Спосіб гістохімічної експрес-діагностики життєздатності кінцівки в стані критичної ішемії, обумовленої діабетичною ангіопатією судин нижніх кінцівок (данк) за допомогою кислої фосфатази

Спосіб гістохімічної експрес-діагностики життєздатності кінцівки в стані критичної ішемії, обу 3 34354 Задача корисної моделі вирішується тим, що спосіб гістохімічної експрес-діагностики життєздатності кінцівки в стані критичної ішемії обумовленої діабетичною ангіопатією судин нижніх кінцівок (ДАНК) за допомогою кислої фосфатази, що включає біопсію кінцівки з місцевою анестезією, нарізку і фарбування препарату в замороженому стані та визначення змін різної тяжкості світловою мікроскопією, при цьому як біопсію кінцівки здійснюють методом пункційної біопсії м’язової тканини на різних рівнях кінцівки, фарбування попередньо підсушених заморожених препаратів здійснюють краплями кислої фосфатази до повного покриття препарату з подальшим утриманням в термостаті при 37°С протягом 45 хвилин, промиванням, висушуванням і покриттям розчином полівініл С препарату, крім того зміни різної тяжкості додатково визначають на рівні гістохімічних змін за наявністю лізосомальної активності кислою фосфатазою. Отож за рахунок такого вирішення задачі корисної моделі даний спосіб діагностики дає можливість чітко встановити протягом 4-х годин про рівень життєздатності кінцівки в стані критичної ішемії та чітко диференціювати стадію ДАНК, що дозволяє вибрати правильну лікувальну тактику. Даний спосіб гістохімічної експрес-діагностики життєздатності кінцівки в стані критичної ішемії обумовленої діабетичною ангіопатією судин нижніх кінцівок (ДАНК) за допомогою кислої фосфа тази виконують наступним чином. Комп’ютерна в ерстка Л.Литв иненко 4 Спочатку відбирають методом пункційної біопсії під місцевою анестезією, наприклад новокаїновою або іншого препарату (в залежності від сприйняття кожної окремої людини певного препарату), зразків м’язової тканини з різних частин нижньої кінцівки (стопи, гомілки, стегна). Зразки поміщають в контейнер при температурі 0- +4°С і через 10-15 хвилин поміщають в морозильну камеру кріостата при -16°С. Заморожені зрізи протягом 10 хвилин просушують, монтують на знежирене предметне скло і краплями наливають розчин кислої фосфатази до моменту повного покриття зрізу. Зрізи закладають в термостат при температурі +37°С на 45 хвилин. Зливають інкубаційний розчин і тричі промивають дистильованою водою. Згодом зрізи висушують і покривають розчином полівініл С. За допомогою світлового мікроскопа отримуємо результат: позитивна активність кислої фосфа тази дає червоний (в гамі червоного) колір (дрібні червонуваті гранули в цитоплазмі м’язових волокон), негативна активність кислої фосфатази не дає забарвлення зрізів в явно вираженого червоного кольору. Згідно результату вибирають лікувальну тактику і проводять диференціацію стадії ДАНК. Корисна модель забезпечує більш високу точність діагностики життєздатності кінцівки, скоротити час дослідження та дозволяє вибрати правильну лікувальну тактику. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601