 квітня 1992, Патент US 5,347,039, виданий 13 ве 57081 20 ресня 1994, Японська патентна публікація 4193836, опублікована 13 липня 1992, Британська патентна публікація 2253787, опублікована 23 вересня 1992, Патент US 5,411,969, виданий 2 травня 1995, Японська патентна публікація 4,356,435, опублікована 10 грудня 1992, Патент US 5,266,707, виданий ЗО листопада 1993, Патент US 5,455,247, виданий 3 жовтня 1995, Патент US 5,475,029, виданий 12 грудня 1995, Патент US 5,591,772, виданий 7 січня 1997, Патент US 5,286,746, виданий 15 лютого 1994, Японська патентна публікація JP 7089898, опублікована 4 квітня 1995, Європейська патентна заявка ЕР 677,039, опублікована 18 жовтня 1995 та Міжнародна патентна публікація 96/08248, опублікована 21 березня 1996 Цей винахід стосується обох способів лікування раку, в яких Інгібітор ФТази і інгібітор HMG СоА редуктази призначаються разом, і як частина цього винаходу у вигляді фармацевтичних композицій, а також способів, в яких обидва активні агенти призначаються окремо, і як частина цього винаходу, у вигляді схеми дозування, призначеного для одержання позитивного результату від комбінованої терапії Підходяща схема дозування - це КІЛЬКІСТЬ призначеної кожної дози і специфічний інтервал між прийняттям доз кожного активного агенту, що залежить від суб'єкту, якому призначено лікування, типу раку або ненормального росту клітин і жорсткості умов У виконанні представленого винаходу, інгібітор ФТази призначається в кількостях, що зазначені в літературі, або іншими словами, що вважаються ефективними, для призначення такої сполуки, в якості одиничного активного агенту для лікування раку або інгібування ненормального росту клітин, і інгібітор HMG СоА редуктизи призначався в КІЛЬКОСТІ ВІД приблизно однієї четвертої до однієї другої КІЛЬКОСТІ описаної в літературі, або іншими словами, вважається ефективною для призначення такої сполуки, в якості одиничного активного агенту для лікування пперхолестеролемм Наприклад, у виконанні представлених винаходів, інгібітори ФТази формули і, ІІА, ІІВ and III зазвичай призначаються з розрахунку на дорослу людину з вагою 70кг в КІЛЬКОСТІ, ЩО лежить в інтервалі від приблизно 0,005 до приблизно 0,6мг на кг ваги тіла в день суб'єкта, що піддається лікуванню, у вигляді одиничних або розділених доз, і інгібітор HMG СоА редуктази аторваститин зазвичай призначається в КІЛЬКОСТІ, що лежить в інтервалі від приблизно 0,07 до приблизно 3,6 мг на кг ваги тіла в день, в одиничній або розділений дозі Але можуть мати місце варіації в залежності від виду тварини, до якої застосовується лікування, її індивідуальної ВІДПОВІДІ на згаданий медикамент, також як і від виду вибраної фармацевтичної рецептури, часу та інтервалу в якому відбувається таке призначення В деяких випадках рівні доз нижче нижчої межі згаданого вище інтервалу, можуть бути більше ніж адекватні, в інших випадках можуть бути використані, без будь яких негативних сторонніх ефектів, рівні доз вищі добової межі, при умові, що такі більші дози призначаються декількома меншими дозами, що приймаються протягом дня Для інгібіторів ФТази і інгібіторів HMG СоА ре 57081 22 21 дуктази, що використовуються в фармацевтичних чинник спочатку робиться ІЗОТОНІЧНИМ Такі водні композиціях і способах цього винаходу в подальрозчини придатні для призначення у вигляді внутшому буде використовуватись термін "терапевтирішньовенних ІН'ЄКЦІЙ Масляні розчини придатні чні агенти" Терапевтичні агенти можуть призначадля призначення у вигляді внутрішньосуглобових, тись оральним або перентеральним шляхом внутрішньом'язових та підшкірних ІН'ЄКЦІЙ ОдерКомпозиції, що містять інгібітор ФТази і інгібітор жання всіх цих розчинів в стерильних умовах виHMG СоА редуктази в основному призначаються конується за стандартними фармацевтичними протягом дня орально або перентерально, у виметодиками, добре відомими фахівцю в даній гагляді одиничних або розділених доз, таким чином, лузі що загальна КІЛЬКІСТЬ призначеного активного агеАктивність терапевтичних сполук в якості інгінту співпадає з вищезгаданими принципами біторів ФТази визначали по їх здатності, порівняно з контрольними, інгібувати ФТазу in vitro Ця метоТерапевтичні агенти можуть бути призначені дика описується нижче самостійно або в комбінації з фармацевтичне прийнятними носіями або розчинниками будь-яким з Одержану неочищену ФТазу, що містилась в попередньо вказаних шляхів, і такі призначення цитозольній фракції гомогенезованих мозкових можуть бути проведені в одноразовій або багатотканин використовували для скрінінгу сполук в 96разовій дозах Більш конкретно, нові терапевтичні шарунковому форматі дослідження Цитозольна агенти даного винаходу можуть бути призначені у фракція одержується гомогенізацією приблизно великій КІЛЬКОСТІ різних дозованих форм, тобто, 40г свіжих тканин в ЮОмл суміші буферу сахаровони можуть бути скомбіновані з різними фармаза/МдСЬ/ЕОТА (використовуючи гомогенезатор цевтично прийнятними носіями у формі таблеток, Dounce, 10-15 струшувань), центрифугували 1000 капсул, пігулок, твердих льодяників, порошків, грам гомогенату протягом 10 хвилин при 4G, спреїв, кремів, бальзамів, супозиторіїв, желе, ге17000 грам надосадкової рідини повторно лів, паст, лосьйонів, мазей, водних суспензій, розцентрифугували протягом 15 хвилин при 4G і одечинів для ІН'ЄКЦІЙ, еліксирів, сиропів і їм подібні ржану надосадкову рідину збирали Цю надосадТакі носи включають тверді розбавники або наповкову рідину розводили одержуючи кінцеву конценнювачі, стерильне водне середовище та різні нетрацію 50мМ Трис НСІ (рН 7,5), 5MN DTT, 0,2 М токсичні органічні розчинники і т д Більш того, КСІ, 20мМ ZnCI2, 1мМ PMSF і 178000 грам оральні фармацевтичні композиції можуть бути центрифугували протягом 90 хвилин при 4G Суприйнятне підсолоджені і/або ароматизовані Запернатант, зазначений як "неочищена ФТаза" вигалом, терапевтично ефективні сполуки даного користовували для визначення концентрації провинаходу присутні в таких дозованих формах з теїну, аліквоти і зберігали при -70°С рівнями концентрації, що лежать в межах від приДослідження проводили вимірюючи in vitro інблизно 5,0ваг % до 70ваг % гібування людської ФТази використовуючи модифікований метод описаний в Amersham Для орального призначення таблетки, що місLifeScience використовуючи спорядження Farnesyl тять різноманітні екціпієнти, такі як мікрокристалічtransferase (ЗН) Scmtilation Proximity Assay (SPA) на целюлоза, цитрат натрію, карбонат кальцію, (TRKQ 7010) Активність ензиму ФТази визначали пдрофосфат кальцію та гліцин можуть бути виков об'ємі 100мл, що містить 50мМ N-(2ристані разом різноманітними дезштегрантами, пдроксиетил) піперазин-І\І-(2-етансульфоновоі такими як крохмаль (переважно кукурудзяний, каркислоти) (HEPES), рН 7,5, ЗОмМ МдСІ2, 20мМ КСІ, топляний або тапюковий крохмаль), алпнінова 5мМ Na2HPO4, 5мМ дітютреїтолу (DTT), 0,01% кислота та певні комплексні силікати, разом зі зв'яТритон Х-100, 5% диметилсульфоксид (ДМСО), зуючими гранулювання, такими як полівшілпіролі20мг неочищеної ФТази, 0,12мМ [ЗН]дон, цукроза, желатин та акація Додатково змафарнезилфосфату ([3H]-FPP ЗбОООдпм/пмоль щуючі агенти, такі як стеарат магнію, Amersham LifeScience), і 0,2мМ бютинильованого лаурилсульфат натрію та тальк, є часто дуже коRas пептиду KTKCVIS (Bt-KTKCVIS), в якому Nрисними для цілей таблетування Тверді композифункція бютинильована в альфа аміногрупі і який ції подібного типу можуть також бути застосовані синтезований і очищений ВЕРХ на МІСЦІ Реакцію як наповнювач в желатинових капсулах, переважні розпочинали додаванням ферменту і завершували матеріали, у цьому зв'язку, також включають лакдодаванням EDTA (додається у вигляді STOP реатозу або молочний цукор, а також поліетиленглігенту на приладі TRKQ 7010) через 45 хвилин інколі з великою молекулярною вагою Коли для кубації при 37°С Пренильований і непренильоваорального призначення бажані водні суспензії ний Bt-KTKCVIS одержували додаванням Юмл і/або еліксири, активний інгредієнт може бути скостептавідин-покритих SPA намистинок (TRKQ мбінований з різноманітними підсоложуючими або 7010) на комірку і витримуванням реакційної суміароматизуючими агентами, забарвлюючими речоші протягом ЗО хвилин при кімнатній температурі винами або барвниками і, якщо це бажано, емульКІЛЬКІСТЬ радіоактивних зв'язаних з SPA намистисифікуючими і/або суспендуючими агентами, а нок визначали використовуючи MicroBeta 1450 також з разом з такими розчинниками, як вода, платівковий лічильник При цих умовах дослідженетанол, пропіленгліколь, гліцерин та різні подібні їх ня, активність ферменту є лінійної функцією віднокомбінації сно до концентрації акцептору пренільною групи, Для парентерального призначення можуть буBt-KTKCVIS, і неочищеної ФТази, але насичений ти застосовані розчини терапевтичного агенту в ВІДПОВІДНИМ донором пренілу, FPP, Час досліджукунжутному чи арахісовому маслі, або у водному ємої реакції також є лінійної залежністю пропіленгліколі Водні розчини повинні бути придатне забуферені, якщо це необхідно, і рідкий розТестуємі сполуки, як прийнято розчиняли в 23 57081 100% ДМСО Інгібування аісгивності фарнезилтрансферази визначали розрахунком відсотку загальною КІЛЬКОСТІ обробленого фарнезилу в присутності тестуємої сполуки відносно її загальної КІЛЬКОСТІ в контрольних комірках (в яких відсутній інгібітор) Значення ІС50 - це концентрація необхідна для одержання половинної фарнезиляції BtKTKCVIS, і визначається виходячи з дозиВІДПОВІДІ Флуоресцентні дослідження активності ФТази можуть бути проведені використовуючи скрінінг інгібіторів ФТази, як описано в Британській патентній публікації GB 2,267,966, опублікованій 22 грудня 1993 Активність деяких терапевтичних агентів в якості інгібіторів HMG СоА редуктази може бути визначена за методикою описаною Dugan et Al , Achiv Biochem Biophys , (1972), 152, 21-27 В цьому методі рівень активності HMG-CoA ферменту на стандартних лабораторних щурах підвищується при призначенні щурам харчів, що містили 5% холестирамшу протягом чотирьох днів, після якої щурів умертвляли Печінки щурів гомогенізували і визначали загальну КІЛЬКІСТЬ ХОЛ есте рол-14Сацетату в неомилених жирах гомогенізованої печінки щурів Визначали мікромолярну концентрацію сполуки, що потрібна для 50% інгібування стеролсинтази за одну годину, і виражали за допомогою значення ІС50 24 тин, алкілуючих агентів, наприклад, циспластин, карбоплитин і циклофосфамід, антиметаболітів, наприклад, 5-фторуразил, цистозин арабшозид і пдроксисечовини, або, наприклад, один з переважних антиметаболітів описаний в Європейській патентній заявці № 239362, такий як N-{5-[N-(3,4дипдро-2-метил-4-оксохшазолін-6-ілметил)-г\Іметиламіно]-2-теноіл}-І_-тутамшова кислота, інтеркаляційний антибіотик, наприклад, адриаміцин і блеоміцин, ферменти, наприклад, аспарпназа, інгібітори топоізомерази, наприклад, етопозид, модифікатори біологічної ВІДПОВІДІ, наприклад, інтерферон, і антигормони, наприклад, антиестрогени такі, як 'NOLVADEX' (тамоксифен) або антиандрогени такі, як 'CASODEX' (4'-ціано-3-(4фторфенілсульфоніл)-2-пдрокси-2-метил-3'(трифторметил)пропюнанілід Така терапія може бути здійснена шляхом стимуляції, послідовними або розділеними дозами індивідуальних терапевтичних компонентів Згідно З ЦИМ аспектом винаходу, це передбачає фармацевтичний продукт, що містить фармацевтичне прийнятний носій, як описано вище, і крім того антипухлинний агент, як описано вище, один або обидва інгібітор HMG СоА редуктази і інгібітор ФТази Як вказано в Таблиці нижче, представлений винахідник показав, що ефективність сполуки 1, що маю структуру Другий метод (що має назву COR) описаний Т Kita, et al , J Clm Invest, (1980) 66 1094-1100 В 14 цьому методі, вимірювали КІЛЬКІСТЬ C-HMG-COA перетвореної в С мевалонат в присутності одержаного очищеного ферменту HMG-CoA редуктази Визначали мікромолярну концентрацію сполуки, що потрібна для 50% інгібування холестеролсинтази, і виражали за допомогою значення ICso Різноманітні способи цього винаходу можуть бути здійснені в частині, що стосується терапії і що включає призначення одного або більшої КІЛЬКОСТІ антипухлинної речовини, наприклад, яку вибирають з мімотичних інгібіторів, наприклад, вінблас може бути підвищена мінімальної ефективною дозою ловастатину 25 57081 26 Таблиця Синергічні ефекти ловастатину і сполуки 1 при обробці пренильованого K-ras 4B в непошкоджених клітинах Сполука 1 [мкм] 0 0,1 1,0 10 % Інгібування пренильованого OF K-Ras 4B* КОНТРОЛЬ + 5мкМ ловастатину 0 23 0 56 0 83 0 96 * Напівзлиті моношари NIH-3T3 трансфектантного перетриманого мутанту K-Ras 4B обробляли протягом 18 годин при температурі 37°С підвищуючи концентрацію СР-390,392 в присутності і у відсутності 5мкМ пдролізованого ловастатину Клітини піддавали лізуванню в лізизному буфері RIPA (50мМ трис[пдроксиметил]амшометан, 0,15 М хлорид натрію, 1% диеоксихолат натрію, 1% Тритон Х-100, 0,1% SDS, 0,25 азид натрію, рН 8,5), що містить ІмМ DTT (дитютреїтол, Boehnnger Mannheim, Indianapolis, IN) і інгібітори протеази (апротинш, леупептин, анітрапаш, пефаблок з кінцевою концентрацією 10мкг/мл, 2мкг/мл, 2мкг/мл і 50мкМ, ВІДПОВІДНО, Boehnnger Mannheim, Indianapolis, IN) і кип'ятили протягом 3 хвилин Еквівалентну КІЛЬКІСТЬ протеїну (ЮОмкг/лунку) розчиняли в 12,5% гелі SDS-PAGE і пропускали крізь мембрани імобілон-Р (Integrated Separation Systems, Natick, MA) Мембрани імуномітили розчином 5мкг/мл моноклонального антитіла анти-Pan-ras (Ab-3) (Calbiochem, La Jolla, СА) Мітки шкубували кон'югатом пероксидази вторинного антитіла і імуномічені Ras протеїни визначали удосконаленим хемілюмінесцентним методом (Amersham Life Products, Arlington Heights, IL) Денсинометричним скануванням визначали відсоток пренильованого Ras, використовуючи MasterScan 3 0 (Scanalytics, Billenca, Massachusettes) Комп'ютерна верстка Т Чепелєва Підписано до друку 05 07 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна