Спосіб моделювання уражень тонкої кишки токсинами блідої поганки

Спосіб моделювання уражень тонкої кишки лабораторних тварин - щурів - токсинами блідої поганки, який включає одноразове внутрішньоочеревне введення екстракту цього гриба в дозі LD50, який відрізняється тим, що додатково перед введенням екстракту здійснюють одноразову ІН'ЄКЦІЮ розчину мезатону на персиковій олії в дозі 0,05 мг/кг у параартеріальні тканини краніальної брижової артерії Винахід відноситься до медицини, а саме моделювання патологічних процесів, і може бути використаний при експериментальному вивченні уражень тонкої кишки токсинами блідої поганки Відомий спосіб моделювання уражень тонкої кишки лабораторних тварин - щурів токсинами блідої поганки, який включає одноразове внутрішньочеревне введення екстракту цього гриба в дозі LD50 [1] Вказану дозу, попередньо визначену для конкретного гриба, LDso вводять з розрахунку на масу тіла тварин Після введення необхідної КІЛЬКОСТІ екстракту, виготовленого традиційним способом [2], спостерігають токсичне ураження внутрішніх органів, зокрема печінки, нирок, легень, міокарда, яке проявляється ВІДПОВІДНИМИ морфологічними та біохімічними змінами Недоліком відомого способу є недостатній рівень інформативності та відтворюваності, що випливає, перш за все, з недостатньо виражених в ході експериментального патологічного процесу змін у тонкій кишці, хоча останні посідають значне місце в патогенезі токсичного ураження внутрішніх органів через інтенсивне всмоктування з кишки токсину Вказані недоліки тим більш суттєві, що у відомому способі екстракт вводять екстраентерально, а саме внутрішньоочеревинно, обмежуючи при цьому природний шлях контактування токсину з кишечною стінкою В основу винаходу поставлено завдання вдосконалити відомий спосіб, у якому шляхом попередньої зміни функціонального стану кишечної стінки, а саме и проникності для токсинів блідої поганки, досягають підвищення інформативності та відтворюваності експериментальної моделі При розгляді технічного завдання було прийнято до уваги те, що позакишечне (внутрішньочеревне) введення токсину призводить до всмоктування останнього безпосередньо з очеревинної порожнини, обминаючи природний, патогенетично вагомий компонент - всмоктування токсину з кишечнику Неврахування цього призводить до обмеження інформативності експериментальної моделі, знижує рівень її відтворюваності Виходячи з наведеного, поставлене завдання вирішують тим, що у відомому способі моделювання уражень тонкої кишки лабораторних тваринщурів токсинами блідої поганки, який включає одноразове внутрішньочеревне введення екстракту цього гриба в дозі LDso, ВІДПОВІДНО ДО винаходу додатково перед введенням екстракту здійснюють одноразову ІН'ЄКЦІЮ розчину мезатону на персиковій олії в дозі 0,05мг/кг у параартеріальні тканини краніальної брижової артерії Спосіб здійснюють наступним чином В умовах тюпенталового наркозу з дотриманням правил асептики і антисептики білому щуру здійснюють лапаротомію За ходом краніальної брижової артерії та паралельно їй у параартеріальні тканини вводять мезатон на персиковій олії в дозі 0,05мг/кг Після ЦЬОГО внутрішньочеревно вносять екстракт блідої поганки в дозі LDso Черевну стінку зашивають пошарово Через 6 годин після початку експерименту здійснюють евтаназію білого щура шляхом швидкої декапітацм Про наявність ураження тонкої кишки роблять висновок за даними ГІСТОЛОГІЧНОГО та морфометричного її дослідження Приклад 1 Білому непородному щуру-самцю масою 200г під тюпенталовим наркозом здійснили (О ю ю 55691 серединну лапаротомію, в заочеревинному просторі знайшли черевну аорту та місце відходження краніальної брижової артерії По ходу цієї артерії з обох сторін у параартеріальні тканини ввели 1,0% розчин мезатону в дозі 0,01 мл та персиковій олії, після чого внутрішньочеревно внесли 1,0мл екстракту токсинів блідої поганки, що відповідала експериментальне встановленій дозі LDso, а саме 170мг/кг Черевну порожнину пошарово зашили Через 6 годин від початку експерименту тварину вивели з досліду і провели ГІСТОЛОГІЧНІ та морфометричні дослідження Контролем були ВІДПОВІДНІ параметри контрольних тварин ГІСТОЛОГІЧНО у СТІНЦІ тонкої кишки виявлені розширені переповнені кров'ю судини, у термінальних відділах мікроциркуляторного русла відмічено стаз, стромальні та периваскулярні набряки, посилення інфільтрації слизової оболонки і підслизової основи лімфоідними та плазматичними клітинами, дистрофію епітелюцитів, їхню вогнищеву десквамацію Приклад 2 За допомогою запропонованого способу провели моделювання уражень тонкої кишки токсинами блідої поганки у 11 білих щурів Про наявність позитивного результату виконаного моделювання свідчать дані, наведені у таблиці Таблиця Морфометрична характеристика тонкої кишки на фоні ураження токсинами блідої поганки Показник Висота покривних епітелюцитів, мкм Діаметр ядер епітелюцитів, мкм Ядерно-цитоплазматичні відношення Клітинна густина інфільтрату на 1 мм^ слизової оболонки Відносний об'єм пошкоджених епітелюцитів, % Групи тварин контрольна експериментальна 13,50 ±0,1 5 15,70 ±0,18*** 3,80 ± 0,07 4,86 ± 0,06*** 0,083 ± 0,002 0,096 ± 0,003** 10792,0 ±108,0 14960,6 ±124,2*** 1,90 ±0,06 32,60 ± 2,40*** Примітка зірочкою позначено показники, які достовірно відрізняються від контрольних (*- Р< 0,05, **- Р< 0,01, ***- Р< 0,001) При мікроскопічному дослідженні у тонкій кишці експериментальних тварин спостерігали набряк слизової оболонки, підслизової основи та м'язової оболонки на фоні розширених кровоносних судин Мали місце розлади мікрогемодинаміки у вигляді стазу, діапедезних крововиливів Строма слизової оболонки та підслизової основи інфільтровані клітинними елементами, цитоплазма епітелюцитів набрякла, межі між окремими клітинами нечіткі, поширені явища вогнищевої десквамації покривних епітелюцитів, некрозу окремих клітин Наведені морфологічні зміни свідчать, що у СТІНЦІ тонкої кишки широко представлені альтеративні, інфільтративні процеси, а також виражені судинні розлади, які вказують на суттєве токсичне ураження тонкої кишки ванні залишилися живими, придатними для подальшого дослідження як, власне, патологічного процесу, так і його експериментальної терапії Таким чином, запропонований спосіб забезпечує більш високий, у порівнянні з прототипом, рівень відтворюваності моделі ураження тонкої кишки токсинами блідої поганки та його інформативності Джерела інформації, які слід взяти до уваги 1 Виклюк Л Т , Лісничук Н Є Морфометрична оцінка структурної перебудови тонкої кишки під впливом токсинів блідої поганки // Здобутки клінічної та експериментальної медицини —Тернопіль Укрмедкнига — С 79-80 2 Бойчук Б Р Отруєння грибами — Тернопіль Укрмедкнига, 1997 —200 с Слід зауважити, що усі тварини при моделю Підписано до друку 05 05 2003 р Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24