Спосіб морфологічної діагностики атеросклерозу міокарда

Винахід відноситься до галузі медицини, а саме, до судово-медичної експертизи і може використовува тися для посмертної діагностики атеросклерозу міокарда. Відомий спосіб діагностики атеросклерозу шляхом ультраструктурного дослідження атеросклеротичних бляшок коронарних артерій серця і виявлення в них кристалів холестерину (Guyton J.R., Klemp К. The Mpid-rich core region of human atherosclerotic fibrous plaques Am J. Pathology 1989, 134 : 705 - 717). Недоліком відомого способу є те, що діагностика атеросклерозу проводиться в атеросклеротичних бляшках крупних артерій на пізніх стадіях захворювання. Він не дає можливості діагностувати більш ранні стадії атеросклерозу, коли кристали холестерину ще тільки зароджуються і знаходяться внутрішньоклітинне, а не поза клітинами. В основу винаходу поставлено завдання удосконалити спосіб морфологічної діагностики атеросклерозу міокарда, в якому досліджується зона, де знаходиться мікроциркуляторне русло серця, чим забезпечується виявлення кристалів холестерину всередині вторинних лізосом гладком'язових клітин і за рахунок цього досягається можливість діагностувати атеросклероз на більш ранніх стадіях. Поставлене завдання вирішується тим, що в способі морфологічної діагностики атеросклерозу, що включає ультраструктурне дослідження серця згідно винаходу, беруть некропсійний матеріал міокарда в зоні мікроциркуляторного русла і визначають кристали холестерину всередині вторинних лізосом гладком'язових клітин та при їх наявності діагностують атеросклероз міокарда. Винахідницький рівень забезпечується неочевидністю визначення кристалів холестерину в клітинах мікроциркуляторного русла міокарда. Спосіб здійснюється наступним чином. Беруть некропсію міокарда лівого шлуночка в раптово померлих, Кусочки тканини розміром 2 ´ 3мм і довжиною в 3 - 4мм поміщають в холодний розчин 1% осмієвої кислоти (OsO4) на 0,1М какодилатнім буфері (pH 7,3) на дві години. Після фіксації кусочки міокарда промивають в буфері і обезводнюють в спирті наростаючої концентрації і в ацетоні по методиці, описаній Б. Уіклі (Weakiey B.S. A beginner's handbook in biological electron microscopy. Edinburg and London, 1972, 324p.). Зафіксовані і обезводнені кусочки міокарда поміщають в крохмальні капсули і заливають їх сумішшю епону і аралдіту, з наступним поміщенням їх в термостат для полімеризації при температурі 60°C, 3 отриманих блоків роблять зрізи міокарда товщиною в 200 - 400Å з допомогою скляних ножів на ультрамікротомі ЛК6 (виробництво Швеції). Зрізи міокарда виловлюють із ванночок, наповнених водою, на спеціальні сітки, які вводять в електронний мікроскоп УЭМВЮО-Л для дослідження. Тканину міокарда вивчають і фотографують в мікроскопі при збільшенні від 8000 до 10000 разів. Це дає можливість виявити кристали холестерину всередині вторинних лізосом, які знаходились в гладком'язевих клітинах мікроциркуляторного русла серця. Приклад. В судово-медичний морг доставлений труп раптово померлого мужчини Н., 40 років, для встановлення діагнозу І причини смерті. Додатково беруть некропсію міокарда лівого шлуночка і проводять його дослідження по вищевказаній методиці. Знаходять кристали холестерину всередині вторинних лізосом в гладком'язевих клітинах мікроциркуляторного русла серця. Дають додаткове заключения про наявність морфологічних ознак атеросклерозу в раптово померлого мужчини (фото 1 і 2). Запропонований спосіб дає можливість морфологічної діагностики відносно ранніх стадій атеросклерозу і коронаросклерозу не тільки на посмертному (уа утопсійному) матеріалі, але і при дослідженні біопсій серця та крупних судин. Таким чином, виявлення кристалів холестерину всередині гладком'язових клітин мікроциркуляторного русла міокарда, чи в магістральних судинах людського організму є доказом атеросклерозу, що може мати велике значення для диференціальної діагностики його з міокардитами, кардіоміопатіями, а також васкулітами різної етіології.