Спосіб моделювання некрозу міокарда

Изобретение относится к области экспериментальной физиологии и терапии, и может найти применение при изучении структурных и метаболических закономерностей развития ишємичєскихіі некротических процессов в сердце, а также при скрининге новых сердечно-сосудистых лекарственных средств, природных и преформированных физических факторов. Наиболее близким к заявляемому способу моделирования, принятым за прототип, является способ моделирования инфаркто-подобного некроза миокарда, заключающийся в подкожном введении животному изадрина в дозе 30 мг/кг, двукратно через день[1]. Недостатком способа-прототипа является то, что не воспроизводятся в полном объеме специфические патоморфологические, биохимические и иммунологические изменения, свойственные глубокому некротическому поражению сердца (миолиз, волнистая контрактура, гнезда грануляционной ткани, стойкий энергодефицит, повышенный уровень кардиальных антител и др.) νφ как следствие этого - ведущий патологический процесс постнекротического периода -диффузный кардиосклероз - не развивается. Важно отметить, что при воспроизведении данной модели по указанной схеме некротизированные мышечные клетки исчезают уже на 3-5-ый дни, в ряде случаев не удается выявить антитела к сердечной мышце, что объясняется малой величиной некротической области и сохранностью интерстициальных соединительнотканных клеток. Кроме того, данная модель далеко не полностью соответствует реальным условиям возникновения некрозов, включая инфаркт миокарда у человека, т.к. они чаще происходят на фоне постепенного повреждения структуры и функции сердца, связанного с развитием ишемической болезни или с кардиотоксическим действием различных веществ, что в итоге приводит к снижению компенсаторных, адаптационных и регенераторных возможностей сердца. Воспроизведение же некроза миокарда в условиях эксперимента проводится на здоровых животных с высокими компенсаторно адаптационными возможностями сердца и организма в целом. Этим и объясняется отсутствие ряда признаков глубокого некротического поражения миокарда или их слабая выраженность при моделировании патологии по способу прототипа. В основу изобретения поставлена задача создания способа моделирования некроза миокарда, в котором за счет воспроизведения в полном объеме специфических патоморфологических, биохимических и иммунологических изменений, свойственных глубокому некротическому поражению сердца обеспечивается приближение модели патологии к клиническому течению и за счет этого открывается возможность более глубокого изучения структурных и метаболических закономерностей развития ишемических и некротических процессов в сердце. Кроме этого модель может быть использована при скриннинге новых сердечнососудистых лекарственных средств, природных и лреформированных физических факторов. Поставленная задача решается тем, что в способе моделирования некроза миокарда путем подкожного введения экспериментальным животным изадрина, согласно изобретению вначале вводят витамин Д3 в дозе 800 тыс МЕ/кг массы внутримышечно в течение пяти дней, а через 24,30 и 48 часов после этого вводят изадрин в дозе 30 мг/кг массы. Доказательством причинно-следственной связи между совокупностью Существенных признаков заявляемого изобретения и достигаемым техническим результатом служит следующее: - Введение витамина Дз в дозе 800 тыс мЕ/кгмассы внутримышечноприводитк поражению эндотелия сосудов сердца и обеспечивает точечные поражения паренхимы миокарда: - Введение витамина Дз в течение 5-ти дней приводит к более глубокому и стойкому поражению сосудов и паренхимы, что доказано нами экспериментально; - Введение изадрина в дозе 30 мг/кг массы через 24,30 и 48 часов после витамина Д3 обуславливает увеличение и расширение площади некроза, без развития эффекта привыкания к яду (изадрину); Предложенная совокупность признаков способа и последовательность их выполнения обеспечивает развитие специфических морфологических, биохимических и иммунологических изменений свойственных клиническому течению некротического процесса. Пример конкретного выполнения способа моделирования. Крысам линии Вистар (16 штук) массой 180-200 г в течение пяти дней внутримышечно вводили витамин Д3 в дозе 800 тыс. МЕ/кг массы животного, а затем после инъекции витамина Д3 через 24, 30, 48 часов вводили подкожно изадрин в дозе 30 мг/кг массы. По внешним признакам не отмечено особых изменений: крысы чистые, относительно бодрые, несколько снижен аппетит. На второй день моделирования у животных обнаружены сливные обширные некрозы, расположенные в субэндокардиальной и интрамуральной области желудочков, перегородке и верхушке сердца. По периферии зон поражения - некроз с полосами пересокращения, переходящий вмиолиз. Стенки мелких артерий некробиотически изменены. На четвертые сутки в зонах поражения преобладали процессы резорбции некротических масс, множественные очаги пролиферации соединительнотканных элементов. На шестой день обнаружены выраженные гранулемы. Формирование рубчиков завершилось к 30-му дню. В прилегающей к рубчикам ткани миокарда - мелкоочаговый диффузный кардиосклероз. Морфологический, биохимический и иммуналогический анализы подтверждают наличие ярко выраженных некрозов с исходом в кардиосклероз, приближающихся к клиническому течению (см.табл.1). Таким образом, из приведенных экспериментальных исследований следует, что применение витамина Дз повышает чувствительность миокарда к кардионекротическо-му действию изадрина, что в итоге приводит к образованию обширных и глубоких некрозов. Весь процесс завершается Рубцовым заживлением нескольких участков некроза и развитием диффузного кардиосклероза. При использовании предлагаемой модели удается воспроизвести близкое к клинической картине некротическое (инфарктопо-добное) поражение сердца с исходом в кардиосклероз. Это подтверждается следующими данными: 1. Морфологический анализ препаратов сердца доказывает развитие обширных суб-эндокардиальных и интрамуральных некрозов с медленным процессов заживления. 2. Анализ биохимических показателей доказывает возникновение и развитие патологического процесса в условиях выраженного дефицита энергии, проявляющегося в острой фазе высокой гиперферментемией сыворотки крови. 3. Анализ уровня кардиальных антител доказывает наличие выраженных деструктивных изменений антигенной структуры белков в очаге некроза, ведущих к развитию аутоатессии.