Процес одержання та кількісного визначення полісахаридного комплексу з болиголова плямистого

Процес одержання та кількісного визначення полісахаридного комплексу з болиголова плямистого шля хом екстракції повітряно-сухої, подрібненої надземної частини болиголова плямистого, концентрування водної витяжки, осадження полісахаридного комплексу, відділення фільтрату, його промивання й висушування цільового продукту, визначення кількісного вмісту полісахаридів, встановлення якісного та кількісного співвідношення U 1 3 23879 4 тений методом высокоэффективной жидкостной ною, протиалергійною та цукрознижуючою дією та хроматографии"], що складається з екстракції реактивністю. човини з рослинного матеріалу, очищення й кількіКорисна модель пояснюється прикладами 1-5. сне визначення речовини, кількісне визначення Приклад 1. Запропонований процес одержанзмісту гиббереллової кислоти здійснюють за доня полісахаридного комплексу здійснюють наступпомогою високоефективної рідинної хроматограним чином. фії. - повітряно - суху, подрібнену надземну частиВідомий спосіб по пат. №2168170 ну рослини екстрагують водою, нагріваючи до [RU,G01N33/48, „Способ хроматографического 95°С на протязі 1 години при постійному змішуопределения полисахаридов в водной среде"]. ванні; Найбільш близьким до передбачуваної корис- повторне витяжкаання полісахаридів провоної моделі по технічній сутності й досягається редили двічі при співвідношенні сировина-екстрагент зультату, що, є пат. №2082168 [RU G01N33/50, от (1:1); 1997.06.20 „Способ обнаружения и количественнорослинний матеріал відокремлювали го определения экдистероидов в растительных центрифугуванням, а об'єднані екстракти упарюобъектах"], аналіз здійснюють шляхом тонкошаровали до 1/5 первинного об'єму; вої високоефективної рідинної або газорідинної - полісахаридний комплекс відокремлюють хроматографії. шляхом осадження 95% етанолом у співвідношенНедоліками цього способу є: трудомісткість ні 3:1 при кімнатній температурі; підготовки сировини до аналізу; необхідність готу- твердий осад, який випав, відфільтровували, вання скляних пластинок і труднощі відтворення промивали 96% етанолом, ацетоном; однорідності поверхні, що позначається на ре- потім висушували та зважували. зультатах аналізу; виявлення етанолу розчином Полісахаридний комплекс представляє собою ваніліну в сірчаній кислоті; велика витрата розчинаморфний порошок, темно - коричневого кольору ників при хроматографуванні. при розчиненні у воді утворюється опалесцентний В основу корисної моделі поставлене завданрозчин. ня спростити процес отримання полісахаридів з Таким чином, запропонований процес еконорослинної сировини, та скоротити термін якісного мічно доступний, забезпечує при наявності неободержання та кількісного визначення полісахарихідного виробничого встаткування комплексну педів. реробку рослинної сировини в короткий відрізок Поставлено завдання досягається тим, що почасу без втрати біологічно активних речовин. вітряно - суху, подрібнену надземну частину болиПолісахаридний комплекс дає позитивні реакголова плямистого екстрагують водою, причому ції осадження зі спиртом та ацетоном, з розчином екстракцію ведуть при температурі води до 95°С, у Фелінга у кислому середовищі. Кількісний вміст співвідношенні сировина екстрагент 1:1 на протязі полісахаридів визначали гравіметричним методом 1 години при постійному змішуванні, рослинний після фракціонування 95% спиртом. матеріал відокремлюють центрифугуванням, а Приклад 2. Полісахаридний комплекс отримуоб'єднані екстракти упарюють до 1/5 первинного ють, як описано в прикладі 1, а для визначення об'єму, полісахаридний комплекс осаджують 96% моносахаридного складу проводили гідроліз поліетанолом при кімнатній температурі в співвідносахаридів кислотою сульфатною (1моль/л) при шенні 3:1, твердий осад, який випав, відфільтротемпературі (100±2,5)°С. Кінетику гідролізу вивчавують, промивають 96% етанолом, ацетоном, поли експериментально. тім висушують та зважують, визначення Ідентифікацію моносахаридів у гідролізатах кількісного вмісту полісахаридів визначають гравіпроводили методами хроматографії на папері у метричним методом після фракціонування 95% системах: бутанол – піридин - вода (6:4:3) та етиспиртом, для встановлення моносахаридного лацетат - кислота оцтова кислота мурашина - вода складу проводять гідроліз полісахаридів кислотою (18:3:1:4), хроматографії у тонкому шарі сорбенту сульфатною (1моль/л) при температурі на силікагелі у системі: етилацетат - піридин - во(100±2,5)°С, ідентифікацію моносахаридів у гідрода - спирт бутиловий - кислота оцтова (5:4:4:10:2), лізатах проводять методами паперової, тонкошапаралельно з достовірними зразками. Хроматогрової та газорідинної хроматографії. рами після висушування на повітрі обробляли аніВідмінність запропонованого способу від відолінфталатним реактивом та нагрівали у сухо повімого полягає в тому, що екстракцію ведуть при тряній шафі при температурі (100±2,5)°С. Через 15 температурі води до 100°С і співвідношенні сирохвилин спостерігали наявність плям моносахаривинна - екстрагент 1:1, водний витяжка концентдів: глюкози, галактози, рамнози, які були забарврують до 1/5 обсягу ви хідної сировини при кімнатлені у коричневий колір та ксилози і по мономірній температурі, потім полісахаридний комплекс ному складу методом хроматографії у тонкому відокремлюють шляхом осадження 96% етанолом шарі сорбенту дозволили арабінози - забарвлених у співвідношенні 3:1, фільтрат упарюють до густоу рожевий колір. ти залишку зі змістом вологи, твердий осад, який Результати дослідження по мономірному випав, відфільтровують, промивають 96% етаноскладу методом хроматографії у тонкому шарі лом, ацетоном. сорбенту дозволили підтвердити дані, отримані Порівняння технічного рішення, що заявляєтьметодом хроматографії на папері. ся, з відомими показує, що вперше підібрано опПриклад 3. Методами хроматографії на папері тимальні режими одержання субстанції з високою та в тонкому шарі сорбенту паралельно з достовіпротипухлинною, імуномодулюючою, противірусрними зразками моносахаридів в гідролізатах по 5 23879 6 лісахаридного комплексу болиголова були іденгалактозу. тифіковані в нейтральній фракції слідуючи моноПриклад 6. Кількісний вміст кислих моносахасахариди: глюкоза, галактоза, арабіноза, ксилоза, ридів визначали спектрофотометричним методом, рамноза, а в кислій фракції -галактуронова та глюв основу якого покладений карабазольний метод. куронова кислоти. По величині плям на хроматогУ якості стандартного зразка використовували рамах та інтенсивності їх забарвлення, за поперегалактуронову кислоту. Результати аналізів преддньою оцінкою, основними по вмісту є арабіноза ставлені в Таблиці. та галактоза, а також галактуронова та глюкуроноТаким чином, з надземної частини болиголова ва кислоти. плямистого виділений та охарактеризований воДля визначення співвідношення моносахаридорозчинний полісахаридний комплекс, який складів в досліджуваних гідролізатах нейтральної фрадається, в основному, з галактуронової кислоти, кції були отримані ацетати поліолів достовірних галактози, арабінози з окремими включеннями зразків моносахаридів (глюкоза, галактоза, арабіглюкози, рамнози та ксилози. Це дозволяє віднесноза, ксилоза та рамноза) та ацетати поліолів моти досліджуваний полісахаридний комплекс до носахаридів у досліджуваних гідролізатах. Ці спогрупи глюкуроногликанів, які в останній час, як луки були ідентифіковані методом газорідинної природні біополі мери стали об'єктом дослідження хроматографіі. у всьому світі завдяки своїм протипухлинним, імуПриклад 4. Проведено визначення мінеральномодулюючим, противірусним, протиалергійним, ної частки комплексу. Вміст її складає близько цукрознижуючим та іншим цінним лікувальним 29,8% і вона представлена слідуючими катіонами ефектам. та аніонами: кальцій, магній, марганець, цинк, фоДосліджуваний полісахаридний комплекс може сфат, хлорид, суль фат. бути використаний для створення препаратів, які Приклад 5. Вміст суми відновлюючих моносаволодіють протипухлинною, імуномодулюючою, харидів визначали спектрофотометричним метопротивірусною, протиалергійною та цукрознижуюдом з пікриновою кислотою у лужному середовищі. чою дією. В якості стандартного зразка використовували Таблиця Полісахаридний комплекс болиголова Вихід, % 17,15±0,34 Комп’ютерна в ерстка Л. Купенко моль% Glu 15 Співвідношення Gal Аr 43 23 моносахари Кс 10 Rha 9 Підписне Вміст кислих моносахаридів, % 8,15±0,16 Вміст суми відновлюючих моносахаридів, % 10,21±0,25 Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601