Кристалічна форма похідного гліцину (варіанти), фармацевтична композиція та терапевтичний або профілактичний засіб

Реферат: Представлений винахід стосується кристалічних форм (S,E)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти, що мають чудову хімічну та фізичну стабільність, та їх медичного застосування. UA 111213 C2 (12) UA 111213 C2 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Галузь техніки Представлений винахід стосується кристалічних форм похідної гліцину та їх медичного застосування. Рівень техніки Фармацевтичні препарати повинні зберігати якість протягом тривалого часу під час розподілу, зберігання тощо, та для сполук, як діючих компонентів, вимагаються висока хімічна і фізична стабільність. Таким чином, для діючих компонентів фармацевтичних препаратів, кристали яких, як очікується, повинні мати високу стабільність в порівнянні з аморфними продуктами, які зазвичай використовуються. У скринінгу кристалів діючих компонентів фармацевтичних препаратів важко знайти оптимальні умови для одержання кристалів, а також, навіть тоді, коли кристали можуть бути отримані, існування кристалічних поліморфних модифікацій є проблематичним у багатьох випадках. Це зумовлено тим, що кожна кристалічна форма має різне молекулярне розташування в упаковці, незважаючи на однакову хімічну структуру молекулярного блоку таким чином, що існують відмінності в хімічній і фізичній стабільності між кристалічними формами. Якщо кристалічна форма сполуки, що використовується як діючий компонент фармацевтичних препаратів, вибрана неправильно, зниження чистоти, зміна в ступені гідратації, зміни в кристалічній формі тощо, відбуваються через вплив зовнішнього середовища під час зберігання, та важко підтримувати якість сполуки, в результаті чого виникають несподівані ситуації, такі як зниження фармакологічних ефектів і прояв побічних ефектів, що залежать від кристалічних форм. Таким чином, в тих випадках, коли кристали сполуки, як діючого компонента фармацевтичних препаратів, успішно отримують, необхідно точно оцінити кристалічні поліморфи сполуки. З іншого боку, відомо, що (S,E)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2іламіно)феніл]пент-4-енова кислота, представлена нижче Формулою (I), демонструє терапевтичні дії при запальних захворюваннях кишечника, алергічному дерматиті, розсіяному склерозі та лейкемії (Патентна література 1-4). Посилання на попередній рівень техніки Патентна література Патентна література: 1: WO 2006/068213 Патентна література: 2: WO 2007/145282 Патентна література: 3: WO 2007/148648 Патентна література: 4: WO 2007/148676 Суть винаходу. Проблеми, які вирішуються за допомогою винаходу. Однак, оскільки неможливо передбачити існування кристалічних поліморфів або стабільних кристалічних форм від хімічної структури сполуки, та, крім того, може існувати сполука, яка не може утворювати кристал, існує необхідність вивчити умови формування кристалічної форми для кожної сполуки різними способами. Хоча чудова ефективність як діючого компонента фармацевтичних препаратів є підтвердженою для (S,E)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти, існування її кристалічних поліморфних або навіть можливість утворення кристалів не були відомі до теперішнього часу, та щоб одержати оптимальну кристалічну форму було важливим завданням для розробки сполуки як фармацевтичного продукту. Об'єктом представленого винаходу є забезпечення кристалічної форми (S,E)-2-(2,6дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти, що має чудову хімічну і фізичну стабільність, та їх медичне застосування. Способи вирішення проблем. 1 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Для вирішення описаних вище проблем, автори представленого винаходу інтенсивно вивчали успішність формування кристалів (S,E)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти та знайшли існування кристалічних поліморфних модифікацій форми А, форми В, форми С, форми D і форми Е (гідрат), та безліч кристалів сольватів, тим самим здійснюючи представлений винахід. Серед них, кристали форми В, форми С, форми D та форми Е (гідрату) мають низьке поглинання вологи та відмінну фізичну стабільність; кристалічні форма В, форма С та форма Е (гідрат) мають чудову хімічну і фізичну стабільність у важких умовах зберігання, та кристалічна форма С має відмінну фізичну стабільність навіть у зовнішньому навколишньому середовищі, в якому кристали піддаються впливу розчинників. Тобто, представлений винахід стосується кристалічної форми, описаної в наступних, з (1) до (10) пунктах та їх медичне застосування. (1) Кристалічна форма (S,E)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти. (2) Кристалічна форма відповідно до (1), яка демонструє піки при 2θ(°) 17,1, 17,7, 18,7, 19,9 і 21,0° в порошковій рентгенівській дифрактограмі. (3) Кристалічна форма відповідно до (2), яка демонструє ендотермічний пік в діапазоні від 178 до 182 °C в термогравіметрично-диференційному термічному аналізі. (4) Кристалічна форма відповідно до (1), яка демонструє піки при 2θ (°) 5,9, 8,3, 11,8, 13,2 та 21,7° в порошковій рентгенівській дифрактограмі. (5) Кристалічна форма відповідно до (4), яка демонструє ендотермічний пік в діапазоні від 167 до 171 °C в термогравіметрично-диференційному термічному аналізі. (6) Кристалічна форма відповідно до (1), яка демонструє піки при 2θ (°) 6,6, 8,3, 11,1, 14,6 і 18,2° в порошковій рентгенівській дифрактограмі. (7) Кристалічна форма відповідно до (6), яка демонструє ендотермічний пік в діапазоні від 100 до 104 °C в термогравіметрично-диференційному термічному аналізі. (8) Кристалічна форма відповідно до будь-якого одного з (1) - (7), яка не є сольватом або гідратом. (9) Фармацевтична композиція, яка містить як діючий компонент кристалічну форму відповідно до будь-якого одного з (1) - (8). (10) Терапевтичний або профілактичний агент для запального захворювання кишечника, алергічного дерматиту, розсіяного склерозу або лейкемії, що містить як діючий компонент кристалічну форму відповідно до будь-якого одного з (1) - (8). Ефект винаходу Оскільки кристалічні форми за представленим винаходом демонструють чудову хімічну і фізичну стабільність в порівнянні з аморфною формою, кристалічна форма є переважною як діючий компонент фармацевтичних препаратів, та можуть робити внесок у забезпечення високої надійності фармацевтичних препаратів, які знижують ризики, такі як зменшення фармакологічної ефективності і поява побічних ефектів. Короткий опис креслень Фіг. 1 являє собою дифрактограму порошкової рентгенівської дифракції кристалічної форми C заявленої сполуки. Фіг. 2 являє собою криву диференційного термічного аналізу, отриману термогравіметричнодиференційним термічним аналізом кристалічної форми C заявленої сполуки. Фіг. 3 являє собою дифрактограму порошкової рентгенівської дифракції кристалічної форми В заявленої сполуки. Фіг. 4 являє собою криву диференційного термічного аналізу, отриману термогравіметричнодиференційним термічним аналізом кристалічної форми B заявленої сполуки. Фіг. 5 являє собою дифрактограму порошкової рентгенівської дифракції кристалічної форми E (гідрату) заявленої сполуки. Фіг. 6 являє собою криву диференційного термічного аналізу, отриману термогравіметричнодиференційним термічним аналізом кристалічної форми Е (гідрату) заявленої сполуки. Фіг. 7 являє собою дифрактограму порошкової рентгенівської дифракції кристалічної форми A заявленої сполуки. Фіг. 8 являє собою криву диференційного термічного аналізу, отриману термогравіметричнодиференційним термічним аналізом кристалічної форми А заявленої сполуки. Фіг. 9 являє собою дифрактограму порошкової рентгенівської дифракції кристалічної форми D заявленої сполуки. 2 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Фіг. 10 являє собою криву диференційного термічного аналізу отриманого термогравіметрично-диференційним термічним аналізом кристалічної форми D заявленої сполуки. Спосіб здійснення винаходу Кристалічна форма за представленим винаходом являє собою кристалічну форму (S,E)-2(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти та характеризується наявністю кристалічних поліморфів форми А, форми В, форми С, форми D та форми Е (гідрату). Кристалічні форми (S,E)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент4-енової кислоти (надалі також згадується як "заявлена сполука") можна відрізнити за характеристичними піками, зображеними на дифрактограмах порошкової рентгенівської дифракції або ендотермічними піками, зображенихми на кривих диференціального термічного аналізу (надалі названого як "крива ДТА"), отриманих за допомогою термогравіметричнодиференційного термічного аналізу (надалі названого як "ТГ-ДТА"). Дифрактограми порошкової рентгенівської дифракції та криві ДТА можуть дещо змінюватися в залежності від умов вимірювання. Наприклад, для кута дифракції 2θ в порошковій дифракції рентгенівських променів, похибки близько ± 0,2°, як правило, є прийнятними. Як показано на Фіг. 1, кристалічна форма C заявленої сполуки демонструє характеристичні піки при куті дифракції 2θ(°) 17,1, 17,7, 18,7, 19,9 і 21,0° у порошковій рентгенівській дифрактограмі. Крім того, кристалічна форма С заявленої сполуки демонструє криву ДТА, зображену на Фіг. 2, та демонструє ендотермічний пік при 180 °C, тобто в діапазоні від 178 до 182 °C. Як показано на Фіг. 3, кристалічна форма B заявленої сполуки демонструє характеристичні піки при куті дифракції 2θ(°) 5,9, 8,3, 11,8, 13,2 та 21,7° у порошковій рентгенівській дифрактограмі. Крім того, кристалічна форма B заявленої сполуки демонструє криву ДТА, зображену на Фіг. 4, та демонструє ендотермічний пік при 169 °C, тобто в діапазоні від 167 до 171 °C. Як показано на Фіг. 5, кристалічна форма Е (гідрат) заявленої сполуки демонструє характеристичні піки при куті дифракції 2θ(°) 6,6, 8,3, 11,1, 14,6 та 18,2° у порошковій рентгенівській дифрактограмі. Крім того, кристалічна форма Е (гідрат) заявленої сполуки демонструє криву ДТА, зображену на Фіг. 6 та демонструє ендотермічний пік при 102 °C, тобто в діапазоні від 100 до 104 °C. Як показано на Фіг. 7, кристалічна форма А заявленої сполуки демонструє характеристичні піки при куті дифракції 2θ(°) 5,7, 7,4, 11,3 та 12,0° у порошковій рентгенівській дифрактограмі. Крім того, кристалічна форма А заявленої сполуки демонструє криву ДТА, зображену на Фіг. 8 та демонструє ендотермічний пік при 139 °C, тобто в діапазоні від 137 до 141 °C. Як показано на Фіг. 9, кристалічна форма D заявленої сполуки демонструє характеристичні піки при куті дифракції 2θ(°) 5,8, 11,5, 11,8 та 23,0°. Крім того, кристалічна форма D заявленої сполуки демонструє криву ДТА, показану на Фіг. 10 та демонструє ендотермічний пік при 135 °C, тобто в діапазоні від 133 до 137 °C. Вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку для одержання порошкової рентгенівської дифрактогами можна проводити в умовах, вказаних нижче, використовуючи порошковий рентгенівський дифрактометр. Зразок для вимірювання отримували шляхом заповнення зразком матеріалу кювети для зразків (матеріал: силікон, глибина: 0,2 мм) та вирівнювання поверхні матеріалу зразка. "Умови порошкової рентгенівської дифракції" Джерело рентгенівського випромінювання: CuKά випромінювання з використанням вигнутого кристала монохроматора (графіт) Вихід: 40 кВ/50 мА Щілина розходження: 1/2° Вертикальна обмежуюча щілина: 5 мм Щілина розсіювання: 1/2° Приймаюча щілина: 0,15 мм Детектор: сцинтиляційний лічильник Режими сканування: 2θ/θ сканування, безперервне сканування Діапазон вимірювань (2θ): від 2 до 60° Швидкість сканування (2θ): 47 хв. Крок сканування (2θ): 0,02° Ендотермічний пік означає температуру на вершині піку на кривій ДТА. Вимірювання ТГ-ДТА використовується в даному документі для одержання кривої ДТА та може бути здійснено в умовах, що описані нижче, за допомогою аналізатора ТГ-ДТА. 3 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 "Умови ТГ-ДТА" Швидкість нагрівання: 5 °C/хв. Атмосфера: азот (швидкість потоку: 50 мл/хв.) Вимірювальна кювета: алюмінієва відкрита кювета Вага зразку: від 4 до 6 мг Кристалічна форма С заявленої сполуки може бути отримана розчиненням будь-якої форми заявленої сполуки в ароматичному розчиннику до концентрації від 0,1 до 5 мг/мл, переважно від 1 до 5 мг/мл та залишають стояти або перемішують отриманий розчин при температурі від 0 до 30 °C протягом від 1 до 30 днів. Кристалічну форму С заявленої сполуки можуть отримувати шляхом розчинення при нагріванні будь-якої форми заявленої сполуки в спиртовому розчиннику при температурі від 50 до 80 °C до концентрації переважно від 10 до 100 мг/мл, більш переважно від 50 до 80 мг/мл, додавши попередньо отриману кристалічну форму С, як кристал-затравку, до отриманого в результаті розчину, та потім перемішуванням розчину при температурі від 50 до 80 °C протягом від 1 до 48 годин, та далі від 0 до 30 °C протягом від 1 до 24 годин. Кристалічну форму В заявленої сполуки можуть отримувати шляхом розчинення будь-якої форми заявленої сполуки в спиртовому розчиннику до концентрації переважно від 20 до 100 мг/мл, більш переважно від 25 до 50 мг/мл та залишають стояти або перемішують отриманий розчин при температурі від 0 до 30 °C протягом від 1 до 30 днів. Кристалічну форму Е (гідрат) заявленої сполуки можуть отримувати шляхом додавання води в кількості переважно від 10 до 1000 мл, більш переважно від 3 до 100 мл на 1 г аморфної заявленої сполуки, щоб одержати суспензію, та перемішування суспензії при температурі від 0 °C до 30 °C протягом від 1 до 30 днів. Кристалічну форму А заявленої сполуки можуть отримувати шляхом розчинення будь-якої форми заявленої сполуки в толуолі з концентрацією переважно від 5 до 20 мг/мл, більш переважно від 10 до 15 мг/мл та залишаючи отриманий розчин стояти закритим герметично при температурі від 0 до 30 °C протягом від 1 до 30 днів. Кристалічну форму D заявленої сполуки можуть отримувати шляхом розчинення будь-якої форми заявленої сполуки, в спиртовому розчиннику або складноефірному розчиннику в концентрації переважно від 5 до 20 мг/мл, більш переважно від 10 до 15 мг/мл та залишаючи стояти або перемішуючи отриманий розчин при температурі від 0 до 30 °C протягом від 1 до 30 днів. Приклади описаних вище ароматичних розчинників включають бензол, хлорбензол, толуол, ксилол та кумол; та толуол або ксилол є переважними. Приклади описаних вище спиртових розчинників включають метанол, етанол, 1-пропанол, 2пропанол, 1-бутанол та 2-бутанол; та метанол, етанол або 2-пропанол є переважними. Приклади описаних вище складноефірних розчинників включають етилформіат, метилацетат, етилацетат, пропілацетат, ізопропілацетат та ізобутилацетат; та метилацетат, етилацетат або пропілацетат є переважними. Кристалічна форма заявленої сполуки може бути використана як фармацевтична, прийнятна для лікування та/або профілактики запального захворювання кишечника, алергічного дерматиту, розсіяного склерозу або лейкемії у ссавців (наприклад, миші, щура, хом'яка, кролика, собаки, мавпи, великої рогатої худоби, вівці та людини). Коли кристалічну форму заявленої сполуки клінічно вводять у вигляді фармацевтичної композиції, дозу кристалічної форми можуть відповідним чином вибирати в залежності від симптому, віку, маси тіла, статі, способу введення тощо. Наприклад, дозу від 0,01 мг до 5 г на день у випадку ін'єкційного розчину, та дозі від 0,1 мг до 10 г на день у випадку перорального препарату переважно вводять дорослому в перерахунку на діючий компонент, та можуть вводити одночасно або окремо, відповідно, в кілька прийомів. Коли кристалічну форму заявленої сполуки клінічно вводять у вигляді фармацевтичних препаратів, приклади препаратів включають пероральні препарати, такі як таблетки, капсули, гранули, порошки та сиропи, та парентеральні препарати, такі як інгаляції, ін'єкційні розчини, очні краплі, назальні спреї, супозиторії, мазі, креми, лосьйони та пластирі. Дані препарати можуть бути отримані у відповідності зі способами, які зазвичай використовують в галузі препаратів. У цьому випадку добавки, які, зазвичай, використовуються в галузі розробки, такі як наповнювачі, стабілізатори, консерванти, буферні агенти, солюбілізатори, емульгатори, розріджувачі та ізотонічні агенти, можуть бути змішані належним чином, якщо необхідно. Приклади фармацевтично прийнятних носіїв та розріджувачів, які використовують для приготування вищеописаних препаратів включали зв'язуючі (сиропи, желатин, гуміарабік, метилцелюлозу, гідроксипропілцелюлозу, гідроксипропілметилцелюлозу, сорбіт, 4 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 полівінілпіролідон, полівініловий спирт, трагакантову камедь, тощо), наповнювачі (сахарозу, лактозу, D-маніт, еритрит, кристалічну целюлозу, етилцелюлозу, кукурудзяний крохмаль, фосфат кальцію, сорбіт, гліцин, тощо), розпушувачі (частково прежелатинізований крохмаль, натрій кроскармелозу, кросповідон та низькозаміщену гідроксипропілцелюлозу) та лубриканти (стеарат магнію, поліетиленгліколь, тальк, діоксид кремнію, складні ефіри сахарози та жирних кислот, тощо). Фармацевтичний препарат, що містить як діючий компонент кристалічну форму заявленої сполуки, містить кристали переважно в кількості від 0,001 до 90 % за масою, більш переважно в кількості від 0,01 до 70 % за масою на одиничну дозу. Для контролю продуктивності, сумісності та розчинності фармацевтичних препаратів, кристалічні форми заявленої сполуки можуть бути перемішані після подрібнення. Подрібнені кристали заявленої сполуки мали розподіл часток за діаметром, в якому D90 становить переважно не більше, ніж 1000 мкм, а більш переважно не більше, ніж 100 мкм. Термін "D90" в даному документі означає діаметр частинок у точці, де об'єм якого в сукупності вимірюється від більш дрібних частинок та досягає 90 %, тобто точка, в якій накопичена частота об'ємного розподілу досягає 90 %. Способи подрібнення кристалів заявленої сполуки включають подрібнення з енергією потоків в таких млинах, як струменевий млин та ударні млини, такі як молотковий млин, стрижневий млин та кульковий млин. Приклади Представлений винахід тепер буде конкретно описано за допомогою прикладів, але представлений винахід не обмежується даними прикладами. (Приклад посилання 1): Одержання аморфної заявленої сполуки. Заявлену сполуку (1 г), отримана за способом, описаним в патентній літературі 1, розчиняли в метанолі (10 мл) та після концентрування отриманого результаті розчину у випарнику, концентрат висушували при зниженому тиску із використанням вакуумного насоса протягом трьох днів для одержання аморфної сполуки. (Приклад посилання 2): Одержання аморфної заявленої сполуки. Заявлену сполуку (1 г), отриману за способом, описаним в патентній літературі 1, розчиняли в тетрагідрофурані (10 мл) та після концентрування отриманого розчину у випарнику, концентрат висушували при зниженому тиску з використанням вакуумного насоса протягом одного дня для одержання аморфної заявленої сполуки. (Приклад посилання 3): Одержання етилового ефіру (S)-2-(2,6-діхлорбензоіламіно)пент-4енової кислоти (інша назва: етиловий ефір (S)-2-(2,6-дихлорбензамід)пент-4-енової кислоти). Тозилат етилового ефіру L-аллілгліцину (100 г) зважували та додавали в колбу на 2000 мл, а після заміни атмосфери в колбі на аргон, толуол (500 мл) та триетиламін (88,5 мл) додавали до нього, щоб отримати суспензію. Суспензію охолоджували до 0 °C та потім по краплях додавали 2,6-діхлорбензоїлхлорид (50,0 мл) протягом 20 хв. з наступним перемішуванням отриманого в результаті розчину при 0 °C протягом 45 хвилин. До реакційного розчину додавали гідрокарбонат натрію (56 г), розчинений у воді (850 мл), та отриманий в результаті розчин перемішували та потім розділяли на шари. Водний шар екстрагували толуолом (400 мл) та органічні шари потім об'єднували та промивали водою (400 мл). Органічний шар концентрували до 285 мл при зниженому тиску, та отриманий в результаті розчин в толуолі, охолоджували до 0 °C. До розчину по краплях додавали гептан (1000 мл), та отриманий в результаті розчин перемішували при 0 °C протягом двох годин. Кристали виділяли фільтрацією та промивали охолодженим кригою гептаном (200 мл), з подальшою сушкою при зниженому тиску з одержанням 88,3 г етилового ефіру (S)-2-(2,6-діхлорбензоіламіно)пент-4-енової кислоти (вихід: 88 %). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 1,31 (3Н, т, J=7,1 Гц), 2,66 (1Н, м), 2,80 (1H, м), 4,204,30 (2Н, м), 4,93 (1H, дд, J=5,4, 5,4, 7,8 Гц), 5,15 (1H, д, J=9,8 Гц), 5,19 (1H, д, J=15,6 Гц), 5,78 (1H, м), 6,41 (1H, шд, J=5,4 Гц), 7,25-7,34 (3H, м). (Приклад посилання 4): Одержання етилового ефіру (S,E)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти. 5 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Після заміни атмосфери на аргон в колбу ємністю 500 мл, додавали N,N-диметилформамід (144 мл) та етанол (16 мл). Потім, етиловий ефір (S)-2-(2,6-діхлорбензоіламіно)пент-4-енової кислоти (16,0 г), отриманий в прикладі посилання 3, N-(4-йодфеніл)-N-метил-2-піримідиніламін (інший назва: N-(4-йодфеніл)-N-метилпіримідин-2-амін) (16,5 г), описаний в патентній літературі 1, тетра-н-бутіламонію бромід (16,3 г), карбонат калію (14,0 г) та ацетат паладію (230 мг) послідовно додавали в колбу, та після успішної заміни атмосфери в системі аргоном, отриманий в результаті розчин перемішували при 50 °C протягом 18 годин. Реакційний розчин охолоджували до кімнатної температури, та потім додавали до нього воду (320 мл), після чого екстрагували етилацетатом (265 мл). Екстракт двічі промивали 5 % водним розчином тіосульфату натрію (80 мл), потім двічі 5 % водним розчином хлориду натрію (80 мл), а потім екстракт концентрували при зниженому тиску до маси розчину приблизно 75 г. Процедуру, в якій етанол (100 мл) додавали до концентрату та отриманий в результаті розчин концентрували при зниженому тиску до приблизно 75 г, повторювали три рази, та до отриманого етанольного розчину додавали активоване вугілля (8,0 г) з подальшим перемішуванням при кімнатній температурі протягом 30 хвилин. Активоване вугілля видаляли фільтрацією і промивали етанолом (10 мл). До фільтрату додавали активоване вугілля (4,0 г) і після перемішування отриманого продукту при кімнатній температурі протягом 30 хвилин, активний вугілля видаляли фільтрацією і промивали етанолом (10 мл). Фільтрат концентрували при зниженому тиску до 78 г, та отриманий етанольний розчин нагрівали до 50 °C. Після додавання по краплях дистильовану воду (30 мл) до розчину, отриманий в результаті розчин охолоджували до кімнатної температури та додатково охолоджували до 0 °C з наступним перемішуванням розчину протягом однієї години. Кристали видаляли фільтруванням, промивали охолодженою кригою сумішшю етанолу і води у співвідношенні 2:1 (20 мл), а потім сушили при зниженому тиску з одержанням 18,3 г етилового ефіру (S,E)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти (вихід: 73 %). 1H NMR (400 МГц, CDCl3) δ 1,32 (3H, т, J=7,1 Гц), 2,84 (1H, м), 2,97 (1H, м), 3,51 (3H, с), 4,25 (1H, м), 4,28 (1H, м), 5,01 (1H, м), 6,11 (1H, дт, J=15,6, 7,6 Гц), 6,48 (1H, м), 6,52 (1H, д, J=15,6 Гц), 6,58 (1H, т, J=4,6 Гц), 7,24-7,37 (7H, м), 8,33 (2H, д, J=4,6 Гц), (Приклад 1): Одержання кристалічної форми C заявленої сполуки. Аморфну форму заявленої сполуки (30 мг), отриману в прикладі посилання 1, зважували та додавали в ємність з боросилікатного скла, та добавляли толуол (15 мл) з наступним перемішуванням отриманого в результаті продукту при кімнатній температурі, до розчинення сполуки. Отриманий в результаті розчин залишали стояти при кімнатній температурі у відкритому стані. Після підтвердження утворення осаду, розчинник видаляли за допомогою піпетки Пастера та осад сушили при зниженому тиску з використанням вакуумного насоса протягом 30 хвилин з одержанням білого порошку зазначеної в заголовку кристалічної форми. Для отриманих кристалів проводили вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку з використанням порошкового рентгенівського дифрактометра (Rigaku Ultima; 2200/RINT+PC) та ТГ-ДТА за допомогою ТГ-ДТА аналізатора (Rigaku); TG810D. Результати цих вимірювань наведені на Фіг. 1 та на Фіг. 2. Кут дифракції 2θ: 17,1, 17,7, 18,7, 19,9, 21,0° ендотермічний пік: 180 °C. (Приклад 2): Одержання кристалічної форми C заявленої сполуки. В колбу об'ємом 500 мл, зважували та додавали (5,50 г) етилового ефіру (S,E)-2-(2,6дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент-4-енової кислоти, отриманого в прикладі посилання 4, та додавали 4 моль/л соляної кислоти (110 мл) з наступним перемішуванням отриманої суспензії при 50 °C протягом 6 годин. Після охолодження реакційного розчину до 0 °C, додавали етанол (50 мл) та далі туди додавали гідроксид натрію (18,5 г), розчинений у воді (50 мл) з наступним перемішуванням отриманого в результаті реакційного розчину при кімнатній температурі протягом 20 хвилин. Реакційний розчин 6 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 охолоджували до 0 °C, та після додавання 4 моль/л хлористоводневої кислоти для доведення рН розчину до приблизно 3, отриманий в результаті розчин екстрагували етилацетатом (150 мл). Екстракт промивали водою (100 мл) та концентрували при зниженому тиску. До концентрату добавляли етанол (100 мл) та, після концентрування отриманого в результаті розчину до 18 г, та додавали гептан (15 мл) з наступним перемішуванням розчину при кімнатній температурі. Кристали видаляли фільтруванням та сушили при зниженому тиску з одержанням 4,62 г неочищених кристалів (вихід: 89 %). Отримані неочищені кристали (4,20 г) зважували та додавали в 200 мл колбу, та додавали 2-пропанол (56 мл), з подальшим нагріванням отриманого в результаті розчину при перемішуванні. Після підтвердження розчинення при 73 °C, розчин почали охолоджувати. Затравочні кристали (190 мг) додавали при 70° C, розчин охолоджували до 55 °C та перемішували при 55 °C протягом 12 годин. Потім розчин охолоджували до 0 °C та перемішували при 0 °C протягом 18 годин. Кристали видаляли фільтрацією та промивали 2пропанолом, та сушили з одержанням 3,85 г кристалів форми C заявленої сполуки (вихід: 92 %). Для отриманих кристалів проводилися вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку та ТГ-ДТА, та було підтверджено, що результати узгоджуються з Фіг. 1 і Фіг. 2. (Приклад 3): Одержання кристалічної форми В заявленої сполуки. Аморфну форму заявленої сполуки (30 мг), отриману в Прикладі посилання 2, зважували та додавали в ємність з боросилікатного скла, та додавали до них метанол (1,1 мл) з наступним перемішуванням отриманої в результаті суміші при кімнатній температурі до розчинення сполуки. Суміш залишали стояти при кімнатній температурі у відкритому стані. Після підтвердження осадження, розчинник видаляли за допомогою піпетки Пастера, та осад сушили при зниженому тиску з використанням вакуумного насоса протягом 30 хвилин з одержанням білого порошку форми В сполуки. Для отриманих кристалів проводили вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку та ТГ-ДТА. Результати цих вимірювань наведені на Фіг. 3 та Фіг. 4. Кут дифракції 2θ: 5,9, 8,3, 11,8, 13,2, 21,7°, Ендотермічний пік: 169° C. (Приклад 4): Одержання кристалічної форми Е (гідрат) заявленої сполуки. Аморфну форму заявленої сполуки (30 мг), отриману в Прикладі посилання 1, зважували та додавали в ємність з боросилікатного скла, та додавали воду (10 мл) з наступним перемішуванням отриманої в результаті суспензії протягом ночі. Тверді речовини видаляли шляхом фільтрації з суспензії, з отриманням білого порошку форми Е (гідрату) заявленої сполуки. Для отриманих кристалів проводили вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку та ТГ-ДТА. Результати цих вимірювань наведені на Фіг. 5 та Фіг. 6. Кут дифракції 2θ: 6,6, 8,3, 11,1, 14,6, 18,2° ендотермічний пік: 102 °C. (Приклад 5): Одержання кристалічної форми А заявленої сполуки. Аморфну форму заявленої сполуки (30 мг), отриману в Прикладі посилання 2, зважували та додавали в ємність, виготовлену з боросилікатного скла, та додавали толуол (3 мл) з наступним перемішуванням отриманої в результаті суміші при кімнатній температурі, до розчинення сполуки. Потім ємність з боросилікатного скла закривали герметично та залишали стояти при кімнатній температурі. Після підтвердження осадження, розчинник видаляли за допомогою піпетки Пастера, та осад сушили при зниженому тиску з використанням вакуумного насоса протягом 30 хвилин з одержанням білого порошку форми заявленої сполуки. Для отриманих кристалів проводили вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку та ТГ-ДТА. Результати даних вимірювань наведені на Фіг. 7 та Фіг. 8. Кут дифракції 2θ: 5,7, 7,4, 11,3, 12,0°. Ендотермічний пік: 139 °C. (Приклад 6): Одержання кристалічної форми D заявленої сполуки. Аморфну форму заявленої сполуки (30 мг), отриману в Прикладі посилання 1, зважували та додавали в ємність, виготовлену з боросилікатного скла, та додавали етанол (2 мл) з наступним перемішуванням отриманої в результаті суміші при кімнатній температурі, до розчинення сполуки. Суміш залишали стояти при кімнатній температурі у відкритому стані. Після підтвердження осадження, розчинник видаляли за допомогою піпетки Пастера, та осад сушили при зниженому тиску з використанням вакуумного насоса протягом 30 хвилин з одержанням білого порошку форми D заявленої сполуки. Для отриманих кристалів проводили вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку та ТГ-ДТА. Результати даних вимірювань показані на Фіг. 9 та Фіг. 10. Кут дифракції 2θ: 5,8, 11,5, 11,8, 23,0°. Ендотермічний пік: 135 °C. (Приклад дослідження 1): Оцінка поглинання вологи. Кількість зразка: від 5 до 12 мг Температура вимірювання: 25 °C Рівновага маса/час: 0,01 мас%/5 хвилин 7 UA 111213 C2 5 10 Максимальний час врівноважування: 180 хвилин Діапазон вимірювань: 5 % відносної вологості - 95 % відносної вологості -5 % відносної вологості Інтервал вимірювання: 5 % відносної вологості. Також, для того, щоб оцінити чи змінилась кристалічна форма, проводилися вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку для кожної кристалічної форми А, форми В, форми С, форми D та форми Е (гідрату), отриманих після тесту щодо оцінки поглинання вологи. Результати показані в таблиці 1. Тільки для кристалічної форми А, діапазон вимірювань (2θ) вимірювання рентгенівської дифракції на порошку був змінений від 2 до 35°, та вимір проводили при 25 °C, 90 % відносної вологості. Для контролю вологості, був використаний генератор вологості (HUM-1A; виробництва Rigaku). Таблиця 1 Кристалічна форма Збільшення ваги 1) Зміна в кристалічній формі 15 20 25 30 35 40 45 Форма A Форма B 3,4 % 1,9 % Змінена 2) Не змінена Форма C Менше ніж 0,1 % Не змінена Форма D Форма E 1,0 % 0,4 % Не змінена Не змінена 1): Збільшення маси означає одне спостережене збільшення маси, коли відносна вологість була збільшена від 5 % до 95 %. 2): Кристалічна форма була переведена у гідрат, відмінний від кристалічної форми Е (гідрату), коли відносна вологість була збільшена з 5 % до 95 %. Як показано в таблиці 1, для кристалічної форми В, форми С, форми D і форми Е (гідрату) заявленої сполуки, маса, що збільшується за рахунок зволоження істотно не змінилася, та кристалічні форми не були змінені. Дані результати показали, що кристалічна форма В, форма С, форма D та форма Е (гідрат) заявленої сполуки мали чудову фізичну стабільність. (Приклад дослідження 2): Оцінка стабільності в твердому стані. Аморфну форму та кристалічну форму А, форму В, форму С, форму D та форму Е (гідрат) заявленої сполуки зберігали герметично при 60 °C протягом чотирьох тижнів, та їх чистоту до і після зберігання вимірювали за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (надалі іменується як "ВЕРХ") за наступних умов. Порошкову рентгенівську дифракцію та ТГ-ДТА виконували, щоб оцінити, чи зміни в кристалічних формах були пов'язані або не пов'язані зі зберіганням. Результати показані в Таблиці 2. Водний розчин дигідрофосфату натрію в концентрації 20 ммоль/л (надалі іменується "водний розчин НДФ"), використований для одержання рухомої фази ВЕРХ готували шляхом додавання дистильованої води (3 л) до зваженого дигідрату дигідрофосфату натрію (9,36 г) та перемішування отриманого в результаті розчину до розчинення дигідрату. Аналітичний зразок ВЕРХ готували зважуванням та додаванням кожної кристалічної форми (1,75 мг) заявленої сполуки в 10 мл мірну колбу відповідно; додаванням ацетонітрилу (2 мл) до нього, до розчинення кристалів, та потім додаванням до нього водного розчину НДФ до загального об'єму 10 мл. > Реєстрація на довжині хвилі: 210 нм Колонка: YMC-Pack Pro C18 AS-303 Рухома фаза А: водний розчин НДФ/ацетонітрил = 80:20 (об'єм/об'єм) Рухома фаза В: ацетонітрил/водний розчин НДФ = 70:30 (об'єм/об'єм) Склад рухомої фази B: від 0 до 60 хвилин: 0 → 100 % Від 60 до 65 хвилин: 100 %, Від 65 до 66 хвилин: 100 → 0 %, Від 66 до 75 хвилин: 0 % Швидкість потоку: 1,0 мл/хв. Температура колонки: 40° C Кількість впорскнутого зразку: 20 мкл. 8 UA 111213 C2 Таблиця 2 Кристалічна форма Форма A Форма B Форма C Форма D Форма E Аморфна Чистота [%] Початкове 97,3 99,8 98,9 98,0 96,6 95,8 значення Після 4 97,5 99,8 98,9 98,0 96,9 92,0 тижнів Продукт розкладання, що відсутній відсутній відсутній відсутній відсутній 8 різних 1) зріс не менше ніж на продуктів 0,15 % після 4 тижнів Кристалічна форма після Форма B Форма B Форма C Суміш Форма E Аморфна 4 тижнів кристалічних 2) форм 5 10 15 20 25 30 35 40 45 1): Збільшення кількості кожного продукту розкладання, який збільшився не менше ніж на 0,15 %, становило 0,49 % для продукту розкладання з 0,9 відносного часу утримування (надалі іменується "ВЧУ"), 0,20 % для продукту розкладання з ВЧУ 1,0, 0,23 % для продукту розкладання з ВЧУ 1,1, 0,20 % для продукту розкладання з ВЧУ 1,2, 0,15 % для продукту розкладання з ВЧУ 1,6, 1,30 % для продукту розкладання з ВЧУ 1,8 та 0,22 % та 0,20 % для двох продуктів розкладання з ВЧУ 2,3. "ВЧУ" розраховується шляхом ділення часу утримування продукту розкладання в хроматограмі ВЕРХ на час утримування заявленої сполуки в хроматограмі ВЕРХ. 2): Суміш кристалічної форми В, форми С, форми D та форми Е. Як показано в Таблиці 2, чистота кристалічної форми А, форми В, форми С, форми D та форми Е (гідрату) заявленої сполуки істотно не змінилися. Дані результати показали, що кристалічна форма А, форма В, форма С, форма D та форма Е (гідрат) заявленої сполуки мають чудову хімічну стабільність в порівнянні з аморфною формою. Кристалічні форми форми В, форми С та форми Е (гідрат) заявленої сполуки не змінилися при зберіганні. Дані результати показали, що кристалічні форми форми В, форми С та форми Е (гідрат) заявленої сполуки мають також відмінну фізичну стабільність. (Приклад дослідження 3): Дослідження стабільності при зберіганні (Прискорені випробування) кристалічної форми С. Кристалічну форму С заявленої сполуки зберігали в умовах прискорення (40 °C, 75 % відносної вологості) герметично закриту або у відкритому стані протягом шести місяців, та чистоту кристалічної форми до і після зберігання вимірювали за допомогою ВЕРХ в умовах, зазначених нижче. Проводили вимірювання дифракції рентгенівських променів на порошку та ТГ-ДТА для оцінки того, чи була змінена кристалічна форма чи ні в результаті зберігання Фосфатний буфер в концентрації 20 ммоль/л (рН 3,9) (далі називається, як "Буфер X"), який використовують для одержання як рухомої фази ВЕРХ, готували шляхом додавання 20 ммоль/л водного розчину фосфорної кислоти до 20 ммоль/л водного розчину кислого фосфату калію. При цьому, 20 ммоль/л водного розчину дигідрофосфату калію отримували шляхом додаванням зваженого дигідрофосфату калію (8,2 г) в дистильованої воді (3 л) та перемішування отриманого в результаті розчину, до розчинення фосфату, та 20 ммоль/л водний розчин фосфорної кислоти отримували додаванням фосфорної кислоти (1,4 мл) в дистильовану воду (1 л) та змішуванням отриманого в результаті розчину при перемішуванні. Фосфатний буфер в концентрації 20 ммоль/л (рН 7,0) (далі називається, як "Буфер Y"), який використовують для одержання аналітичного зразку ВЕРХ, готували додаванням 20 ммоль/л водного розчину фосфорної кислоти до 20 ммоль/л водного розчину калію гідрофосфату. При цьому, 20 ммоль/л водного розчину калію гідрофосфату отримували при додаванні зваженого калію гідрофосфату (3,5 г) до дистильованої води (1 л) та перемішуванням отриманого в результаті розчину. Крім того, аналітичний зразок ВЕРХ готували зважуванням та додаванням кристалічної форми С заявленої сполуки (10 мг) в 50 мл мірну колбу та додаванням суміші Буфера Y й ацетонітрилу в співвідношенні 80:20 до загального об'єму 50 мл. В "the Guideline on Stability Testing" на основі угод на International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH), для оцінки стабільності якості, необхідної для підтримки ефективності та безпеки фармацевтичних препаратів, прискорене випробування (40 °C, 75 % відносної вологості, шість місяців) представляють як тест для передбачення хімічних впливів при зберіганні протягом 9 UA 111213 C2 5 10 15 тривалого часу за звичайних умов зберігання (наприклад, 25 °C), та одночасно, щоб підтвердити ефект короткострокового відхилення від умов зберігання, які відхилення можуть статися під час транспортування тощо. Дані отримані щодо прискореного випробування є незамінними в заявці для офіційного затвердження фармацевтичних препаратів. Реєстраціяна довжині хвилі: 210 нм Колонка: YMC-Pack Pro C18 AS12S05-2546WT Рухома фаза А: буфер X/ацетонітрил = 80:20 (об'єм/об'єм) Рухома фаза В: ацетонітрил/буфер X=70:30 (об'єм/об'єм) Склад рухомої фази B: від 0 до 80 хвилин: 0 → 100 % Від 80 до 85 хвилин: 100 %, Від 85 до 86 хвилин: 100 → 0 %, Від 86 до 95 хвилин: 0 % Швидкість потоку: 1,0 мл/хв. Температура колонки: 40° C Кількість впорскнутого зразку: 20 мкл. Таблиця 3 Умови зберігання 40 °C, 75 % відносної вологості, герметично, 6 місяців Початкове значення Після 6 місяців Продукт розкладання, що зростає не менше ніж на 0,15 % після 6 відсутній місяців Кристалічна форма після 6 місяців Форма C Чистота [%] 20 25 30 35 40 45 40 °C, 75 % відносної вологості, відкритий стан, 6 місяців 99,5 99,5 99,5 99,4 відсутній Форма C У результаті, як показано в таблиці 3, чистота заявленої сполуки після зберігання кристалічної форми С в умовах прискореного зберігання в герметично закритому або у відкритому стані протягом шести місяців не була істотно змінена в порівнянні з початковим ступенем чистоти. Кристалічна будова кристалічної форми С заявленої сполуки не була змінена в умовах зберігання. Оскільки якість кристалічної форми С не зазнала помітних хімічних та фізичних змін в прискорених випробуваннях, було показано, що кристалічна форма С є дуже стабільною та відмінною як діючий компонент лікарських препаратів з точки зору зберігання та розподілу. Крім того, було виявлено, що кристалічна форма С має чудову фізичну стабільність тому, що її кристалічна форма не була переведена в іншу форму навіть в розчинах (наприклад, толуолі, метанолі, 2-пропанолі прийнятних для використання в кристалізації заявленої сполуки). (Приклад 7): Одержання таблеток швидкого вивільнення з використанням кристалічної форми С. Продукт подрібнення кристалів кристалічної форми С на струменевому млині заявленої сполуки (14,17 г), D-маніт (35,98 г; Roquette Japan K.K.; PEARLITOL (зареєстрований товарний знак) 50C), кристалічну целюлозу (42,5 г; Asahi Kasei Corp.; CEOLUS; (зареєстрований товарний знак) класу PH-101), попередньо частково желатинізований крохмаль (42,5 г; Asahi Kasei Corp.; клас PCS), гідроксипропілцелюлозу (8,5 г; Nippon Soda; клас L), меглумін (8,5 г; Merck) та оксид магнію (8,5 г; Tomita Pharmaceutical Co.,Ltd.) подавали в змішувальний гранулятор (Nara Machinery Co, Ltd.; NMG-1L), та після змішування отриманого в результаті продукту, розпорошували воду (32,2 г) здійснюючи перемішування з грануляцією. Гранульовані порошки сушили в сушильній шафі при 40 °C протягом двох годин, щоб одержати гранули. Отримані гранули піддавали просіюванню на COMIL (Powrex Corporation; QC-197S; меш 1143 мкм; швидкість обертання 2000 обертів на хвилину), до отримання гранул, відсортованих за розміром. До отриманих гранул, відсортованих за розміром, додавали натрійкроскармелозу (8,5 г; FMC Biopolymer; Ac-Di-Sol (зареєстрований товарний знак)) та стеарат магнію (0,85 г; Taihei Chemical Industrial) та змішувані за допомогою V-подібного змішувача (Tsutsui Scientific Instruments Co, Ltd, S-3), з одержанням гранул для таблетування. Отримані гранули для таблетування були таблетовані за допомогою роторної таблетуючої машини (KIKUSUI SEISAKUSHO LTD.; Correct 19) з використанням пуансона круглої форми та матриці з діаметром 8 мм з одержанням 180 мг простих таблеток, що містять 15 мг заявленої сполуки, 38,1 мг D-маніту, 45 мг кристалічної целюлози, 45 мг частково прежелатинізованого крохмалю, 9 10 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 мг гідроксипропілцелюлози, 9 мг меглуміну, 9 мг оксиду магнію, 9 мг натрійкроскармелози та 0,9 мг стеарату магнію на одну таблетку. (Приклад 8): Одержання таблеток швидкого вивільнення з використанням кристалічної форми С. Продукт подрібнення кристалів кристалічної форми С на струменевому млині заявленої сполуки (41,67 г), лактозу (230,83 г; DMV International; Pharmatose (зареєстрований товарний знак) 200М), кристалічну целюлозу (175 г; Asahi Kasei Corp.; CEOLUS (зареєстрований товарний знак) клас PH-101) та гідроксипропілцелюлозу (25 г; Nippon Soda; клас L) подавали в змішувальній гранулятор (Nara Machinery Co, Ltd; NMG-3L), та після змішування отриманого в результаті продукту, розпорошували воду (32,2 г), здійснюючи перемішування з грануляцією. Гранульовані порошки сушать в сушильній шафі при 40 °C протягом двох годин з одержанням гранул. Отримані гранули просівали з розміром отворів 1 мм, натрійкроскармелозу (25 г; FMC Biopolymer; Ac-Di-Sol (зареєстрований товарний знак)) та стеарат магнію (2,5 г; Taihei Chemical Industrial) додавали до них, та змішували за допомогою V-подібного змішувача (Tsutsui Scientific Instruments, Ltd, S-3) з одержанням гранул для таблетування. Отримані гранули для таблетування були таблетовані за допомогою роторної таблетуючої машини (KIKUSUI SEISAKUSHO LTD.; Correct 19) з використанням пуансона круглої форми та матриці з діаметром 8 мм з одержанням 180 мг простих таблеток, що містять 15 мг заявленої сполуки, 83,1 мг лактози, 63 мг кристалічної целюлози, 9 мг гідроксипропілцелюлози, 9 мг натрійкроскармелози та 0,9 мг стеарату магнію на одну таблетку. (Приклад 9): Одержання таблеток швидкого вивільнення з використанням кристалічної форми С. Продукт подрібнення кристалів кристалічної форми С заявленої сполуки на струменевому млині (107,14 г), лактозу (165,36 г; DMV International; Pharmatose (зареєстрований товарний знак) 200M), кристалічну целюлозу (175 г; Asahi Kasei Corp.; CEOLUS (зареєстрований товарний знак) клас PH-101) і гідроксипропілцелюлозу (25 г; Nippon Soda; клас L) подавали в змішувальній гранулятор (Nara Machinery Co, Ltd; NMG-3L), та після змішування, розпорошували воду (100 г) здійснюючи перемішування з грануляцією. Гранульовані порошки сушать в сушильній шафі при 40 °C протягом двох годин з одержанням гранул. Отримані гранули просівали через сито з розміром отворів 1 мм, натрійкроскармелозу (25 г; FMC Biopolymer; Ac-Di-Sol (зареєстрований товарний знак)) і стеарат магнію (5 г; Taihei Chemical Industrial) додавали до них, та змішували з допомогою V-подібного змішувача (Tsutsui Scientific Instruments, Ltd, S-3) з одержанням гранул для таблетування. Отримані гранули для таблетування таблетували за допомогою роторної таблетуючої машини (Kikusui Seisakusho Ltd;. Правильне 19) з використанням пуансона круглої форми та матриці з діаметром 7 мм з одержанням 140,7 мг простих таблеток. Отримані прості таблетки поміщали в машину для нанесення плівкового покриття (Freund Corporation; Hicoater MINI) та обприскували рідиною, в якій були дисперговані OPADRY (зареєстрований товарний знак) OY-7300 (Японія Colorcon; суміш гідроксипропілметилцелюлози 2910, оксиду титану і поліетиленгліколю 400), червоний оксид заліза (Kishi KASEI Co.) і жовтий оксид заліза (Kishi KASEI Co.), отримуючи таблетки з плівковим покриттям, що містять 30 мг заявленої сполуки, 46,3 мг лактози, 49 мг кристалічної целюлози, 7 мг гідроксипропілцелюлози, 7 мг натрійкроскармелози, 1,4 мг стеарату магнію, 3,88 мг OY-7300, 0,08 мг червоного оксиду заліза та 0,03 мг жовтого оксиду заліза на одну таблетку. (Приклад 10): Одержання таблеток швидкого вивільнення з використанням кристалічної форми С Продукт подрібнення кристалів кристалічної форми С на струменевому млині заявленої сполуки (2,86 г), лактозу (2662,9 г; DMV International; Pharmatose (зареєстрований товарний знак) 200M) та кристалічну целюлозу (1000 г; Asahi Kasei Corp.; CEOLUS (зареєстрований товарний знак) клас PH-101) загружали в гранулятор з псевдозрідженим шаром/сушарку (Freund Corporation; FLO-5) та гранулювали з розпиленням водного розчину 7 % (мас./об'єм) гідроксипропілцелюлози (1633 г, Nippon Soda; клас L) в умовах псевдозрідження, а потім сушили з одержанням гранул. Отримані гранули піддавали просіюванню на COMIL (Powrex Corporation; QC-197S; меш 1575 мкм; швидкість обертання 2000 обертів на хвилину), щоб отримати гранули, вибрані за розміром. До отриманих гранул, вибраних за розміром, додавали натрій-кроскармелозу (200 г; FMC Biopolymer; Ac-Di-Sol (зареєстрований товарний знак)) та стеарат магнію (20 г; Taihei Chemical Industrial), та змішували за допомогою V-подібного змішувача (Dalton, Ltd, DV-1-10) до отримання гранул для таблетування. Отримані гранули для таблетування були таблетовані за допомогою роторної таблетуючої машини (KIKUSUI SEISAKUSHO LTD.; Correct 19) з використанням пуансона круглої форми та матриці з діаметром 7 мм з одержанням 140 мг простих таблеток. Отримані прості таблетки загружали в 11 UA 111213 C2 5 10 15 20 25 30 35 машину для нанесення плівкового покриття (Freund Corporation; HICOATER MINI), в якій обприскували рідиною, в якій були дисперговані OPADRY (зареєстрована торгова марка) OY7300, червоний оксид заліза (Кіші KASEI CO.) та жовтий заліза оксид (Kishi KASEI Co.), отримуючи таблетки з плівковим покриттям, що містять 0,1 мг заявленої сполуки, 93,2 мг лактози, 35 мг кристалічної целюлози, 4 мг гідроксипропілцелюлози, 7 мг натрійкроскармелози, 0,7 мг стеарату магнію, 3,88 мг OY-7300, 0,08 мг червоного оксиду заліза та 0,03 мг жовтого оксиду заліза на одну таблетку. Розміри подрібнених частинок кристалічної Форма C заявленої сполуки, що використовуються в прикладах 7-10 були виміряні за допомогою "Microtrac particle size analyzer (Nikkiso Co., Ltd.; 9220FRA; мокрий процес). Розподіл розміру часток подрібненої кристалічної форми C заявленої сполуки були D10: 7,0 мкм, D50: 21,9 мкм, D90: 56,4 мкм для контактного подрібненого продукту, а D10: 1,7 мкм, D50: 3,4 мкм, D90: 5,8 мкм або D10: 2,1 мкм, D50: 3,9 мкм, D90:… 6,6 мкм для струменево подрібненого продукту. Підтверджено вимірювання порошкової рентгенівської дифракції та ТГ-ДТА, що ніяких змін в кристалічній формі у зв'язку з вищезазначеним подрібненням не відбувається. (Приклад дослідження 4): Оцінювання стабільності фармацевтичних композицій при зберіганні. Таблетки, отримані в прикладах з 7 по 10, зберігали при 40 °C тавідносній вологості 75 %, закриті герметично, протягом трьох місяців, та вимірювали їх чистоту до і після зберігання за допомогою ВЕРХ при наведених нижче умовах. Результати показані в таблиці 4. Як аналітичний зразок для ВЕРХ, використовували супернатант, який був отриманий шляхом додавання 10 таблеток або однієї таблетки до суміші буфера Y та ацетонітрилу в співвідношенні 80:20 до концентрації заявленої сполуки 50 або 300 мкг/мл, та перемішуванням, та центрифугуванням отриманого продукту. > Реєстрація на довжині хвилі: 210 нм Колонка: YMC-Pack Pro C18 AS12S05-2546WT Рухома фаза А: буфер X /ацетонітрил = 80:20 (об'єм/об'єм) Рухома фаза В: ацетонітрил/буфер X=70:30 (об'єм/об'єм) Склад рухомої фази B: від 0 до 80 хвилин: 0 → 100 % Від 80 до 85 хвилин: 100 % Від 85 до 86 хвилин: 100 → 0 % Від 86 до 95 хвилин: 0 % Швидкість потоку: 1,0 мл/хв. Температура колонки: 40 °C. Кількість впорскнутого зразку: 20 мкл (концентрація заявленої сполуки становить 300 мкг/мл) або 80 мкл (концентрація заявленої сполуки становить 50 мкг/мл). Таблиця 4 Чистота [%] Початкове значення Після зберігання протягом 3 місяців 40 45 50 Приклад 7 98,9 Приклад 8 98,9 Приклад 9 99,8 Приклад 10 99,6 98,9 99,0 99,7 99,6 Хоча деякі кристали є хімічно стабільними як діючі компоненти фармацевтичних препаратів, кристалічні форми можуть бути дестабілізованими в результаті контакту з різними добавками в остаточному вигляді фармацевтичних препаратів, таких як таблетки, що може негативно вплинути на збереження ефективності та безпеки фармацевтичних препаратів. Однак, як показано в таблиці 4, для всіх таблеток, що містять кристалічну форму C заявленої сполуки як діючий компонент, чистота кристалів після зберігання герметично закритих в прискорених умовах протягом трьох місяців, не були істотно змінені порівняно з вихідним ступенем чистоти. Дані результати показали, що кристалічна форма C заявленої сполуки є чудовою за хімічною стабільністю навіть після того, як кристали, що формулювали, проходили через стадію тонкого подрібнення. Промислова придатність. Кристалічна форма заявленої сполуки може бути використана як фармацевтичний засіб, зокрема, терапевтичний або профілактичний засіб для запального захворювання кишечника, алергічного дерматиту, розсіяного склерозу або лейкемії в галузі медицини. 12 UA 111213 C2 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 5 10 15 20 25 1. Кристалічна форма (S,Е)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент4-енової кислоти, яка має піки порошкової дифракції рентгенівської дифрактограми, одержаної із застосуванням CuKα-випромінювання, з кутами 2θ (°), які складають 17,1°, 17,7°, 18,7°, 19,9° і 21,0°. 2. Кристалічна форма за п. 1, яка в термогравіметрично-диференційному термічному аналізі при нагріванні із швидкістю 5 °C/хв. має ендотермічний пік в діапазоні від 178 до 182 °C. 3. Кристалічна форма (S,Е)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент4-енової кислоти, яка має піки порошкової дифракції рентгенівської дифрактограми, одержаної із застосуванням CuKα-випромінювання, з кутами 2θ (°), які складають 5,9°, 8,3°, 11,8°, 13,2° і 21,7°. 4. Кристалічна форма за п. 3, яка в термогравіметрично-диференційному термічному аналізі при нагріванні із швидкістю 5 °C/хв. має ендотермічний пік в діапазоні від 167 до 171 °C. 5. Кристалічна форма (S,Е)-2-(2,6-дихлорбензамід)-5-[4-(метилпіримідин-2-іламіно)феніл]пент4-енової кислоти, яка має піки порошкової дифракції рентгенівської дифрактограми, одержаної із застосуванням CuKα-випромінювання, з кутами 2θ (°), які складають 6,6°, 8,3°, 11,1°, 14,6° і 18,2°. 6. Кристалічна форма за п. 5, яка в термогравіметрично-диференційному термічному аналізі при нагріванні із швидкістю 5 °C/хв. має ендотермічний пік в діапазоні від 100 до 104 °C. 7. Фармацевтична композиція, яка містить як діючий компонент вказану кристалічну форму за будь-яким з пп. 1-6. 8. Терапевтичний або профілактичний засіб, який застосовують при запальному захворюванні кишечнику, алергічному дерматиті, розсіяному склерозі або лейкемії, що містить як діючий компонент вказану кристалічну форму за будь-яким з пп. 1-6. 13 UA 111213 C2 14 UA 111213 C2 15 UA 111213 C2 16 UA 111213 C2 17 UA 111213 C2 Комп’ютерна верстка Л. Литвиненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 18