Спосіб одержання комплексу вітаміну d3 з холестерином

Винахід відноситься до способів одержання продуктів опромінювання 7-дегідрохолестерину, більш конкретно до області удосконалення способу одержання комплексу вітаміну D3 з холестерином, який може бути використаний в хіміко-фармацевтичній промисловості для одержання вітамінної продукції. Відомий спосіб одержання люмістерину, шля хом розчинення в етанолі 93%-ного 7-дегідрохолестерину до одержання 0,2%-ного розчину з перемішуванням та нагріванням до температури не вище 35-40°С, охолодження розчину до 18-20°С, послідуючого пропускання через нього протягом 10-15 хвилин потоку азоту для вилучення кисню, опромінювання одержаного розчину 7-дегідрохолестерину УФ-світлом з довжиною хвилі 310-312нм в апараті проточного типу в потоці інертного газу, концентрування розчину упарюванням в 10-12 разів у вакуум-випарному апараті при температурі не вище 45°С, відділення неперетвореного 7дегідрохолестерину шляхом виморожування в кристалізаторі з температурою –(10¸25оС) і витримки протягом 3-12 годин, повторного упарювання в 10-12 разів у вакуумі при температурі не вище 45°С та наступної витримки одержаного концентрату 12 годин при -(10¸25°C) для повторного виморожування з наступним відділенням другого вимороженого осаду. [Див. A.C. СРСР №466219, кл. С07С171/08, дата пріоритету 22.05.1973р.] Відомий спосіб забезпечує 65% вихід (по перетвореному 7-дегідрохолестерину) провітаміну D 3 та 10% вихід по перетвореному 7-дегідрохолестерину вітаміну D3. Субстанція, що одержана цим способом, відрізняється недостатньою хімічною стійкістю та низькою біологічною активністю і тому не може бути використана, як кінцевий вітамінний продукт. Відомий також спосіб одержання комплексу вітаміну D3 з холестерином шляхом розчинювання при нагріванні еквімолекулярної кількості холестерину в ацетоновому розчині фотосмоли, яка містить вітамін D3, одержану при опромінюванні розчину 7-дегідрохолестерину в етанолі УФ світлом з довжиною хвилі 302312нм, з наступними випарюванням, виморожуванням при температурі -(10°¸25°С) та вилучанням неперетвореного 7-дегідрохолестерину, які здійснюються в дві стадії, після чого здійснюють термічну ізомеризацію отриманого таким чином концентрату, а потім -упарювання до фотосмоли. Комплекс вітаміну D 3 з холестерином виділяється після нагрівання ацетонового розчину фо тосмоли з холестерином з осаду, утвореного при різкому зниженні температури розчину до -(10°¸25°С). [Див. A.C. СРСР №505188, МПК С07С401/00, пріоритет 22.05.1973р. заявник Інститут біохімії АН УРСР]. Відомий спосіб, вибраний, як прототип, за принципом найбільшого збігу суттєви х ознак з об'єктом техніки, що заявляється, забезпечує одержання подвійної сполуки холекальціферолу з холестерином, яка характеризується значною стійкістю вітаміну D3, а комплекс, одержаний таким чином, містить біля 45% вітаміну D3 та до 5% 7-дегідрохолестерину. Недоліком даного способу слід вважати инижений вміст вітаміну D3 в комплексі, а також у зв'язку з високою концентрацією 7-дегідрохолестерину при тривалому зберіганні препарату не виключене утворення перекисних сполук 7-дегідрохолестерину. Задачею, що покладена в основу цього винаходу, є підви щення вмісту вітаміну D3 в комплексі (не менш, ніж 49%) та збільшення терміну зберігання комплексу за рахунок зниження концентрації невилучених залишків 7-дегідрохолестерину (не більше 1%): Задача, що поставлена, вирішується тим, що у способі одержання комплексу вітаміну D3 з холестерином шляхом розчинювання при нагріванні еквімолекулярної кількості холестерину в ацетоновому розчині фотосмоли, яка містить вітамін D3, одержану при опромінюванні розчину 7-дегідрохолестерину в етанолі УФ світлом з довжиною хвилі 302-312нм, з наступними випарюванням, виморожуванням та вилучанням неперетвореного 7-дегідрохолестерину, термічною ізомеризацією отриманого таким чином концентрату та упарюванням до фотосмоли, виділення комплексу після нагрівання ацетонового розчину фотосмоли з холестерином з осаду, утвореного при різкому зниженні температури ацетонового розчину до -(10°¸25°С), перед розчинюванням холестерину з ацетонового розчину фогосмоли виморожують домішки 7дегідрохолестерину. Задача також вирішується і тим, що після опромінювання розчину 7-дегідрохолестерину в етанолі УФ світлом, наступне випарювання, виморожування та вилучання неперетвореного 7дегідрохолестерину здійснюють триразово. Задача, що покладена вирішується також і тим, що перед розчинюванням холестерину нагрітий до температури 50-55°С ацетоновий розчин фотосмоли фільтрують через активоване вугілля. Введення до способу одержання комплексу вітаміну D3 з холестерином нової, раніше невідомої, операції виморожування з ацетонового розчину фо тосмоли домішок 7-дегідрохолестерину, яка здійснюється перед розчинюванням, холестерину, дозволяє одержати новий технічний результат - підвищення концентрації вітаміну D3 у комплексі до 49% та значне зменшення домішок 7-дсгідрохолестерину (до 1%), що знижує вірогідність утворення перекисних сполук і, як наслідок, збільшує гарантійний строк зберігання препарату. Це дає всі підстави віднести всю сукупність ознак загального обсягу патентних домагань до розряду суттєви х. Триразове випарювання, виморожування та вилучання неперетвореного 7-дегідрохолестерину, яке застосовується після опромінювання розчину 7 дегідрохолестерину в етанолі УФ світлом замість дворазового, що здійснювалося раніше, підвищує якість фотосмоли та сприяє досягненню необхідного технічного результату. Зменшенню небажаних домішок допомагає також операція фільтрації нагрітого до температури 50-55°С ацетонового розчину фо тосмоли через активоване вугілля. Спосіб, що заявляється, здійснюється таким чином. 93% 7-дегідрохолестерин розчинюють в етанолі до одержання 0,2%-ного розчину при перемішуванні та нагріванні розчину не вище 35-40°С. Після повного розчинення 7-дегідрохолестерину розчин охолоджують до 18-20°С та пропускають через нього потік азоту протягом 10-15 хвилин для вилучення розчиненого кисню. Одержаний таким чином розчин опромінюють в апараті проточного тішу в потоці інертного газу (азот, аргон) ультрафіолетовим світлом з діапазоном довжин хвиль 302-312нм при температурі 20-30°С. Швидкість потоку розчину повинна забезпечувати 40-60% перетворення вихідного 7-дегідрохолестерину в провітамін D3. Для вилучення неперетвореного 7-дегідрохолестерину здійснюють концентрування опроміненого розчину упарюванням у 10-12 разів в вакуум-випарному апараті при температурі не вище 45°С для того, щоб виключити термічне перетворення превітаміну в вітамін D3., Одержаний концентрований розчин становлять у кристалізатор з температурою -(10-25°С) і залишають на 3-12 годин для виморожування неперетвореного 7дегідрохолестерину. Кристали, що випали у осад, з 90%-ним вмістом 7-дегідрохолестерину промивають холодним етанолом та суша ть в вакуум-сушильному шкафу при 35°С протягом 3-4-х годин до постійної ваги. Надалі вони використовуються при виробництві вітаміну D3 для тваринництва. Спиртовий розчин після вилучення вимороженого 7-дегідрохолестерину знову упарюють в 10-12 разів в вакуумі при температурі не вище 45°С. Одержаний концентрат залишають на 12 годин для повторного виморожування неперетвореного 7-дегідрохолестерину при температурі -(10-25°С). Операцію вилучення вимороженого 7-дегідрохолестерину (випарювання в вакуумі, виморожування та відділення неперетвореного 7-дегідрохолестерину) повторюють у третій раз. Така старанність вилучення залишків неперетвореного 7-дегідрохолестерину сприяє утворенню міцних комплексних зв'язків вітаміну D3 з холестерином в еквімолекулярному співвідношенні. Далі здійснюють термічну ізомеризацію концентрату, для чого його розчинюють етанолом в співвідношенні 1:1 (для досягнення максимального перетворення провітаміну в вітамін D3), кип'ятять зі зворотним холодильником в протоці інертного газу (аргон, азот) протягом 2,5 годин, після чого розчин охолоджують до кімнатної температури при постійному потоці інертного газу. Отриманий таким чином спиртовий концентрат, який містить вітамін D3, упарюють на роторному випарнику в вакуумі (20-30мм.рт.ст.) при температурі бані не вище 45°С для одержання фотосмоли. Фотосмолу розчинюють в ацетоні в співвідношенні 1:10 при нагріванні розчину, потім ацетоновий розчин виморожують при температурі -(10-25°С) протягом 10-12 годин і осад домішків 7дегідрохолестерину, люмістерину та інше, що утворилися, відфільтровують та вилучають. Після цього розчин, попередньо нагрітий до температури 50-55°С, фільтрують через активоване вугілля, а до фільтрату далі додають холестерин у кількості, що відповідає еквімолекулярному співвідношенню з вітаміном D3. Далі розчин охолоджують до температури -(10-25°С) та витримують протягом 4-12 годин. Осад комплексу вітаміну D3 з холестерином, що утворився внаслідок цього, відфільтровують, промивають на фільтрі охолодженим до температури -(10-25°С) ацетоном та сушать у вакуумі при температурі 30-35°С дві-три години. Утворений цим способом комплекс містить не менш 49% вітаміну D3 та біля 1% домішків 7дегідрохолестерину. Гарантійний термін зберігання препарату, що одержаний способом, який заявляється, не менше 2-х років. Спосіб одержання комплексу вітаміну D3 з холестерином розроблений та впроваджений на технологічному обладнанні Київського вітамінного заводу і показав високу ефективність препарату, який випускається на підприємстві під товарним знаком "Відехол".