8-n-(фурил-2)метиламіно-1-n-хлоробензилтеобромін, який виявляє діуретичну, протизапальну і антиоксидантну дію

8-N-(Фурил-2)метиламіно-1-nхлоробензилтеобромін, формули: 2 3 38873 Найближчим аналогом сполуки, що заявляється, може служити 1-бензил-8-Nпірролідинотеобромін (Романенко М.І., Іванченко Д.Г., Самура Б.В. та ін. // Запорізький мед. журн. 2006. - №3. - С.142-146.): O CH3 N O N N N N CH3 Сполука, що заявляється, відрізняється від найближчого аналога наявністю атому хлор у в пара-положенні бензильного замісника та наявністю в положенні 8 N-(фурил2)метиламінного залишку. На відміну від найближчого аналога сполука, що заявляється, виявляє значно вищі протизапальну, діуретичн у та антиоксидантну дії. В основу корисної моделі поставлена задача створення оригінальних вітчизняних препаратів діуретичної, протизапальної та антиоксидантної дії, які можуть бути використані для лікування серцево-судинних захворювань, корекції різноманітних вікових дисфункцій та інш. Вказана задача може бути вирішена синтезом 8-N-(фурил-2)метиламіно-1-nхлоробензилтеоброміну: O CH3 N Cl O N N N O CH3 Сполука, що заявляється, перевищує за показниками діуретичної, антиоксидантної дії найближчий аналог та еталони порівняння, а за показником протизапальної дії активність сполуки, що заявляється, практично дорівнює активності диклофенака та анальгіна. Одержують сполуку, що заявляється, взаємодією 8-бромо-1-n-хлоробензилтеоброміну з 2-амінометилфураном. Приклад 1. Етап 1. Синтез 8-бромо-1-nхлорбензилтеоброміну (II). Суміш 51,8г (0,2моль) 8-бромтеоброміну (І), 36мл (0,21моль) n-хлорбензилхлориду, 24,0г (0,22моль) безводного Na2CO3, 300мл диметилформаміду кип'ятять 5,5 годин, фільтрують, фільтрат охолоджують, осад відфільтровують, промивають водою та кристалізують із водного діоксану. Вихід 95,3%, Ттопл. 210-1°С. С14Н12Вr1Cl1N4O 2. Знайдено, %: С 43,9; Н - 3,3; N - 14,7. Розраховано, %: С - 43,8; H 3,2; N - 14,6. Етап 2. Синтез 8-N-(фуріл-2)метиламіно-1-nхлоробензилтеоброміну (III) - сполука, що заявляється. Суміш 3,8г (0,01моль) 8-бромо-1-nхлоробензилтеоброміну, 2,9г (0,03моль) 2амінометилфурану, 50мл етоксіетанолу кип'ятять 4 5 годин, охолоджують, розводять водою до 200мл, осад відфільтровують, промивають водою та кристалізують із водного діоксану. Вихід 67,9%, Ттопл. 231-3°С. C19H17Cl1N4O3. Знайдено, %: С 59,0; Н - 3,9; N - 14,6. Розраховано, %: С - 59,3; Н 4,45; N - 14,56. ПМР-спектр (d-шкала, м.д., розчинник ДМСО): 7,49 (т., 1Н) - NH; 7,46 (д., 1Н) - СaН; 7,337,23 (кв., 4Н) - С6Н4-Сl(n); 6,32 (т., 1Н) - Сb Н; 6,27 (д., 1Н) - Сb Н; 4,96 (с, 2Н) – N1CH2; 4,51 (д., 2Н) NHCH2; 3,59 (с, 3Н) -N 7CH3; 3,38 (c., 3H)-N 3CH3. Приклад 2. Гостра токсичність сполуки, що заявляється, була вивчена за методом Кербера (Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. - М.: Медицина, 1974. -144с.) у дослідах на білих мишах вагою 18-24г. Приклад 3. Вивчення діуретичної дії отриманої сполуки проводили на білих щура х за методом Берхіна Є.Б. (Берхин Е.Б. Методы изучения действия новых химических соединений на функцию почек // Хим.-фарм. журн. -1977. - Т.П. - №5. - С.311). В якості еталону порівняння використовували гідрохлортіазид в дозі 25мг/кг. Приклад 4. Протизапальна дія вивчена на білих щурах на моделі гострого асептичного набряку, викликаного сублантарним введенням в задню лапку щура 0,1мл 1% розчину карагеніну (Тринус Ф.П., Клебанов В.М., Мохарт Н.А. Методы скрининга и фармакологического изучения противо-воспалительных, анальгезирующи х и жаропонижающих средств. Метод, рекомендации. - К.: Здоров'я, 1974. - 27с.) В якості еталонів порівняння використовували анальгін (50мг/кг) та диклофенак натрію (8,0мг/кг). Сполуку, що заявляється, вводили в дозі 17,9мг/кг. Приклад 5. Антиоксидантну активність (АОА) 8-N-(фурил-2)метиламіно-1-nхлоробензилтеоброміну вивчали in vitro методом неферментного ініціювання вільнорадикального окиснення (Pat. 5726063 USA, G01N 33/52. Method of colorimetric analysis of malonic dialdehydes and 4hydroxy-2-enaldehydes as indexes of lipid peroxidation, kits for use in said mathod and their preparation / D. Gerard-Monnier, I. Erdelmeir, J Chaudiere, J. Yadan. -appl. №702197, date of patent Mar. 10, 1998.). В якості субстрату використано суспензію яєчних ліпопротеїдів (СЯЛ). СЯЛ готується шляхом гомогенізації яєчного жовтка з фосфатним буфером (рН 7,4). До суспензії додають досліджувані сполуки в концентрації 10-3, 10-5, 107 моль/л. Реакцію вільнорадикального окиснення ініціюють додаванням 25мМ розчину FeSO4×7H2O. Суміш інкубують 60 хвилин при 37°С. Реакцію зупиняють 50% розчином трихлороцтової кислоти з грилоном Б. Після центрифугування протягом 30 хвилин до розчину тіобарбітурової кислоти (ТБК) додають надосадочну рідину і кип'ятять на водяній бані протягом 60 хвилин. Забарвлений комплекс малонового діальдегіду з ТБК вилучають додаванням н-бутанолу. Методом спектрофотометрії визначають концентрацію малонового діальдегіду, яка свідчить про інтенсивність процесів вільнорадикального окиснення. Антиоксидантну активність (у відсотках) визначають за формулою: 5 38873 АОА=(СК1-С0 /СК1-СК2)100%, де СК1, СК2 - вміст ТБК-реактантів у контрольних пробах, моль/л; С0 - вміст ТБК-реактантів у дослідній пробі, моль/л. 6 Дані гострої токсичності, діуретичної, протизапальної та антиоксидантної дії сполуки, що заявляється, еталонів порівняння та найближчого аналога наведені в таблиці. Таблиця Гостра токсичність, діуретична, протизапальна та антиоксидантна дія сполуки, що заявляється, еталонів порівняння та найближчого аналога № п/п Сполука ЛД50 Доза, мг/кг 1 8-N-(фурил-2)метиламіно-1-nхлоробензилтеобромін (сполука, що заявляється) 358±17,9 17,9 2 1-бензил-8-N-пірролідинотеобромін (прототип) 219,5±12,8 4,4 3 4 5 6 7 8 Гіпотіазид Диклофенак Анальгін Аскорбінова кислота Тіотриазолін Дибунол 25,0 8,0 25,0 Як видно із наведених в таблиці даних, сполука, що заявляється, виявляє значно сильнішу діуретичну дію та є малотоксичною. За показником діуретичної дії сполука, що заявляється, активніша на 26,4% і 46,7% ніж прототип та гідрохлортіазид, відповідно. За показником протизапальної дії 8-N-(фурил2)метиламіно-1-n-хлоробензилтеобромін найближчий аналог прототип на 5,0% та анальгін на 1,1% але поступається диклофенаку 1,3%. Таким чином, за даним показником активність сполуки, що заявляється, практично дорівнює активності еталонів порівняння. Дані з таблиці свідчать про високу антиоксидантну активність. Так, за показником АОА 8-N Комп’ютерна в ерстка Д. Шев ерун Діурез, Протизапальна С, % за дія, % моль/л контроль 10-3 114,9 40,9 10-5 10-7 10-3 88,5 35,9 10-5 10-7 68,2 42,2 39,8 10-3 10-3 10-3 АОА, % 75,56 59,11 54,67 45,56 63,33 45,00 1 65,00 33,90 25,20 (фурил-2)метиламіно-1-n-хлоробензилтеобромін перевищує найближчий аналог та еталони порівняння. Сполука, що заявляється, в концентрації 10-3моль/л має показник АОА більший на 10,56%, 41,66%, 50,36% ніж аскорбінова кислота, тіотриазолін, дибунол відповідно та актівніша ніж найближчий аналог на 30,0%. Лише в концентрації 10-5моль/л за показником АОА сполука, що заявляється, поступається прототипу 4,22%. Таким чином, наведені вище дані свідчать про те, що після поглиблених фармакологічних досліджень сполука, що заявляється, може бути використана в якості діуретичного, протизапального засобу та антиоксиданту в медичній практиці. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601