Спосіб диференціальної діагностики мієлоідних лейкозів

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии - способам дифференциальной диагностики лейкозов. Целью Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики острого миелобластного лейкоза и бластного криза хронического миелолейкоза. Целью способа является ускорение дифференциальной диагностики острого миелобластного лейкоза и бластного криза хронического миелолейкоза. Способ осуществляется следующим образом. . Кроветворные клетки получают при пункции грудины больных. 1 мкл костномозгового пунктата помещают в стерильную пробирку с раствором гепарина в среде 199 из расчета 50 ЕД/мкл. После осаждения эритроцитов надслой собирают, тщательно пилетируют у подсчитывают в нем число 38 - Э 1 изобретения является ускорение диагностики лейкозов. Целью изобретения является ускорение диагностики острого и хронического миелолейкоза. Проводят культивирование кроветворных клеток, взвешенных в полужидком агаре, в камере из полиэкриламидного геля, которую имплантируют в брюшную полость мыши. На 3-е сутки культивирования по числу образовавшихся клеточных агрегатов-клонов судят о функциональном состоянии начальных отделов кроветворной системы, при эффективности клонирования 20 и выше диагностируют хронический миеловидкый лейкоз (областиый криз), а при 5 и ниже оетрый миелоидный лейкоз. ядерных клеток. Клеточную суспензию смешиваютс основной агаровой средой. Состав среды: среда 199 (солевая основа Хенксэ), сыворотка человека АВО IV, бактоагар фирмы "Dlfco", приготовленный на тридистиллированной воде. Агаровую среду с кроветворными клетками помещают в диффузионную камеру из полиакриламидного геля и переносят в чашку Петри со средой 199 с 10% сывороткой человека и антибиотиками (50 ЕД пенициллина и 50 ЕД стрептомицина). Благодаря высоким диффузионным свойствам материала в течение короткого срока происходит вымывание остатков мономеров и пропитывание, камеры питательной средой. Затем камеру погружают в брюшную полость мыши (линии СВА), являющуюся стандартным 00 ел 1685157 жалобами на слабость, потливость, отсутстисточником питательных вещєст t и вие аппетита, ломоту в суставах. Считает естимулирующєго фактора себя больным около двух месяцев. СостояУчет результатов производят ежедневние удовлетворительное Лимфатические но по числу клеточных агрегатов, образуе5 узлы не увеличены, печень выступает из-под мых в процессе культивирования в расчете реберной дуги на 1 см, селезенка на 3 см. В на 1x10 посаженных клеток и после оценанализе крови 38% бластных клеток. Цитоки результатов помещают ее в брюшную химические исследования указали на миеПОЛОСТЬ МЫШИ ВНОВЬ. лоидное происхождение бластных клеток. П р и м е р 1 Больная П , 57 лет, поступила в гематологическую клинику с жалоба- 10 Произведена стерналькая пункция. В миеми на слабость, головокружение, боли в лограмме 56% бластных клеток. С целью суставах. Считает себя больной в течение 3 дифференциальной диагностики острого мес. Состояние средней тяжести Выраженмиелоблйстного лейкоза и хронического миная бледность кожных покровов, единичные елолейко;>я (бластного криза) поставлена подкожные кровоизлияния на голенях и на 15 кульі ура клеток костного мозга в диффузипередней брюшной стенке. Печень выступаонных камерах (! х 105 клеток на камеру) На ет на 2 см из-под края реберной дуги. Селео и сутки определялось 20 агрегатов, на 5~ зенка не пальпируется. 35, нэ 13-68 Обилие клеточных агрегате^ в культуое как в ранние сроки кулыиьироваВ периферической крови - анемия, тромбоцитопения, 16 бластных клеток на 20 ния, так и в конце эксперимента позволило 100 учитываемых, СОЭ 83 мм/ч. С диагнопоставить диагноз хронического миелолеистической целью произведена стернальная коза (бласгный криз), что было подтверждепункция. В этот же день сделана посадка но и дальнейшим течением заболевания. кроветворных клеток в культуру (в диффузионные камеры). На 3-5-е сутки ЭКО (эффек- 25 Формула изобретения тивность клонирования) в расчете на 1 х 10 миклокариоцитов) равна нулю. На 13-е сутСпособ дифференциальной диагностики культивирования ЭКО равна 0 Диагноки миелоидных лейкозов, включающий опстирован острый лейкоз. ределение эффективности клонирования Данные культур подтверждаются ре- 30 кроветворной ткани в питательной среде, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью зультатами лабораторных и клинических исускорения, клонирование проводят в камеследований. ре из полиакриламілдного геля, эффективНаблюдения в динамике подтвердило ность клонирования определяют на 3-е диагноз острого лейкоза Результаты цитохимических исследований указали на мие- 35 сутки и при ее значениях 20 и выше диагнолобластный вариант стируют хронический миелоидный лейкоз, а при 5 и ниже - острый ммелоидный лейкоз. П р и м е р 2 Больной С, 25 лет, поступил; в гематологическую клинику с Редактор В.Трубченко Составитель А.Лыкоеа Техред М.Моргентал Корректор Т ПРЛИЙ Заказ 3860/ДСП Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям ы открытиям при ГКИТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г Ужгород УЛ Гагарина 101