Динатрієва сіль акридин-9-ілгідразону a-кетоглутарової кислоти, що проявляє антирадикальну та антиоксидантну активність

Динатрієва сіль акридин-9-ілгідразону a кетоглутарової кислоти формули: 2 3 24544 4 1670см -1, пл. dNH - 1595см -1, n NH – 3315см-1, n Alk 2925cм -1. Динатрієва сіль акридин-9-ілгідразону aкетоглутарової кислоти є жовтою кристалічною речовиною з температурою плавлення 280°С (з розкладанням), розчинна у воді, важко розчинна в диметиформаміді, спиртах, нерозчинна в ацетоні, ефірі, хлороформі. Летальна доза (ЛД50) визначалась на білих безпородних мишах вагою 18-25г за методом Кербера [Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования физиологически активных веществ.-М.: Медицина, 1974. - 143с.] при внутришньочеревинному введенні досліджуваної сполуки. ЛД50 для динатрієвої солі акридин-9-ілгідразону a-кетоглутарової кислоти складає 105,5±8,6мг/кг. Вивчення антирадикальної активності сполуки було проведено на моделі аутоокиснення адреналіну [Методи оцінки антиоксидантних властивостей фізіологічне активних сполук при ініціюванні вільнорадикальних процесів у дослідах in vitro. Методичні рекомендації /Ю.І. Губський, В.В. Дунаев, І.Ф. Бєленічев та ін. // МОЗ України. - Київ, 2002.- 26с.]. Реакція окислення адреналіну в адренохром, що відбувається в лужному середовищі, супроводжується накопиченням вільного аніон-радикала кисню О2-. Тому досліджувалася здатність сполуки „гасити" автоокислення адреналіну в адренохром (супероксидрадикал - СОР) у водному середовищі. - промивання осаду діетиловим ефіром; - перекристалізації солі з метанолу. Приклад одержання сполуки: готують розчин 1,35г (0,005моль) динатрієвої солі акридин-9ілгідразону a-кетоглутарової кислоти в 20мл метилового спирту та розчин натрію гідроксиду 0,8г (0,01моль), розчиненого в 5мл води. Отримані розчини зливають при перемішуванні на магнітній мішалці. Після розчинення осаду суміш фільтрують, фільтрат випарюють на водяній бані та промивають діетиловим ефіром. Отриману сіль кристалізують з метанолу. Вихід динатрієвої солі акридин-9-ілгідразону a-кетоглутарової кислоти 1,35г (85%). Брутто-формула сполуки – С18Н13N3Nа2O4 . М.м.=318,07. Знайдено: С-56,80; Н-3,50; N-11,40. Вирахувано: С-56,70; Н-3,44; N-11,02. Індивідуальність сполуки контролювалась і підтверджена методом тонкошарової хроматографії на пластинках "Silufol" у системі розчинників: бутанол-оцтова кислота-вода (2:1:5). Значення Rf100=72. Хімічну стр уктур у динатрієвої солі акридин-9ілгідразону a-кетоглутарової кислоти доведено за допомогою спектру ядерного магнітного резонансу ЯМР 1H (П МР). Дані, отримані з ПМР-спектру, розчинник – D2O, стандарт - ТМС, d-шкала, м.д.: 7,12-7,80 (5Н, аром. Н, м), 15,14 (NH, 1Н, с), 2,52 (СН3, 3Н, с), 2,72 (СН2, 2Н, т), 2,29 (CH 2, 2Н, т). Дані, отримані з ІЧ-спектру (таблетки калію броміду): n C=C, C=N - 1630см -1, 1605см -1, n COO Таблиця Антирадикальна та антиоксидантна активність Сполука динатрієва сіль акридин-9-ілгідразону aкетоглутарової кислоти Глутамінова кислота (аналог) Інтакт Контроль динатрієва сіль 2метилхінолін-4ілгідразону aкетоглутарової кислоти (прототип) Інтакт Контроль Дибунол Метіонін Унітіол Сечовина Fe2+-ПОЛ МДА, мкмоль/мл АОА,% НАДФН-ПОЛ МДА, мкмоль/мл АОА, % Інгібування СОР Оптична густина АОА,% 3,24 ± 0,10* 48 0,7010,05* 69 0,070 ± 0,001* 63 3,55 ± 0,21* 39 1,00 ± 0,09* 32 0,165 ± 0,002* 13 1,00 ± 0.09 5,18 ± 0,14 0,42 ± 0,07 1,27 ± 0,11 0,190 ± 0,002 3,09 ± 0,18* 41 0,87 ± 0,04* 65 0,160 ± 0,001* 27 0,33 ± 0,02 5,00 ± 0,14 3,68 ± 0,05* 37 0,61 ± 0,03 1,33 ± 0,07 1,03 ± 0,04* 1,00 ± 0,06* 28 32 0,220 ± 0,001 0,130 ± 0,004* 38 Примітка: * - р