Спосіб лікування туберкульозу легенів

Изобретение относится к медицине, а именно, к способам комплексного лечения туберкулеза. Туберкулез как заболевание представляет собой специфический воспалительный процесс, который сопровождается изменением структуры биологических мембран, нарушением процессов переокисления липидов и тканевого дыхания. Известны способы лечения туберкулеза легких путем введения совместно с противотуберкулезными препаратами, например, изониазидом, этамбутолом, тиосульфата натрия и a -токоферола [1, 2]. Прототипом нового способа является способ лечения туберкулеза легких, который включает введение перорально масляного раствора витамина E ( a -токоферолацетата) из расчета 3-4 мг на кг веса тела животного один раз в сутки в течение 3-4 месяцев в комплексе с изониазидом [1]. Несмотря на улучшение общего состояния, прибавку в весе, уменьшение признаков туберкулезной интоксикации, отмечается образование массивных очагов поражения на начальном этапе лечения, недостаточное ограничение зон казеозного некроза в процессе лечения. Эти результаты, а также исследования клеточного состава ткани легкого показывают недостаточную эффективность известного способа лечения. В основу изобретения поставлена задача разработать более эффективный способ лечения туберкулеза легких, позволяющий усилить противовоспалительное и противосклеротическое действие путем введения биологически активного производного витамина Е. Поставленная задача решается за счет комплексного введения изониазида и масляного раствора производного витамина Е: 2-(4'-метил-3'-пентенил-6-ацетокси2,5,7,8-тетраметилхромана), который вводят в суточной дозе 4-6 мг/кг массы тела в течение 28 суток. 2-(4'-метил-3'-пентенил-6-ацетокси-2,5,7,8-тетраметилхроман) представляет собой аналог витамина Е- a токоферолацетат с укороченной до шести углеродных атомов боковой цепью формулы CH 3COOH O Благодаря введению предложенного аналога витамина E в суточной дозе 4-6 мг/кг массы тела 1 раз в сутки в течение 28 суток совместно с изониазидом получен более выраженный противотуберкулезный эффект, выражающийся в усилении противовоспалительного и противосклеротического действия. Изобретение иллюстрируется примерами конкретного выполнения способа, а также результатами патогистологических и микробиальных исследований. Пример 1. Гвинейских морских свинок заражают 0,01 мг микобактерий туберкулеза штамма H37RV и делят на 4 группы по 20 животных. 0-1 группа - контрольная, для изучения туберкулезного поражения - не получает лечения; I - 1 гр уппа - получает изониазид; II - 1 группа - получает изониазид и масляный раствор витамина E перорально из расчета 4 мг на 1 кг веса животного; III - 1 группа - получает изониазид и предположенный аналог витамина E (масляный раствор) перорально из расчета 4 мг на 1 кг веса тепа животного. Препараты начинают вводить через 28 дней после заражения животных на фоне развитого диссеминированного поражения легких. Определяют летальность, индекс поражения туберкулезом (ИПТ), содержание витамина E в сыворотке крови, а также проводят патогистологические исследования ткани легкого после 28-дневного курса лечения. Для 0-1 (контрольной), І-1, ІІ-1, ІІІ-1 групп летальность составляет соответственно: 67,1%; 20,1%; 14,8%; 10,2%; ИПТ 87,2±4,46; 39,9±2,02; 21,8±1,01; 20,2±0,9; содержание витамина E в сыворотке крови - 14,00±1,80; 20,8±2,12; 32,1±3,9; 37,9±4,1мкМ/л. Пример 2. Гвинейских морских свинок заражают 0,01 мг микобактерий туберкулеза штамма H37RV и разделяют на 4 группы по 20 животных, как в примере 1 (0-2, І-2, ІІ-2, ІІІ-2). Курс лечения осуществляют по схеме, описанной в примере 1, однако ІІ-2 и ІІІ-2 группам вводят по 5 мг на 1 кг веса тела животного соответственно масляного препарата витамина E фармакопейного и предложенного аналога витамина Е. Для 0-2 (контрольной) І-2, ІІ-2, ІІІ-2 гр упп соответственно летальность составляет 66,6%; 20,0%; 15%; 10%; ИПТ - 86,8±4,86; 39,7±2,03; 21,5±1,1; 20,0±0,9; содержание витамина Е в сыворотке крови - 14,4±1,91; 21,63±2,28; 35,12±4,14; 38,2±4,3 мкМ/л. Пример 3. Гвинейских морских свинок заражают 0,01 мг микобактерий туберкулеза штамма H37RV, разделяют на 4 группы по 20 животных, как в примере 1 (0-3, І-3, ІІ-3, ІІІ-3). Курс лечения осуществляют по схеме, описанной в примере 1, однако ІІ-3 и ІІІ-3 группам вводят по 6 мг на 1 кг веса тела животного соответственно масляного препарата витамина Е фармакопейного и предложенного аналога витамина Е (масляный раствор). Для 0-3 (контрольной), І-3, ІІ-3, ІІІ-3 групп соответственно летальность составляет 66,0%; 19,8%; 15,3%; 10,0%; ИПТ - 85,9±4,60; 39,2±2,12; 21,0±0,9; 19,8±0,8; содержание витамина Е в сыворотке крови - 15,1±2,02; 22,03±2,18; 35,3±4,3; 39,4±4,5мкМ/л. Пример 4. Патогистологические исследования проводят на ткани легкого гвинейских морских свинок, которых заражают микобактериями туберкулеза штамма H37RV и лечат согласно схеме, описанной в примерах 1-3. Результаты, представленные в таблице 1, свидетельствуют о том, что предложенный аналог витамина Е обладает по сравнению с витамином Е фармакопейным более выраженным противоотечным, потивовоспалительным и противосклеротическим действием, что подтверждается: - более выраженной тенденцией к ограничению очагов; - значительным уменьшением казеозного некроза; - преобладанием лимфоидных клеток над эпителиоидными, что свидетельствует о повышении иммунной реактивности организма; - уменьшением инфильтрации и отека (до полного его отсутствия) в межальвеолярных перегородках, что способствует значительному уменьшению фиброзообразования. При введении нового аналога в дозе менее 4 мг на кг веса животного отмечают недостаточную эффективность действия препарата, что выражается в меньшем ограничении гранулемы в большем преобладании эпителиоидных клеток в очагах поражения и в частичном сохранении отека в межальвеолярных перегородках. Пример 5. Исследование антимикобактериального действия витамина E и предложенного нового аналога проводят при посеве микобактерий туберкулеза на плотную питательную среду Левенштейна-Йенсена, в которую перед застыванием вносят указанные препараты в концентрациях от 0,5 до 100 мкг/мл. Препараты для этих исследований готовят в стерильных условиях на 10% водном растворе твина-80 в качестве эмульгатора с таким расчетом, чтобы максимальная конечная концентрация твина в среде не превышала 1%. После застывания среды пробирки засевают лабораторным штаммом микобактерий Н 37PV и выдерживают в термостате при 37°С в течение 21 дня. Эффективность препаратов оценивают по наличию или отсутствию роста микобактерий на среде. Контролем служат пробирки, в которые добавляют только твин-80 до 1% конечной концентрации. Результаты исследований, представленные в таблице 2, показывают, что подавление роста микобактерий туберкулеза отмечается при введении меньших доз предлагаемого аналога витамина E по сравнению с витамином E фармакопейным. Проведенные патоморфологические и микробиологические исследования ткани легкого у экспериментальных животных, леченых согласно новому способу, в сравнении с известным методом, показывают существенные ограничения очагов, преимущественное увеличение лимфоидных клеток, значительное уменьшение площади казеозного некроза и сильное подавление роста микобактерий при введении предложенного аналога витамина Е.