Спосіб моделювання хронічних неспецифічних захворювань легень з гіпертонієй малого кола кровообігу у малих дослідних тварин

Изобретение относится к области экспериментальной медицины и может быть использовано для получения модели хронических неспецифических заболеваний легких (ХНЗЛ) с гипертензией малого круга кровообращения ГМКК у лабораторных животных (крыс). Моделирование ХН3 Л и Г МКК на крысах линии Вистар вызвано запросами клиники, широкой распространенностью заболевания, тяжелым осложнением - легочно-сердечной недостаточностью и связанной с этим необходимостью изучением новых лекарственных препаратов с целью коррекции данного патологического состояния. Известен способ моделирования эмфиземы легких с различными нарушениями кровообращения в легких [1]. который заключается в том, что крупным лабораторным животным внутривенно вводят взвесь ликоподия с диаметром частиц 25 - 30мкм. Частицы ликоподия задерживаются в сосудистом русле, нарушают кровообращение в малом круге и приводят к возникновению эмфиземы легких. Однако данному способу присущи следующие недостатки: за счет того, что частицы ликоподия не рассасываются, нельзя получить стойкий положительный эффект лечения данного заболевания. В качестве прототипа взят способ моделирования хронической пневмонии [2], который заключается в том, что подопытным собакам первый раз внутривенно вводят 8мл/кг массы животного 50% - 60% взвеси куриных эритроцитов на физиологическом растворе, затем повторно вводят тот же материал в дозе 1 - 5мл/кг массы. Обострение хронического процесса осуществлялось путем повторных введений через каждые 3мес. взвеси куриных эритроцитов в дозе 1 - 5мл/кг. Однако данный способ не дает возможности смоделировать на мелких лабораторных животных (крысах) ХНЗЛ с присущим им признаком - пневмосклерозом. Задача изобретения - повышение степени воспроизводимости неспецифического заболевания легких с наличием пневмосклероза, путем трансторакального введения в паренхиму легкого крыс спиртового раствора туши в количестве 0,08 - 0,2мл на 100г массы тела с последующим одноразовым введением в хвостовую вен у 25% взвеси куриных эритроцитов на физиологическом растворе в количестве 0,15 0,2мл на 100г массы тела через 14 - 20 дней. Трансторакальное введение спиртового раствора туши в паренхиму легких применено впервые. Сравнение заявляемого способа со способом прототипа, где воспроизводят хроническую пневмонию путем неоднократного внутривенного введения 50 - 60% взвеси куриных эритроцитов, позволяет сделать вывод о соблюдении "новизны". Отличительным признаком заявленного способа является одноразовое внутривенное введение 25% взвеси куриных эритроцитов. Способ осуществляется следующим образом. Предварительно крысам линии Вистар в качестве наркоза вводят внутрибрюшинно этаминалнатрия из расчета 0,2мл (3мг) на 100г массы тела. После этого крысам трансторакально в паренхиму правого или левого легкого (между 7 - 8 ребром грудного отдела) вводят спиртовый раствор туши (приготовленный на 70° этиловом спирте в разведении 1 : 1) в количестве 0,08 - 0,2мл на 100г массы тела, через 14 - 20 дней тем же животным вводят в хвостовую вену 25% взвесь куриных эритроцитов на физиологическом растворе в количестве 0,15 - 0,2мл на 100г массы тела. Заявляемый способ позволяет с высокой степенью воспроизводимости через 3мес. от начала моделирования получить модель ХНЗЛ с четко выраженными признаками хронического пневмонита, эмфизематозных изменений, хронического деструктивного бронхита со спазмом бронхов, перифокальными дистелектазами и ателектазами легочной паренхимы, а также очаговыми склеротическими изменениями, развивающимися по месту введения спиртового раствора туши и гипертонии малого круга кровообращения. Пример 1 (1 месяц наблюдения). 10 крысам популяции Вистар трансторакально в паренхиму легких введено 0,08 - 0,2мл на 100г массы тела спиртового раствора туши и через 14 20 дней внутривенно в хвостовую вен у введена 25% взвесь куриных эритроцитов на физиологическом растворе в количестве 0,15 0,2мл на 100г массы тела. Через 1 месяц крысы взяты на исследование. Морфологические исследования выявили утолщение и фиброз висцеральной плевры, а также развитие фиброзной ткани по ходу введения раствора туши. По периферии последнего отмечается очаговый коллапс легочной паренхимы и неравномерно выраженная панацинарная эмфизема. Это свидетельствуе т о развивающейся структурной перестройке легочной ткани без признаков легочной гипертензии. Пример 2 (3 месяца наблюдения). 20 крысам линии Вистар трансторакально в паренхиму легкого введено 0,08 - 0,2мл на 100г массы тела спиртового раствора туши с последующим через 14 - 20 дней введением в хвостовую вену 25% взвеси куриных эритроцитов на физиологическом растворе в количестве 0,15 0,2мл на 100г массы тела. Через 3 месяца крысы взяты на исследование. Морфологические исследования подтверждают наличие структурных признаков развития хронических неспецифических заболеваний легких, включающих: хронический пневмонит, хронический деструктивный бронхит со спазмом просветов, перифокальные дистелектазы и ателектазы легочной паренхимы, очаговую панацинарную эмфизему, а также очаговые склеротические изменения, развивающиеся преимущественно по ходу введения спиртового раствора туши. При этом наблюдается гипертрофия стенок ветвей легочной артерии, документирующаяся достоверными отличиями морфометрических показателей. Толщина стенок ветвей легочной артерии белых крыс в норме: сосуды крупного калибра составляет 7,44 ± 0,43 (n = 64), при моделировании 20,83 ± 0,74 (n = 64) P < 0,05; сосуды среднего калибра - в норме составляет 5,02 ± 0,19 (n = 70), при моделировании - 12,65 ± 0,37 (n = 61) P 0,05). Наряду с этим имели место изменения со стороны и некоторых други х показателей, Отмечался достоверный рост максимального, диастолического и пульсового системного артериального давления. В среднем показатели увеличивались на 49; 46 и 63% соответственно. Наблюдалась тенденция к некоторому урежению частоты сердечных сокращений и удлинению интервала RR. Каких либо существенных изменений со стороны биоэлектрической активности миокарда не выявлено. Сократительная активность и релаксационные свойства миокарда также не отличались от исходной величины. Таким образом, полученные результаты позволяют заключить, что срок 3,5 - 4мес от начала моделирования ХНЗЛ можно рассматривать как наиболее ранний период возникновения признаков легочной гипертезии. Однако, воспроизводимость последней не является 100% - ой. Предлагаемый способ применен для моделирования ХНЗЛ и ГМКК на 40 крысах; 20 крыс служили контролем. Наблюдением установлено, что предложенный способ обеспечивает достаточно высокую воспроизводимость процесса, приближение по патогенезу этого заболевания к клиническому варианту, возможность изучения особенностей функционирования жизненно важных органов при данной патологии, а также создает возможность испытания фармакологических средств.